4T1 rakud - oluline ülevaade rinnavähirakkude uurimisest ja rakendustest

4T1 on transplanteeritav hiirte rinnavähi rakuliin. Seda kasutatakse laialdaselt geneetiliselt identse in vitro kasvajamudelina inimese rinnavähi uurimiseks. 4T1 rakud on väga invasiivsed ja tuumorigeensed; neil on kalduvus metastaseeruda esmasest kasvajakohast rinnanäärmes teistesse kohtadesse, sealhulgas maksa, lümfisõlmedesse, kopsudesse, luudesse ja ajusse, seega on nad ideaalsed rinnavähi metastaaside uurimiseks [1].

4T1 rakkude üldised omadused ja päritolu

Enne rakuliiniga töötamist on oluline teada rakuliini päritolu ja üldisi omadusi. Käesolevas jaotises oleme maininud 4T1 rinnavähirakkude põhitõdesid. Näiteks, mis on 4T1 rakud? Millised on 4t1 rakuliini omadused? Mis on 4T1 rakuliini päritolu? Milline on 4T1 rakuliini morfoloogia?

4T1 on rinnakasvaja rakuliin, mis pärineb rinnanäärme kasvajast, mis tekkis spontaanselt hiire BALB/c-tüvel. Need väga invasiivsed ja tuumorigeensed rakud jäljendavad väga täpselt inimese rinnavähi käitumist kasvu ja metastaatilise leviku osas. Konkreetselt uuritakse 4T1 kasvajamudeliga kolmiknegatiivset rinnavähki (TNBC).
4T1 rakud on kleepuvad ja neil on epiteelirakkude sarnane morfoloogia.

4T1 Vs EMT-6 rakuliin

4T1 ja EMT-6 on mitteimmunogeensed, hiirte rakumudelid kolmiknegatiivse rinnavähi uuringuteks. Siin on 4T1 agressiivsemad ja invasiivsemad kasvajarakud kui EMT-6, millel on vähem invasiivsed omadused [2].

4T1 Vs 4T07 rakud

4T07 on samuti hiirte vähirakuliin. Peamine erinevus 4T1 ja 4T07 rakkude vahel on; 4T1 rakud võivad lahkuda primaarsest kasvajakohast ja levida, et moodustada nähtavaid sekundaarseid metastaase, samas kui 4T07 rakud ei saa vaatamata primaarsest kohast lahkumisele moodustada nähtavaid metastaase [3].

SEM-tomograafiline kujutis 4T1 rakust.

4T1 rakuliini kasvatamise teave

4T1 rinnavähi rakuliin pakub biomeditsiini valdkonnas ulatuslikke teadusrakendusi. Nende rakkude kultiveerimiseks peaksite läbima järgmised põhipunktid, mis kirjeldavad; mis on 4T1 kahekordistumisaeg? Kuidas kasvatatakse 4T1 rakke? Milline on rakkude külvi tihedus 4T1 puhul?

4T1 rakkude kultiveerimise põhipunktid

Kordistumisaeg:	Rinnavähirakkude 4T1 keskmine populatsiooni kahekordistumisaeg on 14 tundi.
Adherentselt või suspensioonis:	4T1 on adherentne rakuliin.
Subkultiveerimise suhe:	4T1 kolmiknegatiivse rinnavähi rakuliini puhul on soovitatav jagada rakkude vahekord 1:6 ja 1:8. Jagamiseks loputatakse rakke PBSiga ja inkubeeritakse Accutase ensüümiga 8-10 minutit. Dissotsieerunud rakud kogutakse tsentrifuugimise teel ja resuspenseeritakse värskes keskkonnas. Resuspendeeritud rakud doseeritakse uude kolbi kasvamiseks.
Kasvukeskkond:	4T1 rakkude kasvatamiseks kasutatakse RPMI 1640 keskkonda. rakkude ideaalseks kasvuks lisatakse kasvukeskkonda 10% veiste loote seerumit (FBS), 2,0 g/L NaHCO3 ja 2,1 mM stabiilset glutamiini.
Kasvutingimused:	4T1 tuumorirakke hoitakse 37 °C niiskendatud inkubaatoris, kus on 5%_CO2-lisand.
Säilitamine:	rakkude elujõulisuse säilitamiseks tuleb 4T1 rakke säilitada temperatuuril alla -150 °C, st elektrilises sügavkülmikus või vedela lämmastiku aurufaasis.
Külmutamisprotsess ja keskkond:	CM-1 või CM-ACF on soovitatav 4T1 rakuliini jaoks. Eelistatud on aeglane külmutamismeetod, kuna see kaitseb rakkude elujõulisust, võimaldades temperatuuri järkjärgulist langust 1 °C võrra.
Sulatamisprotsess:	Külmutatud rakkude viaali hoitakse 37 °C veevannis mõned sekundid, kuni rakud sulavad ja alles jääb vaid väike jääklomp. Need rakud resuspenseeritakse värskes söötmes ja valatakse kolbi kasvatamiseks. Pärast 24-tunnist inkubeerimist vahetatakse keskkond välja, et eemaldada külmunud keskkonna komponendid.
Bioturvalisuse tase:	4T1 rinnavähirakkude kasvatamiseks soovitatakse 1. bioloogilise ohutuse taseme laboratooriumi.

Hiire 4T1 rinnavähirakud, 20- ja 10-kordselt suurendatud.

4T1 rakuliin: 4T1T: Eelised ja puudused: eelised ja puudused

Selles artikli osas käsitletakse 4T1 metastaatilise mudeliga seotud eeliseid ja puudusi.

Eelised

4T1 rakuliini peamised eelised on järgmised:

Tumorigeensus:
4T1 on väga tumorigeenne rakuliin. Need rakud on võimelised moodustama 4T1 süngeense hiire mudeli rinnavähi uurimiseks, kui neid süstitakse hiirele. Seetõttu sobib 4T1 mudel ideaalselt kasvajate arengu, kasvu ja metastaaside tekke uurimiseks. Lisaks sellele on see kasulik ravimi sõelumiseks ja hindamiseks.
In vitro metastaatiline mudel:
4T1 mudelil on loomulik metastaasitung, mis võimaldab teadlastel tõhusalt uurida metastaasiprotsessi aluseks olevaid mehhanisme ja radu. Lisaks on 4T1 rakud 6-tioguaniinile resistentsed. See aitab mikrometastaatiliste rakkude tõhusat avastamist, mis on teiste mudelitega võrreldes täpsem, kuna ei vaja sihtorganite kaalumist ja sõlmede loendamist.

Puudused

4T1 rakuliiniga seotud puudused on järgmised:

Agressiivsus/kiire kasvukiirus:
4T1 rakuliin on väga agressiivne kolmiknegatiivne rinnavähi rakuliin. Kiire kasvukiiruse tõttu muutub selle rakuliini kasutamine pikaajalistes katsetes ja katsemuutujate kontrollimine keeruliseks.

Osta 4T1 rakuliin: kõrge kvaliteediga rinnavähi mudel

430,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300300

4T1 rakuliin: Rakendused vähiuuringutes

4T1 hiire rakuliin on väärtuslik uurimisvahend vähi bioloogia uurimiseks ja uute ravimeetodite hindamiseks. Siin on loetletud 4T1 rakkude peamised rakendused:

Vähi bioloogia

4T1 rakuliini kasutatakse laialdaselt vähi arengu ja kasvu uurimiseks. See on ideaalne in vitro mudel, et uurida ja uurida erinevaid rakulisi ja molekulaarseid mehhanisme, mis on seotud kasvaja progresseerumise ja metastaasiga. Lisaks võib see paljastada raku signaaliradade, mikrokeskkonna ja geeniekspressiooni rolli nendes protsessides. 2019. aastal läbiviidud uuringutes kasutati 4T1 rakke, et avastada vähirakkude sissetungi ja rände taga olevaid ajamehhanisme. Tulemustest selgus, et kaasatud on STAT3, MMP2 ja MMP9 geenid ning nende geenide inhibeerimine võib märkimisväärselt piirata vähirakkude migratsiooni ja invasiivsust [4]. Sarnased uuringud on osutanud ka mitmetele teistele signaaliradadele, mis on seotud kasvaja arengu ja metastaasiga.

Lisaks on 4T1 mudel oluline rinnavähi mikrokeskkonna, sealhulgas immuunrakkude infiltratsiooni ja esmase kasvaja kasvu mõistmiseks. Uuringud, mis keskenduvad 4T1-kasvaja mikrokeskkonnale, on näidanud olulist teavet immuunrakkude ja tsütokiinide, näiteks CXCL13 ekspressiooni rolli kohta kasvaja progresseerumises. Mudel aitab ka metastaatiliste niššide ja kasvaja metastaaside uurimisel, eriti hilises staadiumis rinnavähi puhul, kus rinnanäärme kartsinoomi kolonisatsioon on levinud.

Vähiteraapia uuringud

Rakuliini 4T1 kasutatakse laialdaselt vähiraviuuringutes uute ravimeetodite sõelumiseks ja hindamiseks. Uuringus uuriti rosmariini ekstraktist sünteesitud roheliste raua nanoosakeste (Rosemary-FeNPs) ja puhta rosmariini ekstrakti tsütotoksilist potentsiaali 4T1 rakuliinil. Uurimistulemused pakkusid välja, et Rosemary-FeNPs on paljutõotavamad kui puhas ekstrakt [5]. Sarnaselt uuriti 2021. aastal läbiviidud uuringus ingveriekstrakti kasvajavastast potentsiaali 4T1 rinnavähirakkudes ja 4T1 hiire mudelis [6].

Lisaks looduslikele ekstraktidele kasutatakse 4T1 rakuliini traditsiooniliste kemoterapeutiliste ainete tõhususe hindamiseks. Näiteks on uuringud, mis hõlmasid tsisplatiini kombineerimist teiste ravimeetoditega, näidanud 4T1 mudelis suurenenud kasvajarakkude surma ja vähenenud kasvaja progresseerumist. Liblik-lutsiferaasi lisamine 4T1 rakkudesse on võimaldanud reaalajas kujutada kasvaja kasvu ja metastaatilist fenotüüpi, mis lihtsustab erinevate ravimeetodite mõju hindamist.

Lisaks on 4T1 rakuliini resistentsus 6-tioguaniini suhtes hõlbustanud mikro-metastaatiliste rakkude uuringuid, parandades metastaaside avastamist ja analüüsi. Sellel rakuliinil on oluline roll ka kasvajavastase immuunsuse ja immunoteraapia mõju uurimisel, eriti ortotoopiliste hiiremudelite puhul, kus teadlased saavad lähedalt jäljendada inimese vähktõbe.

Üldiselt on 4T1 rakuliin jätkuvalt asendamatu vahend onkoloogilistes uuringutes, alates vähibioloogia põhimehhanismide mõistmisest kuni uute ravistrateegiate väljatöötamise ja katsetamiseni.

4T1 rakud: T4T1T: teaduspublikatsioonid

Selles artikli osas käsitletakse mõningaid huvitavaid ja enim tsiteeritud publikatsioone 4T1 rakkude kohta.

M. longifolia abil sünteesitud AgNP-de potentsiaalne proliferatsioonivastane toime 4T1 rakuliinis ROSi tekitamise ja rakumembraanide kahjustamise kaudu

See artikkel avaldati 2018. aastal ajakirjas Journal of Photochemistry and Photobiology. Uuringus pakuti välja, et Madhuca longifolia 'st sünteesitud hõbeda nanoosakesed avaldavad rakuseina lagundamise ja ROS-i tekitamise kaudu proliferatsioonivastast toimet 4T1 kasvajarakkudes.

Verbaskosiidi tsütotoksilisus ja apoptootiline toime rinnavähi 4T1 rakuliinile

See uuring ajakirjas BMC Pharmacology and Toxicology (2021) pakkus välja, et looduslik ühend verbaskosiid kutsus TLR4-signalisatsiooni kaudu esile apoptootilist toimet rinnavähirakkudes 4T1.

Eupatoriin pärssis kasvaja progresseerumist ja suurendas immuunsust 4T1 hiire rinnavähi mudelis

See uuring avaldati ajakirjas Integrative Cancer Therapies 2020. Selles uuringus kasutati 4T1 rakke 4T1 süngeense hiire mudeli väljatöötamiseks ja uuriti selle abil Eupatoriini vähivastast potentsiaali. Eupatoriin viivitas 4T1-hiire mudelis kasvajate arengut.

Viola odorata ekstrakti inhibeeriv toime kasvaja kasvule ja metastaasile 4T1 rinnavähi mudelis

See Iraani ajakirjas Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018) avaldatud uuring pakkus välja, et ravimtaim Viola odorata omab potentsiaalset tsütotoksilist mõju 4T1 rakkudele.

Doketakseliga koormatud tahked lipiid-nanoosakesed takistavad 4T1 hiire rinnanäärme kartsinoomi rakkude kasvaja kasvu ja kopsu metastaasi teket

Selles uuringus pakuti välja, et dotsetakseeliga koormatud tahked lipiid-nanoosakesed (DTX-koormatud SLN-id) võivad olla paljulubav aine rinnavähi raviks ja metastaaside vältimiseks, kuna nad piiravad vähi kasvu ja 4T1 rakkude kopsumetastaasi.

Ressursid 4T1 rakuliini jaoks: Materjalid: protokollid, videod ja muud

Järgnevalt on esitatud mõned ressursid 4T1 rakkude kohta:

4T1 transfektsiooni juhendmaterjal: See video on samm-sammuline juhend 4T1 rakuliini transfektsiooni läbiviimiseks.
Rakuliini subkultuurimine: Selles videos selgitatakse kleepuvate rakuliinide subkultuurimise protokolli.

Järgmine link sisaldab rakukultuuriprotokolli 4T1 rakkude jaoks:

4T1 rakuliin: See veebilehe link sisaldab kogu kasulikku teavet 4T1-kultuuride käitlemise kohta. Seal on teave kultuurkeskkonna kohta, krüokonserveeritud kultuuride ja paljunevate kultuuride käitlemisprotokollid.

Korduma kippuvad küsimused 4T1 rakuliini kohta

Viited

Pulaski, B.A. ja S. Ostrand-Rosenberg, Mouse 4T1 breast tumor model. Curr Protoc Immunol, 2001. Chapter 20: p. Unit 20.2.
Maxwell, K.G., Rinnavähirakkude immunomoduleerimine kogu kasvaja vaktsineerimiseks. 2016.
Walker, I., et al., Rinnanäärmekasvajad indutseerivad tsentraalset pro-inflammatoorset tsütokiini ekspressiooni, kuid mitte käitumishäireid Balb/C hiirtel. Scientific Reports, 2017. 7(1): p. 1-13.
Li, Y., et al., Stat3 signaalitee inhibeerimine loodusliku toote pektolinarigeniiniga nõrgestab rinnavähi metastaasi. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: p. 1195.
Farshchi, H.K., et al., Raua nanoosakeste roheline süntees rosmariini ekstrakti abil ja tsütotoksilisuse mõju hindamine vähirakuliinidele. Biokatalüüs ja põllumajanduslik biotehnoloogia, 2018. 16: p. 54-62.
Gholizadeh, A.P., et al., Ingveri ekstrakti mõju 4T1 rinnanäärmevähi rakuliinile Balb/c hiirel. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): p. 43-49.