Accutase rakkude eraldamise lahus – 100 ml

Accutase rakkude eralduslahus EDTA ja fenoolpunasega – 100 ml

Accutase on kasutusvalmis, steriilselt filtreeritud rakkude eralduslahus, mis on loodud kui õrn alternatiiv trüpsiinile/EDTA-le imetajate adhesiivsete rakkude eraldamiseks standardsetest kudekultuuri plastnõudest ja adhesiivkattega pindadelt. See ühendab proteolüütilise ja kollageenolüütilise ensüümi aktiivsuse tasakaalustatud soolalahuses, et tagada efektiivne, kuid kontrollitud eraldamine, säilitades rakupinna valgud ning toetades kõrget eluvõimet pärast passaaži ja kiiret uuesti kinnitumist.

Accutase koostis põhineb Dulbecco fosfaadipuhverdatud soolalahusel (DPBS), millele on lisatud EDTA ja fenoolpunane visuaalse pH indikaatorina. Ensüümid on mitte-imetajate ja mitte-bakteriaalset päritolu, mistõttu Accutase sobib eriti hästi tüvirakkude uurimiseks, vaktsiinide tootmiseks ja mis tahes rakendusteks, kus tuleb minimeerida loomsetest või mikroobidest pärinevaid saasteaineid. Lahus inhibeerib ennast automaatselt 37 °C juures, seega ei ole pärast eraldamist vaja neutraliseerivat reagenti ega seerumit sisaldavat keskkonda – rakud saab viia otse värskesse keskkonda.

Peamised omadused

• Kasutusvalmis 1x steriilselt filtreeritud vedelik – lahjendamist ega taastamist ei ole vaja
• Kombineeritud proteolüütiline ja kollageenolüütiline ensüümiaktiivsus õrnaks dissotsiatsiooniks
• Iga partii on standardiseeritud kindlaksmääratud dissotsiatsioonitegevusele, et tagada partiidevaheline ühtlus
• Enüümid ei pärine imetajatelt ega bakteritelt
• Inhibeerib ennast 37 °C juures – neutraliseerivat lahust ei ole vaja
• Valmistatud Dulbecco PBS-is koos EDTA-ga
• Fenoolpunane on lisatud visuaalseks pH-indikaatoriks
• pH 6,8–7,8

Tüüpilised rakendused

Accutase lahustab õrnalt mitmesuguseid adhesiivseid ja tundlikke rakutüüpe, sealhulgas inimese embrüonaalseid tüvirakke (hESCs), inimese indutseeritud pluripotentseid tüvirakke (iPSCs), närvi tüvirakke, primaarseid neuroneid ja tavapäraselt kultiveeritavaid adhesiivseid rakuliine, nagu HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ja A549. Tüüpilised kasutusjuhtumid hõlmavad:

• Imetajate adhesiivsete rakkude rutiinne subkultiveerimine ja passaažimine
• hESCs, iPSCs ja muude tundlike liinide õrn üherakuline dissotsiatsioon
• Proovide ettevalmistamine voolutsütomeetria ja FACS-analüüsi jaoks
• Rakupinna markerite analüüs, kus epitoobi terviklikkus on oluline
• Rakkude rändamise, proliferatsiooni ja apoptoosi analüüsid
• Puhkeoleku testid seerumi näljutamise ja onkogeeni transfektsiooni uuringute abil
• Tuumorrakkude ja neuraalkreestrakkude rändetestid
• Tootmise mastaabis laiendamine bioreaktori töövoogudes

Rutiinseks tööks kandke umbes 10 ml Accutase'i 75 cm² kultuuripinnale ja inkubeerige 5–10 minutit toatemperatuuril. Optimaalne inkubatsiooniaeg tuleks määrata iga rakuliini jaoks eraldi ja see ei tohiks ületada ühte tundi. Enne lisamist loputage rakukihiga Ca²⁺/Mg²⁺-^vaba soolalahusega, näiteks kaltsiumi ja magneesiumita DPBS-ga, et eemaldada jääkserum ja kahevalentsed katioonid.

Käsitsemine ja säilitamine

Hoidke avamata pudelit külmutatuna temperatuuril -15 °C või madalamal. Sulatage toatemperatuuril või öösel temperatuuril +2 °C kuni +8 °C. Ärge sulatage Accutase'i 37 °C veevannis, kuna kõrgem temperatuur vähendab ensüümi aktiivsust. Pärast sulatamist võib lahust hoida kuni 2 kuud temperatuuril +2 °C kuni +8 °C; ärge hoidke toatemperatuuril. Ärge soojendage reagenti enne kasutamist 37 °C-ni – lisage see otse pestud rakkudele toatemperatuuril. Pika säilivusaja tagamiseks soovitatakse kasutada ühekordseks kasutamiseks mõeldud alikvoote, et vältida korduvaid sulatamistsükleid. Töötage alati aseptilistes tingimustes.

Kvaliteet

Valmistatud rangete kvaliteedistandardite kohaselt. Iga Accutase'i partii on steriilselt filtreeritud ja testitud steriilsuse, pH, välimuse ja dissotsiatsioonitegevuse suhtes, et tagada partii-partii ühtlane ja korratav tulemus.

Toote spetsifikatsioonid

Koostis (koostis ühe liitri kohta)

Accutase on Innovative Cell Technologies, Inc. registreeritud kaubamärk.