U87MG rakud - Glioblastoomi uuringud U87MG abil ja selle mõju ajuvähi uuringutele
Inimese primaarset glioblastoomi rakuliiniU-87 MG kasutatakse laialdaselt bioloogilistes uuringutes. Eelkõige kasutatakse neid rakke neuroteaduste ja immunonkoloogia valdkonnas.
U-87 MG rakuliini üldised omadused ja päritolu
Käesolevas jaotises käsitletakse U87 rakuliini päritolu ja üldisi omadusi. Te saate teada, mis on U-87 MG rakud? Kust pärineb U87 rakuliin? Milline on U-87 MG täies vormis? Kui suured on U87 rakud? Milline on U87 rakuliini morfoloogia?
- U87 rakuliin on glioblastoomi, astrotsütoomi rakuliin. See loodi 1966. aastal Uppsala Ülikoolis. Rakud saadi 44-aastaselt kaukaasia mehelt, kes kannatas glioblastoomi haiguse all. Seda rakuliini nimetatakse ametlikult U 87 MG, mis tähendab Uppsala 87 Malignant Glioma.
- U 87 MG rakud esindavad epiteelirakkude sarnast morfoloogiat.
- U 87 MG rakkude suurus on 12-14 µm läbimõõduga.
- See inimese glioblastoomi rakuliin on hüpodiploidne ja omab ligikaudu 48% rakkude populatsiooni modaalset kromosoomiarvu 44. Kuid 5,9 % rakupopulatsioonis esineb ka kõrgemaid ploidiaid.
U-87 MG rakkude kasvatamise teave
Enne U 87 MG rakkudega töötamist peaksite tutvuma järgmiste põhipunktidega nende glioblastoomirakkude kasvatamisel. Eelkõige peaksite teadma järgmist: Milline on U 87 MG rakkude populatsiooni kahekordistumise aeg? Millist keskkonda kasutatakse U87 rakkude kultiveerimiseks? Milline on U 87 MG rakuliini külvi tihedus?
U-87 MG rakkude kultiveerimise põhipunktid
|
Populatsiooni kahekordistumise aeg: |
U 87 MG rakkude populatsiooni kahekordistumisaeg on 18-38 tundi. |
|
Adherentselt või suspensioonis: |
U 87 MG on kleepuv rakuliin. Rakkudel on piklik kuju ja nad kasvavad monokihina. |
|
Külvikutihedus: |
Glioblastoomi rakuliini U 87 MG soovitatakse külvata rakutihedusega 1 x104 rakku/cm2. U87 adherentseid rakke pestakse 1 x PBS-ga ja inkubeeritakse Accutase'i lahusega. Seejärel dissotsieerunud rakud tsentrifuugitakse ja võetakse tagasi. Rakud resuspendeeritakse ettevaatlikult ja lisatakse uutesse kasvukeskkonda sisaldavatesse kolvidesse. |
|
Kasvukeskkond: |
U 87 MG rakuliini kasvatatakse EMEMis (Eagle's minimal essential medium), millele on lisatud 1,0 g/L L-glükoosi, 2,0 mM L-glutamiini, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA, 1 mM naatriumpüruvaati ja 10% FBS lahust. Keskkonda tuleb uuendada iga 2-3 päeva järel. |
|
Kasvutingimused: |
U-87 MG rakud vajavad optimaalseks kasvuks niisutatud inkubaatorit, kus on 5% CO2 ja temperatuur 37°C. |
|
Säilitamine: |
U87 rakke hoitakse glioblastoomirakkude maksimaalse elujõulisuse säilitamiseks kas vedela lämmastiku aurufaasis või temperatuuril alla -150°C. |
|
Külmutamisprotsess ja keskkond: |
U 87 MG rakkude külmutamiseks sobivad CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonnad. Soovitatav on aeglane külmutamine, kuna see hoiab ära rakkude šoki ja kaitseb rakkude elujõulisust. |
|
Sulatamisprotsess: |
Külmutatud U-87 MG rakuliini viaalid sulatatakse 37 °C veevannis. Rakud lisatakse kasvukeskkonnaga, resuspendeeritakse ja doseeritakse uutesse kolvidesse kasvatamiseks. Vastupidiselt sellele võib U87 rakke tsentrifuugida, et eemaldada külmutuskeskkond ja seejärel kultiveerida. |
|
Bioturvalisuse tase: |
U 87 MG rakukultuuride käitlemiseks on nõutav 1. bioloogilise ohutuse tase. |
U-87 MG rakkude eelised ja puudused
Kui me mõtleme rakuliinile, siis esimene asi, mis meile pähe tuleb, on: millised on U-87 MG rakkude kasutamise eelised? Millised on U87 rakkude puudused?
Eelised
U 87 MG rakuliine kasutatakse teadusuuringutes laialdaselt. Mõned selle rakuliiniga seotud eelised on järgmised:
Eelised
- Lihtne kasvatada: U 87 MG rakke on lihtne kasvatada. Nad ei nõua keerukaid või keerulisi rakukultuuride kasvatamise nõudeid
- Homogeensus: U-87 MG on homogeenne rakuliin. Enamik rakke populatsioonis omab sama geneetilist struktuuri ja seega sarnaseid omadusi. Neid rakke kasutatakse rakuprotsesside uurimiseks, ravimite skriininguks ja testimiseks
- Hästi iseloomustatud: See glioblastoomi rakuliin on kasvuomaduste, morfoloogia ja geeniekspressiooni poolest hästi iseloomustatud, mis muudab selle väärtuslikuks uurimisvahendiks
Puudused
- Piiratud rakendatavus: U 87 MG on glioblastoomi rakuliin, seega on selle rakendused piiratud peamiselt glioblastoomide ja nende aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimisega. See ei pruugi sobida teiste vähitüüpide uurimiseks.
U-87 MG rakkude uurimisrakendused
U87MG glioblastoomi rakuliini kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes, eriti glioblastoomi uurimisel. Mõned U 87 MG rakkude uurimisrakendused on järgmised:
- Vähi bioloogiauuringud: U87 rakuliini kasutatakse vähi kasvu ja arengu, selle aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide, signaaliradade ja kasvajate mikrokeskkonna uurimiseks. 2020. aastal avaldatud uuringus kasutati glioblastoomi in vitro mudelit, U-87 MG rakuliini, et uurida BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) geeni kui terapeutilist sihtmärki. Tulemused näitasid, et BMAL1 geen pärsib glioblastoomirakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiivsust, pärssides tsükliin B1, metalloproteinaas-9 ja fosfo-AKT geeni ekspressiooni [1]. Teises 2019. aastal tehtud uuringus kasutati U87 rakuliini ja uuriti, et Lipopolüsahhariidi poolt indutseeritud kasvajakuumuse nekroosifaktor-alfa-faktori (LITAF) transkriptsioonifaktori ekspressiooni alareguleerimine võib suurendada glioomirakkude kiirgustundlikkust FOXO-1 raja ülereguleerimise kaudu. LITAF on tuntud ka kui p53-indutseeritud geen 7 (PIG7) [2].
- Ravimite avastamine ja arendamine: U-87 MG rakke saab kasutada ravimite sõelumiseks ja testimiseks, mis võimaldab teadlastel tuvastada uusi potentsiaalseid vähivastaseid ravimeid ning hinnata nende tõhusust ja toksilisust. Uurimistöös kasutati U 87 MG glioblastoomi rakuliini, et hinnata Inula helenium (L.) ekstrakti antioksüdantset ja vähivastast potentsiaali [3]. Sarnaselt mainiti teises publikatsioonis, et taimeekstraktide tsütotoksilise ja apoptootilise toime testimiseks kasutati rakuliini U87 [4]. Lisaks uuriti 2018. aastal avaldatud uuringus Nuphar'i taimedest ekstraheeritud seskviterpeen alkaloidide tsütotoksilist toimet tundlikele ja ravimresistentsetele U 87 MG rakuliinidele [5].
Tellige oma U87 MG glioomi rakuliin täna
U-87 MG rakuliin: Teadusuuringute publikatsioonid
Siin on mõned silmapaistvad teaduspublikatsioonid, milles käsitletakse U 87 MG rakuliini.
Selles Neuroreport 2018 avaldatud artiklis pakuti välja, et hüpoksia võib suurendada inimese glioblastoomirakkude rännet ja invasiivsust, reguleerides PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α signaalirada.
See uuring on avaldatud ajakirjas Frontiers in Pharmacology aastal 2020. Uurimistulemuste kohaselt avaldab flavonoid Eriodictyol vähivastast toimet U87 rakuliinile ning pärsib rakkude proliferatsiooni ja metastaasi. Ühend vahendab oma kasvajavastaseid omadusi, moduleerides PI3K/Akt/NF-κB rada.
See uuring ajakirjas Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) näitab, et Hiina taimne valem nimega Xihuang pill võib indutseerida apoptoosi U87 rakkudes, suunates ROS-i aktiveeritud Akt/mTOR/FOXO1 kaskaadi.
LITAF suurendab inimese glioomirakkude kiirgustundlikkust FoxO1 raja kaudu
See teadustöö avaldati ajakirjas Cellular and Molecular Neurobiology 2019. aastal. Uuringus pakuti välja, et transkriptsioonifaktor LITAF reguleerib alla ja suurendab glioomirakkude kiirgustundlikkust, reguleerides FOXO-1 signaalirada.
See artikkel on avaldatud ajakirjas Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Teadlased kasutasid U 87 MG rakke, et uurida kurkumiiniga koormatud PLGA nanoosakeste tsütotoksilist toimet.
U-87 MG rakkude ressursid: Protokollid, videod ja muud vahendid: protokollid, videod ja muud
U87MG glioblastoomi rakuliini kasutatakse paljudes vähiuuringute laborites. Mõned seda rakuliini iseloomustavad ressursid on järgmised:
- U87 rakuliini transfektsioon: Selles dokumendis kirjeldatakse teile U 87 MG rakkude transfektsiooniprotokolli.
- U 87 MG rakuliini transfektsioon: See video on juhendmaterjal, mis selgitab samm-sammult U87 rakkude transfektsiooni protokolli.
U87 rakkude rakukultuuriprotokolli allikas on loetletud allpool:
- U87 MG rakud: See link sisaldab põhiteavet U 87 MG rakuliini kohta. See sisaldab lühikest rakkude jagamise, külmutamise ja rakkude sulatamise protokolli.
Teadmised U87 MG glioomi uuringutest: Korduma kippuvad küsimused
Viited
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 pärsib U87MG rakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiivsust, vähendades tsükliin B1, fosfo-AKT ja metalloproteinaas-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF suurendab inimese glioomirakkude kiirgustundlikkust FoxO1 raja kaudu. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., Inula helenium (L.) ekstrakti antioksüdantne ja vähivastane toime inimese U-87 MG glioblastoomi rakuliinis. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh ja A. Ghasempour, Tsütotoksilisus ja apoptoosi indutseerimine rinnavähi, nahavähi ja glioblastoomi rakkudes taimeekstraktide abil. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Nuphar'i taimede seskviterpeen alkaloidide tsütotoksilisus tundlike ja ravimresistentsete rakuliinide suhtes. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.