T98G rakuliin
T98G rakud on inimese glioblastoomi rakuliin, mida kasutatakse üldiselt biomeditsiinilistes uuringutes. Eelkõige kasutatakse neid rakke ajuvähi uuringutes, et uurida olulisi rakke ja molekulaarseid tegureid, mis seda soodustavad. Lisaks sellele aitavad nad teadlastel sõeluda ja katsetada uusi vähivastaseid ravimeid, mis võivad aidata ravimite väljatöötamisel.
See artikkel sisaldab kõiki olulisi üksikasju T98G rakuliini kohta, mida vajate enne töö alustamist sellega, näiteks:
- T98G rakuliini üldised omadused ja päritolu
- T98G rakuliini kultiveerimisega seotud teave
- T98G rakuliin: T98G9898: eelised ja puudused
- T98G rakkude rakendused
- T98G rakke sisaldavad teaduspublikatsioonid
- T98G rakkude ressursid: Protokollid, videod ja muud
1. T98G rakuliini üldised omadused ja päritolu
See artikli osa aitab teil uurida T98G rakuliini põhilisi omadusi. See hõlmab teavet rakuliini päritolu, morfoloogia, suuruse ja ploidia kohta. Lisaks mõistetakse põhjalikult järgmisi päringuid: Mis on T98G rakud? Millist tüüpi rakk on T98G? Kust on T98G pärit? Millised on T98G rakuliini omadused? Mis on glioblastoomi rakuliin T98G U87?
- T98G rakuliini on loonud GH Stein. See koosneb fibroblastitaolistest rakkudest, mis on saadud 61-aastase kaukaasia mehe glioblastoomi multiforme'i ajukoes [1].
- T98G rakud on mittetuumorigeensed; nad ei tekita alasti hiirtele süstimisel kasvajaid. Siiski kipuvad nad sobiva ankurdamise korral rakukultuuris paljunema.
- Nendel rakkudel on fibroblastide sarnane morfoloogia.
- Glioblastoomi rakuliin T98G esindab hüperpentaploidsust. Modaalne kromosoomide arv jääb vahemikku 128-132. Kõrgemat ploidsust võib esineda 1,39% rakupopulatsioonist.
T98 Vs T98G
Mõlemad on inimese glioblastoomi rakuliinid ja neil on sarnane päritolu. Ainus erinevus nende rakuliinide vahel on kromosoomide arv. T98G omab peaaegu kaks korda rohkem kromosoomide arvu kui T98. Seetõttu nimetatakse T98G T98 polüploidseks variandiks.
T98G versus U87
U87 ja T98G on mõlemad inimese glioblastoomi rakuliinid, mida kasutatakse ajuvähi uurimisel. U87-l on agressiivsem fenotüüp võrreldes T98G GBM-ga.
2. T98G rakuliini kultiveerimisega seotud teave
Kultiveerimisega seotud teave rakuliini kohta on väga oluline teada, enne kui alustate sellega tööd. See aitab teil hõlpsasti ja mugavalt käsitleda rakuliini laboris. Te peaksite teadma: Milline on T98G rakuliini kahekordistumisaeg? Milline kasvukeskkond on T98G rakkude jaoks parim? Millised on T98G kasvuomadused? Milline on T98G rakkude külvi tihedus? Kuidas külmutatakse T98G rakke?
T98G rakkude kasvatamise põhipunktid
|
Kordistumisaeg: |
T98G rakkude ligikaudne kahekordistumisaeg on 40 tundi. See võib sõltuvalt kultiveerimistingimustest erineda. |
|
Adherentselt või suspensioonis: |
T98G rakud on kleepuvad. Nad kinnituvad kasvatusanumate põhja külge ja moodustavad monokihi. |
|
Jagunemissuhe: |
T98G rakke subkultiveeritakse jaotussuhtes 1:2 kuni 1:5. Selleks pestakse rakke kõigepealt 1 X PBS-puhvriga ja seejärel inkubeeritakse neid 8-10 minutit ümbritseva õhu temperatuuril passageerimislahusega (Accutase). Pärast inkubeerimist lisatakse eraldatud rakud värskesse kasvukeskkonda ja tsentrifuugitakse. Seejärel resuspendeeritakse kogutud rakupellet ettevaatlikult ja rakud doseeritakse kasvukolbi, mis sisaldab kasvukeskkonda. |
|
Kasvukeskkond: |
T98G rakkude kasvatamiseks kasutatakse EMEM-keskkonda, mis sisaldab 10% veiste loote seerumit, 2 mM L-glutamiini, 2,2 g/L NaHCO3 ja EBSS. Keskkonda tuleb vahetada 3 kuni 4 korda nädalas. |
|
Kasvutingimused: |
T98G rakke hoitakse niisutatud inkubaatoris, mille temperatuur on 37 °C ja mis on ühendatud CO2-ga. |
|
Säilitamine: |
Külmutatud rakke võib säilitada alla -150°C või vedela lämmastiku aurufaasis, et kaitsta rakkude elujõulisust pikema aja jooksul. |
|
Külmutamisprotsess ja keskkond: |
T98G rakke soovitatakse külmutada CM-1 või CM-ACF rakkude külmutuskeskkonnas. Selleks soovitatakse kasutada aeglast külmutamisprotsessi, mis võimaldab temperatuuri langust ainult 1 °C minutis. See hoiab ära rakkude šoki ja säilitab nende elujõulisuse. |
|
Sulatamisprotsess: |
Külmutatud rakud sulatatakse ettevaatlikult, asetades need 40-60 sekundiks 37 °C juures eelnevalt soojendatud veevanni. Seejärel resuspenseeritakse need värskes kasvukeskkonnas ja viiakse uude kolbi. Pärast 24-tunnist inkubeerimist vahetatakse keskkond, et kõrvaldada külmumisvahendi komponendid. |
|
Bioturvalisuse tase: |
T98G kultuure hoitakse bioloogiliselt turvalises laboratooriumis. |
3. T98G rakuliin: T98G: eelised ja puudused
T98G on laialdaselt kasutatav inimese glioblastoomi rakuliin. Sellel on mitmeid plusse ja miinuseid, mis eristavad seda teistest. Selles artikli osas käsitletakse mõningaid märkimisväärseid neist.
Eelised
T98G rakkude eelised on järgmised:
-
Hästi iseloomustatud
Väljakujunenud ja hästi iseloomustatud rakuliin. Põhjalikult uuritud ja kirjanduses dokumenteeritud.
-
In vitro mudel
Esindab glioblastoomi, kõige agressiivsema ajukasvaja omadusi. Väärtuslik vahend haiguse uurimiseks, bioloogia mõistmiseks ja ravi arendamiseks.
Puudused
T98G rakkudega seotud puudused on järgmised:
-
Heterogeensus
T98G rakupopulatsiooni geneetiline heterogeensus võib põhjustada vastuolusid katsetulemustes ja raskendada andmete tõlgendamist.
4. T98G rakkude rakendused
T98G rakuliin on väärtuslik vahend, mida kasutatakse vähiuuringutes. Siin on loetletud mõned peamised T98G rakkude uurimisrakendused:
- Vähiuuringud: T98G rakuliin on väärtuslik vahend glioblastoomi kasvajate bioloogia uurimiseks. Neid rakke kasutatakse peamiselt glioblastoomi haiguse arengu ja progresseerumise aluseks olevate keeruliste molekulaarradade uurimiseks. Peale selle kasutatakse neid kasvajate kasvu ja muid vähirakkude mehhanisme juhtivate geneetiliste mutatsioonide tuvastamiseks. Yang Chen ja kolleegid töötasid nende rakkudega ja leidsid, et miRNA-21 üleekspressioon vähendab T98G rakkudes PDCD4 (Programmed cell death protein 4) taset. See viib PDCD4 poolt vahendatud T98G rakkude apoptoosi pärssimiseni. Seega viitab uuring sellele, et miRNa-21 on potentsiaalne sihtmärk ravimeetodite arendamiseks [2]. Sarnaselt sellele uuringule uurisid Fanqiang Kong ja kolleegid mikroRNA-15a rolli T98G glioblastoomirakkude proliferatsioonis ja invasiivsuses. Nad leidsid, et miRNA-15a-5p soodustab neid rakuprotsesse raku adhesioonimolekuli 1 (CADM1) sihtmärgi kaudu [3].
- Ravimi testimine ja ravimiarendus: T98G on suurepärane glioblastoomi in vitro mudel uute ravimite sõelumiseks ja platvormi loomiseks võimalike vähiravimite tõhususe hindamiseks. Teadlased katsetavad ka mitmesuguseid ühendeid ja ravimeetodeid, et tuvastada ja avastada kõige paljulubavamate glioblastoomivastaste omadustega ravimikandidaate. See viib uute ravimite ja ravistrateegiate väljatöötamiseni, mis annab lootust glioblastoomiga patsientidele. Sellises uuringus uuriti korilagiiniks nimetatud loodusliku ühendi vähivastast potentsiaali temozolomiidile resistentses T98G GBM rakuliinis. Uuringutulemused pakkusid välja, et korilagiin koos temozolomiidiga kutsub rakkudes esile suuremaid antiproliferatiivseid ja antiapoptootilisi toimeid [4].
5. T98G rakke sisaldav teaduspublikatsioon
Järgnevalt on esitatud mõned huvitavad ja sageli tsiteeritud teadusartiklid glioblastoomi rakuliini T98G kohta.
REV-ERB agonisti SR9009 kemoterapeutiline toime inimese glioblastoomi T98G rakkudele
Selles väljaandes ASN Neuro (2019) uuriti REV-ERB agonisti SR9009 vähivastast toimet T98G glioblastoomi rakkudele.
Selles Neurochemical research'is (2019) avaldatud teadusartiklis pakuti välja, et naatriumbutüraat ja kvertsetiin pärsivad sünergiliselt kaitsvat autofagiat T98G rakkudes ja suurendavad rakkude apoptoosi.
Selles Genes'is (2023) avaldatud uuringus tehti RNA sekveneerimine T98G hüpoksiaga kohanenud rakuliinis ja pakuti välja IRE1 (Inositol-requiring enzyme 1) kui paljutõotavat terapeutilist sihtmärki.
See artikkel on avaldatud ajakirjas Oncology Letters (2017). Uuringus uuriti, et miRNA-548c-3p on suunatud T98G onkogeenidele (c-Myb), et pärssida T98G rakkude proliferatsiooni ja migratsiooni.
See artikkel ajakirjas Journal of Medicinal Plants Research (2011) pakkus välja, et Dracocephalum tanguticum kloroformi ekstrakt avaldab T98G rakkudele antiproliferatiivset toimet, moduleerides kaspaas-3, Bax ja P21 geene.
6. T98G rakkude ressursid: T98G: Protokollid, videod ja muud vahendid: protokollid, videod ja muud
Siin on mainitud olemasolevad ressursid, mis sisaldavad T98G rakkude kultiveerimise ja transfektsiooni protokolle.
- T98G transfektsioon: See teadusartikkel sisaldab T98G transfektsiooni protokolli. Selles selgitatakse lühidalt meetodit ja vajalikku reaktiivi.
Järgmised lingid aitavad teil suuresti õppida T98G rakukultuuriprotokolli ja lihtsustada sellega töötamist.
- T98G rakud: See veebisait sisaldab olulist teavet T98G rakukultuuriprotokollide kohta, sealhulgas subkultiveerimise ja proliferatiivsete ja krüokonserveeritud kultuuride käitlemise kohta. Lisaks aitab see teil õppida ka rakkude kasvukeskkonda, tingimusi ja kahekordistumisaega.
Viited
- Haehl, E., Endoteelirakkude poolt indutseeritud kiirgusresistentsus glioblastoomi puhul. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al., MicroRNA-21 alareguleerib kasvajasupressori PDCD4 ekspressiooni inimese glioblastoomirakkudes T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
- Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5psoodustab T98G glioblastoomirakkude proliferatsiooni ja invasiivsust raku adhesiomolekuli 1 sihtmärgi kaudu. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
- Milani, R., et al., Corilagin Induces High Levels of Apoptosis in the Temozolomide-Resistant T98G Glioma Cell Line. Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.