SiHa rakud - emakakaelavähi uuringute valgustamine

SiHa rakud on emakakaelavähi rakud, mida kasutatakse laialdaselt biomeditsiinilistes uuringutes. Nad on suurepärased transfektsiooni peremehed ja sobivad seega geeniekspressiooni uuringuteks. Kuna need rakud on pärit inimeselt ja on olulised emakakaelavähi puhul, kasutatakse neid rakke peamiselt vähibioloogia, viroloogia ja ravimite arendamise uuringutes.

SiHa rakkude üldised omadused ja päritolu

Rakuliini päritolu ja üldiste omaduste mõistmine on ülioluline, sest see mõjutab selle kasutamist teie uurimistöödes. Selles artikli osas saate teada SiHa rakuliini päritolu, eripära ja palju muud: Mis on SiHa vähirakuliin? Mis on SiHa rakkude HPV? Mis on SiHa rakuliini päritolu? Milline on SiHa morfoloogia?

SiHa, emakakaela kartsinoomi rakuliin on saadud Aasia naise (55-aastane) primaarse emaka biopsia fragmentidest, kellel oli plaatinavähk [1].
SiHa rakuliinil on hüpertriploidne karüotüüp. Enamiku rakkude keskmine kromosoomide arv jääb vahemikku 69-72. Kuid umbes 24% rakkudest omab modaalset kromosoomiarvu 71.
SiHa rakud on inimese papilloomiviiruse 16 positiivsed. Neis on integratsiooniks umbes 1 kuni 2 HPV genoomi koopiat raku kohta [2].
Nendel emakakaelavähirakkudel on epiteliaalne morfoloogia.

HeLa emakakaelavähirakkude jagunemine mikroskoobi all.

SiHa rakuliin: Kultiveerimisega seotud teave

Rakuliini kultuuri pidamine ei ole lihtne, kui te ei tea kõiki selle kultiveerimise põhipunkte. Te peaksite teadma: Milline on SiHa kahekordistumisaeg? Mis on SiHa rakukeskkond? Kuidas kasvatada SiHa rakuliini?

SiHa rakkude kultiveerimise põhipunktid

Kordistumisaeg:	SiHa rakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 17 tundi.
Adherentselt või suspensioonis:	SiHa on adherentne rakuliin.
Subkultiveerimise suhe:	SiHa rakkude subkultiveerimise suhe on 1:2 kuni 1:4. Passaažiks ja adherentsed rakud loputatakse 1x PBS-ga. Lisatakse Accutase'i lahus ja rakke inkubeeritakse 8-10 minutit ümbritseva õhu temperatuuril. Seejärel lisatakse kultuurkeskkond ja rakud tsentrifuugitakse. Rakupellet resuspendeeritakse ja rakud valatakse kasvatamiseks uude kolbi.
Kasvukeskkond:	SiHa rakkude ideaalseks kasvatamiseks kasutatakse Eagle'i minimaalselt vajalikku keskkonda (EMEM), mis sisaldab 10% FBS, 2 mM L-Glutamiini, 2,2 g/L NaHCO3 ja Earle'i tasakaalustatud soolalahust (EBSS). Keskkonda vahetatakse 2-3 korda nädalas.
Kasvutingimused:	SiHa rakke hoitakse 37 °C juures niisutatud inkubaatoris, kus on 5% CO2.
Säilitamine:	Külmutatud SiHa emakakaelavähi rakuliini viaalid säilitatakse pikema aja jooksul alla -150°C temperatuuril elektrilises sügavkülmikus või vedela lämmastiku aurufaasis.
Külmutamisprotsess ja keskkond:	SiHa rakkude külmutamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonda. Rakkude külmutamisel kasutatakse aeglast külmutamismeetodit, mis võimaldab rakkude elujõulisuse kaitsmiseks langeda vaid 1 °C minutis.
Sulatamisprotsess:	Külmutatud rakke hoitakse 40-60 sekundit 37 °C veevannis, kuni alles jääb väike jääklomp. Seejärel lisatakse värske kasvukeskkond ja rakud tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonna komponendid. Rakupellet resuspenseeritakse ja rakud doseeritakse kasvukolbi.
Bioturvalisuse tase:	SiHa rakukultuuride käitlemiseks ja hooldamiseks on vajalik 1. bioloogilise ohutuse taseme laboratoorium.

SiHa rakkude adherentne kiht 10× ja 20× suurendusena.

SiHa rakuliini eelised ja puudused

Nagu teistelgi inimese kantsinoomi rakuliinidel, on ka SiHa-l mõned kindlad omadused, mis on seotud teatud eeliste ja puudustega. Siinkohal oleme arutanud mõningaid olulisi neist.

SiHa emakakaelavähi rakuliini eelised

Emakakaelavähi mudel
- Tuletatud emakakaela lamerakk-kartsinoomist.
- Kasutatakse emakakaelavähi mehhanismide, kasvu ja arengu uurimiseks.
- Ekspresseerib geene p53+ ja pRB+, mis on seotud DNA parandamise, rakutsükli reguleerimise ja kasvaja supressiooniga.
Tumorigeenne potentsiaal
- SiHa rakud on tumorigeensed ja võivad indutseerida alasti hiirtel halvasti diferentseeritud III astme epidermoidseid kasvajaid.
- Kasutatakse in vivo vähiuuringuteks ja vähivastaste ravimeetodite testimiseks.

SiHa rakkude puudused

Proliferatsiooni määr
- SiHa rakud paljunevad kiiresti, mis viib ülekasvu.
- Nõuab sagedast passageerimist, mis suurendab geneetilise ebastabiilsuse riski, mis võib mõjutada rakkude käitumist aja jooksul.

SiHa rakkude teadusrakendused

SiHa rakuliini kasutatakse laialdaselt emakakaelavähi uurimisel. Siin käsitletakse mõningaid selle rakuliini konkreetseid rakendusi.

Inimese papilloomiviirusega (HPV) seotud uuringud: SiHa rakud on HPV 16 positiivsed, seega on nad väärtuslikud üksused inimese papilloomiviiruse infektsiooni, selle molekulaarmehhanismide ja selle rolli uurimiseks emakakaelavähi arengus ja progresseerumises. Teadlased kasutavad neid rakke ka selleks, et uurida viiruse replikatsiooni, integratsiooni ja selle mõju peremeesraku protsessidele. 2020. aastal läbiviidud uuringus kasutati SiHa rakuliini, et uurida HPV E6/E7 onkoproteiinide rolli emakakaelavähi arengus, suunates seda CRISPR-tehnoloogia abil. Tulemustest selgus, et E6/E7 geenide koputamine põhjustas SiHa rakkude kasvu pärssimist ja apoptoosi. Seetõttu võivad need viiruse geenid olla olulised ravimi sihtmärgid HPV-ga seotud emakakaelavähi vastaste ravimeetodite väljatöötamiseks [3].
Vähi bioloogia: SiHa rakud on väärtuslik mudel emakakaelavähi bioloogia, sealhulgas vähi arengu, progresseerumise, metastaaside tekke ja invasiivsuse uurimiseks. Teadlased kasutavad neid rakke, et uurida geneetilisi mutatsioone ja aluseks olevaid molekulaarseid radu, mis aitavad kaasa emakakaelavähi arengule ja kasvule, näiteks kasutati uuringus SiHa rakke ja leiti, et ülesreguleeritud SEC61G (SEC61 translokon subunit gamma) soodustab emakakaelavähi rakkude proliferatsiooni MAPK-kaskoodi aktiveerimise kaudu [4].
Ravimite sõelumine ja testimine: SiHa on laialdaselt kasutatav emakakaelavähi liin, et hinnata potentsiaalsete HPV-ga seotud emakakaelavähile spetsiifiliste vähivastaste ravimite tõhusust. Teadlased uurivad nende rakkude abil ravimite antiproliferatiivset, apoptootilist ja metastaatikavastast potentsiaali. Näiteks 2019. aastal läbi viidud uuring, milles uuriti Vatica diospyroides Symingtoni tüübi SS-vilja ekstraktide tsütotoksilist potentsiaali SiHa emakakaelavähi rakuliinile [5].

SiHa rakud oma uurimistööks!

430,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 305023

SiHa rakke sisaldav teaduspublikatsioon

Mõned olulised ja sageli tsiteeritud teaduspublikatsioonid, milles on kasutatud SiHa emakakaela koldekartsinoomi rakuliini.

Aloe-emodiini kasvajavastane toime emakakaelavähirakkudele oli seotud inimese papilloomiviiruse E6/E7 ja glükoosi metabolismiga

Selles ajakirjas OncoTargets and Therapy (2019) avaldatud väljaandes pakuti välja, et looduslik ühend aloe-emodiin avaldab HPV E6/E7 ja glükoosi ainevahetusega seotud apoptootilist toimet SiHa emakakaelavähirakkudes.

Excoecaria agallocha (L.) leheekstrakti vähivastase potentsiaali hindamine inimese emakakaelavähi (SiHa) rakuliinil ja selle aluseks oleva toimemehhanismi hindamine

See artikkel avaldati ajakirjas Future Journal of Pharmaceutical Sciences 2022. Käesolevas uuringus uuriti Excoecaria agallocha (L.) taime leheekstrakti kasvajavastast toimet SiHa emakakaelavähi rakuliinil.

1, 10-fenantrooliini ja sulfaatunud ZnO nanoosakeste ühendamise antiproliferatiivne toime SiHa emakakaelavähi rakuliinis

Selles ajakirjas Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) avaldatud uuringus pakuti välja, et 1, 10-Fenantroliini molekul avaldab tsinksulfaatnanoosakestega sidumisel SiHa rakkudes märkimisväärset antiproliferatiivset toimet.

Astragalosiid IV inhibeerib SiHa emakakaelavähirakkude invasiivsust ja metastaasi teket TGF-β1-vahendatud PI3K ja MAPK radade kaudu

See uuring avaldati ajakirjas Oncology Reports 2019. aastal. Uuringust selgus, et looduslik toode Astragalosiid IV pärsib SiHa rakkude migratsiooni ja invasiivsust TGF-β1-vahendatud PI3K ja MAPK signaaliradade moduleerimise kaudu.

IFI16 soodustab emakakaelavähi progresseerumist, reguleerides PD-L1 immunomikrokeskkonnas STING-TBK1-NF-kB raja kaudu ülespoole

See uuring ajakirjas Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) näitas, et IFI16 (interferoon-gamma indutseeritav valk 16) reguleerib PD-L1 geeni STING-TBK1-NF-kB raja aktiveerimise kaudu, et soodustada SiHa emakakaelavähi rakkude kasvu.

SiHa rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud

Siin on mõned SiHa rakke tutvustavad veebiressursid.

SiHa rakkude transfektsioon: See teadusartikkel sisaldab SiHa emakakaelavähirakkude säilitamise ja SiHa rakkude transfektsiooni protokolli.

Järgmine link sisaldab teavet SiHa rakukultuuri kohta.

SiHa rakuliin: See veebisait sisaldab palju väärtuslikke andmeid SiHa rakuliini kohta. See sisaldab teavet kasvukeskkondade, kultiveerimistingimuste, SiHa rakkude subkultiveerimise protokollide ning selle proliferatiivsete ja krüokonserveeritud kultuuride käitlemise kohta.

KKK SiHa emakakaela kartsinoomi rakkude kohta

Viited

Melzer, C., J. von der Ohe ja R. Hass, Lühiülevaade: mesenhüümilise strooma/tüveliste rakkude ristmõju vähirakkudega pakub terapeutilist potentsiaali. Stem cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., et al., Inimese kõrge riskiga papilloomiviiruse mõju uurimine emakakaelavähirakkude biokeemilisele koostisele vibratsioonispektroskoopia abil. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
Chen, Y., et al., In vitro ja in vivo inimese emakakaelavähirakkude kasvu pärssimine inimese papilloomiviiruse E6/E7 mRNAde lõhustamise kaudu CRISPR/Cas13a süsteemi abil. Antiviiral Research, 2020. 178: p. 104794.
Fan, Y., et al., SEC61G soodustab emakakaelavähi proliferatsiooni, aktiveerides MAPK signaalirada. Disease Markers, 2022. 2022.
Chothiphirat, A., et al., Vatica diospyroides symingtoni tüüpi SS puuviljaekstraktide vähivastane potentsiaal ja nende mõju emakakaelavähi rakuliinide programmilisele rakusurmale. The Scientific World Journal, 2019. 2019.