RBL-2H3 rakud - RBL-2H3 tähendus allergilises vastuses ja immunoloogilistes uuringutes
RBL-2H3 rakuliin on rottide basofiilsete leukeemiarakkude liin, mida kasutatakse immunoloogilistes uuringutes. See on mudelsüsteemiks nuumrakkude füsioloogia, käitumise ja funktsioonide uurimiseks. Neid rakke kasutatakse ka allergiliste reaktsioonide, immunoloogiliste protsesside ning ravimite katsetamise ja arendamise uurimiseks.
Artiklis antakse ülevaade RBL-2H3 päritolust, üldistest omadustest, kasvatusnõuetest ja uurimisrakendustest.
RBL-2H3 rakud: Päritolu ja üldised omadused
Enne basofiilide rakuliini kasutamist oma teadusuuringutes peaksite teadma selle päritolu ja üldisi omadusi. Selles artikli osas teavitatakse teid RBL-2H3 rakkude põhitõdedest. Näiteks: Mis on RBL-2H3 mastiirirakud? Miks kasutada RBL-2H3 rakke? Mis on RBL-2H3 rakud roti basofiilse leukeemia puhul? Milline on RBL-2H3 morfoloogia? Kas RBL-2H3 rakud on surematud?
- RBL-2H3 on basofiilse leukeemia rakud, mis on saadud Wistari roti basofiilide rakkudest 1978. aastal Riikliku Hambaravi Uurimisinstituudi immunoloogia laboris.
- RBL-2H3 rakud omavad c-kit retseptori türosiinkinaasi ja masti rakkude proteaasi II (RMCP-II) retseptoreid, mis teeb neist potentsiaalse masti rakumudeli. Seetõttu nimetatakse neid tavaliselt mastrakkudeks, hoolimata nende päritolust roti basofiilidest [1].
- Nad vabastavad aktiveerimisel histamiini ja teisi mediaatoreid ning ekspresseerivad kõrge afiinsusega IgE retseptoreid.
- RBL-2H3 rakkudel on fibroblastide sarnane morfoloogia.
RBL-2H3 rakud: Teave kultiveerimise kohta
See jaotis aitab teil õppida mõningaid põhiaspekte RBL-2H3 rakuliini kultiveerimiseks. Te saate teada: Mis on RBL-2H3 rakkude kahekordistumisaeg? Milline on RBL-2H3 rakkude külvi tihedus? Milline on RBL-2H3 rakukultuuri protokoll? Mis on RBL-2H3 rakuliini külmutusvahend?
RBL-2H3 rakkude kasvatamise põhipunktid
|
Populatsiooni kahekordistumise aeg: |
RBL-2H3 mastrakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 50-60 tundi. |
|
Adherentselt või suspensioonis: |
RBL-2H3 on adherentne rakuliin. |
|
Subkultiveerimise suhe: |
RBL-2H3 rakkude puhul hoitakse jaotussuhet vahemikus 1:2 kuni 1:4. Adherentsed rakud pestakse magneesiumi- ja kaltsiumivaba 1 x PBS lahusega. Lisatakse passageerimislahus Accutase ja rakke hoitakse 10 minutit ümbritseval temperatuuril, et need eralduksid kultuuranuma põhjast. Lisatakse värsket söötmeainet ja rakud tsentrifuugitakse. Korjatud rakud resuspenseeritakse ettevaatlikult värskes söötmes ja valatakse uutesse kasvukeskkonda sisaldavatesse kolvidesse. |
|
Kasvukeskkond: |
RBL-2H3 rakkude kasvatamiseks kasutatakse EMEM-keskkonda, mis sisaldab 10% FBS, 2 mM L-glutamiini, 2,2 g/L NaHCO3 ja EBSS-soola. Keskkonda tuleb vahetada 2-3 korda nädalas. |
|
Kasvutingimused: |
RBL-2H3 rakke kasvatatakse niisutatud inkubaatoris, mille temperatuur on 37 °C ja mis on ühendatud 5%CO2 allikaga. |
|
Säilitamine: |
Rakke säilitatakse vedela lämmastiku aurufaasis või alla -150 °C temperatuuril elektrilises sügavkülmikus, et kaitsta rakkude elujõulisust pikema aja jooksul. |
|
Külmutamisprotsess ja keskkond: |
RBL-2H3 rakkude külmutamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonda, kasutades aeglast külmutamisprotsessi. Lühidalt öeldes võimaldab see meetod temperatuuri langust 1 °C minutis ja kaitseb rakke šoki eest. |
|
Sulatamisprotsess: |
RBL-2H3 rakke sulatatakse etteantud vesivannis (37 °C) umbes 60 sekundit. Seejärel lisatakse rakud värskesse söötmesse ja tsentrifuugitakse. See etapp on oluline külmutuskeskkonna komponentide eemaldamiseks. Seejärel resuspenseeritakse rakupellet kasvukeskkonnas ja rakud doseeritakse kolbi kasvatamiseks. |
|
Bioturvalisuse tase: |
RBL-2H3 rakke tuleb hoida bioloogilise ohutuse 1. taseme laboratooriumides. |
RBL-2H3 Basofiilse rakuliini eelised ja piirangud
RBL-2H3 rakke kasutatakse tavaliselt immunoloogilistes uuringutes. Selles jaotises kirjeldatakse nende peamisi eeliseid ja piiranguid.
Eelised
- Lihtne kasvatada: RBL-2H3 rakke on lihtne kasvatada ja säilitada laboratooriumis. See hõlbustab kulutõhusat ja reprodutseeritavat katsetamist, mistõttu on nad populaarne valik immunoloogias tehtavate esialgsete uuringute jaoks.
Piirangud
- Mitteinimlik päritolu: Kuna RBL-2H3 rakud pärinevad roti basofiilidest, ei pruugi nad täpselt jäljendada inimese bioloogilisi protsesse, mis võib piirata nende kasutatavust inimspetsiifilistes uuringutes. See nõuab andmete ettevaatlikku tõlgendamist tulemuste ekstrapoleerimisel inimsüsteemidele.
- Lihtsustatud nuumrakkude mudel: Kuigi need rakud pakuvad põhilist mudelit nuumrakkude funktsioonide uurimiseks, ei esinda need täielikult nuumrakkude interaktsioonide keerulist olemust inimese immuunsüsteemis. Sellest tulenevalt ei pruugi need adekvaatselt modelleerida nuumrakkude mitmekülgset rolli immuunvastuses või haigusseisundites in vivo.
RBL-2H3 rakuliin: Liiniliin: nurgakivi immunoloogilistes uuringutes
Basofiilide ja nuumrakkude uuringud RBL-2H3 rakuliini abil
Rattus norvegicus'e rakuliin RBL-2H3 on peamine mudel basofiilide ja nuumrakkude bioloogia uurimiseks. Need roti nuumarakud annavad olulise ülevaate nuumrakkude mediaatorite vabanemisest, mis on kriitilise tähtsusega allergiliste seisundite, näiteks allergilise riniidi mõistmiseks. Nende rakkude kaudu uurivad teadlased rakuretseptorite dünaamikat ja immunoloogiliste sünapside loomist, mis on kesksel kohal immuunsüsteemi reaktsioonis allergeenidele. 2019. aastal avaldatud huvitavas uuringus kasutati RBL-2H3 rakuliini ja uuriti Qingkailingi süstimise teel tekitatud pseudoallergiliste reaktsioonide taga olevaid mehhanisme. Uuringus leiti, et PI3K-RAC1 signaalkaskaad kutsub osaliselt esile selle allergilise reaktsiooni rakkudes [2]
Immunoloogiline sünapsi dünaamika allergiauuringutes
RBL-2H3 rakud, mida kasutatakse laialdaselt immunoloogiauuringutes, on eriti tõhusad immunoloogilise sünapsi dünaamika uurimiseks. See aitab selgitada immuunsüsteemi kommunikatsiooniprotsesse, mida kasutatakse nii perifeerse vere kui ka peritoneaalsete nuumrakkude uurimisel. Sellised uuringud on olulised immuunvastuse terviklikuks mõistmiseks nii süsteemses kui ka lokaalses kontekstis
Ravimite skriining ja toksilisuse testimine
Ravimite sõelumisel ja testimisel kasutatakse RBL-rakkude reageerimisvõimet erinevatele stiimulitele, sealhulgas uuritakse, kuidas H2O2 pärsib IgE-vahendatud vastuseid. Need rakud mängivad olulist rolli selliste haiguste nagu streptokokkinfektsioonide ravi väljatöötamisel, kus mitis grupi streptokokid pärsivad nuumrakkude aktiveerimist. Lisaks sellele hindavad teadlased selle RBL 2H3 mc mudeli abil erinevate ainete, sealhulgas kemikaalide, ravimite ja nanoosakeste toksilist mõju. Näiteks hiljutises uuringus (2022) hinnati polüstüreeni mikroplasti tsütotoksilisust RBL-2H3 rakkudele. Nad leidsid, et mikroplastid kahjustavad RBL-2H3 raku organelle ja soodustavad rakusurma [3]. Teises 2021. aasta uuringus hinnati loodustoote neferiini antiallergilist ja põletikuvastast potentsiaali, kasutades RBL 2H3 mc mudelit. Uuring näitas ühendi häid antiallergilisi ja põletikuvastaseid omadusi [4]
Täiustatud immunoloogilised mõõtmismeetodid
RBL-2H3 rakkude järjepidev ja mõõdetav vahendajate vabanemine muudab nad ideaalseks mugavaks fluorimeetriaks, mis hõlbustab täpseid ja täpseid mõõtmisi, mis on olulised haiguste uurimiseks ja raviainete hindamiseks.
RBL-2H3 rakuliin, mis on pärit Rattus norvegicus'e perekonnast, on hindamatu väärtus nii immunoloogia alus- kui ka rakendusuuringutes. See pakub põhjalikke võimalusi immunoloogiliste haiguste tundmaõppimiseks ja ravimiseks
RBL-2H3 rakuliin edasijõudnud immunoloogilisteks uuringuteks
RBL-2H3 rakud: RBLR-2: teaduspublikatsioonid
Järgnevalt on esitatud mõned põnevad teaduspublikatsioonid, milles käsitletakse RBL-2H3-mastrirakke:
Narirutiini pärssiv toime RBL-2H3 rakkude degranulatsioonile
See teadustöö avaldati ajakirjas Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Uuringus pakuti välja, et narirutiin, looduslik ühend, avaldab RBL 2H3 degranulatsioonile inhibeerivat mõju NF-κB, MAPK ja türosiinkinaasi signaalitee reguleerimise kaudu.
See uurimus ajakirjas International Journal of Molecular Sciences (2020) pakkus välja, et apigeniini ühend pärsib märkimisväärselt RBL-2H3 ja RAW264.7 rakkude allergilisi ja põletikulisi reaktsioone. Seetõttu võib see olla potentsiaalne vahend immuunsusega seotud haiguste vastu võitlemisel.
Käesolevas teadusartiklis ajakirjas International Journal of Molecular Sciences (2021) hinnati loodusaine saponariini antiallergilist ja põletikuvastast mõju, kasutades erinevaid rakuliine, sealhulgas RBL-2H3.
Selles tõenduspõhises täiendava ja alternatiivse meditsiini (2014) uuringus leiti, et Benchalokawichiani ekstraktid ja mõned aktiivsed koostisosad avaldavad potentsiaalset inhibeerivat mõju RBL 2H3 ß-heksosaminidaasi vabanemisele.
See artikkel avaldati 2018. aastal ajakirjas International Journal of Biological Macromolecules. Uuringus väideti, et spirulina maxima, looduslik toode, pärsib RBL 2H3 degranulatsiooni, takistades MAPKs ja AKT fosforüleerimist.
RBL-2H3 rakuliini ressursid: RBLR-2R2: Protokollid, videod ja muud vahendid: protokollid, videod ja muud
RBL-2H3 on laialdaselt kasutatav nuumrakkude liin. RBL-2H3 kultiveerimise ja transfektsiooni protokollidega seotud olemasolevad ressursid on mainitud siin:
- RBL 2H3 MC mudel: See teadusartikkel sisaldab RBL-2H3 kultuuride säilitamise ja RBL-2H3 transfektsiooni protokollid.
Siin on mõned ressursid, mis selgitavad RBL-2H3 rakukultuuri protokolli:
- RBL-2H3 rakud: RBL-2H3 rakuliini rakukultuuriprotokollide õppimiseks on see veebisait kasulik. Lisaks sisaldab see teavet RBL 2H3 rakkude söötme ja kultiveerimistingimuste kohta.
RBL-2H3 rakuliin: Teadlastele olulised KKK-d
Viited
- Passante, E. ja N. Frankish, RBL-2H3 rakuliin: selle päritolu ja sobivus nuumrakkude mudelina. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Qingkailingi süstimise põhjustatud pseudoallergiline reaktsioon osaliselt PI3K-Rac1 signaalitee kaudu RBL-2H3 rakkudes. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Polüstüreeni mikro(nano)plastid kahjustavad RBL-2H3 rakkude organelle ja soodustavad MOAP-1-i apoptoosi indutseerimiseks. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Neferiini antiallergiline ja põletikuvastane toime RBL-2H3 rakkudele. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.