NCI-H460 rakud – kopsuvähiuuringute suunamine NCI-H460 andmete abil
NCI-H460 on inimestelt pärinevad mitteväikerakk-kopsuvähirakud, mida kasutatakse laialdaselt kopsuvähi ja toksikoloogia uuringutes. See rakuliin on väärtuslik vahend mitmesuguste vähibioloogia aspektide uurimiseks, sealhulgas kasvaja arengu, kasvu ja ravimresistentsuse uurimiseks. Lisaks on NCI-H460 rakud sobiv mudel vähivastaste ravimite väljatöötamiseks.
- Kasvukeskkond
- NCI-H460 kultiveerimiskeskkonnana kasutatakse RPMI 1640-t. Seda täiendatakse 10% veise loote seerumiga, 2,1 mM stabiilse glutamiiniga ja 2,0 g/l NaHCO3-ga. Kasvukeskkonda tuleks vahetada 2–3 korda nädalas.
- Kahekordistumisaeg
- NCI-H460 rakuliini kahekordistumisaeg on umbes 33 tundi.
- Kasvutüüp
- NCI-H460 kopsuvähirakud on adhesiivsed.
- Bioloogilise ohutuse tase
- BSL-4
- Saadaval
- Cytion — Telli NCI-H460
NCI-H460 rakud: päritolu ja üldised omadused
Rakuliini päritolu ja üldised omadused mõjutavad oluliselt selle kasutamist teadusuuringutes. Artikli käesolev osa aitab teil tutvuda NCI-H460 kopsuvähi rakkude päritolu ja olulisemate omadustega. Saate teada: Mis on NCI-H460 rakud? Milline on NCI-H460 rakuliini tüüp? Milline on NCI-H460 morfoloogia?
- NCI-H460 rakuliin pärineb suurerakulise kopsuvähiga Euroopa mehe pleuraefusioonist. Selle asutasid 1982. aastal A.F. Gazdar ja tema kolleegid.
- NCI-H460 kopsuvähirakkudel on epiteelne morfoloogia.
- NCI-H460 on kasvajate tekitav rakuliin, millel on hüpotriploidset kromosoomikoosseisu. Nende rakkude modaalne kromosoomide arv on 57. NCI-H460 rakkudel esineb võrreldava sagedusega ka 58 modaalse kromosoomide arvu.
- Nendel kopsuvähirakkudel esineb palju NCI-H460 mutatsioone, mis on sarnased mitteväikerakk-kopsuvähiga, näiteks NCI-H460 KRAS-mutatsioon, mis on seotud rakkude proliferatsiooni, kasvu, invasiivsuse ja metastaasidega.
NCI-H460 rakkude kasvatamise teave
NCI-H460 rakuliini nõuetekohaseks käitlemiseks ja hooldamiseks peaksite teadma järgmisi põhipunkte. See annab teile teavet NCI-H460 kahekordistumisaja, NCI-H460 kultiveerimissöötme ja NCI-H460 kopsuvähirakkude põhiliste rakukultuuride kasvatamise protseduuride kohta.
NCI-H460 rakkude kasvatamise põhipunktid
|
Kordistumisaeg: |
NCI-H460 kahekordistumisaeg on ligikaudu 33 tundi. |
|
Adherentselt või suspensioonis: |
NCI-H460 kopsuvähirakud on kleepuvad. |
|
Subkultiveerimise suhe: |
NCI-H460 rakuliini jaoks soovitatav jagunemissuhe on 1:2 ja 1:4. Pärast vana söötme eemaldamist loputatakse adherentsed rakud 1 x fosfaatpuhvrisoolalahusega. Seejärel inkubeeritakse rakke Accutase passageerimislahusega 8-10 minutit ümbritseva õhu temperatuuril. Dissotsieerunud rakud resuspenseeritakse kultuurkeskkonnas ja tsentrifuugitakse. Korjatud rakud resuspendeeritakse uuesti ja valatakse kasvatamiseks uude kolbi. |
|
Kasvukeskkond: |
NCI-H460 kasvukeskkonnana kasutatakse RPMI 1640. Seda täiendatakse 10% veise loote seerumi, 2,1 mM stabiilse glutamiini ja 2,0 g/L NaHCO3-ga. Keskkonda tuleb vahetada 2 kuni 3 korda nädalas. |
|
Kasvutingimused: |
NCI-H460 kultuure hoitakse 37 °C temperatuuril niisutatud inkubaatoris, kus on pidev 5% CO2-lisand. |
|
Säilitamine: |
NCI-H460 kopsuvähirakke võib pikaajaliselt säilitada vedela lämmastiku aurufaasis või alla -150°C temperatuuril elektrilises ülimadalal temperatuuril töötavas sügavkülmikus. |
|
Külmutamisprotsess ja keskkond: |
NCI-H460 rakkude külmutamiseks ja säilitamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF keskkonda. Rakkude maksimaalse elujõulisuse tagamiseks soovitatakse kasutada aeglast külmutamismeetodit. |
|
Sulatamisprotsess: |
Külmutatud NCI-H460 rakke sulatatakse eelsoojendatud vesivannis (temperatuuril 37 °C) 40-60 sekundit, kuni jääb väike jääklomp. Sulatatud rakud lisatakse värskele meediumile ja tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonna komponendid. Kogutud rakupellet resuspenseeritakse uuesti ja rakud doseeritakse uutesse kolvidesse, mis sisaldavad kasvukeskkonda. NCI-H460 rakkude kinnitumine kolvi pinnale võib võtta peaaegu 24 tundi. |
|
Bioloogilise ohutuse tase: |
NCI-H460 kopsuvähirakke käideldakse ja hoitakse 1. bioohutuse taseme laboratooriumides. |
NCI-H460 rakkude eelised ja puudused
NCI-H460 on laialdaselt kasutatav rakuliin kopsuvähi uurimisel. Käesolevas jaotises käsitletakse NCI-H460 kopsuvähirakkudega seotud üldisi eeliseid ja puudusi.
Eelised
Mitteväikerakk-kopsuvähi rakuliini NCI-H460 eelised on järgmised:
-
Kasvaja päritolu
NCI-H460 rakuliin on saadud suurrakulise kopsukartsinoomi patsiendilt, mis esindab seda konkreetset kopsuvähi tüüpi. Neid kasutatakse mudelina kopsuvähi bioloogia uurimiseks ning uute ja tõhusate ravimeetodite väljatöötamiseks. NCI-H460 rakkudel on kasvajate tekkepotentsiaal ja neid saab süstida immuunpuudulikele hiirtele, et luua in vivo kasvajamudeleid, mille abil uurida kasvaja kasvu, arengut ja võimalike ravimite tõhusust.
-
Kõrge proliferatsioonikiirus
NCI-H460 näitab suuremat kasvukiirust kui teised mitteväikerakk-kopsuvähi rakuliinid, näiteks A549. See eelis suurendab nende kättesaadavust ja aitab teadlastel teha reprodutseeritavaid ja ajaliselt tundlikke katseid.
Puudused
NCI-H460 kopsuvähirakkudega seotud puudused on järgmised:
-
Homogeensus
NCI-H460 rakud on homogeensed, kuna need on saadud ühe patsiendi kasvajast. Seetõttu puudub neil üldiselt keerukus ja heterogeensus, mida täheldatakse patsientide kasvajates.
NCI-H460 rakkude teadusrakendused
NCI-H460 kopsuvähirakke kasutatakse laialdaselt kopsukartsinoomiga seotud uuringutes. Järgnevalt on esitatud mõned olulised NCI-H460 rakkude uurimisrakendused:
- Kopsuvähi uuringud: NCI-H460 rakud on hindamatu väärtusega mudel rakkude ja molekulaarsete mehhanismide uurimiseks, mis on seotud kasvajate arengu, kasvu ja metastaaside tekkimisega. Lisaks sellele kasutatakse neid rakke imperatiivsete signaaliradade, molekulaarsete sihtmärkide ja mitmesuguste geneetiliste mutatsioonide uurimiseks, mis on seotud kopsuvähi progresseerumisega. Nende tegurite tõhusaks uurimiseks on NCI-H460 rakkudega läbi viidud mitmeid uuringuid. 2019. aastal läbi viidud uuringus pakuti välja, et üleekspresseeritud tuumaubiquitoosne kaseiin ja tsükliinist sõltuvate kinaaside substraat (NUCKS) on seotud kasvajarakkude kasvuga PI3K/AKT signaalitee reguleerimise kaudu [1]. Sarnaselt kasutati in vitro ja in vivo uuringus NCI-H460 rakke, et uurida eIF4E geeni rolli. Tulemustest selgus, et eIF4E geen on seotud kopsukartsinoomi kasvu ja angiogeneesiga ning seda saab sihtmärgiks võtta, et töötada välja paljulubavaid kopsuvähivastaseid ravimeid [2].
- Ravimite avastamine ja arendamine: Inimese kopsuvähi rakuliini NCI-H460 kasutatakse laialdaselt ravimite avastamise ja arendamise uuringutes. Teadlased kasutavad neid rakke, et uurida uute ravimikandidaatide toksilisust ja tõhusust, suunatud ravimeid ja ravi, mis on peamiselt suunatud NCI-H460 KRAS-mutatsioonidele. Haoyue Hu ja kolleegide 2023. aastal läbi viidud uuringus kasutati NCI-H460 rakke, et uurida anlotiniibi ravimi vähivastast toimet. Tulemused näitasid, et anlotiniib mõjutas osaliselt KRAS-mutantidega kopsuvähirakkude kasvu, inhibeerides MEK/ERK-signaalkaskaadi [3]. Samuti uuriti fenoolse ühendi, karnosiinhappe antiproliferatiivset ja proapoptootilist toimet NCI-H460 rakkude abil [4].
- Ravimiresistentsus: NCI-H460 rakuliin sobib ideaalselt kopsukartsinoomi ravimresistentsuse mehhanismi uurimiseks. Teadlased kasutavad neid rakke ravimresistentsuse mudelite väljatöötamiseks, et tuvastada aluseks olevaid geene, molekulaarseid tegureid ja signaaliradu. Näiteks töötati uuringus välja pemetreksedile, mitmekülgselt suunatud antifolaatravimile, resistentsed NCI-H460 rakud, et uurida pemetreksediresistentsuse aluseks olevaid molekulaarseid mehhanisme mitteväikerakk-kopsuvähi rakkudes [5].
NCI-H460 rakuliini ostmine: Teie värav kopsuvähi uuringutele
NCI-H460 rakke sisaldav teaduspublikatsioon
Siin on mõned huvitavad teaduspublikatsioonid NCI-H460 kopsukartsinoomi rakuliini kohta.
See uuring ajakirjas Molecules (2023) pakkus välja, et mustast oast pärit looduslik α-1,6-glükaan BBWPW pärsib NCI-H460 rakkude proliferatsiooni PI3K/AKT/MAPK raja reguleerimise kaudu.
Selles artiklis ajakirjas Phytomedicine (2019) uuriti, et dioscin-6′-O-atsetaat, uus looduslik ühend, avaldab NCI-H460 kopsuvähirakkudele antiproliferatiivset toimet.
miRNA-425-5p suurendab kopsuvähi kasvu PTEN/PI3K/AKT-signaalitelje kaudu
BMC Pulmonary Medicine (2020) uuringus väidetakse, et mikroRNA-425-5p suurendab kopsukartsinoomi kasvajate teket PTEN/PI3K/AKT raja kaudu.
See artikkel ajakirjas Molecular Medicine Reports (2017) pakkus välja kvinalisariini ühendi kasvajavastase potentsiaali ja selle aluseks olevad mehhanismid NCI-H460 ja teiste kopsuvähirakkude puhul.
See uuring ajakirjas Food and Function (2019) toob esile Eucalyptus globulus labill. ekstrakti võimaliku vähivastase toime NCI-H460 rakkude abil. Tulemused näitasid, et taimeekstrakt näitas neid toimeid, suurendades NCI-H460 p53 ekspressiooni ja muutes rakutsükli profiili.
NCI-H460 rakuliini ressursid: H604H60: Protokollid, videod ja muud
Siin on mõned NCI-H460 kopsuvähirakke iseloomustavad veebiressursid.
- NCI-H460 rakkude transfektsioon: See videoõpetus on samm-sammult juhis NCI-H460 rakkude transfekteerimiseks plasmiid-DNAga.
Järgnevad lingid sisaldavad imperatiivset teavet rakukultuuride kohta H460 rakkude puhul.
- NCI-H460 rakud: See veebisait annab olulist teavet NCI-H460 rakkude söötme, subkultiveerimise, külmutamise ja sulatamise protseduuride kohta.
- NCI-H460 rakkude passageerimine: See dokument annab teile juhiseid NCI-H460 rakuliini passageerimise ja subkultiveerimise kohta. Lisaks aitab see teil õppida ka NCI-H460 rakkude transfektsiooni protokolli.
NCI-H460 rakuliini uurimine: KKK ja arusaamad: Korduma kippuvad küsimused ja arusaamad
Viited
- Hu, C., et al., NUCKS soodustab kopsuvähirakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiivsust Pi3k/Akt signaalitee kaudu. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, uudne eIF4E/eIF4G interaktsiooni inhibiitor, inhibeerib kopsuvähirakkude kasvu ja angiogeneesi Ras/MNK/ERK/eIF4E signaalitee kaudu. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotiniib avaldab KRAS-mutatsiooniga kopsuvähirakkudele vähivastast toimet MEK/ERK raja pärssimise kaudu. Cancer Management and Research, 2020: p. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Karnosiinhape avaldab antiproliferatiivset ja proapoptootilist toimet kasvajalistes NCI-H460 ja mittekasvajalikes IMR-90 kopsurakkudes. Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Pemetreksedile resistentsete NCI-H460/PMT rakkude loomine ja iseloomustamine. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (varem Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.