MX-1 rakuliin

MX-1 on inimese rinnavähi adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud rinnavähi ksenotransplantaadi mudelist atüümilistel hiirtel. Inimese rinnavähi adenokartsinoomi rakud saadi 29-aastase kaukaasia päritolu naise rinnavähist. MX-1 rakud on kolmekordselt negatiivse rinnavähi (TNBC) rakud, mida kasutatakse laialdaselt ravimresistentsuse, rakusignaalimise, ravimireaktsiooni mehhanismide jms uurimiseks.

MX-1 rakkude päritolu ja üldine teave

Enne selle rakuliiniga töötamist peaksite tutvuma selle põhitõdedega. Käesolevas artiklis vaatame läbi peaaegu kogu MX-1 rakuliini puudutava üldinfo.

Surematu MX-1 rakuliin on kasvajate tekitav rakuliin, mis on loodud kasvaja ksenotransplantaadist. MX-1 rakke peetakse kolmiknegatiivse rinnavähi (TNBC) tüübiks [1]. Lisaks on need rakud östrogeeniretseptori- ja p53-negatiivsed, kuna nad ei ekspresseeri neid geene.

MX-1 rakud – kolmekordselt negatiivse rinnavähi mudelisüsteem

MX-1 rakuliini kasvatamistingimused ei ole nõudlikud. Neid rakke on lihtne paljundada ja kasutada erinevates uurimislaborites transfektsiooniuuringutes. Selle rakuliini puhul uuritakse tavaliselt ajutise transfektsiooni meetodiga selle aluseks olevaid rakulisi mehhanisme ja geeniekspressiooni mustreid [2, 3].

See rakuliin on usaldusväärne mudelisüsteem rinnavähi uurimiseks. Seda saab kasutada haiguse progresseerumise taga peituvate molekulaarsete mehhanismide mõistmiseks ning haiguse vastu võitlemiseks mõeldud ravimite sõelumiseks ja arendamiseks. Täpsemalt öeldes võib inimese MX-1 rinnavähi adenokartsinoomi rakuliin olla alternatiiviks TNBC-rakkudele, kuna see on östrogeeniretseptor-negatiivne [4].

Avaldatud: 2023 | Viimati läbi vaadatud: mai 2026

MX-1 rakuliin: kasvatamise juhised

• Kaksikustumisaeg: INS-1 rakkude populatsiooni kaksikustumisaeg on umbes 44 tundi.
• Adherentne või suspensioonis: INS-1 rakud kasvavad nii suspensioonis kui ka adhereerunud kujul.
• Subkultiveerimissuhe: INS-1 rakke subkultiveeritakse jagamissuhtega 1:3. Lühidalt öeldes kogutakse suspensioonis olevad rakud kokku. Adherentseid rakke loputatakse PBS-ga ja inkubeeritakse Accutase lahusega. Pärast lahtikleepumist lisatakse rakkudele värsket kasvukeskkonda. Seejärel tsentrifuugitakse ja kogutakse nii suspensioonis kui ka adheseerunud rakud. Rakud suspendeeritakse hoolikalt uuesti ja jaotatakse kasvu jaoks uutesse kolvidesse.
• Kasvatuskeskkond: INS-1 roti insuliinoomi rakuliini kasvatamiseks kasutatakse RPMI 1640-t. Kasvukeskkonda täiendatakse 10% kuumutamisega inaktiveeritud veise loote seerumiga, 2,1 mM stabiilse glutamiiniga, 10 mM HEPES-iga, 2,0 g/l NaHCO₃-ga ja 1 mM naatriumpüruvaadiga.
• Kasvatustingimused: INS-1 rakke hoitakse niisutatud inkubaatoris, mille temperatuur on seatud 37 °C-le ja millele juhitakse pidevalt 5% CO₂.
• Säilitamine: INS-1 beeta-rakke saab pikaajaliselt säilitada vedela lämmastiku aurufaasis või elektrilises sügavkülmikus temperatuuril alla -150 °C.
• Külmutamisprotsess ja kasvukeskkond: INS-1 rakkude aeglaseks külmutamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF kasvukeskkondi. See võimaldab temperatuuri langust vaid 1 °C minutis, et kaitsta rakkude eluvõimelisust.
• Sulatusprotsess: Külmutatud INS-1 rakke sulatatakse eelnevalt 37 kraadi Celsiuse temperatuurile seadistatud veevannis 40–60 sekundit. Pärast sulatamist lisatakse rakkudele värsket kasvatuskeskkonda ja valatakse need kasvamiseks otse uude kolbi. 24 tunni möödudes vahetatakse kasvatuskeskkond välja, et eemaldada külmutamisel tekkinud komponendid.
• Bioloogilise ohutuse tase: INS-1 roti insuliinoomi rakkude kasvatamiseks on vajalik 1. bioloogilise ohutuse taseme labor.

MX-1 rakud: rakendused teadustöös

Seda inimese rinnavähi adenokartsinoomi MX-1 rakuliini kasutatakse rinnavähi uuringutes sageli selliste rakkude asemel nagu MDA-MB-231 või MCF-7. Siin on toodud mõned selle rakuliini erirakendused vähiuuringutes.  

Ravimresistentsuse mehhanismid

MX-1 rakke kasutatakse rinnavähi ravimite suhtes resistentsuse tekkimist vahendavate molekulaarsete tegurite uurimiseks. Uuringutes on MX-1 rakke laialdaselt kasutatud ravimresistentsete mudelite loomiseks. 2021. aastal avaldatud uuringus kirjeldati MX-1 rakkude kasutamist doksorubitsiiniresistentsete rinnavähi rakuliinide loomiseks. Väljatöötatud rakumudel kinnitas ABC-transpordijaama ABCB1 ja epiteel-mesenküümse ülemineku (EMT) osalust kemoresistentsuse tekkimisel [5].

Geenide ekspressioon/rakkude signaaliteed

MX-1 rakuliini saab ajutiselt transfekteerida, et selgitada välja geeniekspressiooni mustrid ja rakkude signaaliteed. Uuringutes on kasutatud MX-1 rakke shRNA (lühike juukseklambri-RNA) ja mittetranslatsiooni-RNA transfektsiooniks, et uurida nende mõju rinnavähi rakkude proliferatsioonile ja kasvule. Lisaks on selgitatud seotud geenide signaaliteid [2, 6].

Potentsiaalsete inhibiitorite sõelumine

MX-1 rakke saab kasutada potentsiaalsete rinnavähivastaste ravimite sõelumiseks, kuna need imiteerivad vähirakkude mikrokeskkonda. Üks uuring on näidanud mikrotubuliini toksiini vinorelbiini terapeutilist toimet, mis põhjustas MX-1 rakkudes rakusurma ja polüploidsust [4].

Tellige oma MX-1 rakuliin juba täna

MX-1 rakuliini materjalid: protokollid, videod ja muud

Kultiveerimis- ja transfektsioonimeetodite kohta on saadaval piiratud hulgal materjale, kuid oleme teie jaoks kogunud nii palju teavet kui võimalik.

Rakukultuuri protokollid

MX-1 rakke kasutatakse paljudes ajutise transfektsiooni analüüsi uuringutes. Siin oleme loetlenud mõned allikad, mis aitavad teil transfektsiooniprotokolle koostada.

• MX-1-rakkude transfektsioon: selles publikatsioonis kirjeldatakse siRNA-ga transfektsiooni protokolli MX-1-rakkudes geenide knock-out-mudeli väljatöötamiseks.
• Imetajate rakkude transfektsioon: selles artiklis on kogu oluline teave imetajate rakuliinides kasutatavate transfektsioonimeetodite kohta.

Loodame, et see artikkel on andnud teile väärtuslikke teadmisi MX-1 rakuliini kohta ning et olete saanud parema arusaama sellest, kuidas neid rakke oma teadustöös kasvatada, hooldada ja kasutada. Kui olete huvitatud MX-1 rakuliiniga töötamisest, siis ärge kõhelge meilt tellimust esitamast, et oma teadustöö teekond käima lükata!

Korduma kippuvad küsimused MX-1 rinnanäärme kartsinoomi rakuliini kohta

Viited

1. Stefanski, C.D. ja J.R. Prosperi, CHK1-resistentsuse vastu võitlemine kolmiknegatiivse rinnavähi puhul: EGFR-i inhibeerimine potentsiaalse kombinatsioonravi vahendina. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): lk 229.
2. Vasiyani, H. jt, cGAMP-i analoog c-di-AMP aktiveerib STING-i vahendatud rakusurma signaaliteed östrogeeniretseptor-negatiivsetes rinnavähi rakkudes. Apoptosis, 2021. 26: lk 293–306.
3. Xiang, S. jt., Apoptoosi inhibiitorvalgu-sarnase valgu-2 proteoomiline analüüs rinnavähi rakkude proliferatsiooni suhtes. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): lk 1–11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa ja J. Magae, „Mikrotubuli toksiin vinorelbiin indutseerib apoptoosi ja polüploidsust inimese kolmekordselt negatiivses rinnavähi rakuliinis MX-1”. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): lk 447–451.
5. Kubiliute, R. jt., Mittedogenotoksiline ABCB1-aktivaator tetrafenüülfosfoonium võib kaasa aidata doksorubitsiiniresistentsuse tekkele MX-1 rinnavähi rakuliinis. Scientific reports, 2021. 11(1): lk 1–11.
6. Jiang, R. jt., Rinnavähi mixoomikaanalüüs: pikk mittetranslatsiooniline RNA linc01561 toimib ceRNA-na, mis on seotud rinnavähi progresseerumisega. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: lk 1–9.