MX-1 rakuliin

MX-1 on inimese rinna adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud rinnanäärmevähi ksenotransplantaadi mudelist atüümsetel hiirtel. Inimese rinna adenokartsinoomi rakud on saadud 29-aastase kaukaasia naise rinnanäärme kasvajast. MX1 rakud on kolmiknegatiivse rinnavähi (TNBC) rakud, mida kasutatakse laialdaselt ravimresistentsuse, rakusignalisatsiooni, ravimivastuse mehhanismi jne uurimiseks.

MX-1 rakkude päritolu ja üldteave

Enne selle rakuliiniga töötamist peaksite tundma selle pähkleid ja pähkleid. Me vaatame läbi peaaegu kogu üldise teabe MX-1 rakuliini kohta.

Immortaalne MX-1 rakuliin on tuumori ksenotransplantaadist loodud kasvajarakkude liin. MX-1 rakke peetakse kolmiknegatiivse rinnavähi (TNBC) tüübiks [1]. Lisaks on need rakud östrogeeni retseptori ja p53 negatiivsed, kuna nad ei ekspresseeri neid geene.

MX-1 rakud - kolmiknegatiivse rinnavähi mudelisüsteem

MX-1 rakuliini kasvatustingimused ei ole keerulised. Neid rakke saab hõlpsasti paljundada ja kasutada erinevates uurimislaboratooriumides transfektsiooniuuringuteks. Transientse transfektsiooni meetodiga uuritakse tavaliselt selle rakuliini rakumehhanisme ja geeniekspressiooni mustreid [2, 3].

See rakuliin on rinnanäärme kartsinoomide usaldusväärne mudelisüsteem. Seda saab kasutada haiguse progresseerumise taga olevate molekulaarsete mehhanismide mõistmiseks ning haiguse vastu võitlemiseks mõeldud ravimite sõelumiseks ja väljatöötamiseks. Konkreetsemalt võib inimese MX-1 rinna adenokartsinoomi rakuliin olla alternatiiviks TNBC rakkudele, kuna see on östrogeeni retseptori negatiivne [4].

MX-1 rakuliin: Teave kasvatamise kohta

• Kordistumisaeg: INS-1 rakkude populatsiooni kahekordistumisaeg on ligikaudu 44 tundi.
• Adherentselt või suspensioonis: INS-1 rakud kasvavad nii suspensioonis kui ka adherentselt.
• Subkultiveerimise suhe: INS-1 rakke subkultiveeritakse jaotussuhtes 1:3. Lühidalt öeldes kogutakse suspendeeritud rakud. Adherentsed rakud loputatakse PBSiga ja inkubeeritakse Accutase lahusega. Pärast eraldumist lisatakse rakkudele värsket keskkonda. Seejärel tsentrifuugitakse ja kogutakse nii suspendeeritud kui ka adherentsed rakud. Rakud resuspenseeritakse ettevaatlikult ja jaotatakse uutesse kolvidesse kasvatamiseks.
• Kasvukeskkond: INS-1 roti insulinoomi rakuliini kasvatamiseks kasutatakse RPMI 1640. Keskkonda on täiendatud 10% soojusinaktiveeritud veiste loote seerumi, 2,1 mM stabiilse glutamiini, 10 mM HEPESi, 2,0 g/L NaHCO3 ja 1 mM naatriumpüruvaadi sisaldusega.
• Kasvutingimused: INS-1 rakke hoitakse niisutatud inkubaatoris temperatuuril 37 °C ja pideva 5% CO2-ga.
• Säilitamine: INS-1 beetarakke võib pikaajaliselt säilitada vedela lämmastiku aurufaasis või alla -150 °C temperatuuril elektrilises sügavkülmikus.
• Külmutamisprotsess ja keskkond: INS-1 rakkude külmutamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF keskkonda aeglase külmutamise teel. See võimaldab rakkude elujõulisuse kaitsmiseks temperatuuri langust ainult 1 °C minutis.
• Sulatamisprotsess: Külmutatud INS-1 rakke sulatatakse 40-60 sekundi jooksul 37 °C temperatuurile eelseadistatud vesivannis. Pärast sulatamist lisatakse rakud värskele kasvukeskkonnale ja valatakse otse uude kolbi kasvamiseks. 24 tunni pärast vahetatakse keskkond välja, et kõrvaldada külmunud keskkonna komponendid.
• Bioturvalisuse tase: INS-1 roti insulinoomi rakkude kasvatamiseks on vaja 1. bioloogilise ohutuse taseme laboratooriumi.

MX-1 rakud: Rakendused teadusuuringutes

Inimese rinna adenokartsinoomi MX-1 rakuliini kasutatakse tavaliselt rinnavähi uuringutes selliste rakkude nagu MDA-MB-231 või MCF-7 asemel. Siin on mõned selle rakuliini erilised rakendused vähiuuringutes.

Ravimiresistentsuse mehhanismid

MX-1 rakke kasutatakse rinnanäärmevähi ravimite suhtes resistentsuse tekkimist vahendavate molekulaarsete tegurite uurimiseks. Uuringutes on MX-1 rakke laialdaselt kasutatud ravimresistentsete mudelite loomiseks. Aastal 2021 avaldatud uuringus teatati MX-1 rakkude kasutamisest doksorubitsiinile resistentse rinnavähi rakuliini loomiseks. Välja töötatud rakumudel valideeris ABC-transporteri ABCB1 ja epiteliaalse-mesenhümaalse ülemineku (EMT) osaluse kemoresistentsuse omandamisel [5].

Geeniekspressioon/raku signaalirada

MX-1 rakuliini saab transfekteerida transientselt geeniekspressiooni mustrite ja raku signaaliradade selgitamiseks. Uuringutes on kasutatud MX-1 rakke shRNA (lühikese juuksenõela RNA) ja mittekodeeriva RNA transfektsiooniks, et uurida nende mõju rinnavähirakkude proliferatsioonile ja kasvule. Lisaks on välja selgitatud seotud geenide signaaliradasid [2, 6].

Potentsiaalsete inhibiitorite skriining

MX-1 rakke saab kasutada potentsiaalsete ravimite skriininguks rinnavähi vastu, kuna need imiteerivad vähirakkude mikrokeskkonda. Uurimisuuring näitas mikrotubulitoksiini vinorelbiini terapeutilist aktiivsust, mis käivitas MX-1 rakkudes rakusurma ja polüploidsust [4].

Tellige MX-1 rakuliin täna

MX-1 rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud materjalid: Protokollid, videod ja muud

Kultiveerimis- ja transfektsioonimeetodite kohta on saadaval piiratud hulk ressursse, kuid me kogusime teie jaoks kokku võimalikult palju teavet.

Rakukultuuri protokollid

MX-1 rakke kasutatakse paljudes transientse transfektsiooni analüüsi uuringutes. Siin on loetletud mõned ressursid, mis aitavad teid transfektsiooniprotokollidega.

• MX-1 rakkude transfektsioon: Selles väljaandes kirjeldatakse siRNAga transfektsiooni protokolli MX-1 rakkudes geenide knock-out mudeli väljatöötamiseks.
• Imetaja rakkude transfektsioon: Selles artiklis on kogu oluline teave imetajate rakuliinides kasutatavate transfektsioonimeetodite kohta.

Loodame, et see artikkel on andnud teile väärtuslikke teadmisi MX-1 rakuliini kohta ja et olete saanud parema ülevaate sellest, kuidas neid rakke kasvatada, hooldada ja kasutada oma teadusuuringutes. Kui olete huvitatud MX-1 rakuliiniga töötamisest, siis ärge kartke tellida meilt, et alustada oma teadustööga!

Korduma kippuvad küsimused MX-1 rinnanäärme kartsinoomi rakuliini kohta

Viited

1. Stefanski, C.D. ja J.R. Prosperi, CHK1 resistentsuse vastu võitlemine kolmiknegatiivse rinnavähi korral: EGFR-i inhibeerimine kui potentsiaalne kombinatsiooniteraapia. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., cGAMPi analoog, c-di-AMP, aktiveerib STINGi vahendatud rakusurmaradu östrogeeniretseptor-negatiivsetes rinnavähirakkudes. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Proteoomiline analüüs apoptoosi inhibiitori valgusarnasevalgu-2mõju kohta rinnavähirakkude proliferatsioonile. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa ja J. Magae, Vinorelbine, a Microtubule Toxin, Induces Apoptosis and Polyploidy in MX-1, a Human Triple-Negative Breast Cancer Cell Line. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., Mitte-genotoksiline ABCB1 aktivaator tetrafenüülfosfoonium võib aidata kaasa doksorubitsiini resistentsusele MX-1 rinnavähi rakuliinis. Scientific reports, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Mixomics analysis of breast cancer: Pikk mittekodeeriv RNA linc01561 toimib rinnavähi progresseerumises osaleva ceRNA-na. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.