LNCaP rakuliin: Prostata vähi läbimurde võti

LnCaP rakuliin on vähiuuringute, eriti eesnäärmevähi uurimise nurgakivi. Selle laialdane kasutamine selles valdkonnas on tingitud selle kasulikkusest eesnäärmevähi bioloogiliste aluste mõistmisel ja võimalike terapeutiliste sekkumiste tõhususe hindamisel. Käesoleva artikli eesmärk on pakkuda põhiteadmisi LNCaP (eesnäärme lümfisõlmede kartsinoom) rakuliinist, varustades uurijaid olulise teabega, mis on vajalik töö alustamiseks selle rakuliiniga.

LNCaP rakkude omadused ja päritolu

LNCaP rakuliinil, mis on tunnustatud eesnäärmevähi uurimisel, on unikaalsed omadused ja päritolu, mille mõistmine on teadlaste jaoks keskse tähtsusega:

Päritolu: LNCaP rakud isoleeriti esmakordselt 1977. aastal 50-aastase eesnäärmevähki põdeva kaukaasia mehe metastaatilisest lümfisõlmest, täpsemalt vasakpoolsest supraklavikulaarsest piirkonnast.
Androgeenitundlikkus: Neid rakke iseloomustab tundlikkus androgeenide suhtes, mis on võimaldanud arendada algsetest LNCaP rakkudest kaks olulist alaliiki: LNCaP-G4, mis on tuntud oma kõrge androgeenitundlikkuse poolest, ja LNCaP-E9, mida iseloomustab madal androgeenitundlikkus. Need alamliinid pakuvad mitmekülgset vahendit eesnäärmevähi nüansside uurimiseks.
Morfoloogia: LNCaP rakud on epiteelilaadsed ja suudavad kasvada nii agregaatidena kui ka üksikute rakkudena, pakkudes mitmekülgset mudelit rakkude ja rakkude koostoimete ja vähirakkude morfoloogia uurimiseks.
Suurus: LNCaP eesnäärmevähirakkude keskmine läbimõõt on ligikaudu 18 µm, mis aitab nende rakkude mikroskoopilisel uurimisel ja iseloomustamisel.
Kromosoomide koostis: Rakuliin on aneuploidne, selle kromosoomide arv on vahemikus 76-91, mis peegeldab vähirakkudes sageli täheldatavat geneetilist ebastabiilsust.
Tumorigeenne potentsiaal: Kui LNCaP rakud viiakse isaste atüümsetesse nude hiirtesse, moodustavad nad 58% ulatuses nahaaluseid kasvajaid, mis rõhutab nende kasulikkust eesnäärmevähi in vivo mudelites.

LNCaP-rakkude päritolu, omaduste ja kasulikkuse üksikasjalik mõistmine uuringutes annab kindla aluse teadlastele, kes alustavad eesnäärmevähi uuringuid, hõlbustades teadlikku katsete kavandamist ja tulemuste tõlgendamist.

Eesnäärme rakud SEMis.

LNCaP rakkude kasvatamine: Olulised juhised

Uuringute alustamine eesnäärmevähi silmapaistva rakuliiniga LNCaP eeldab selle kultiveerimise põhialuste põhjalikku tundmist. Järgnevalt on esitatud LNCaP rakkude tõhusaks kasvatamiseks vajalikud kriitilised aspektid:

Populatsiooni kahekordistumise aeg: LNCaP rakkude keskmine kahekordistumisaeg on 48-60 tundi, mis näitab, kui kaua on vaja rakupopulatsiooni kahekordistumiseks optimaalsetes tingimustes.
Kasvutunnused: Need rakud on adherentsed, kipuvad kasvama monokihina, moodustades samas eristatavaid rakuklastreid, mis on oluline rakkude tervise ja konfluentsuse jälgimiseks.
Külvikutihedus: LNCaP rakke on soovitatav külvata tihedusega 1-2 x 10^4 rakku/cm^2 . Protokoll hõlmab rakkude pesemist PBS-ga, nende eraldamist Accutase'i abil, millele järgneb tsentrifuugimine. Seejärel resuspendeeritakse rakud ja kasvatatakse uutes kolbides värskes kasvukeskkonnas.
Optimaalne kasvukeskkond: LNCaP kasvatamiseks eelistatakse EMEMi, mida on rikastatud 2,5 mM L-glutamiiniga ja 10% veiste loote seerumiga (FBS). Optimaalsete kasvutingimuste säilitamiseks on soovitatav meediumit värskendada iga kolmas päev.
Kultiveerimiskeskkond: LNCaP rakud kasvavad 37 °C niiskendatud inkubaatoris 5% CO2 atmosfääris, mis on tingimused, mis jäljendavad täpselt in vivo keskkonda.
Rakkude säilitamine: LNCaP rakke tuleks pikaajalise säilitamise eesmärgil säilitada vedela lämmastiku aurufaasis, mis tagab nende elujõulisuse tulevaste katsete jaoks.
Külmutamis- ja sulatamistehnikad: Kasutades CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonda, tuleb LNCaP rakke külmutada järk-järgult, et vähendada termilist šokki. Pärast sulatamist, mida on kõige parem teha 37 °C veevannis, kuni alles jääb vaid väike jääklomp, tuleb rakud viivitamata resuspenseerida kasvukeskkonnas, tsentrifuugida, et eemaldada külmutuskeskkond, ja seejärel viia need üle kasvukolvidesse.
Bioloogilise ohutuse kaalutlused: LNCaP-rakkude kasvatamine nõuab 1. bioohutuse taseme protokollide järgimist, mis tagab ohutu ja tõhusa käitlemise.

Need suunised on aluseks LNCaP rakukultuuride rajamisel ja säilitamisel, hõlbustades tugevate ja korratavate tulemuste saavutamist eesnäärmevähi uurimisalastes püüdlustes.

LNCaP rakud madala ja kõrge konfluentsuse juures.

LNCaP rakuliini kasutamise plussid ja miinused

LNCaP rakuliinil, mis on eesnäärmevähi uurimise nurgakivi, on ainulaadne hulk omadusi, mis annavad selle kasutamisel nii eeliseid kui ka probleeme. Käesolevas jaotises kirjeldatakse LNCaP rakuliiniga seotud olulisi eeliseid ja võimalikke puudusi.

Eelised

Lihtne kasvatamine: LNCaP rakkude kasvatamine ja hooldamine laboris on eriti kasutajasõbralik. See on muutnud nad eelistatud valikuks erinevate rakenduste, sealhulgas ravimite skriiningu ja farmakoloogiliste testide jaoks.
Androgeenitundlikkus: LNCaP rakkude tunnusjooneks on nende sõltuvus androgeenidest, mida iseloomustab androgeeniretseptorite (AR) ekspressioon. See omadus muudab need rakud hindamatuks in vitro mudeliks androgeenisõltuva eesnäärmevähi dünaamika uurimiseks, mis annab ülevaate haiguse kulgemisest ja potentsiaalsetest terapeutilistest sihtmärkidest.

Puudused

Kasvukiirus: Üks LNCaP rakkude piiranguid on nende suhteliselt aeglane proliferatsioonikiirus. See omadus võib tekitada probleeme katsekujundustes, mis nõuavad rakkude kiiret kasvu või suurt tootlikkust piiratud aja jooksul.
Rakkude agregatsioon: LNCaP rakkudel on kalduvus moodustada agregaate või klastreid, mis võib tekitada varieeruvust ja raskendada andmete tõlgendamist teatud rakupõhiste analüüside puhul, eriti nende puhul, mis põhinevad rakkude ühtlasel jaotumisel või üksikute rakkude analüüsil.

Nende LNCaP rakuliini omaduste mõistmine on teadlaste jaoks ülioluline, et kasutada ära selle eeliseid ja samal ajal leevendada selle piirangute mõju, optimeerides seeläbi rakuliini potentsiaali eesnäärmevähi uuringute edendamisel.

Androgeenitundlike LNCaP rakkude uurimisrakendused

Inimese eesnäärmevähist saadud LNCaP-rakud on kriitiline vahend erinevates uurimisvaldkondades. Nende kasulikkus tuleneb nende androgeenisõltuvusest ja võimest modelleerida eesnäärmevähi bioloogia konkreetseid aspekte. Peamised rakendused hõlmavad järgmist:

Eesnäärmevähi uurimine

Androgeeni retseptori uuringud

LNCaP rakud, nagu paljud eesnäärme kasvajarakud, on tundlikud androgeenide suhtes, mis on eesnäärmevähi kasvu kriitilised tegurid. Seda tundlikkust kasutatakse terapeutiliselt ära androgeenide äravõtmise strateegiate abil, nagu androgeenide eemaldamine või antiandrogeenide, nagu flutamiid, kasutamine. Nende ravimeetodite tõhusust jälgitakse sageli spetsiifiliste antigeenide supressiooni ja rakkude proliferatsiooni pärssimise kaudu. Resistentse eesnäärmevähi teke on siiski märkimisväärne probleem, mis sageli järgneb antiandrogeenide ärajätmisele, mis võib viia metastaatilise haiguse tekkeni.

Mutatsioonidel on LNCaP-rakkude kohanemis- ja resistentsusmehhanismides keskne roll. Punktmutatsioonid, eriti androgeeni retseptori geenis, on tuvastatud ja uuritud selliste tehnikate abil nagu polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) ja transkriptoomilised analüüsid. Need mutatsioonid võivad mõjutada rakkude reaktsiooni androgeenide ärajätmise ja antiandrogeenravi suhtes, mis muudab kaugelearenenud eesnäärmevähi ravi keerulisemaks.

Ravimite avastamine

Terapeutiline skriining

LNCaP-rakkude kasutamine on laienenud traditsioonilistest hormoonravimeetoditest kaugemale, et uurida uudseid ravimeetodeid. Huvi on pakkunud rakusisene ravimite manustamine, mis on suunatud konkreetsetele rakkude sisemistele teedele, selliste ühendite nagu ripl tsütotoksilisus ja selliste ainete nagu amügdaliin ja klorgüliin mõju. Nende uuringute eesmärk on avastada uusi meetodeid metastaatilise protsessi peatamiseks, rakutsükli progresseerumise kontrollimiseks ja rakutsükli peatamiseks eesnäärmevähirakkudes, mis annab lootust tõhusamatele ravimeetoditele haiguse kaugelearenenud ja resistentsete vormide vastu.

Kliinilised tagajärjed

LNCaP rakkude metastaatiline potentsiaal, eriti nende võime jäljendada metastaatilist protsessi sellistesse kohtadesse nagu supraklavikulaarne lümfisõlm, muudab need rakud hindamatuks eesnäärmevähi leviku uurimisel. Nende rakkude genoomilise ja transkriptoomilise maastiku, sealhulgas inimese genoomse DNA rolli mõistmine nende käitumises, on oluline metastaatilise eesnäärmevähi ennetamise või ravimise strateegiate väljatöötamiseks.

430,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300265

Tõstke oma teadusuuringuid meieLnCaP rakuliini ja selle derivaadiLnCaP klooni FGCabil

LNCaP-rakkude ressursid ja uurimistulemused

Teadlaste jaoks on väga oluline saada juurdepääs kõrgetasemelistele LNCaP rakuliinidele ja nende üksikasjalikele geneetilistele ja fenotüübilistele andmetele. Arvukad biorepositooriumid ja teadusasutused pakuvad neid elutähtsaid ressursse, mis võimaldavad teadlastel viia läbi põhjalikke ja olulisi uuringuid eesnäärmevähi ja sellega seotud valdkondades.

Tähelepanuväärsed LNCaP rakke hõlmavad teaduspublikatsioonid

LNCaP rakuliin on olnud kesksel kohal paljudes eesnäärmevähi uuringute mõjusates uuringutes. Allpool on esitatud mõned märkimisväärsed publikatsioonid, milles on kasutatud LNCaP rakke kui olulist teadusmudelit:

Androgeeni retseptori CRISPR/Cas9 sihistamine pärsib inimese eesnäärmevähi LNCaP rakkude kasvu: CRISPR/Cas9 potentsiaali terapeutilise vahendina LNCaP rakkude kasvu pärssimiseks androgeeni retseptori sihtimisega.
Daphne pontica L. varte fütokeemiline analüüs koos nende pro-apoptootiliste omadustega DU-145 ja LNCaP eesnäärmevähirakkude vastu: Daphne pontica L. vähivastaseid võimeid LNCaP- ja DU-145-rakkude vastu.
Liraglutiidi, glükagoonilaadse peptiidi-1 retseptori agonisti sünergistlik kasvajavastane toime koos doketakseliga LNCaP eesnäärmevähi rakuliinile: See uuring, mis on avaldatud ajakirjas European Journal of Pharmacology 2020, uurib Liraglutiidi ja doketakseli tugevat kasvajavastast sünergiat LNCaP rakkudel.
Coriandrum sativum'i võimaliku vähivastase toime määramine PC-3 ja LNCaP eesnäärmevähi rakuliinides: Selle 2018. aasta väljaande Journal of Cellular Biochemistry kohaselt näitab Coriandrum sativum'i ekstrakt paljulubavat vähivastast toimet LNCaP rakkudele, moduleerides peamisi rakutsükli geene.
STEAP1 nokkimine pärsib rakkude kasvu ja indutseerib apoptoosi LNCaP eesnäärmevähirakkudes, mis tasakaalustab androgeenide mõju: Selles Molecular Oncology Journal'i 2018. aasta artiklis käsitletakse, kuidas üleekspresseeritud STEAP1 geeni vaigistamine LNCaP rakkudes võib takistada eesnäärmevähirakkude kasvu ja käivitada apoptoosi.

LNCaP rakud: LNPCNP: Protokollid, õpetused ja muud

LNCaP, laialdaselt kasutatav eesnäärmevähi rakuliin, on toetatud rohkete ressurssidega, sealhulgas üksikasjalike kultiveerimis- ja transfektsiooniprotokollide abil:

LNCaP rakuliini transfekteerimine: See dokument pakub põhjalikku juhendit LNCaP rakkude passiveerimis- ja transfektsiooniprotokollide kohta

KKK LNCaP rakkude kohta

Viited

Castanares, M.A., et al., Uue LNCaP päritolu metastaatilise eesnäärmevähi rakuliini iseloomustamine. The Prostate, 2016. 76(2): p. 215-225.
Iguchi, K., et al., Isolation and characterization of LNCaP sublines differenting in hormone sensitivity. Journal of andrology, 2007. 28(5): p. 670-678.
Wei, C., et al., CRISPR/Cas9 sihtmärgistamine androgeeni retseptorile pärsib inimese eesnäärmevähirakkude LNCaP kasvu. Molecular medicine reports, 2018. 17(2): p. 2901-2906.
Gomes, I.M., et al., STEAP1 nokkimine pärsib rakkude kasvu ja indutseerib apoptoosi LNCaP eesnäärmevähirakkudes, mis tasakaalustab androgeenide mõju. Medical Oncology, 2018. 35: p. 1-10.
Tousi, M.S., et al., mPEG-b-PLGA-ga kaetud raudoksiid-nanoosakeste kui eupatoriini kandja apoptootilise toime hindamine inimese eesnäärmevähi DU-145 ja LNCaP rakuliinidele. Journal of Pharmaceutical Analysis, 2021. 11(1): p. 108-121.