Avaldatud: 2023 | Viimati läbi vaadatud: mai 2026

Jurkat E6.1 rakuliin

Jurkat E6.1 on Jurkat-rakuliini kloon, mis on perifeersest verest saadud surematu inimese T-lümfotsüütide rakuliin. Esmakordselt loodi see 1977. aastal ning seda kasutatakse T-rakkude retseptori signaalimise, T-rakkude ja muude lümfotsüütide adoptiivravi uuringutes vähivastases võitluses, verega seotud protoonkogeenide uurimisel, rakkude ellujäämise ja rakkude diferentseerumise uurimisel.

Käesolevas artiklis esitame kogu teabe ja eeltingimused, mida peate teadma enne töö alustamist Jurkat E6.1 kloonitud rakuliinidega, sealhulgas:

1. Päritolu, ajalugu ja üldine teave
2. Rakukultuuri omadused
3. Jurkat E6.1 rakuliinide rakendused
4. Teaduslikud publikatsioonid
5. Eelised ja piirangud
6. Ressursid: protokollid, videod ja muud materjalid

 1. Päritolu, ajalugu ja üldine teave

Siin on kogu vajalik teave Jurkat E6.1 rakuliini ajaloo, päritolu ja üldiste omaduste kohta ning selle käsitsemise kohta rakukultuuris.

• Jurkat E6.1 on immortaliseeritud inimese T-lümfotsüütide rakuliin. See kloonitud rakuliin on tuletatud Jurkat-rakuliinist, mis saadi 1976. aastal ägeda lümfoblastilise leukeemiaga 14-aastase poisi perifeersest verest. Pärast verest eraldamist nimetati seda rakuliini esialgu JM-iks, kuna nimetused JM ja Jurkat viitavad sellele, et need rakuliinid on eraldatud samalt patsiendilt. Jurkat E6.1 rakuliin klooniti rakuliini derivaatidest, mida tuntakse nimetusega Jurkat-FHCRC.
• E6.1 rakuliinid on saadud leukeemiast; neid rakuliine kasutatakse IL-2 ekspressiooni suurendamiseks monoklonaalsete antikehade või lektiiniga stimuleerimise teel. Need ekspresseerivad T-rakkude antigeeniretseptoreid; seetõttu saab neid rakuliine kasutada immuunsüsteemi häirete uurimisel ja immuunonkoloogilistes uuringutes.
• Jurkat E6.1 rakkude morfoloogia: Jurkat E6.1 rakud isoleeriti leukeemiapatsiendilt ja neil on T-lümfotsüütidega võrreldes muutunud morfoloogia, mis muudab need surematuteks rakuliinideks. Lümfoblast tekib siis, kui antigeene esitavad rakud aktiveerivad naivseid lümfotsüüte antigeeni esitamise teel. Selle tulemusena suureneb tuuma, tsütoplasma, mRNA ja valkude kasv.
• Raku suurus: Jurkat E6.1 rakuliinid on kloonitud ja surematuks muudetud, nende läbimõõt on tavaliselt vahemikus 10–16 μm (läbimõõt võib varieeruda sõltuvalt suspensiooni tüübist). Nendel rakuliinidel on väga kerakujuline kuju.
• Geenivaramu ja kromosoomide arv: Need rakuliinid on inimese T-lümfotsüütide pseudodiploidsed rakuliinid, mille modaalne kromosoomiarv on 46. Uuringud näitavad, et modaalne kromosoom esineb umbes 74% juhtudest ning polüploidsuse määr on umbes 5,3%. Kariotüübi uuringud näitasid kariotüüpi 46, X, Y, -2, -18, del (2) (p21p23), del (18) (p11.2). X- ja Y-kromosoomidel on enamikus rakuliinides tavaliselt üks normaalne koopia.
• Jurkat-rakuliinid vs E6.1 Jurkat-rakuliinid: Jurkat-rakuliinid on esmased vanemrakuliinid, mis isoleeriti esmakordselt ägeda lümfoblastilise leukeemiaga patsiendilt. E6.1 Jurkat-rakuliinid on aga Jurkat-FHCRC-rakuliinide kloonitud derivaadid.

Avaldatud: 2023 | Viimati läbi vaadatud: mai 2026

Jurkat E6.1 rakuliinide rakendused

Jurkat E6.1 rakuliini kasutatakse peamiselt immuunsüsteemiga seotud haiguste ja nendega kaasnevate vähivormide uurimisel. Lisaks on see sobiv HIV-nakkusega seotud mõningate keerukate nähtuste uurimiseks, kuna CD4 T-rakkude retseptor on vajalik retroviiruse sisenemiseks.

Allpool on toodud mõned peamised valdkonnad, kus neid rakuliine kasutatakse:

T-rakkude signaalimise ja apoptootiliste signaaliteede mudelisüsteem: Seda T-rakkude leukeemiast pärinevat rakuliini kasutatakse laialdaselt TCR-signaalikaskadiga seotud uuringutes. Jurkat E6.1 vabastab rohkem IL-2 ja IL-8, mis omakorda aitavad kaasa T-rakkude aktiveerimisele ja käivitavad põletikulised signaaliteed. See rakuliin on tuntud ka hüperfosforüleeritud Pyk2 ja suurenenud Vav1 tootmise poolest, mis mõjutab otsustavalt aktiini tsütoskeleti ümberkorraldumist T-rakkudes. TCR-i segregeerumist Jurkat E6-1 rakuliinis saab parandada ka LFA-1 jõulise ekspressiooni abil, mis omakorda tugevdab TCR-signaalimist ja IL-2 ekspressiooni. Jurkat E6.1 rakuliinides viiakse läbi ka rakkude proliferatsiooni ja rakutsükli uuringuid. Neid on eelistatud apoptootiliste signaaliteede ja mere- ning taimsetest allikatest pärinevate ühendite poolt indutseeritud DNA-kahjustuste uurimisel. 2013. aastal läbi viidud uuringus hinnati nende rakuliinide abil haide epigonaalsete konditsioneeritud kasvukeskkonna mõju inimrakkudele. Samamoodi uuriti Jurkat E6.1 rakuliinides taimset päritolu hirsutiini pärssivat mõju rakkude proliferatsioonile. Sageli kasutatakse Jurkat E6.1 rakuliine ka vähivastastes uuringutes valitud sihtmärkide hindamiseks. Nendel rakuliinidel on uuritud ka mere neurotoksiinide, nagu brevetoksiinide (PbTx), mõju.

HIV-uuringud: Jurkat E6.1 rakuliinide üks olulisemaid rakendusi on nende võime toimida sobiva mudelina HIV-uuringutes, kuna need suudavad valida erinevaid signaalimisprotsesse, mis indutseerivad TCA-d. Jurkat E6.1 rakuliine on kasutatud mitte ainult HIV aktiveerumise mõistmiseks, vaid ka HIV latentsuse taga peituvate mehhanismide analüüsimiseks. Nendes rakuliinides on ulatuslikult uuritud HIV replikatsiooni ja nakatumist, kus neid on võimalik allutada geenide redigeerimisele ja geenide väljalülitamisele, nagu tehti 2021. aasta uuringus. Jurkat E6.1 rakuliine kasutati uurimaks ravimite manustamise mõju HIV-nakkusele, näiteks pika toimeajaga efavirentsi (Efa) ja enfuvirtiidi (Enf) ühiselt sisaldavate polümeer-lipiid-hübriidnanopartiklite (PLN) mõju viiruse sisenemisele. CRISPR/Cas9-tehnoloogiaga muundatud Jurkat E6.1 rakuliini on korduvalt kasutatud HIV sisenemise, replikatsiooni ja nakatumise mehhanismide uurimiseks.

Teaduspublikatsioonid

Siin on mõned märkimisväärsed näited ulatuslikust teadustööde kogumist, sealhulgas Jurkat E6.1 rakuliinide kohta.

Seleeni metaboliit metüülselenool reguleerib nende ligandide ekspressiooni, mis käivitavad immuunsüsteemi aktiveerimise lümfotsüütide retseptori NKG2D kaudu

Jurkat E6.1 rakuliine inkubeeriti erinevates seleenühendites, et uurida ligandide ekspressiooni ja MICA/B pinnal esinemist.

Karakasiinhape, ent-3,4-seko-kaureen, soodustab apoptoosi ja rakkude diferentseerumist, pärssides leukemiarakkudes NF-κB signaaliteed.

Caracasinehappe poolt indutseeritud tsütotoksilisuse mõistmine inimese T-rakuliinides, nagu Jurkat E6.1 ja HL-60.

Tõendid azidotümidiini suhtes ravimresistentsuse in vitro arengust T-lümfotsütaarsetes leukeemiarakuliinides (Jurkat E6–1/AZT-100) ja HIV-1-nakkusega lastel

Kasutati AZT-ravimiga pikaajaliselt inkubeeritud Jurkat E6.1 rakuliini, et uurida azidotümidiini (AZT) resistentsust HIV-1-ga nakatunud patsientidel.

Jurkat E6.1 rakuliini uuringud mõnede bioindoolide mõju kohta membraani voolavusele

Selles uuringus kasutati polariseeritud fluorestsentsanalüüsi süsteemi, et mõista bioindoolide, sealhulgas serotoniini, trüptofaani ja melatoniini mõju rakumembraani voolavusele Jurkat E6.1 rakuliinides.

Tribulus terrestris’e alkaloidide ekstrakti poolt Jurkat E6-1 rakkudes apoptoosi indutseerimise molekulaarne mehhanism

Tribulus terrestris’est saadud alkaloidide ekstrakt indutseeris Jurkat E6.1 rakkudes apoptoosi, et mõista selle toimemehhanismi.

LFA-1 ekspressiooni suurendamine parandab immuunsünapsi arhitektuuri ja T-rakkude retseptori signaaliedastust Jurkat E6.1 rakkudes

T-rakkude retseptori signaaliedastust Jurkat E6.1 rakkudes tugevdati LFA-1 ekspressiooni jõulise suurendamise abil.

Eelised ja piirangud

Nagu teistelgi rakuliinidel, on ka Jurkat E6.1-l oma eelised ja piirangud.

Eelised

On palju põhjuseid, miks seda rakendustes eelistatakse:

• Kasvamisviis

  Jurkat E6.1 on suspensiooniline ja mitteadheereeruv rakuliin, mis tähendab, et see kasvab suspensioonis ega kinnitu kultuuripinnale.

• Geenide ekspressioon

  Jurkat E6.1 rakuliin ekspresseerib interleukiin-2 (IL‑2) ja CD3 kodeerivaid geene. T3 antigeenikompleksi vastu suunatud monoklonaalsete antikehade, lektiinide või forbolestritega stimuleerimisel on näidatud, et need rakud toodavad suurendatud koguses IL-2.

• Antigeenide ekspressioon

  Jurkat E6.1 rakuliin ekspresseerib CD3-antigeeni, mis on seotud T-rakkude aktiveerimise ja signaalimisega.

• Ekspressioonimarkerid

  Rakuliin ekspresseerib T-rakkude antigeeniretseptori (TCR) markereid, mis on olulised T-rakkude äratundmisel ja immuunvastuses.

• Sobivus transfektsiooniks

  Jurkat-klooni E6.1 rakuliin sobib pererakkude transfektsioonikatseteks, võimaldades eksogeense geneetilise materjali viimist rakkudesse erinevate teadusuuringute eesmärgil.

Piirangud

Pärast eeliste käsitlemist vaatame läbi Jurkat E6.1 rakuliinide kasutamisega seotud piirangud:

• Rakkude transfektsioon viirusvektori abil

  Jurkat E6.1 rakkude transfektsioon on nende T-rakkude päritolu tõttu keeruline. Geneetiliseks modifitseerimiseks on tavaliselt vaja kalleid ja aeganõudvaid viirusvektoreid. Mitteviiruslikud vektorid on Jurkat-rakkudes näidanud madalat transfektsiooniefektiivsust ja märkimisväärset toksilisust.

• Bakteriaalne saastumine

  Jurkat E6.1 rakukultuure tuleb jälgida võimaliku bakteriaalse saastumise suhtes, et tagada eksperimentide tulemuste usaldusväärsus.

• Viiruslik saastumine

  Jurkat E6.1 rakuliinid ekspresseerivad mitmesuguseid kemokiiniretseptoreid ja madalat CD4 taset, mis soodustab viiruste sisenemist. See muudab need rakud vastuvõtlikuks T-rakke nakatavate viiruste, nagu HTLV ja HIV, suhtes.

6. Materjalid: protokollid, videod ja muud

Käesolevas jaotises käsitletakse rakukultiveerimise ja transfektsiooni meetodeid ja protokolle, samuti selle rakuliiniga seotud õppevideoid:

Rakukultuuri protokollid

Siin on mõned selle rakuliini kasvatamiseks järgitavad põhilised protseduurid:

• Rakukultuuri standardprotseduur (SOP), Jurkat'i paljundamine: Kalifornia Ülikool on oma USCS Genome brauseris avaldanud ka meetodi Jurkat'i klooni E6-1 kultiveerimiseks.
• Jurkat, kloon E6-1, kultiveerimine ja käitlemine: Elabscience on lisanud oma tootekirjelduse lehele kultiveerimise ja käitlemise protokolli.

Transfektsiooniprotokollid

Siin on loetelu erinevatest kättesaadavatest transfektsiooniprotokollidest:

• Jurkat-rakkude transfektsiooniprotokoll Lipofectamine LTX reagendiga: Jurkat-rakkude transfektsiooniprotokoll, milles kasutatakse ThermoFisheri Lipofectamine LTX reagenti. 
• Amaxa™ 4D-Nucleofector™ protokoll Jurkat-klooni E6.1 [ATCC®] jaoks: Lonza Group AG on esitanud transfektsiooniprotokolli ATCC-st pärineva Jurkat-klooni E6.1 jaoks, kasutades 4D-Nucleofector® X seadet.

Videod Jurkat E6.1 kohta

On mitmeid suurepäraseid videoid, mis käsitlevad rakukultuuri põhimõtteid, protseduure, proliferatsiooni, külvamist ja muid teemasid.

• Rakkude passaažimine: rakukultuuri alused: see on suurepärane ThermoFisheri video, mis annab põhijuhised inimrakuliinide passaažimiseks.
• Rakkude sulatamine: rakukultuuri alused: see ThermoFisheri video annab põhilisi juhiseid rakukultuuri kasvatamise ja rakkude sulatamise kohta.
• Plasmiid-DNA transfektsiooni protokoll: See ThermoFisheri video keskendub plasmiid-DNA transfektsiooni protokollile, kasutades Lipofectamine® LTX ja Plus™ reagente.
• Apoptoosi mõõtmine 3 mikromolaarse staurosporiiniga töödeldud Jurkat-rakkude suspensiooniga: See video näitab, kuidas teha apoptoosi analüüsi Celigo pilditsütomeetriga, kasutades Nexcelom Bioscience’i Hoechst-i ja kaspaasi 3/7 reagente.