Hep3B rakud: Hepatotsellulaarse kartsinoomi uurimine ja avastamine

HEP3B on immortaliseeritud inimese hepatotsüütide kartsinoomi rakuliin. Seda kasutatakse laialdaselt hepatotoksilisuse ja ravimite metabolismi uuringutes. HEP3B transfektsiooni tõhusus on märkimisväärne; seetõttu kasutatakse neid rakke tavaliselt maksavähi arengu, progresseerumise ja terapeutiliste sekkumiste uurimiseks. See artikkel hõlmab kogu vajalikku teavet HEP3B rakuliini kohta, et aidata teil sellega töötamisel. Peamiselt hõlmab see järgmist:

HEP3B rakkude üldised omadused ja päritolu
Kultiveerimisega seotud teave HEP3B rakuliini kohta
HEP3B rakuliin: HEPB3 HEPP3: eelised ja piirangud
HEP3B rakkude rakendused teadusuuringutes
HEP3B rakuliini kohta avaldatud publikatsioonid
HEP3B rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud

1.hEP3B rakkude üldised omadused ja päritolu

Esmane teave, mida rakuliini kohta vajate, on selle päritolu ja üldised omadused. See võib aidata teil otsustada selle kasutamise üle oma teadusuuringutes ja aidata teil sellega tegelemisel. See artikli osa hõlmab kogu olulist teavet HEP3B päritolu ja omaduste kohta. Siin saate teada: Mis on Hep 3B rakuliinid? Mis on Hep3B rakkude päritolu? Milline on HEP3B rakkude morfoloogia?

HEP3B on inimese pideva hepatoomi rakuliin, mis pärineb 8-aastase hepatotsellulaarse kartsinoomiga (HCC) Aafrika poisi maksakoes. Selle rajasid Aden ja kolleegid 1979. aastal Barbara B. Knowlesi laboris Wistari instituudis Philadelphias, USAs [1].
HEP3B rakkude kromosoomi on integreeritud B-hepatiidi viiruse (HBV) genoom.
Need hepatotsüütide kartsinoomirakud on epiteeli morfoloogiaga.
HEP3B rakkude modaalne kromosoomiarv on 60. Erinevalt HepG2-st ei ole neil kromosoomi 1 ümber paigutatud.

Mis on HepG2 ja Hep3B erinevus?

HepG2 ja HEP3B erinevad kromosoomide arvu poolest raku kohta. HEP3B sisaldab 60 kromosoomi, samas kui HepG2 rakkudes on keskmiselt 55 kromosoomi. Lisaks sellele on HepG2 mittetuumorigeenne ja B-hepatiidi negatiivne, samas kui HEP3B on tuumorigeenne ja HBV-positiivne.

Maksakartsinoom suure suurendusega mikroskoobi all.

2.kultiveerimise teave HEP3B rakuliini kohta

Teadmised rakuliini kultiveerimisega seotud teabe kohta võivad teid lihtsustada. Selles jaotises käsitletakse kõiki olulisi punkte HEP3B HBV rakuliini kultiveerimiseks, sealhulgas: Milline on Hep3B rakkude kahekordistumisaeg? Millised on HEP3B kultiveerimistingimused? Kuidas kultiveerida HEP3B Hepobakterioosirakke?

HEP3B rakkude kultiveerimise põhipunktid

Kordistumisaeg:	HEP3B rakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 36 tundi.
Adherentselt või suspensioonis:	See hepatoomi rakuliin on adherentne.
Jagatud suhe:	HEP3B rakke subkultiveeritakse vahekorras 1:2 kuni 1:4. Adherentseid HEP3B rakke loputatakse 1 x PBSiga ja seejärel inkubeeritakse Accutase dissotsiatsioonilahusega. Pärast 8 kuni 10 minutit lisatakse uus keskkond ja rakud tsentrifuugitakse. Seejärel resuspendeeritakse kogutud rakud ettevaatlikult ja valatakse kolvidesse, mis sisaldavad kultuurkeskkonda soovitatud jagunemissuhtega.
Kasvukeskkond:	HEP3B rakkude kasvatamiseks kasutatakse EMEM-keskkonda, mis sisaldab 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamiini ja Earle'i tasakaalustatud soolalahust (EBSS).
Kasvutingimused:	HEP3B rakke kasvatatakse 37 °C niiskendatud inkubaatoris pideva 5% CO2-ga.
Säilitamine:	Külmutatud HEP3B rakke säilitatakse alla -150 °C temperatuuril elektrilises sügavkülmikus või vedela lämmastiku aurufaasis.
Külmutamisprotsess ja keskkond:	HEP3B-rakkude jaoks soovitatav külmutussöötme on CM-1 või CM-ACF. Rakkude külmutamisel kasutatakse aeglast külmutamisprotsessi, mis võimaldab rakkude elujõulisuse kaitsmiseks temperatuuri langust ainult 1 °C minutis.
Sulatamisprotsess:	Külmutatud rakke sulatatakse 40-60 sekundit 37 °C juures eelseadistatud vesivannis. Hiljem lisatakse need rakud värskesse kasvukeskkonda ja tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonna elemendid. Kogutud rakud resuspenseeritakse ja jaotatakse uutesse kasvukolbidesse.
Bioturvalisuse tase:	HEP3B rakkude kasvatamiseks on vaja 1. bioloogilise ohutuse taseme laboratooriumi.

Hep3B rakkude adherentne poolkonfluentne kiht 10× ja 20× suurendusena.

3.hEP3B rakuliin: HEPB3: eelised ja piirangud

HEP3B on laialdaselt kasutatav hepatotsellulaarse kartsinoomi rakuliin. Selles jaotises keskendutakse nende hepatoomirakkude mõningatele peamistele eelistele ja piirangutele.

Eelised

HEP3B rakkude peamised eelised on järgmised:

Lihtne kasvatada	HEP3B rakkudel ei ole keerulisi rakukultuurinõudeid, mistõttu on neid lihtne teaduslaboris käsitseda ja hooldada. See lihtsustab katsemenetlusi.
Kõrge transfektsiooni tõhusus	HEP3B rakkudel on märkimisväärne transfektsiooni tõhusus, mistõttu neid kasutatakse laialdaselt geneetilises manipulatsioonis ja geeniekspressiooniga seotud uuringutes.
Tumorigeensus	HEP3B on tumorigeenne hepatotsellulaarse kartsinoomi rakuliin, mis on võimeline moodustama tuumoreid, kui seda süstitakse immuunpuudulikku hiirele. See aitab uurida vähi progresseerumist ja arengut, kasutades HEP3B ksenotransplantaadi mudeleid.
HEP3B P53 staatus	HEP3B rakkudel on P53-geeni mutatsioon, mis on sarnane hepatotsellulaarse kartsinoomi (HCC) ja teiste vähivormidega, mistõttu on need olulised P53-mutatsiooni mõju uurimiseks vähi kasvule, arengule ja progresseerumisele.

Piirangud

HEP3B rakuliiniga seotud piirangud on järgmised:

In vitro rakumudel

HEP3B rakuliin toimib hepatotsellulaarse kartsinoomi (HCC) rakkude in vitro mudelina. Siiski ei pruugi see täielikult esindada HCC keerukust, nagu see esineb elusorganismides. Sellest tulenevalt võivad katsetulemused in vitro erineda in vivo täheldatud tulemustest.

4.hEP3B rakkude kasutamine teadusuuringutes

HEP3B rakuliin pakub biomeditsiinilistes uuringutes mitmeid rakendusi. Mõned peamised HEP3B rakkude teadusrakendused on järgmised:

Vähibioloogia: HEP3B on inimese hepatotsellulaarse kartsinoomi rakuliin. See on hindamatu väärtusega rakumudel, mille abil uurida rakkude ja molekulaarseid mehhanisme, mis on HCC arengu ja progresseerumise aluseks. Teadlased kasutavad neid rakke geneetiliste mutatsioonide, rakuprotsesside ja maksavähiga seotud raku signaaliradade uurimiseks. Näiteks kasutati uuringus HEP3B rakke ja leiti, et mikroRNA-223-3p reguleerib NLRP3 inflammasoomi komponente, pärsib proliferatsiooni ja suurendab HEP3B hepatokartsinoomi rakkude apoptoosi [2].
Ravimi sõelumine ja arendamine: HEP3B rakuliini kasutatakse ka uute maksakartsinoomi vastaste ravimite testimiseks, sõelumiseks ja arendamiseks. Lisaks kasutatakse seda erinevate vähivastaste ravimite ja ravimeetodite toksilisuse ja tõhususe hindamiseks. Teadlased kasutasid neid hepatoomirakke ka ravimite metabolismi uurimiseks. Teadlased kasutasid HEP3B rakke ja hindasid Cotinus coggygria taimeekstrakti tsütotoksilist potentsiaali HEP3B hepatotsüütide kartsinoomi rakkudele [3].
Viirusinfektsioonid: HEP3B on B-hepatiidi viiruspositiivne rakuliin; seetõttu kasutatakse seda selliste viirusinfektsioonide uurimiseks, mis võivad põhjustada maksavähi teket, st HBV ja HCV. See võib aidata paremini mõista viirusinfektsioone ja arendada võimalikke viirusevastaseid ravimeetodeid. Näiteks kasutati ühes uuringus HEP3B hepatotsüütide vähirakke ja uuriti ubiquitinatsiooni olulisust hepatiit c viiruse levikul. Tulemused näitasid, et ubikvitiinispetsiifiline proteaas 15 (USP15) on seotud HCV levikuga hepatotsüütidele omaste funktsioonide, sealhulgas lipiidipisarate moodustamise ja HCV RNA translatsiooni reguleerimise kaudu [4].

430,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 305141

5.hEP3B rakuliini publikatsioonid

Selles artikli osas käsitletakse mõningaid huvitavaid uurimispublikatsioone HEP3B rakkude kohta.

Apoptoosi ja autofagia reguleerimine luteoliini poolt inimese hepatotsellulaarse vähi Hep3B rakkudes

Selles väljaandes Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) avaldati, et luteoliini ühendi poolt indutseeritud endoplasmilise retikulumi stress võib avaldada P53-null HEP3B rakkudes P53-independentne kasvajavastane toime.

Avicennia marina'st isoleeritud lupeooli potentsiaalne sihtrühm Hep3B maksavähirakkude vastu

See uuring ajakirjas Archiv der Pharmazie (2021) pakkus välja pentatsüklilise triterpenoidi, lupeooli, kui potentsiaalse vähivastase toimeaine HEP3B rakkude vastu.

Cnidium monnieri (L.) Cussoni etanooliekstrakt indutseerib rakutsükli peatamist ja apoptoosi p53-independentse raja reguleerimise kaudu HepG2 ja Hep3B hepatotsellulaarse kartsinoomi rakkudes

See artikkel on avaldatud ajakirjas Molecular Medicine Reports (2017). Uuringutulemustes märgitakse, et Cnidium monnieri (L.) Cusson etanooliekstrakt kutsub esile rakusurma (apoptoosi) ja rakutsükli peatamist hepatokartsinoomi rakkudes HepG2 ja HEP3B läbi p53 ja Akt/GSK-3β signaalitee reguleerimise.

Auranofiin suurendab sulforafaani poolt vahendatud apoptoosi hepatotsellulaarse kartsinoomi Hep3B rakkudes PI3K/Akt signaalitee inaktiveerimise kaudu

See Biomolecules and Therapeutics'is (2020) avaldatud uurimus pakkus välja, et auranofiinil on sünergistlik toime ja see soodustab sulforafaani poolt vahendatud HEP3B rakkude apoptoosi PI3K/AKT raja aktiveerimise kaudu.

RNA-0072309 on kasvajavastased mõjud Hep3B rakuliinis mikroRNA-665 sihikule suunates

Selles teadusartiklis BioFactors (2023) pakuti välja, et ringikujuline RNA-0072309 avaldab hepatotsellulaarse kartsinoomi rakkudes HEP3B kasvajavastast mõju miRNA-665 sihitamise kaudu.

6.hEP3B rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud

Järgnevalt on esitatud mõned HEP3B rakkude kohta kättesaadavad ressursid:

HEP3B transfektsioon: See video selgitab HEP3B rakkude transfektsiooniprotokolli.
HEP3B transfektsiooni tõhusus: See link aitab teil õppida HEP3B DMEM-i keskmise koostist, rakkude passageerimist ja HEP3B rakkude transfektsiooniprotokolli. Lisaks annab see teavet HEP3B lipofektamiini 3000 reagendi optimeerimiseks teie transfektsiooniprotokollis.

Järgmine link sisaldab HEP3B rakukultuuri protokolli:

HEP3B kasvatustingimused: See link aitab teil tutvuda Huh7 ja HEP3B kultuuride käitlemise ja hooldamise protokolliga.
HEP3B rakud: Sellel veebisaidil on palju teavet HEP3B-rakkude kohta, sealhulgas HEP3B-keskkond, rakkude jagamise, sulatamise ja proliferatiivsete ja krüokonserveeritud kultuuride käitlemise protokoll.

Viited

Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
Wan, L., et al., miRNA-223-3p reguleerib NLRP3, et edendada apoptoosi ja pärssida hep3B rakkude proliferatsiooni. Eksperimentaalne ja terapeutiline meditsiin, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
Danjolli-Hashani, D. ja S. Selen-Isbilir, Cotinus coggygria ekstrakti tsütotoksiline toime Hep3B vähirakuliinile. Natural Product Research, 2022: lk 1-4.
Kusakabe, S., et al., USP15 osaleb C-hepatiidi viiruse paljunemises viirusliku RNA translatsiooni ja lipiidipisarate moodustamise reguleerimise kaudu. Journal of Virology, 2019. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.