HT22 rakuliin

HT22 on neuroteaduslikes uuringutes tavaliselt kasutatav närvirakkude liin. See on väärtuslik neurogeneraatiliste häirete uurimiseks ja potentsiaalsete neuroprotektiivsete ravimeetodite või -viiside testimiseks. Peale selle on HT22 rakud glutamaadi suhtes tundlikud, seega kasutatakse neid glutamaadist põhjustatud toksilisuse või neuronaalse kahjustuse uurimiseks.

Selles artiklis tuuakse esile HT22 rakkude hädavajalikud aspektid, mis võivad teid uurimistöös aidata. Peamiselt käsitletakse järgmist:

HT22 rakkude üldised omadused ja päritolu
HT22 rakuliini kasvatamise teave
HT22 rakuliini eelised ja puudused
HT22 rakuliini teadusuuringute rakendused
HT22 rakke sisaldavaid teaduspublikatsioone
HT22 rakkude ressursid: Protokollid, videod ja muud materjalid: protokollid, videod ja muud materjalid

1. HT22 rakkude üldised omadused ja päritolu

Selles artikli osas valgustatakse HT22 rakkude päritolu ja üldisi omadusi. Selle teabe teadmine rakuliini kohta on vajalik enne sellega töö alustamist. Siit saate teada: Mis on HT22 rakud? Milline on HT22 hipokampuse rakkude morfoloogia? Milline on HT22 rakkude suurus?

HT22 on pidev rakuliin, mis on saadud hiire aju hipokampuse piirkonnast. See on vanemliku HT-4 rakuliini alamkloon, mis on välja töötatud hiirte neuronaalsete kudede immortaliseerimise teel temperatuuritundliku polüomaviiruse simian virus 40 (SV40) T antigeeni abil.

Need rakud erinevad küpsetest hipokampuse rakkudest, kuna neil puuduvad glutamaadi- ja kolinergilised retseptorid nagu küpsetel hipokampuse päritolu neuronitel. Seega ei sobi nad mäluga seotud uuringuteks [1].

HT22 rakud on epiteelirakkude sarnase välimusega.

Alzheimeri tõve korral neuronite vahel moodustuvad amüloidplaadid.

2. HT22 rakuliini kasvatamise teave

HT22 rakke kasutatakse neuroteaduslike uuringute laborites. Enne nende rakkude kultiveerimist otsivad teadlased olulist rakukultuuri teavet, mis muudab nende töö lihtsaks ja tõhusaks. Selles jaotises käsitletakse kõiki HT22 rakkude kultiveerimise põhipunkte. Te saate teada: Mis on HT22 rakkude kahekordistumisaeg? Kuidas HT22 rakke kasvatada? Milline on HT22 rakukultuuri protokoll? Milline on HT22 rakukeskkond?

HT22 rakkude kultiveerimise põhipunktid

Kordistumisaeg:	HT22 rakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 15 tundi.
Adherentselt või suspensioonis:	HT22 rakud on kleepuvad.
Subkultiveerimise suhe:	HT22 hipokampuse rakkude subkultiveerimise suhe on 1:3 kuni 1:6. Lühidalt eemaldatakse söötmeaine ja adherentsed rakud loputatakse 1 x PBS-ga. Kolbi lisatakse akutaasi dissotsiatsioonilahus ja rakke inkubeeritakse 8-10 minutit ümbritseval temperatuuril. Seejärel lisatakse värske kultuurkeskkond ja rakud kogutakse tsentrifuugimiseks viaali. Saadud rakupellet resuspendeeritakse hoolikalt ja rakud doseeritakse kasvukolbi.
Kasvukeskkond:	HT22 rakkude kasvatamiseks kasutatakse DMEM-keskkonda. Rakkude optimaalseks kasvuks lisatakse 10% FBS, 4,5 g/L glükoosi, 4 mM L-glutamiini, 1,5 g/L NaHCO3 ja 1,0 mM naatriumpüruvaati.
Kasvutingimused:	HT22 rakukultuure hoitakse niisutatud inkubaatoris (temperatuur 37 °C), kus on 5%_CO2.
Säilitamine:	Külmutatud HT22 rakke võib pikaajaliselt säilitada alla -150 °C temperatuuril kas vedela lämmastiku aurufaasis või ülimadalal temperatuuril elektrilises sügavkülmikus.
Külmutamisprotsess ja keskkond:	HT22 rakke võib külmutada CM-1 või CM-ACF keskkonnas, kasutades aeglast külmutamismeetodit. See protsess võimaldab proovi temperatuuri langust ainult 1 °C minutis, kaitseb rakke šoki eest ja aitab säilitada nende elujõulisust.
Sulatamisprotsess:	Rakke sulatatakse 37 °C veevannis 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Seejärel lisatakse rakkudesse kultuurkeskkonda ja need tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonna komponendid. Rakupellet resuspenseeritakse ja rakud valatakse uude kolbi, mis sisaldab kultuurkeskkonda. Seejärel inkubeeritakse rakke 37 °C juures inkubaatoris vähemalt 24 tundi.
Bioturvalisuse tase:	HT22 rakkude kasvatamiseks on kohustuslik 1. bioloogilise ohutuse taseme laboratoorsed tingimused.

hT22 rakkude 30% ja 90% konfluentsed monokihid rakukultuuris.

3. HT22 rakuliini eelised ja puudused

HT22 hipokampuse rakkudega on seotud mõned plussid ja miinused, mis eristavad neid teistest neuronaalsetest rakuliinidest. Siin on mainitud mõned rakuliini märkimisväärsed eelised ja puudused.

Eelised

HT22 hiirte neuronaalse rakuliini eelised on järgmised:

Kiire kasvukiirus
HT22 rakkude kahekordistumisaeg on 15 tundi, mis võimaldab kiireid ja tõhusaid katseid ning aitab kaasa õigeaegsetele uurimistulemustele.
Immortaliseerimine
HT22 on immortaliseeritud rakuliin, mis tagab pideva kasvu pikema aja jooksul. See tagab rakkude pideva kättesaadavuse, vähendab aega ja kulusid ning hõlbustab pikaajalisi eksperimente koos järjepidevate tulemustega.

Puudused

HT22 rakkude puudused on järgmised:

Hiirte päritolu
HT22 rakuliin on saadud hiire aju hipokampuse koest, mis ei pruugi täielikult esindada inimese neuronirakkude füsioloogia ja käitumise keerukust, mis piirab nende translatiivset tähtsust.

4. HT22 rakuliini teadusuuringute rakendused

HT22 rakke kasutatakse laialdaselt neurobioloogilistes uuringutes. Selles artikli osas käsitletakse selle rakuliini mõningaid paljutõotavaid rakendusi:

Neuroteaduslikud uuringud: HT22 rakke kasutatakse laialdaselt neurodegeneratiivsete haiguste, st Alzheimeri ja Parkinsoni tõve uurimisel. Neid peetakse väärtuslikuks uurimisvahendiks nende haigustega seotud neurotoksilisuse ja oksüdatiivse stressi mehhanismide uurimiseks. 2020. aastal läbiviidud uuringutes leiti, et PI3K/AKT/CREB rada on seotud hüperglükeemiast põhjustatud neuraalse toksilisusega HT22 rakkudes [2]. Samamoodi pakuti hiljutises uuringus välja, et Nrf2/HO-1 rada ja NF- κB signaaliteljestik mängivad olulist rolli HT22 amüloid beeta toksilisuses [3].
Ravimite sõelumine: HT22 rakke kasutatakse laialdaselt ravimite testimiseks ja sõelumiseks. Need aitavad teadlastel tuvastada potentsiaalseid ravimeid, millel on neuroprotektiivne mõju neurodegeneratiivsete haiguste vastu võitlemiseks. 2019. aastal läbi viidud uuringus uuriti tetrahüdrokurkumiini ühendi neuroprotektiivset potentsiaali glutamaadiga töödeldud HT22 hipokampuse rakkudes. Selles indutseerib glutamaat HT22 rakkudes oksüdatiivset stressi ja põhjustab rakusurma, aktiveerides mitogeen-aktiveeritud valgukinaasid [4].

800,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 305158

5. HT22 rakke sisaldavad teaduspublikatsioonid

Siin on mõned huvitavad teadusartiklid, milles kasutatakse HT22 rakuliini:

Krotsiini neuroprotektiivse toime uurimine antioksüdantide kaudu HT22 rakkudes ja Alzheimeri tõvega hiirtel

See uuring ajakirjas International Journal of Molecular Medicine (2019) pakkus välja Crocus sativus L. isoleeritud ühendi krotsiini neuroprotektiivse potentsiaaliL-glutamaadikahjustatudHT22 rakkudes.

Uued oksindoolide derivaadid takistavad oksüdatiivse stressi poolt põhjustatud rakusurma hiire hipokampuse HT22 rakkudes

Selles Neuropharmacology's (2018) avaldatud väljaandes teatati, et oksindooli derivaadid kaitsevad HT22 rakkude oksüdatiivse stressi poolt esilekutsutud surma eest.

Ginsenosiid Rb2 pärsib glutamaadi poolt vahendatud oksüdatiivset stressi ja neuronaalset rakusurma HT22 rakkudes

See teadustöö avaldati ajakirjas Journal of Ginseng Research 2019. aastal. Selles uuringus uuriti loodusliku toote, ginsenosiidi Rb2 neuroprotektiivset mõju, kasutades HT22 rakuliini. Uuringus leiti, et ginsenosiid rb2 vähendas tõhusalt glutamaadist põhjustatud oksüdatiivset stressi ja rakusurma hiirte hipokampuse rakkudes HT22.

Hõbe nanoosakesed indutseerisid tsütotoksilisust HT22 rakkudes autofagia ja apoptoosi kaudu PI3K/AKT/mTOR signaalitee kaudu

Selles ökotoksikoloogia ja keskkonnaohutuse ajakirjas (2021) avaldatud uuringus hinnati hõbeda nanoosakeste tsütotoksilist potentsiaali HT22 rakuliinis.

Ferrostatiin-1 kaitseb HT-22 rakke oksüdatiivse toksilisuse eest

See teadusartikkel avaldati 2020. aastal ajakirjas Neural regeneration research. Selles pakuti välja, et ferrostatiin-1, ferroptoosi inhibiitor, takistab oksüdatiivset toksilisust HT22 hipokampuse rakkudes.

6. HT22 rakkude ressursid: Protokollid, videod ja muud

Mõned veebiressursid HT22 rakkude kohta selgitavad nende transfektsiooni, diferentseerimist ja rakukultuuriprotokolle:

HT22 transfektsioon: See dokument sisaldab optimeeritud protokolli HT22 transfektsiooniks 24 ja 96 süvendi rakukultuuriplaatidel.
HT22 rakkude diferentseerimine: See artikkel juhendab teid põhjalikult HT22 diferentseerimisprotokolli kohta.

Järgmine link sisaldab HT22 rakukultuuri protokolli:

HT22 rakkude subkultuurimine: See link aitab teil õppida HT22 rakuliini subkultiveerimise protokolli. Lisaks aitab see teil õppida rakkude neurotoksilisuse esilekutsumise protokolli.
HT22 hipokampuse rakud: See veebisait sisaldab palju kasulikku teavet HT22 rakkude kahekordistumisaja, keskkondade ja rakukultuuriprotokollide kohta.

Viited

He, M., et al., Diferentseerimine muudab HT22 neuronite tundlikkuse eksitotoksilisuse suhtes. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
Zhang, S., et al., Fisetiin takistab HT22 rakke kõrge glükoosi poolt põhjustatud neurotoksilisuse eest PI3K/Akt/CREB signaalitee kaudu. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
Zhang, R.-l., et al., Berberiini kaitsev mõju β-amüloidi poolt põhjustatud neurotoksilisuse vastu HT22 rakkudes Nrf2/HO-1 raja kaudu. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: p. 106-210.
Park, C.-H., et al., Tetrahüdrokurkumiini neuroprotektiivne mõju glutamaadi poolt põhjustatud oksüdatiivse stressi vastu hipokampuse HT22 rakkudes. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.