HT-29 rakuliin

HT-29 on inimese kolorektaalse vähi rakuliin, millel on laialdased rakendused vähi- ja toksikoloogilistes uuringutes. Näiteks on need rakud tundlikud kolorektaalse vähi standardse kemoteraapia suhtes. Lisaks on HT-29 rakuliin hästi iseloomustatud in vitro mudel sooleepiteeli reaktsiooni uurimiseks bakteriaalsele infektsioonile. HT-29 rakud jäljendavad küpsete soole rakkude, st enterotsüütide omadusi ning sobivad seetõttu kinnitumise ja mehhanistlike uuringute jaoks.

HT-29 rakud: päritolu ja üldine teave

Enne mis tahes rakuliini kasutamist peaksite teadma selle üldisi omadusi ja päritolu. Käesolev osa aitab teil teada saada: Mis on HT-29 rakud? Kas HT-29 on kolorektaalse vähi rakuliin? Milline on HT-29 rakkude morfoloogia?

Mis on HT-29 rakuliin? HT-29 on kolorektaalse adenokartsinoomi rakuliin, mille asutasid 1964. aastal Trempe ja Fogh. Rakud pärinevad algselt kolorektaalse adenokartsinoomiga valge naise (44-aastane) primaarse kasvajast [1]. Alates loomisest on seda rakuliini kasutatud vähktõve bioloogia uurimiseks.

HT-29 rakkude morfoloogia: HT-29 rakuliinil on üldiselt epiteelilaadne morfoloogia. Diferentseerunud rakud kasvavad monokihina, moodustavad tihedad rakkudevahelised ühendused ja neil on apikaalne harjaspiir. Kui neid rakke kasvatatakse glükoosivaeses keskkonnas või neile manustatakse indutseerijaid, nagu butüraat või hape, ilmnevad neil enterotsüütidele omased tunnused.

Raku suurus: HT-29 kolorektaalse vähirakkude liini läbimõõt on 11 μm.

Geenivaramu ja ploidsus: HT-29 rakuliini kromosoomide modaalne arv on 71. See võib varieeruda vahemikus 68–72. Lisaks on HT-29 rakkude kromosoomide arv hüpertriploidsusega, kusjuures 2S-komponent esineb 2,4% sagedusega.

Mis on HT29 MTX? HT29 MTX on metotreksaadiresistentne rakuliin, mis on isoleeritud algsest HT-29 inimese käärsoolevähirakuliinist, kohandades seda 10 µM metotreksaadiga. Need rakud omavad limasekreteerivate küpsete pokkrakkude omadusi.

HT-29 rakud: eelised ja piirangud

Igal rakuliinil on oma eelised ja puudused, mis eristavad seda teistest rakuliinidest. Käesolevas osas käsitletakse HT-29 rakkudega seotud peamisi eeliseid ja piiranguid.

Eelised

HT-29 rakkude peamised eelised on järgmised:

• Lihtne kasvatada

  HT-29 rakuliini on lihtne käsitseda ja hooldada, kuna selle kasvatamisel ei ole keerukaid nõudeid. Seda kasvatatakse laialdaselt uurimislaborites.

• Soole rakkude in vitro mudel

  HT-29 rakud võivad spetsiifilistes kasvatustingimustes diferentseeruda küpseteks soolerakkudeks (enterotsüütideks ja lima tootvateks rakkudeks). Neid kasutatakse rakumudelina toidu seedimise ja biosaadavuse uurimiseks.

• Kõrge transfektsiooniefektiivsus

  HT-29 käärsoolevähirakkudel on kõrge transfektsiooniefektiivsus, mis teeb need sobivaks geeniekspressiooni ja -regulatsiooni uuringuteks. Mitmesuguste meetodite abil on võimalik läbi viia nii ajutisi kui ka püsivaid transfektsioonikatsetusi.

• Ravimite tundlikkus

  HT-29 rakud on tundlikud selliste kemoteraapiliste ravimite suhtes nagu fluorouratsiil ja oksaliplatiin, mida kasutatakse sageli käärsoolevähi ravis. Neid kasutatakse ravimresistentsuse uurimiseks ja potentsiaalsete ravimite sõelumiseks kolorektaalse kartsinoomi raviks.

Piirangud

• Heterogeensus

  HT-29 rakud, nagu ka teised vähirakuliinid, on heterogeensed ja ei pruugi moodustada ühtlast rakupopulatsiooni. See võib mõjutada tulemuste reprodutseeritavust teatud analüüsides ja põhjustada väikeseid erinevusi eksperimentide tulemustes.

• Piiratud diferentseerumisvõime

  HT-29 rakkudel on piiratud diferentseerumisvõime. Nad ei diferentseeru täielikult soole- või käärsoole rakkudeks, vaid ilmutavad vaid mõningaid iseloomulikke tunnuseid. See piirang võib piirata nende kasutamist keerulisemate bioloogiliste protsesside uurimisel.

HT-29 rakud: rakendused

HT-29 rakuliini kasvatatakse laialdaselt uurimislaborites tänu selle laiale rakendusvaldkonnale. Käesolevas jaotises käsitletakse vaid mõningaid olulisemaid HT-29 rakkude rakendusi.

Vähktõve uurimine: HT-29 on kolorektaalse adenokartsinoomi rakuliin, mistõttu kasutatakse seda vähktõve progressiooni, arengu ja selle aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. 2018. aastal läbi viidud uuringus kasutati HT-29 rakuliini metastaaside eest vastutavate rakumolekulide uurimiseks. Selles uuringus täheldati, et vimentiini ja CXCR4 geenid reguleerivad rakkude metastaase. Samas võib mikroRNA-193a-5p mimiku transfekteerimine vähendada nende geenide mRNA taset ja edukalt vähendada vähirakkude metastaase [2].

Toksikoloogilised uuringud: HT-29 rakuliini kasutatakse laialdaselt toksikoloogilistes uuringutes. Neid kolorektaalse kartsinoomi rakke kasutatakse erinevate ravimikandidaatide toksilisuse hindamiseks erinevate analüüside abil. Näiteks uuriti ühes uuringus taime Syzygium cumini etanooliekstrakti toksilisuse potentsiaali HT-29 rakuliinil. Tulemused näitasid HT-29 rakkude kasvu märkimisväärset pärssimist, mis viitab ekstrakti paljulubavatele vähivastastele omadustele [3].

Mikrobioloogia: HT-29-t saab kasutada pererakkude süsteemina potentsiaalsete mikroobide, st bakterite ja viiruste patogeneesi uurimiseks. Teadlased võivad nakatada HT-29 rakke mikroobidega, et uurida nende virulentsust ja peremeesrakkude reaktsiooni. Ühes sellises uuringus kasutati HT-29 rakke piimhappebakterite probiootiliste omaduste uurimiseks [4]. Teises uuringus kasutati HT-29 rakke bakteriofaagiravi tõhususe ja ohutuse hindamiseks [5].

5. HT-29 rakke käsitlevad teaduspublikatsioonid

Käesolevas osas tutvustatakse mõningaid märkimisväärseid HT-29 rakke käsitlevad publikatsioone, mis aitavad teil oma uurimistööd kavandada.

Syzygium cumini etanooliekstrakti vähivastase toime hindamine HT-29 kolorektaalse rakuliini puhul

Selles uuringus pakuti Syzygium cumini etanooliekstrakti potentsiaalseks vähivastase ainena kolorektaalse vähirakkude liini HT-29 vastu. Ekstrakt pärssis oluliselt vähirakkude kasvu.

Tetrandriin pärsib käärsoolekartsinoomi HT-29 rakkude kasvu Bcl-2/Caspase 3/PARP signaalitee ja G1/S faasi kaudu

Selles Bioscience Reportsis avaldatud artiklis testiti ühendi tetrandriini vähivastast toimet HT-29 rakkudel. Tulemused näitasid, et tetrandriin pärsib vähirakkude paljunemist ja kasvu rakkude signaaliteede reguleerimise kaudu.

microRNA-193a-5p pärsib inimese HT-29 käärsoolevähirakkude rännet metastaaside signaalitee pärssimise kaudu

Selles uuringus väideti, et miRNA-193a-5p võib potentsiaalselt reguleerida HT-29 rakkude metastaase, reguleerides metastaasidega seotud geene.

Bakteriofaagid on inimrakkudega bakterite suhtes virulentsemad kui bakterikultuuris; järeldused HT-29 rakkude põhjal

See artikkel avaldati ajakirjas Nature Scientific Reports 2018. aastal. Selles uuringus kasutati HT-29 tuumorigeenset rakuliini soole rakumudelina, et hinnata kavandatava bakteriofaagiravi efektiivsust.

Laktobatsillide probiootilised omadused ja nende võime pärssida enteropatoogeensete bakterite adhesiiooni Caco-2 ja HT-29 rakkudele

Selles uuringus kasutasid teadlased HT-29 rakke piimhappebakterite probiootilise toime uurimiseks. Huvitaval kombel näitas uuring, et laktobatsillid takistavad patogeensete bakterite kinnitumist käärsoole rakkudele.

HT-29 rakud Ressursid: protokollid, videod ja muud

Selles osas käsitletakse mõningaid HT-29 rakkude kohta kättesaadavaid veebiressursse, mis aitavad õppida nende hooldamise, kasvatamise ja transfektsiooni protokolle.

Rakukultuuri protokollid

Järgmised ressursid annavad juhiseid HT-29 rakkude subkultiveerimise kohta.

• HT-29 rakkude kasvatamine: See link annab põhiteadmisi kasvukeskkonna, sulatamise ja HT-29 rakkude subkultiveerimise kohta.
• HT-29 kultuuride hooldamine: see artikkel sisaldab kogu kasulikku teavet HT-29 rakkude kasvatamise ja hooldamise kohta.

Transfektsiooniprotokollid

HT-29 rakuliinil on suurepärane transfektsiooniefektiivsus ja seda kasutatakse sageli geeniekspressiooni uuringutes. Järgmised allikad kirjeldavad nende rakkude võimalikke transfektsiooniprotokolle.

• HT-29 transfektsioon: See veebilink sisaldab üksikasjalikku protokolli HT-29 rakkude transfektsiooniks.
• HT-29 rakuliini transfektsioon: See dokument kirjeldab HT-29 rakuliini transfektsiooniprotokolli plasmiid-DNA-ga.

HT-29 rakuliiniga seotud videod

Siin on mõned videod selle tuumorigeense rakuliini kasvatamise ja hooldamise kohta.

• Rakkude passaažimine: See video näitab adhesiivsete rakuliinide passaažimisprotokolli.
• HT-29 rakkude transfektsioon: See video annab juhiseid HT-29 rakkude transfektsioonimeetodi kohta.

Loodame, et käesolevas artiklis esitatud teave on teile kasulik ja piisav HT-29 rakuliini käitlemiseks ja hooldamiseks. Kui kavatsete oma uuringus kasutada HT-29 rakke, tellige need meilt.

Viited

1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles ja I. Recio, HT29 rakuliin. Toidu bioaktiivsete ainete mõju tervisele: in vitro ja ex vivo mudelid, 2015: lk 113–124.
2. Shirafkan, N. jt, mikroRNA-193a-5p pärsib inimese HT-29 käärsoolevähirakkude rännet metastaaside tekkimise teede blokeerimise kaudu. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): lk 8775–8783.
3. Khodavirdipour, A., R. Zarean ja R. Safaralizadeh, Syzygium cumini etanooliekstrakti vähivastase toime hindamine HT-29 kolorektaalse rakuliini puhul. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: lk 575–581.
4. Fonseca, H.C. jt, Laktobatsillide probiootilised omadused ja nende võime pärssida enteropatoogeensete bakterite adhesiiooni Caco-2 ja HT-29 rakkudele. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: lk 102–112.
5. Shan, J. jt, Bakteriofaagid on inimrakkudega bakterite suhtes virulentsemad kui bakterikultuuris; järeldused HT-29 rakkude põhjal. Scientific reports, 2018. 8(1): lk 5091.