HT-29 rakuliin

HT-29 on inimese pärasoolevähi rakuliin, mida kasutatakse mitmesugustes vähi- ja toksikoloogiauuringutes. Näiteks on need rakud tundlikud standardse kemoteraapilise ravi suhtes kolorektaalvähi vastu. Lisaks on HT-29 rakuliin hästi iseloomustatud in vitro mudel, et uurida soole epiteeli reaktsiooni bakteriaalsele infektsioonile. HT-29 rakud jäljendavad küpsete soolestiku rakkude, st enterotsüütide omadusi ja sobivad seega kinnistumise ja mehaaniliste uuringute läbiviimiseks.

Selles artiklis käsitletakse kõiki HT-29 rakuliini aspekte, mida peate enne sellega töötamist teadma. Peamiselt hõlmab see järgmist:

HT-29 rakud: Päritolu ja üldine teave
HT-29 rakuliini rakukultuuri teave
HT-29 rakud: -29-29-29: eelised ja piirangud
HT-29 rakud: Rakendused
HT-29 rakke käsitlevad teaduspublikatsioonid
HT-29 rakkude ressursid: Protokollid, videod ja muud materjalid: Protokollid, videod ja muud materjalid

1. HT-29 rakud: -29-29: päritolu ja üldine teave

Enne mis tahes rakuliini kasutamist peaksite teadma rakuliini üldisi omadusi ja päritolu. See jaotis aitab teil seda teada saada: Mis on HT-29 rakud? Kas HT-29 on kolorektaalvähi rakuliin? Milline on HT-29 rakkude morfoloogia?

Mis on HT-29 rakuliin? HT-29 on kolorektaalse adenokartsinoomi rakuliin, mille rajasid 1964. aastal Trempe ja Fogh. Rakud on algselt saadud 44-aastase kaukaasia naisterahva primaarsest kasvajast, kellel oli kolorektaalne adenokartsinoom [1]. Alates selle rakuliini loomisest on seda kasutatud vähi bioloogia uurimiseks.

HT-29 rakkude morfoloogia: HT-29 rakuliinil on üldiselt epiteelilaadne morfoloogia. Diferentseerunud rakud kasvavad monokihina, moodustavad tihedaid raku-rakuühendusi ja neil on apikaalne harja piir. Kui neid rakke kasvatatakse glükoosipuudulikus keskkonnas või neile antakse indutseerivaid aineid, nagu butüraat või hape, ilmnevad neil enterotsüütide sarnased tunnused.

Raku suurus: HT-29 kolorektaalvähi rakuliini läbimõõt on 11 μm.

Genoom ja ploidsus: HT-29 rakuliini modaalne kromosoomide arv on 71. See võib olla vahemikus 68-72. Peale selle on HT-29 rakkude kromosoomide vooluarv hüpertriploidne, kusjuures 2S-komponent esineb 2,4 % ulatuses.

Mis on HT29 MTX? HT29 MTX on metotreksaatresistentne rakuliin, mis on isoleeritud inimese HT-29 käärsoolevähi algsest rakuliinist, kohandades seda 10 µM metotreksaadiga. Nendel rakkudel on limaskesta eritavate küpsete peiburirakkude omadused.

Jämesoolevähirakkude jagunemine ja liikumine mikroskoobi all.

2. HT-29 rakuliini rakukultuuri andmed

Rakuliini põhiliste kasvatusnõuete tundmine võib muuta teie töö sellega lihtsamaks. Te peaksite teadma: milline on HT-29 rakuliini kahekordistumisaeg? Milline on HT-29 rakkude külvi tihedus? Millist keskkonda HT-29 rakkude jaoks kasutada?

Dubleerimisaeg	HT-29 rakuliini keskmine kahekordistumisaeg on 24 tundi.
Adherentne/suspensioon	HT-29 on adherentne rakuliin.
Külvitihedus	HT-29 rakkude soovituslik külvitihedus on 3 x¹⁰⁴ ^rakku/cm2. Kasvanud rakud pestakse 1 X PBS-ga ja eraldatakse pärast 8-10 minutit kestvat inkubeerimist Accutase'iga. Lisatakse värsket keskkonda ja rakud tsentrifuugitakse. Rakupellet resuspendeeritakse ja rakud doseeritakse uutesse kolvidesse soovitatud rakutihedusega.
Kasvukeskkond	HT-29 rakkude optimaalseks kasvatamiseks kasutatakse Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM), millele on lisatud 2,5 mM L-glutamiini ja 10 % FBS. Keskkonda tuleb vahetada 2 kuni 3 korda nädalas.
Kasvutingimused	HT-29 rakud vajavad kasvuks niisutatud inkubaatorit, mille temperatuur on 37 °C ja_CO2-varustus 5 %.
Säilitamine	Neid rakke säilitatakse vedela lämmastiku aurufaasis temperatuuril alla -195 °C.
Külmutussubstraat ja protsess	HT-29 rakuliini puhul kasutatakse külmutuskeskkonda CM-1 või CM-ACF. Rakud külmutatakse aeglase külmutamise teel, mis põhjustab temperatuuri languse 1 °C võrra ja kaitseb tõhusalt rakkude elujõulisust.
Sulatamisprotsess	Külmutatud HT-29 rakud sulatatakse 37 °C temperatuurile seatud vesivannis. Need rakud saab resuspenseerida ja otse värskesse kasvukeskkonda doseerida. Vastupidiselt sellele võib sulatatud rakke tsentrifuugida, et eemaldada külmutuskeskkonna elemendid, resuspenseerida värskes keskkonnas ja kasvatada kolbides.
Bioturvalisuse tase	HT-29 rakuliini käitlemiseks ja hooldamiseks kasutatakse bioloogilise ohutuse 1. taset.

HT-29 rakud 10x ja 20x suurendusega.

3. HT-29 rakud: Eelised ja piirangud

Igal rakuliinil on unikaalsed plussid ja miinused, mis eristavad seda teistest rakuliinidest. Selles jaotises käsitletakse HT-29 rakkude peamisi eeliseid ja piiranguid.

Eelised

HT-29 rakkude peamised eelised on järgmised:

Lihtne kasvatada
HT-29 rakuliini on lihtne käsitseda ja hooldada, kultiveerimiseks ei ole keerulisi nõudeid. Seda kultiveeritakse laialdaselt teaduslaboratooriumides.
Soolestiku rakkude in vitro mudel
HT-29 rakud võivad diferentseeruda küpseteks soolestiku rakkudeks (enterotsüüdid ja limaskesta tootvad rakud) spetsiifilistes kasvatustingimustes. Neid kasutatakse rakumudelina toidu seedimise ja biosaadavuse uurimiseks.
Kõrge transfektsioonitõhusus
HT-29 käärsoolevähirakud pakuvad kõrget transfektsiooni tõhusust, mistõttu sobivad nad geeniekspressiooni ja regulatsiooni uuringuteks. Erinevate meetodite abil saab läbi viia nii transientseid kui ka stabiilseid transfektsioonikatsetusi.
Ravimitundlikkus
HT-29 rakud on tundlikud kemoterapeutiliste ravimite, nagu fluorouratsiili ja oksaliplatiini suhtes, mida tavaliselt kasutatakse jämesoolevähi ravis. Neid kasutatakse ravimresistentsuse uurimiseks ja potentsiaalsete ravimite sõelumiseks kolorektaalkartsinoomi raviks.

Piirangud

Heterogeensus
HT-29 rakud, nagu ka teised vähirakuliinid, on heterogeensed ja ei pruugi moodustada ühtset rakupopulatsiooni. See võib mõjutada tulemuste reprodutseeritavust teatavates katsetes ja põhjustada väiksemaid erinevusi katsetulemustes.
Piiratud diferentseerumine
HT-29 rakkudel on piiratud diferentseerumispotentsiaal. Nad ei diferentseeru täielikult soole- või käärsoole rakkudeks, vaid neil on ainult mõned iseloomulikud tunnused. See piirang võib piirata nende kasutamist keerukamate bioloogiliste protsesside uurimisel.

4. hT-29 rakud: Rakendused

HT-29 rakuliini kasvatatakse teaduslaboratooriumides laialdaselt tänu selle laiale kasutusvaldkonnale. Käesolevas jaotises käsitletakse ainult mõningaid HT-29 rakkude olulisi rakendusi.

Vähiuuringud: HT-29 on kolorektaalse adenokartsinoomi rakuliin, seega kasutatakse seda vähi progresseerumise, arengu ja selle aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. 2018. aastal läbi viidud uuringus kasutati HT-29 rakuliini metastaasi eest vastutavate rakumolekulide uurimiseks. Selles uuringus täheldati, et vimentiini ja CXCR4 geenid reguleerivad raku metastaasi. Samas mikroRNA-193a-5p mimikumi transfekteerimine võib vähendada nende geenide mRNA taset ja vähendada edukalt vähirakkude metastaasi [2].

Toksikoloogilised uuringud: HT-29 rakuliini kasutatakse laialdaselt toksikoloogiauuringutes. Neid kolorektaalkartsinoomi rakke kasutatakse erinevate ravimikandidaatide toksilisuse hindamiseks, kasutades erinevaid teste. Näiteks uuriti ühes uuringus Syzygium cumini etanoolse ekstrakti toksilisuse potentsiaali HT-29 rakuliinil. Tulemused näitasid HT-29 rakkude kasvu märkimisväärset pärssimist, mis viitab ekstrakti paljulubavatele vähivastastele omadustele [3].

Mikrobioloogia: HT-29 saab kasutada võimalike mikroobide, st bakterite ja viiruste patogeneesi uurimiseks peremeesrakusüsteemina. Teadlased saavad HT-29 rakke nakatada mikroobidega, et uurida nende virulentsust ja peremeesorganismi reaktsiooni. Sellises uuringus kasutati HT-29 rakke piimhappebakterite probiootiliste omaduste uurimiseks [4]. Teises uuringus kasutati HT-29 rakke bakteriofaagide ravi tõhususe ja ohutuse hindamiseks [5].

430,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300215

5. HT-29 rakkude kohta avaldatud teaduspublikatsioonid

See lõik valgustab mõningaid HT-29 rakke käsitlevaid märkimisväärseid publikatsioone, mis aitavad teil kavandada oma teadusuuringuid.

Syzygium cumini etanoolse ekstrakti vähivastase toime hindamine HT-29 kolorektaalrakkude liinile

Selles uuringus pakuti välja Syzygium cumini etanoolne ekstrakt kui potentsiaalne vähivastane aine kolorektaalvähi rakuliini HT-29 vastu. Ekstrakt pärssis märkimisväärselt vähirakkude kasvu.

Tetrandriin inhibeerib käärsoole kartsinoomi HT-29 rakkude kasvu Bcl-2/Caspase 3/PARP raja ja G1/S faasi kaudu

Selles Bioscience Reports'is avaldatud väljaandes testiti ühendi Tetradrine vähivastast toimet HT-29 rakkudele. Tulemused näitasid, et tetradriin pärsib vähirakkude proliferatsiooni ja kasvu raku signaaliradade reguleerimise kaudu.

microRNA-193a-5p pärsib inimese HT-29 käärsoolevähirakkude migratsiooni metastaasiradade pärssimise kaudu

Selles uuringus pakuti välja, et miRNA-193a-5p võib potentsiaalselt reguleerida HT-29 rakkude metastaasi, reguleerides metastaasiga seotud geene.

Bakteriofaagid on inimrakkudega bakteritele virulentsemad kui bakterikultuuris; HT-29 rakkudest saadud arusaamad

See artikkel on avaldatud ajakirjas Nature Scientific Reports 2018. aastal. Selles uuringus kasutati HT-29 kasvajarakkude liini kui soolestiku rakumudelit, et hinnata kavandatud bakteriofaagide ravi tõhusust.

Laktobatsillide probiootilised omadused ja nende võime pärssida enteropatogeensete bakterite adhesiivsust Caco-2 ja HT-29 rakkudele

Selles uuringus kasutasid teadlased HT-29 rakke, et uurida piimhappebakterite probiootilist toimet. Huvitaval kombel näitas uuring, et laktobatsillibakterid takistavad patogeensete bakterite adhesiivsust käärsoole rakkudele.

6. HT-29 rakud Vahendid: Protokollid, videod ja muud materjalid: Protokollid, videod ja muud materjalid

Selles jaotises käsitletakse mõningaid HT-29 rakkude kohta kättesaadavaid veebiressursse, mis aitavad õppida nende hooldamise, kultiveerimise ja transfektsiooni protokollidega.

Rakukultuuri protokollid

Järgmised ressursid juhatavad teid HT-29 rakkude subkultiveerimise kohta.

HT-29 rakkude kultiveerimine: See link annab põhiteadmisi HT-29 rakkude kasvukeskkonna, sulatamise ja subkultiveerimise kohta.
HT-29 kultuuride säilitamine: See artikkel sisaldab kogu kasulikku teavet HT-29 rakkude kultiveerimise ja hooldamise kohta.

Transfektsiooni protokollid

HT-29 rakuliinil on suur transfektsiooni tõhusus ja seda kasutatakse sageli geeniekspressiooni uuringutes. Järgnevates allikates kirjeldatakse nende rakkude võimalikke transfektsiooniprotokolle.

HT-29 transfekteerimine: See veebilehe link sisaldab üksikasjalikku protokolli HT-29 rakkude transfekteerimiseks.
HT-29 rakuliini transfektsioon: Selles dokumendis kirjeldatakse HT-29 rakuliini transfektsiooni protokolli plasmiid-DNAga.

HT-29 rakuliiniga seotud videod

Siin on mõned videod selle kasvajalise rakuliini kultiveerimise ja hooldamise kohta.

Rakkude passiveerimine: See video näitab rakkude passageerimise protokolli adherentsete rakuliinide puhul.
HT-29 rakkude transfekteerimine: See video juhendab teid HT-29 rakkude transfektsiooni meetodi kohta.

Eeldame, et selles artiklis sisalduv teave on teile väärtuslik ja piisav HT-29 rakuliini käitlemise ja hooldamise jaoks. Kui kavatsete oma uuringus kasutada HT-29 rakke, tellige meilt.

Viited

Martínez-Maqueda, D., B. Miralles ja I. Recio, HT29 rakuliin. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: lk 113-124.
Shirafkan, N., et al., microRNA-193a-5p inhibeerib inimese HT-29 käärsoolevähirakkude migratsiooni metastaasitee allasurumise kaudu. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
Khodavirdipour, A., R. Zarean ja R. Safaralizadeh, Syzygium cumini etanoolse ekstrakti vähivastase toime hindamine HT-29 käärsoole rakuliinile. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
Fonseca, H.C., et al., Laktobatsillide probiootilised omadused ja nende võime pärssida enteropatogeensete bakterite adhesiivsust Caco-2 ja HT-29 rakkudele. Probiootikumid ja antimikroobsed valgud, 2021. 13: p. 102-112.
Shan, J., et al., Bakteriofaagid on bakterite suhtes virulentsemad inimrakkudega kui bakterikultuuris; insights from HT-29 cells. Scientific reports, 2018. 8(1): p. 5091.