DU-145 rakud - teadlase põhjalik juhend

DU-145 on inimese eesnäärme kartsinoomi rakuliin, mida kasutatakse laialdaselt biomeditsiinilistes uuringutes. Need rakud on hindamatu väärtusega mudel eesnäärmevähi bioloogia, ravimite testimise ja arendamise uurimiseks. Peale selle kasutavad teadlased DU-145 rakke ka eesnäärmevähi arengu, kasvu ja progresseerumise aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks.

See artikkel annab teile väärtusliku ülevaate DU-145 eesnäärmevähirakkudest. Eelkõige hõlmab see järgmist:

DU-145 rakuliini üldine teave ja päritolu
DU-145 rakkude kasvatamine
DU-145 rakuliin: DU4545-14545: eelised ja piirangud
DU-145 rakkude uurimisrakendused
DU-145 rakke sisaldavad teaduspublikatsioonid
DU-145 rakuliini ressursid: D45454545: Protokollid, videod ja muud materjalid: Protokollid, videod ja muud

1. Üldine teave ja DU-145 rakuliini päritolu

Enne rakuliiniga töötamise alustamist on oluline mõista rakuliini põhiomadusi ja päritolu. Selles jaotises antakse põhjalik ülevaade DU-145 rakuliini omadustest ja päritolust. Saate teada: Mis on DU145 vähirakud? Milline on DU145 rakkude morfoloogia? Milline on PC-3 ja DU145 erinevus?

DU-145 on inimese eesnäärmevähi rakuliin, mis on saadud metastaatilise eesnäärmekartsinoomiga kaukaasia mehe (69-aastane) ajust. Need rakud deponeeriti esmakordselt 1978. aastal K.R. Stone'i ja kolleegide poolt.
Nagu PC-3 eesnäärmevähirakud, ekspresseerib ka DU-145 androgeeni retseptoreid. Kui neid rakke aga töödeldakse androgeeniligandiga, ei näita nad androgeeniretseptoritele reageerivate geenide aktiivsust, mistõttu neid peetakse androgeenist sõltumatuteks rakkudeks.
DU-145 rakkudel on epiteeli morfoloogia.
DU-145 rakud on hüpotriploidsed ja nende modaalne kromosoomide arv on 64. Neil on mitu markerkromosoomi, nagu del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) ja del (9) (p11).

PC-3 vs DU145

Mõlemad eesnäärmevähi rakuliinid on androgeeniretseptorist sõltumatud. Nad erinevad üksteisest oma tumorigeense ja metastaatilise potentsiaali poolest. Kui PC-3 rakuliin süstida immuunpuudulikku hiiresse, moodustab PC-3 rakuliin tugevalt metastaatilist IV astme adenokartsinoomi. Seevastu DU-145 rakuliinist areneb mõõduka metastaatilise potentsiaaliga eesnäärmevähk [1].

Mikrofilamentide häirimine inimese eesnäärmevähirakkudes PC-3.

2. dU-145 rakkude kasvatamine

DU-145 rakuliini kasutatakse laialdaselt eesnäärmevähi uurimislaboratooriumides. Selle lihtsa ja tõhusa kultiveerimise hõlbustamiseks peaksite õppima järgmisi põhipunkte. See osa sisaldab teavet DU145 söötme, kahekordistumisaja, rakukultuuri tingimuste ja protokollide kohta.

DU-145 rakkude kultiveerimise põhipunktid

Populatsiooni kahekordistumisaeg:	DU-145 kahekordistumisaeg jääb vahemikku 30-40 tundi.
Adherentselt või suspensioonis:	DU-145 on adherentne rakuliin.
Külvikutihedus:	DU-145 rakud külvatakse soovitusliku rakutihedusega 2 x¹⁰⁴^rakku/cm2. Sellise tiheduse korral moodustavad rakud peaaegu 4 päeva jooksul konfluentse monokihi. Külvamiseks pestakse rakke 1 x fosfaatpuhvrisoolalahusega ja inkubeeritakse Accutase'i passageerimislahusega. Pärast 8-10-minutilist inkubatsiooni toatemperatuuril lisatakse rakud värskele kasvukeskkonnale ja tsentrifuugitakse. Kogutud rakupellet resuspendeeritakse hoolikalt ja rakud valatakse kasvamiseks uutesse kultuurkolvidesse.
Kasvukeskkond:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) koos kasvukeskkonna lisanditega, st 10% veiste loote seerumit (FBS), 2 mM L-Glutamiini, 2,2 g/L NaHCO3 ja EBSS. Keskkonda uuendatakse 2-3 korda nädalas.
Kasvutingimused:	DU-145 kultuure hoitakse 37 °C niiskendatud inkubaatoris, kus on 5% CO2 allikas.
Säilitamine:	DU-145 rakke säilitatakse vedela lämmastiku aurufaasis või alla -150 °C temperatuuril elektrilises sügavkülmikus, et säilitada rakkude elujõulisus pikema aja jooksul.
Külmutamisprotsess ja keskkond:	DU-145 eesnäärmevähirakkude jaoks soovitatakse kasutada CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonda. Rakkude külmutamiseks valitakse aeglane külmutamismeetod, mis võimaldab temperatuuri järk-järgult 1 °C võrra langetada. See hoiab ära rakkude šoki ja aitab säilitada nende elujõulisust.
Sulatamisprotsess:	Külmutatud DU-145 rakkude viaalid sulatatakse kiiresti 37 °C veevannis 40-60 sekundit. Seejärel lisatakse rakud kultuurkeskkonnaga ja tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonna komponendid. Korjatud rakud resuspenseeritakse kasvukeskkonnas ja valatakse kasvukolbi. Külmutamise taastamine võtab peaaegu 24 tundi.
Bioturvalisuse tase:	DU145 androgeeniretseptorist sõltumatu rakuliini kasvatamiseks on vaja 1. bioloogilise ohutuse taseme seadistusi.

DU-145 eesnäärmevähirakud 10x ja 20x suurendusega.

3. dU-145 rakuliin: Eelised ja piirangud

Nagu teistelgi rakuliinidel, on ka eesnäärmevähi rakuliinil DU-145 mõned plussid ja miinused. Need omadused võivad aidata teil otsustada selle kasutamise üle teie teadusuuringutes. DU-145 rakuliini peamised eelised ja puudused on nimetatud allpool.

Eelised

DU-145 rakkude eelised on järgmised:

Tumorigeensus	DU-145 on agressiivne eesnäärmevähi rakuliin, millel on mõõdukas metastaatiline potentsiaal. Kasutatakse DU145 ksenotransplantaadi mudeli väljatöötamiseks immuunpuudulikkusega hiirtel, et uurida eesnäärmevähi bioloogiat, arengut ja kasvu in vitro ja in vivo.
Androgeeniretseptori sõltumatus	DU-145 eesnäärmevähirakud on androgeeni retseptorist sõltumatud. Nad ei sõltu kasvuks androgeenidest ja ei reageeri rakkude ja molekulide tasandil androgeenidega ravimisel. Ideaalne hormoonist sõltumatu eesnäärmevähi mehhanismide uurimiseks.

Piirangud

DU-145 rakuliini piirangud on järgmised:

In vitro mudel

DU-145 on metastaatilise eesnäärmekartsinoomi in vitro rakumudel, seega ei pruugi see täielikult esindada primaarsete eesnäärmekasvajate keerukust. Lisaks sellele ei pruugi see hõlmata kõiki eesnäärmevähi tüüpe ja alatüüpe selliste spetsiifiliste omaduste tõttu nagu androgeeniretseptori sõltumatus.

4. dU-145 rakkude uurimisrakendused

DU-145 eesnäärmevähi rakuliinil on mitmesuguseid teadusrakendusi. Siin on loetletud mõned paljutõotavad rakendused.

Eesnäärmevähi bioloogia: DU-145 on asjakohane mudel eesnäärmevähi bioloogia uurimiseks. Teadlased kasutavad neid rakke, et uurida molekulaarseid mehhanisme, mis mõjutavad vähi arengut, progresseerumist ja metastaaside teket. Lisaks uuritakse ka eesnäärmevähiga tavaliselt seotud geneetilisi muutusi. 2021. aastal läbiviidud uuringutes uuriti DU-145 rakke, et tuvastada võimalikke biomarkereid tõhusaks diagnostikaks ja raviks. Uuringus pakuti välja aktiini gamma 1 (ACTG1) kui potentsiaalset eesnäärmevähi biomarkerit, kuna see soodustab vähirakkude proliferatsiooni ja reguleerib metastaasi MAPK/ERK raja aktiveerimise kaudu [2].
Ravimite sõelumine ja väljatöötamine: DU-145 eesnäärmevähirakke kasutatakse laialdaselt potentsiaalsete vähivastaste ravimite tsütotoksilisuse ja tõhususe testimiseks. See aitab teadlastel tuvastada uusi ravimeid, mõista ravimresistentsust ja selle aluseks olevaid molekulaarseid mehhanisme. 2022. aastal läbi viidud uuringus uuriti vaikse segu, propolise ehk mesilase liimi tsütotoksilist toimet eesnäärmevähi rakuliinides PC-3 ja DU-145. Uuring näitas selle loodusliku aine kasvu pärssivat toimet mõlemas rakuliinis ja pakkus välja selle vähivastase potentsiaali [3]. Teine uuring viidi läbi 2019. aastal, milles uuriti loodusliku ühendi betaiini proliferatsioonivastast toimet DU-145 eesnäärmevähirakkudes. Uuring näitas, et betaiin avaldab antiproliferatiivset toimet, tõstes oksüdatiivse stressi poolt vahendatud rakusurma ja põletikku DU-145 rakkudes [4].

430,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300168

5.dU-145 rakke sisaldav teaduspublikatsioon

Järgnevalt on esitatud mõned DU-145 rakuliini käsitlevad teaduspublikatsioonid.

Tsinksulfaadi kontsentratsioonist sõltuv mõju inimese eesnäärmevähi DU-145 rakuliinile: oksüdatiivsed, apoptootilised, põletikulised ja morfoloogilised analüüsid

See uuring ajakirjas Biological Trace Element Research, 2020, pakkus välja, et tsinksulfaat (_ZnSo4) avaldab DU-145 rakkudes apoptoosi, morfoloogiliste muutuste, oksüdatiivsete kahjustuste ja põletiku indutseerimise kaudu proliferatsioonivastast mõju.

Annona muricata L. kooreekstrakti ja fütokemikaali annonakiini selektiivne tsütotoksiline ja antimetastaatiline toime DU-145 eesnäärmevähirakkudes

See teadusartikkel avaldati ajakirjas BMC Complementary Medicine and Therapies 2020. Selles uuringus uuriti ühe taime, Annona muricata L. kooreekstrakti ja selle bioaktiivse annonatsiini tsütotoksilist ja metastaatikavastast potentsiaali DU-145 rakuliinis.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFR-gaseotud rada reguleerib eesnäärmevähi DU-145 rakkude doksorubitsiiniresistentsust

Selles IUBMB Life'i (2019) väljaandes pakuti välja, et pikk mittekodeeriv RNA LOXL1-AS1 koostoime miR-let-7a-5p ja EGFR-ga seotud rada reguleerivad DU-145 eesnäärmevähi rakkude doksorubitsiiniresistentsust.

DDR1 allareguleerimine indutseerib apoptoosi ja inhibeerib EMT-d Pyk2/MKK7 fosforüleerimise kaudu DU-145 ja Lncap-FGC eesnäärmevähi rakuliinides

Selles artiklis ajakirjas Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) väideti, et Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) geeni allareguleerimine põhjustab DU-145 rakkude surma ja inhibeerib epiteeli-mesenhümaalset üleminekut (EMT) Pyk2/MKK7 raja aktiveerimise kaudu.

Kustitsiin inhibeerib inimese eesnäärmevähi DU 145 rakkude migratsiooni ja invasiivsust Ras/Akt/NF-κB signaaliteede kaudu

See uuring ajakirjas Journal of Food Biochemistry (2019) pakkus välja, et kastitsiin, polümetoksüflavoon, pärsib DU-145 rakkude migratsiooni ja invasiivsust, reguleerides Ras/Akt/NF-κB-signalisatsiooni.

6. dU-145 rakuliini ressursid: D4545-145: protokollid, videod ja muud

DU-145 eesnäärmevähi rakuliini kohta on saadaval palju veebiressursse. Selles jaotises mainitakse mõned ressursid, mis selgitavad nende rakkude käitlemist, hooldust ja transfektsiooniprotokolli:

DU-145 transfektsioon: See videoõpetus on samm-sammuline juhend DU-145 rakkude transfekteerimise protokolli õppimiseks.

DU-145 rakukultuuri protokoll on siin mainitud.

DU-145 subkultuurimine: See link aitab teil õppida DU-145 rakkude subkultiveerimise või subkultiveerimise protokolli.
DU-145 rakud: Sellel veebisaidil on palju kasulikku teavet DU-145 rakuliini kohta, sealhulgas DU145-keskkonna, subkultuurimise protokolli ning proliferatiivsete ja krüokultuuride käitlemise kohta.

Viited

Lima, A.R., et al., Diskrimineerimine inimese eesnäärme normaalsete ja vähirakkude eksometaboloomi vahel GC-MS abil. Teaduslikud aruanded, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al., ACTG1 ekspressiooni vaigistamine indutseerib eesnäärmevähi epiteliaalse mesenhüümilise ülemineku MAPK/ERK signaalitee kaudu. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Külma eraldamise meetodil saadud propolise ekstraktide vähivastane toime PC-3 ja DU-145 eesnäärmevähi rakuliinidele. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betaiin pärsib rakkude proliferatsiooni, suurendades oksüdatiivse stressi poolt vahendatud apoptoosi ja põletikku inimese eesnäärmevähi DU-145 rakuliinis. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.