DLD-1 rakud: DLD-1 rakkude rakendused ja arusaamad kolorektaalvähi uurimisel

DLD-1 on inimese kolorektaalkartsinoomi rakuliin, mida tavaliselt kasutatakse vähiuuringutes. See on väärtuslik vahend jämesoolevähi erinevate aspektide, sealhulgas kasvaja arengu, progresseerumise, selle aluseks olevate molekulaarmehhanismide ja ravivastuse uurimiseks. Seega on DLD-1 silmapaistev haiguse mõistmisel ja võimalike ravistrateegiate väljatöötamisel.

Selles artiklis antakse olulist teavet DLD-1 rakuliini kohta, mida peaksite teadma enne sellega töötamist. See hõlmab järgmist:

DLD-1 rakkude üldised omadused ja päritolu
Teave DLD-1 rakuliini kultiveerimise kohta
DLD-1 rakuliin: D-1D DLD-1: eelised ja piirangud
DLD-1 rakuliini uurimisrakendused
DLD-1 rakkude kohta avaldatud teaduspublikatsioonid
DLD-1 rakuliini ressursid: D-1D-1: protokollid, videod ja muud

1. DLD-1 rakkude üldised omadused ja päritolu

Enne rakuliiniga töötamist peab uurija kõigepealt arvestama selle päritolu ja üldisi omadusi. Selles artikli osas tutvustatakse üksikasjalikult DLD-1 rakuliini. Selles käsitletakse järgmisi sageli esitatavaid küsimusi: Mis on DLD-1 rakud? Mis on DLD-1 vähirakuliin? Millised on DLD-1 rakuliini mutatsioonid? Milline on DLD-1 raku suurus? Milline on DLD-1 rakkude morfoloogia?

DLD-1 on käärsoolevähi rakuliin, mis pärineb 67-aastase meespatsiendi jämesoolest, kellel oli kolorektaalne adenokartsinoom. Selle isoleerisid D.L. Dexter ja kolleegid aastatel 1977-1979. See rakuliin on sama päritolu kui HCT-8, HCT-15 ja HRT-18 rakuliinid.
Nagu kolorektaalvähi puhul, on ka DLD-1 rakkudel mikrosatelliitilise ebastabiilsuse fenotüüp [1].
DLD-1 mutatsioonide hulka kuuluvad KRAS, P53, BRAF, BRCA1 ja BRCA2. DLD-1 P53 staatuse, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 ja DLD-1 KRAS mutatsiooni tõttu peetakse neid rakke ideaalseks vähiuuringuteks.
Neil rakkudel on epiteelilaadne morfoloogia.
DLD-1 rakuliini suurus on ligikaudu 15 µm.
Inimese kolorektaalvähi rakuliin DLD-1 omab pseudodiploidset karüotüüpi. Umbes 86% rakkudest omab modaalset kromosoomiarvu 46. Siiski võib 17,1% rakupopulatsioonist olla ka polüploidia.

jämesoole CT-kolonograafia või jämesoole CT-skaneeringu 3D-reprodutseerimine, mis kuvatakse ekraanil jämesoolevähi, jämesoolevähi ja kolorektaalvähi diagnoosimiseks.

2.teave DLD-1 rakuliini kasvatamise kohta

Enne mis tahes rakuliini kultiveerimist peate teadma selle põhilisi rakukultuurinõudeid. Selles jaotises tuuakse välja olulised punktid, mida peate õppima enne DLD-1 rakuliiniga töötamise alustamist. See hõlmab järgmist: Mis on DLD-1 kahekordistumisaeg? Milline on DLD-1 kultiveerimissöötme koostis? Milline on DLD-1 rakkude külvitihedus? Kuidas kasvatada DLD-1 rakke?

DLD-1 rakkude kultiveerimise põhipunktid

Kordistumisaeg:	DLD-1 kahekordistumisaeg on ligikaudu 15 tundi.
Adherentselt või suspensioonis:	DLD-1 on inimese käärsoolevähi rakuliin. Rakud kasvavad monokihtidena.
Külvikutihedus:	DLD-1 rakke külvatakse tihedusega 1 kuni 2 x¹⁰⁴ ^rakku/cm2. Adherentsed rakud pestakse 1x fosfaatpuhvrisoolalahusega (PBS) ja inkubeeritakse passageerimislahusega (Accutase) ümbritseval temperatuuril. Pärast 8-10 minutit kestnud inkubatsiooni lisatakse eraldunud rakud kultuurkeskkonda ja tsentrifuugitakse. Seejärel resuspendeeritakse rakupellet ettevaatlikult ja rakud valatakse uutesse kasvukeskkonda sisaldavatesse kasvukanistritesse.
Kasvukeskkond:	DLD-1 rakkude kasvatamiseks kasutatakse RPMI 1640 kasvukeskkonda, mis sisaldab 10% veiste loote seerumit FBS, 2,1 mM stabiilset glutamiini ja 2,0 g/L NaHCO3. Keskkonda tuleb vahetada 2-3 korda nädalas.
Kasvutingimused:	DLD-1 kultuure hoitakse 37 °C niiskendatud inkubaatoris 5% CO2-ga.
Säilitamine:	DLD-1 rakke säilitatakse vedela lämmastiku aurufaasis või elektrilises ülimadalal temperatuuril (temperatuuril alla -150 °C) asuvas sügavkülmikus.
Külmutamisprotsess ja keskkond:	DLD-1 rakkude külmutamiseks võib kasutada CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonda. Alati soovitatakse aeglast külmutamist, mis võimaldab temperatuuri järkjärgulist langust 1 °C võrra, vältides nii rakkude šokki ja kaitstes nende elujõulisust.
Sulatamisprotsess:	Külmutatud rakke sulatatakse 37 °C temperatuuril eelseadistatud vesivannis 40-60 sekundit, kuni jääb väike jääklomp. Seejärel lisatakse rakud värskesse söötmesse ja tsentrifuugitakse. See etapp on vajalik selleks, et eemaldada rakkudest külmutuskeskkonna komponendid. Kogutud rakud resuspenseeritakse kasvukeskkonnas ja doseeritakse kasvukolbi.
Bioturvalisuse tase:	DLD-1 rakuliini hoitakse 1. bioohutuse taseme laboratooriumides.

DLD-1 rakud 10x ja 20x suurendusega, mis näitab nende iseloomulikku epiteelimorfoloogiat.

3.dLD-1 rakuliin: Eelised ja piirangud

Selles artikli osas vaatleme DLD-1 käärsoolevähi rakuliini eeliseid ja piiranguid.

Eelised

DLD-1 rakuliini peamised eelised on järgmised:

Jämesoolevähi mudel	DLD-1 rakkudel on mutatsioonid, mida tavaliselt leidub kolorektaalvähi patsientidel, näiteks DLD-1 KRAS-mutatsioon, DLD-1 BRCA ja DLD-1 BRCA2. See muudab need kliiniliselt sobivaks rakumudeliks selle haiguse uurimiseks.
Tuumorigeenne rakuliin	DLD-1 rakud on tuumorigeensed. Nad võivad alasti hiirtele süstimisel tekitada kasvajaid. Seetõttu kasutavad teadlased neid rakke ksenotransplantaadi kasvajamudelite väljatöötamiseks, mis aitavad uurida kasvaja teket, arengut ja progresseerumist in vivo.

Piirangud

DLD-1 rakkudega seotud piirangud on järgmised:

Heterogeensus

DLD-1 käärsoolevähi rakupopulatsioonid on geneetiliselt ja fenotüübiliselt heterogeensed. See võib mõjutada uurimistulemuste üldistatavust.

4.dLD-1 rakuliini uurimisrakendused

DLD-1 rakuliin pakub vähiuuringutes mitmesuguseid rakendusi. Käesolevas jaotises käsitletakse mõningaid silmapaistvaid rakendusi.

Vähiuuringud: DLD-1 rakud on väärtuslik in vitro mudel, et mõista molekulaarseid mehhanisme, mis on aluseks kolorektaalvähi kasvule, arengule ja progresseerumisele. Lisaks kasutatakse neid geeniekspressiooni, signaaliradade ja konkreetsete geneetiliste mutatsioonide mõju uurimisel vähirakkude käitumisele. 2022. aastal tehtud uuringutes täheldati, et PI3K/Akt/YAP signaalkaskaad reguleerib DLD-1 kolorektaalvähi rakuliini migratsiooni ja invasiivsust [2].
Ravimite väljatöötamine: Teadlased kasutavad DLD-1 rakuliini vähivastaste ravimite tõhususe testimiseks ja nende potentsiaali hindamiseks jämesoolevähi raviks. See aitab kaasa ravimite väljatöötamisele ja tõhusale võitlusele haiguse vastu. 2022. aastal läbi viidud uuringus kasutati DLD-1 vähirakuliini ja uuriti keemiliselt sünteesitud ühendite, räniftalotsüaniinide vähivastast toimet. Uuringu tulemused viitasid nendele ühenditele kui tugevatele vähivastastele ainetele [3]. Huvitaval kombel leiti teises uuringus DLD-1 rakke kasutades probiootilisest P8 valgu vähivastane potentsiaal [4].

430,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300220

5.dLD-1 rakkude kohta avaldatud teaduspublikatsioonid

Selles jaotises tuuakse välja mõned huvitavad ja sageli tsiteeritud publikatsioonid, milles käsitletakse DLD-1 käärsoole kartsinoomi rakuliini.

Flavonoidglükosiid diosmiin indutseerib apoptoosi ja rakutsükli peatamist DLD-1 inimese käärsoolevähi rakuliinis

See publikatsioon on avaldatud ajakirjas Journal of Biologically Active Products of Nature (2022). Uuringus leiti, et flavonoid diosmin indutseeris DLD-1 rakkude rakusurma ja põhjustas ka rakutsükli peatumist; seega võib see olla potentsiaalne vähivastane aine.

Bromelaiin pärsib tõhusalt Kras-mutantset kolorektaalvähki, stimuleerides ferroptoosi

See uuring ajakirjas Animal Cells and Systems (2018) pakkus välja, et ensüüm bromelaiin pärsib DLD-1 KRAS-mutatsioone ja avaldab tugevat tsütotoksilist toimet.

Bergapten indutseerib G1-peatust ja pro-apoptootilist kaskaadi kolorektaalvähirakkudes, mis on seotud p53/p21/PTEN-teljega

See teadusartikkel avaldati 2019. aastal ajakirjas "Environmental Toxicology". Uuringus uuriti loodusliku ühendi Bergapten kasvajavastast mõju DLD-1 tuumarakkude liini abil.

Nanokurkumiini / nanorauaoksiidi komposiidi keskkonnasõbralik valmistamine: Tõhustatud in vitro vähivastane toime DLD-1 rakuliinide vastu

Selles ajakirjas Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) avaldatud uuringus leiti , et kurkumiini ja raudoksiidi nanokomposiidid on väga tõhusad DLD-1 kolorektaalvähirakkude vastu.

Epibrassinoliid aktiveerib AKT-i, et käivitada autofagia koos polüamiini metabolismiga SW480 ja DLD-1 käärsoolevähi rakuliinides

See teadusartikkel avaldati 2020. aastal ajakirjas Turkish Journal of Biology. Uuringus pakuti välja, et looduslik toode, epibrassinoliidi poolt vahendatud AKT-i aktiveerimine DLD-1 rakkudes stimuleerib polüamiinidega seotud autofaagiat.

6.dLD-1 rakuliini ressursid: D-1D-1: protokollid, videod ja muud

Järgnevalt on esitatud mõned ressursid DLD-1 rakkude kohta:

DLD-1 transfektsioon: See videoõpetus on põhjalik juhend DLD-1 in vitro transfektsiooniprotokolli kohta.
DLD-1 rakud: Selles uurimistöös kirjeldatakse lühidalt DLD-1 rakukultuuri nõudeid, sealhulgas keskkonda ja kasvatustingimusi. Lisaks võib see aidata teil õppida DLD-1 rakkude jaoks kasutatavat transfektsiooniprotokolli.

Järgmised lingid sisaldavad DLD-1, inimese pärilikkusest saadud käärsoolevähirakkude kultiveerimise protokolli.

DLD-1 rakuliin: See veebisait annab põhiteavet DLD-1 rakuliini kohta. See aitab teil õppida erinevaid DLD-1 rakukultuuri protokolle, sealhulgas subkultiveerimist ja krüokonserveeritud ja proliferatsioonikultuuride käitlemist.

Viited

Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptootilised geenid kui uued sihtmärgid resveratrooli ja kurkumiini üksik- ja kombineeritud ravi jaoks kolorektaalvähi korral. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
Takeda, T., et al., PI3K/Akt/YAP-signalisatsioon soodustabDLD-1kolorektaalvähirakkude migratsiooni ja invasiivsust. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
Farajzadeh, N., et al., Uute räniftaalotsüaniinide vähivastane aktiivsus kolorektaalse adenokartsinoomi rakuliini (DLD-1) vastu. New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
An, B.C., et al., Probiootikumidest saadud P8 valgu vähivastane roll kolorektaalvähi rakuliinis DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.