Calu-3 rakuliin

Calu-3 rakud kujutavad endast inimtekkelist hingamisteede epiteelirakuliini, mis esindab mitteväikerakk-kopsukartsinoomi. Neid kasutatakse laialdaselt biomeditsiinilistes uuringutes, mis hõlmavad kopsuvähi bioloogia, hingamisteede haiguste, peremehe ja patogeeni vaheliste interaktsioonide ning ravimite transpordi uurimist hingamisteedes. Lisaks kasutatakse neid mitmete hingamisteede haiguste ravimeetodite väljatöötamiseks.

See artikkel annab teile põhjalikud teadmised Calu-3 rakuliini kohta. Siit saate teada:

Calu-3 rakkude päritolu ja üldised omadused
Calu-3 rakuliin: Teave kultiveerimise kohta
Calu-3 rakkude eelised ja puudused
Calu-3 rakuliini rakendused teadusuuringutes
Calu-3 rakud: Uurimisväljaanded
Calu-3 rakkude ressursid: Protokollid, videod ja muud

1. Calu-3 rakkude päritolu ja üldised omadused

Esmane teave, mida rakuliini kohta vajate, on selle päritolu ja üldised omadused. See aitab teil otsustada selle kasutamise üle oma uurimistöös. See jaotis aitab teil seda hädavajalikku teavet Calu-3 rakuliini kohta teada saada. See hõlmab järgmist: Mis on CALU-3 rakuliin? Milline on Calu-3 rakkude morfoloogia? Milline on Calu-3 rakkude päritolu?

Calu-3 rakud saadi kopsu adenokartsinoomiga kaukaasia mehe (25-aastane) pleuraefusioonist (metastaatiline koht). Rakuliin loodi 1975. aastal Jorgen Foghi ja Germain Trempe'i poolt Memorial Sloan Ketteringi vähikeskuses.
Calu-3 rakkudel on epiteelilaadne morfoloogia.
Calu-3 rakkude suurus on 8-9 kuni 20 mikroni läbimõõduga.
Nad kannavad K-RAS (G13D), TP53 ja CDKN2A geenide mutatsioone ning ekspresseerivad EGFRi metsikut tüüpi.

A549 vs Calu-3

A549 ja Calu-3 rakud on inimese kopsu adenokartsinoomi rakuliinid, kuid neil on erinevad omadused. Peamine erinevus Calu-3 ja A549 rakumudelite vahel on limaskesta paksus. Calu-3 rakud moodustavad õhukese limaskihi, modelleerides seega proksimaalset hingamisteede epiteeli. Seevastu A549 rakkudel see omadus puudub ja need sobivad paremini distaalsete hingamisteede füsioloogilise struktuuri kujutamiseks [1].

Bronhide visualiseerimine bronhiaalastma korral. Astma on kopsuhaigus, mille puhul hingamisteed on ahenenud, paistes ja liigse lima tõttu ummistunud, mis põhjustab tüüpilisi sümptomeid, näiteks hingamisraskust.

2. Calu-3 rakuliin: Teave kasvatamise kohta

See jaotis aitab teil teada saada Calu-3 rakuliini kultiveerimise põhipunkte. Siin arutame: Mis on Calu-3 rakkude kahekordistumisaeg? Mis on Calu-3 rakkude söötmeaine? Milline on Calu-3 rakkude kasvatamise protokoll? Kuidas kasvatada Calu-3 rakke?

Calu-3 rakkude kasvatamise põhipunktid

Kordistumisaeg:	Calu-3 rakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 35 tundi.
Adherentselt või suspensioonis:	Calu-3 on kleepuv kopsu adenokartsinoomi rakuliin.
Jagunemissuhe:	Calu-3 rakuliini subkultiveerimissuhe on 1:2 kuni 1:4. Subkultuurimiseks; rakke loputatakse 1 x fosfaatpuhvrisoolalahusega (PBS) ja inkubeeritakse Accutase'iga (passageerimislahus) ümbritseval temperatuuril peaaegu 10 minutit. Seejärel lisatakse värske rakukeskkond ja eraldatud rakud tsentrifuugitakse. Rakkupellet resuspendeeritakse ettevaatlikult ja rakud doseeritakse kolbi, mis sisaldab värsket kasvukeskkonda.
Kasvukeskkond:	Calu-3 rakkude kasvatamiseks kasutatakse EMEM-keskkonda, mis sisaldab 10% FBS, 2 mM L-Glutamiini, 1,5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM naatriumpüruvaati ja NEAA-d. Calu-3 rakkude keskkonda tuleb vahetada 2 kuni 3 korda nädalas.
Kasvutingimused:	Calu-3 rakke kasvatatakse niisutatud inkubaatoris temperatuuril 37 °C ja 5% CO2-ga.
Säilitamine:	Külmutatud rakke tuleb säilitada aurufaasis vedelas lämmastikus või temperatuuril alla -150 °C, et kaitsta rakkude elujõulisust pikema aja jooksul.
Külmutamisprotsess ja keskkond:	CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonda kasutatakse peamiselt Calu-3 kopsurakuliini külmutamiseks. Rakkude elujõulisuse säilitamiseks ja rakkude võimaliku šoki vältimiseks läbivad rakud aeglase külmutamisprotsessi, mis võimaldab temperatuuri langust ainult 1 °C minutis.
Sulatamisprotsess:	Rakud sulatatakse, asetades viaali 37 °C eelseadistatud vesivanni umbes 1 minutiks või kuni jääb väike jääklomp. Lisatakse värske kultuurkeskkond ja rakud tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonna komponendid. Seejärel resuspendeeritakse rakupellet uuesti ja rakud valatakse uude kolbi, mis sisaldab kasvukeskkonda.
Bioturvalisuse tase:	Calu-3 rakuliini käitlemiseks on vaja 1. bioloogilise ohutuse taseme laboratoorset keskkonda.

Calu-3 rakud erinevatel faasidel, rõhutades tüüpilisi saarekesarnaseid kleepuvaid klastreid.

3. Calu-3 rakkude eelised ja puudused

Nagu teistelgi inimese rakuliinidel, on ka Calu-3 rakkudel omad eelised ja puudused. Siinkohal arutame mõningaid olulisi neist.

Eelised

In vitro hingamisteede epiteeli mudel:
Calu-3 rakud on hingamisteede epiteeli tõhusaks in vitro mudeliks hingamisteede epiteelile. Need peegeldavad inimese hingamisteede limaskesta omadusi, võimaldades uurida ravimite transporti, peremehe ja patogeeni vastastikmõju uuringuid ja mukiini tootmist.
Polarisatsioon:
Calu-3 rakud moodustavad polariseeritud monokihid, mistõttu neid kasutatakse laialdaselt ravimitranspordi ja peremees-patogeeni interaktsioonide uurimiseks realistlikumas kontekstis.

Puudused

Vähirakuliin:
Calu-3 rakud on saadud kopsu adenokartsinoomist, seega on oluline märkida, et need ei pruugi täielikult esindada tervet kopsukudet. Teadlased peaksid seda arvestama, kui nad kasutavad neid uuringutes mudelina.

4. Calu-3 rakuliini rakendused teadusuuringutes

Calu-3 pakub mitmeid rakendusi biomeditsiinilistes uuringutes. Selles artikli osas valgustatakse mõningaid kõige lootustandvamaid neist.

Hingamisteede haiguste uuringud: Calu-3 kopsurakke kasutatakse erinevate hingamisteede haiguste või häirete, näiteks tsüstilise fibroosi, astma ja kroonilise obstruktiivse kopsuhaiguse (KOK) uurimiseks. Chiara Papi ja kolleegide uuringus uuriti anti-miR-101-3p peptiid-nukleiinhappe (PNA) mõju miRNA-101-3p sihikule, kasutades Calu 3 tsüstilise fibroosi in vitro mudelit. Uuringus leiti, et PNA-ravi kipub suurendama tsüstilise fibroosi transmembraanjuhtivuse regulaatori (CFTR) geeni ekspressiooni, mis viitab potentsiaalsele ravistrateegiale tsüstilise fibroosi ja sellega seotud haiguste puhul [2].
Ravimite väljatöötamine: Calu-3 rakud on mudeliks mitmete hingamisteede haiguste ravimite katsetamiseks ja arendamiseks. Peale selle kasutatakse neid rakke ka ravimite transpordi uurimisel läbi hingamisteede epiteeli. Näiteks uuriti 2021. aastal tehtud uuringus Andrographis paniculata taimeekstrakti ja selle bioaktiivse andrografoliidi viirusevastast toimet Calu-3 rakkude sars-cov-2 infektsiooni suhtes [3].
Peremees-patogeeni vastastikmõju: Calu-3 rakud on ideaalsed patogeenide ja hingamisteede epiteeli koostoime uurimiseks, aidates mõista selliseid hingamisteede infektsioone nagu SARS-CoV-2. Näiteks uurisid Byoung Kwon Park ja kolleegid Calu-3 ja Vero rakkude reaktsioone ja viiruse tootmist SARS-CoV-2 infektsioonile [4].

650,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 305032

5. Calu-3 rakud: Calu Calu Calu: teaduspublikatsioonid

Järgnevalt on esitatud mõned põnevad ja sageli tsiteeritud teadusuuringud, milles kasutatakse Calu-3 rakke:

Süsinikmonooksiidi vabastav molekul-2 pärsib proliferatsiooni, migratsiooni, invasiivsust ja soodustab apoptoosi mitteväikerakk-kopsuvähi Calu-3 rakkudes

See uuring avaldati 2018. aastal ajakirjas European Review for Medical and Pharmacological Sciences. Uuringus pakuti välja, et süsinikmonooksiidi vabastavad molekulid-2 (CORM-2) soodustavad mitteväikerakk-kopsuvähirakkude (Calu-3) apoptoosi ja pärsivad nende proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiivsust.

Calu-3 epiteelirakud näitavad erinevaid immuun- ja epiteelibarjääri vastuseid kui värskelt isoleeritud primaarsed ninaepiteelirakud in vitro

Selles Clinical and Translational Allergy's (2018) avaldatud uurimuses võrreldi Calu-3 rakuliini ja värskelt kultiveeritud primaarsete ninaepiteelirakkude immuun- ja epiteelibarjäärivastuseid.

Kiniin pärsib inimese rakuliinide nakatumist SARS-CoV-2'ga

See artikkel ajakirjas Viruses (2021) pakkus välja kiniini kui SARS-CoV-2 infektsiooni võimaliku ravi, hinnates selle mõju erinevatele viirusega nakatunud rakuliinidele, nagu Calu-3.

Kõrge D-glükoosi tase indutseerib ACE2 ekspressiooni GLUT1 kaudu inimese hingamisteede epiteelirakuliinis Calu-3

See uuring ajakirjas BMC Molecular and Cell Biology (2022) pakkus välja, et kõrge D-glükoosi sisaldus soodustab Calu-3 rakkude ACE2 ekspressiooni GLUT1 geeni reguleerimise kaudu.

Dolosigranulum pigrum moduleerib immuunsust SARS-CoV-2 vastu hingamisteede epiteelirakkudes

See artikkel ajakirjas Pathogens (2021) uuris Dolosigranulum pigrum 040417 immunomoduleerivat toimet kopsuepiteelirakkudes. Lisaks uuriti selle immunobakteri potentsiaali SARS-CoV-2 infektsiooni eest kaitsmisel.

6. Calu-3 rakkude ressursid: Cu-Cuulu: Protokollid, videod ja muud materjalid: protokollid, videod ja muud

Calu-3 rakkude kohta on saadaval palju veebiressursse, mis sisaldavad rakkude kasvatamise ja transfektsiooniga seotud teavet.

Calu-3 rakkude transfektsiooni protokoll: See ressurss annab olulisi teadmisi Calu-3 rakkude transfektsiooni kohta.
Calu-3 transfektsioon: See videoõpik on samm-sammuline juhend in vitro Calu-3 transfektsiooni protokolli õppimiseks.

Siin on mainitud Calu-3 rakukultuuri protokoll.

Calu-3 rakud: See dokument sisaldab teavet Calu-3 rakkude söötme ja subkultuurimise või passageerimise protokolli kohta.

Viited

Wiese-Rischke, C., R.S. Murkar ja H. Walles, Biological Models of the Lower Human Airways-Challenges and Special Requirements of Human 3D Barrier Models for Biomedical Research. Pharmaceutics, 2021. 13(12).
Fabbri, E., et al., Inimese hingamisteede epiteeli Calu-3 rakkude ravi mikroRNA miR-101-3p-le suunatud peptiid-nukleiinhappega (PNA) on seotud tsüstilise fibroosi transmembraanjuhtivuse regulaatori () geeni suurenenud ekspressiooniga. European Journal of Medicinal Chemistry, 2021. 209: p. 112876.
Sa-Ngiamsuntorn, K., et al., Andrographis paniculata ekstrakti ja selle põhikomponendi andrografoliidi SARS-CoV-2-vastane aktiivsus inimese kopsuepiteelirakkudes ja tsütotoksilisuse hindamine peamiste organirakkude esindajatel. Journal of natural products, 2021. 84(4): p. 1261-1270.
Park, B.K., et al., Differential Signaling and Virus Production in Calu-3 Cells and Vero Cells upon SARS-CoV-2 Infection. Biomol Ther (Seoul), 2021. 29(3): p. 273-281.