"Läbiviimise numbri" mõistmine

Passaažinumber on rakukultuuride puhul keskne mõiste, mis viitab sellele, mitu korda on rakuliini subkultuuritud või üle kantud uuele kasvusöötmele pärast selle esialgset taaselustamist krüokonserveerimisest või referentsrakupangast saamist. See näitaja on oluline rakukultuuri liinide ja ajaloo jälgimisel.

Protsessi ülevaade

• Rutiinse rakukultuuripraktika kohaselt viiakse rakud teatud tiheduse saavutamisel üle uuele kasvusöötmele, et säilitada kasv ja vältida üleküllastumist. Iga selline üleviimine registreeritakse kui läbimine.
• Traditsiooniliselt, kui me saime rakuliini hoiustajalt näiteks 60. läbipääsu juures, jätkasime selle läbipääsu numbriga, suurendades seda iga subkultuuriga. See tava, mis säilitas küll ajaloolise niidi, viis sageli algusest peale kõrgete läbipääsunumbrite saavutamiseni. Arvestades teatavate rakuliinide, näiteks 1951. aastal loodud HeLa liini ulatuslikku ja sageli aastakümneid kestnud kasutamist, ei ole võimalik määrata rakuliini algusest peale tehtud läbimiste koguarvu.
• Et suurendada selgust ja kvaliteeti meie rakukultuuriprotsessides, vaatasime selle lähenemisviisi 2023. aasta alguses läbi. Nüüd, kui algatame kultuuri uuest viaali, sõltumata hoiustajalt saadud läbipääsunumbrist, nullime ja alustame iga toodetud partii puhul uuesti lugemist alates esimesest läbipääsust

Põhjendus

Passaaž on oluline protseduur, et tagada rakukultuuride tervis ja kasulikkus teadusuuringutes. Kui rakud kasvavad liiga suureks, tekib neil kontaktinhibitsioon, mis vähendab nende proliferatsioonikiirust, mis võib negatiivselt mõjutada katsetulemusi. Nende probleemide leevendamiseks rakendab Cytion rangeid kontrolle rakkude tiheduse üle, mille juures subkultuuride kasvatamine toimub, säilitades seeläbi oma rakuliinide valmistamise ajal madalad läbikäikude arvud. See ettevaatusabinõu aitab vältida liigse passageerimise kahjulikke mõjusid, näiteks morfoloogilisi kõrvalekaldeid, kasvukiiruse muutusi ja geneetilist triivi, mis võivad põhjustada rakkude märkimisväärset erinevust nende algsest seisundist. Pikaajaline subkultiveerimine võib suurendada ka mikroobse saastumise ohtu.

Meie lubadus

Tagame, et teadlastele tarnitud rakud on võimalikult lähedased algsele geneetilisele koostisele ja fenotüübilistele omadustele, suurendades sellega katseandmete usaldusväärsust. Lisaks sellele aitab Cytion iga läbimise hoolika dokumenteerimisega kaasa teadusuuringute jälgitavusele ja reprodutseeritavusele, mis peegeldab rakukultuuride kõrgeid standardeid. Teadlastel soovitatakse pidada täpset arvestust läbimise numbrite kohta nii kultuurianumates kui ka laboratooriumi märkmikus, mis on nende rakukultuuride tervise ja ajaloo võrdluseks.