BeWo rakuliin
BeWo on inimese koriokartsinoomist saadud rakuliin, mida kasutatakse laialdaselt biomeditsiinilistes uuringutes. See on väärtuslik in vitro mudel, mille abil uuritakse platsenta arengu ja inimese trofoblastide süntsialiseerumise keerulist protsessi. Teadlased kasutavad neid rakke ka trofoblastide käitumise, hormoonide tootmise ja ainete transporti platsenta kaudu uurimiseks. Lisaks sellele on BeWo rakkudel rakendusi ka toksikoloogia, infektsioonide ja haiguste leviku uuringutes.
Käesolev artikkel hõlmab BeWo rakkude kohta põhiteadmisi, mis võivad aidata teil neid oma teadustöös kasutada. Artikkel sisaldab järgmist:
- BeWo-rakkude üldised omadused ja päritolu
- BeWo rakuliin: kasvatamise teave
- BeWo rakuliini eelised ja puudused
- BeWo-rakkude rakendused teadustöös
- BeWo rakke käsitlevad teadusartiklid
- BeWo rakuliini ressursid: protokollid, videod ja muud
BeWo rakkude üldised omadused ja päritolu
Eelnev teadmine rakuliini päritolu ja üldiste omaduste kohta on oluline selle kasutamiseks teie teadustöös. Artikli selles osas uuritakse BeWo rakuliini päritolu, iseloomulikke omadusi ja palju muud. Siit saate teada: Mis on BeWo koriokartsinoomi rakuliin? Mis on BeWo-rakkude süntsialiseerumine? Kust pärinevad BeWo-rakud? Milline on BeWo-rakkude morfoloogia? Milline on BeWo-rakkude ploidsus?
- Platsenta rakuliin BeWo pärineb 1968. aastal meessoost loote platsenta pahaloomulisest gestatsioonilisest koriokartsinoomist [1]. Seega on see platsenta uurimisel hindamatu väärtusega mudel.
- BeWo rakkudel on epiteelilaadne morfoloogia.
- BeWo rakud on suhteliselt väikesed, suurusega 20–30 µm [2].
- BeWo rakkudel on stabiilne kariotüüp. Nende tüvirakkude arv on hüpotetraploidsed. BeWo rakkude modaalne kromosoomide arv on 86. See võib varieeruda vahemikus 71–178.
- BeWo-rakud toodavad mitmeid hormoone, nt inimese korion-somatomammotropiini, inimese koriongonadotropiini (hCG) ja steroidhormoone.
- BeWo rakud ekspresseerivad molekulaarseid markereid, sealhulgas CK 7, E-kadheriini ja VE-kadheriini.
B30 alaliin
B30 on BeWo-rakkude alaliin. Seda kasutatakse toitainete omastamise ja transportimise uurimiseks. See on tingitud nende jõulisest kasvust poorsetel membraanidel.
BeWo ja JEG-3
BeWo ja JEG-3 rakuliinid on saadud koriokartsinoomidest ja neid kasutatakse platsenta uuringutes. BeWo rakud toodavad hormoone, nagu inimese koriongonadotropiini (hCG) ja östradiooli, madalamal tasemel kui JEG-3.
BeWo rakuliin: kasvatamisjuhised
Rakukultuuri hooldamine võib olla keeruline, kui te ei tea olulisi üksikasju. Näiteks: Milline on BeWo rakkude kahekordistumisaeg? Mis on BeWo rakkude kasvukeskkond? Kuidas kasvatada BeWo rakuliini? Ja kuidas BeWo rakke külmutada?
BeWo rakkude kasvatamise põhipunktid
Kaksikustumisaeg:
BeWo rakkude populatsiooni kahekordistumisaeg on umbes 30 tundi.
Adherentne või suspensioonis:
BeWo on adhesiivne rakuliin.
Rakkude külvitihedus:
BeWo rakkude jaoks soovitatav külvitihedus on 1 × 10⁴ rakku/cm². Külvamiseks eemaldatakse rakkudelt vana kasvukeskkond ja rakke loputatakse 1× PBS-ga. Seejärel lisatakse Accutase (passageerimislahus) ja rakke inkubeeritakse 8–10 minutit toatemperatuuril. Seejärel lisatakse lahtitulenud rakkudele kasvukeskkond ja tsentrifuugitakse. Saadud rakud suspendeeritakse uuesti ja valatakse uude kolbi.
Kasvukeskkond:
BeWo-rakkude kasvatamiseks kasutatakse Ham's F12K-kasvatuskeskkonda, mis sisaldab 10% FBS-i, 2,0 mM L-glutamiini, 2,0 mM naatriumpüruvaati ja 2,5 g/l NaHCO₃. BeWo-rakkude kasvatuskeskkonda tuleks vahetada 2–3 korda nädalas.
Kasvatustingimused:
BeWo-rakke hoitakse niisutatud inkubaatoris, mille temperatuur on seatud 37 kraadile Celsiuse järgi ja millele on tagatud 5% CO₂ varustus.
Säilitamine:
Külmutatud BeWo-rakke säilitatakse temperatuuril alla -150 °C elektrilises üli-madala temperatuuriga sügavkülmikus või vedela lämmastiku aurufaasis.
Külmutamisprotsess ja keskkond:
BeWo-rakke soovitatakse külmutada CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonnas. Rakke külmutatakse aeglase külmutamise meetodil. See meetod võimaldab temperatuuri langust vaid 1 kraadi minutis, vältides seega rakkudele šokki ja kaitstes nende eluvõimelisust.
Sulatusprotsess:
Külmutatud rakke sulatatakse, kastades need eelnevalt 37 °C-ni soojendatud veevanni 40–60 sekundiks, kuni jääb alles väike jääklomp. Seejärel lisatakse värsket kasvukeskkonda ja rakke tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonda kuuluvad komponendid. Kogutud rakupellet resuspendeeritakse ja jaotatakse kasvatamiseks kultuurikolbi.
Bioloogilise ohutuse tase:
BeWo rakukultuuride käitlemiseks ja hooldamiseks on vajalik 1. bioloogilise ohutuse taseme labor.
Avaldatud: 2023 | Viimati läbi vaadatud: mai 2026
BeWo rakuliini eelised ja puudused
BeWo rakkudel on unikaalsed omadused ning neil on oma eelised ja puudused. Selles osas tutvustame mõningaid märkimisväärseid neist.
Eelised
BeWo-koriokartsinoomi rakuliini peamised eelised on järgmised:
-
In vitro platsenta rakumudel
BeWo rakud pakuvad in vitro mudelit trofoblastrakkude käitumise ja platsenta sünitsialiseerumise uurimiseks, jäljendades protsesse, mida on in vivo raske jälgida.
-
Hormoonide tootmine
BeWo rakud eritavad hormoone, nagu hCG ja platsenta laktogeen, mis teeb need väärtuslikuks hormonaalse regulatsiooni uuringutes ja reproduktiivbioloogia alases teadustöös.
Puudused
BeWo trofoblastrakkude puudused on järgmised:
-
Vähirakkude liin
BeWo rakud on saadud koriokartsinoomist, mis on platsenta kasvaja. See päritolu ei pruugi täielikult kajastada normaalset platsenta rakkude funktsiooni.
BeWo rakkude rakendused teadustöös
BeWo rakuliini kasutatakse laialdaselt platsentaalse uurimistöö raames. Siinkohal on nimetatud mõned selle rakuliini konkreetsed rakendused:
- Platsenta ja rasedusega seotud teadustöö: BeWo rakud on platsenta ja rasedusega seotud teadustöös kesksel kohal. Näiteks kasutavad teadlased neid rakke, et uurida ainete, sealhulgas ravimite, toitainete ja toksiinide transporti läbi platsenta barjääri. Lisaks uuritakse ka hormoonide, sealhulgas inimese koriongonadotropiini (hCG), platsenta laktogeeni ja steroidhormoonide tootmist ja reguleerimist. See on oluline raseduse ajal toimuvate hormonaalsete muutuste mõistmiseks. 2018. aastal läbi viidud uuringus uuriti broomitud leegiaeglustite (BFR) mõju sulfotransferaasi aktiivsuse inimese trofoblastilises rakuliinis (BeWo). See ensüüm osaleb kilpnäärmehormooni rakusisese taseme reguleerimises [3].
- Infektsioonide ja haiguste uurimine: BeWo rakke kasutatakse ka patogeenide ja platsenta rakkude vahelise interaktsiooni uurimiseks. See uurimistöö on väärtuslik emalt lootele edasi kanduvate haiguste mõistmiseks ja loote tervise kaitsmise strateegiate väljatöötamiseks. Lisaks aitab see rakuliin teadlastel uurida raseduse ajal tekkivaid tüsistusi, nagu preeklampsia. Näiteks kasutas Michalina Bralewska 2023. aastal läbi viidud uuringus BeWo trofoblastrakkude mudelit ja leidis, et nii kromograniin A (CgA) kui ka sellest saadud peptiid, katestatiin (CST), võivad mängida rolli preeklampsia (PE) patogeneesi keerulises protsessis [4]. Edasi uuriti teises uuringus trikosantiini vähivastast potentsiaali, kasutades BeWo-koriokartsinoomi rakuliini. Uuringus tehti ka täiendavaid jõupingutusi biomarkereid avastada, teostades võrdlevat proteoomilist analüüsi enne ja pärast eksperimenti [5].
5. BeWo-rakke käsitlevad teadusartiklid
Siin on mõned olulised teadusartiklid, milles käsitletakse BeWo trofoblastrakke.
Selles ajakirjas Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) avaldatud uuringus väidetakse, et AMPK-signaalimine aktiveerib BeWo trofoblastrakkudes mitofaagia FUNDC1 ja PRKN poolt vahendatud mitofaagia signaaliteede kaudu. Selle tulemusena aitab mitofaagia säilitada ATP tootmist ja mitokondriaalset membraanipotentsiaali.
See artikkel avaldati ajakirjas Animal Cells and Systems (2020). Uuringus väideti, et etüülparabeen vahendab BeWo-rakkude apoptoosi kaspaasi 3 rada reguleerides.
Selles ajakirjas Drug Metabolism and Disposition (2023) avaldatud uuringus kasutati platsenta rakuliine, sealhulgas BeWo, JAR, JEG-3 ja HTR-8/SVneo, et uurida ksenobiootikumide ja steroidide ladestumist rakkudes.
Selles ajakirjas International Journal of Molecular Medicine (2020) avaldatud uurimusartiklis väidetakse, et APJ retseptori ligand apeliin soodustab BeWo-rakkude proliferatsiooni APJ ja ERK1/2, stat3 ja AMPK signaalimise kaudu. Seega võib see olla oluline adipokiin, mis reguleerib platsenta arengut.
Krambivastased ravimid ja loote toitained: mõju koliinitransportijatele inimese platsenta rakuliinis
Ajakirjas Epilepsia (2021) avaldatud uuringus uuriti loote toitainete ja krambivastaste ravimite mõju koliinitransportijatele inimese trofoblastide rakuliinis BeWo.
BeWo rakuliini ressursid: protokollid, videod ja muud
Siin on mõned BeWo rakkude kohta kättesaadavad veebiressursid:
- In vitro transfektsioon: see video aitab teil õppida in vitro plasmiid-DNA transfektsiooni protokolli adhesiivsetele rakkudele.
Järgmine link sisaldab BeWo rakkude rakukultuuri teavet:
- BeWo rakud: See veebisait sisaldab olulist teavet BeWo rakuliini rakukultuuri kohta. See hõlmab teavet rakukeskkonna ja kultiveerimistingimuste kohta. Samuti on seal protokollid subkultiveerimiseks ning krüokonserveeritud ja proliferatiivsete kultuuride käitlemiseks.
Viited
- Weber, M. jt, Kuue inimese trofoblastirakkude liini tsütogeneetika. Placenta, 2021. 103: lk 72–75.
- Kolokol'tsova, T. jt, Pikaajalises kultuuris olevate trofoblastide omadused. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: lk 259–265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt ja H.M. Stapleton, Kilpnäärmehormooni sulfotransferaasi aktiivsuse häirimine broomitud leegiaeglustavate kemikaalide poolt inimese koriokartsinoomi platsenta rakuliinis BeWo. Chemosphere, 2018. 197: lk 81–88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha ja A. Sakowicz, Preeklampsia keskkonnast tingitud CgA-st pärineva CST-valgu taseme langus HTR-8/SVneo ja BeWo trofoblastilistes rakuliinides. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): lk 7124.
- Hu, Y. jt, Ravimi trikosantiini lisamise võrdlev proteoomiline analüüs BeWo rakuliinis. Molecules, 2022. 27(5): lk 1603.