CV-1 rakud
Üldine teave
| Kirjeldus | CV-1 on Aafrika rohelise ahvi rakuliin, mis on saadud neerudest 1964. aastal. Algselt kasutati seda fibroblastilaadset rakuliini teadusuuringutes, mis keskendusid kantserogeense Rous'i sarkoomiviiruse (RSV) transformatsioonile, kuid seda kasutatakse laialdaselt bioloogilistes uuringutes viiruste tootmiseks, transfektsiooniks ja geenide vaigistamiseks. Need rakud on pöördtranskriptaasi suhtes negatiivsed ja vastuvõtlikud mitmetele viirustele, sealhulgas polioviirus 1, herpes simplex, simian virus 40 (SV40), California entsefaliit ja nii idapoolne kui ka läänepoolne hobuste entsefaliit. CV-1 rakuliinil on kiire kasv, see kasvab plastik- ja klaaspindadel kinni ja näitab kromosoomide arvu nihkeid kõrge läbipääsutaseme korral. On täheldatud, et CV-1 rakud näitavad ATG-ga ravitud Wistari rottidel suurenenud tumorigeensust, samuti suurenenud rakukolooniate moodustumist pehmel agaril. Lisaks sellele toetavad CV-1 rakud SV40 viiruse replikatsiooni ja neil on kiire tümidiinkinaasi (TK) aktiivsus pärast simian-, adeno- ja papoviirusinfektsiooni indutseerimist. CV-1 rakkude karüotüüp on 2n = 60, pseudodiploidne. CV-1 rakke on kasutatud mitmesugustes bioloogilistes uuringutes, sealhulgas tõhususe testimisel, transfektsiooni peremeesrakuna ja viirustõrje testimisel. Samuti on nad tuntud kui sobivad peremeesorganismid transfektsiooniks, eriti SV40-vektoritega. |
|---|---|
| Organism | Monkey |
| Kude | Neerud |
| Rakendused | Sobiv peremees transfektsiooniks, eriti SV40-vektoritega. |
| Sünonüümid | Cv-1, CV 1, CV-1.K, CV1 |
Omadused
| Vanus | 141 päeva |
|---|---|
| Sugu | Mees |
| Raku tüüp | Fibroblastide |
| Kasvuomadused | Kinnipeetav |
Regulatiivsed andmed
| Tsitaat | CV-1 (Cytioni katalooginumber 605471) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 9534 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0229 |
Biomolekulaarsed andmed
| Viiruse vastuvõtlikkus | Polioviirus 1, herpes simplex, idapoolne hobuste entsefaliit, läänepoolne hobuste entsefaliit, California entsefaliit, SV40 |
|---|---|
| Pöördtranskriptaas | Negatiivne |
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | EMEM, w: 2 mM L-Glutamiin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: EBSS, w: 1 mM naatriumpüruvaat, w: NEAA (Cytioni artikli number 820100c) |
|---|---|
| Täiendused | Täiendada söötme 10% FBS-ga |
| Dissotsiatsioonireaktiiv | Accutase |
| Subkultuuride kasvatamine | Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda. |
| Jagatud suhe | Soovitatav on suhe 1:2 kuni 1:3 |
| Külvi tihedus | 3 kuni 4 x 10^4 rakku/cm^2 annab konfluentse kihi umbes 4 päeva jooksul |
| Vedeliku uuendamine | 2 korda nädalas |
| Taastumisjärgne taastumine | Pärast sulatamist asetage rakud plaatidele 5 x 10^4 rakku/cm^2 ja laske rakkudel taastuda külmutamisprotsessist ja kleepuda vähemalt 24 tundi. |
| Külmutage keskkond | CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100) või CM-ACF (Cytioni katalooginumber 806100) |
| Rakkude sulatamine ja kultiveerimine |
|
Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA
| Steriilsus | Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt. |
|---|
Analüüsisertifikaat (CoA)
| Partii number | Sertifikaadi tüüp | Kuupäev | Kataloogi number |
|---|---|---|---|
| 601470-517 | Analüüsitunnistus | 22. Jan. 2026 | 601470 |