Клетъчна линия BEWO

BeWo е клетъчна линия, получена от човешки хориокарцином, която се използва широко в биомедицинските изследвания. Тя служи като ценен in vitro модел за изследване на сложния процес на плацентарно развитие и синцитиализация на човешки трофобласти. Изследователите използват тези клетки и за изучаване на поведението на трофобластните клетки, производството на хормони и преноса на вещества през плацентата. Освен това клетките BeWo намират приложение и в токсикологията, инфекциите и изследванията за предаване на болести.

Тази статия обхваща фундаментални знания за BeWo клетките, които могат да ви помогнат да работите с тях във вашите изследвания. Тя ще включва:

Общи характеристики и произход на BeWo клетките
Клетъчна линия BeWo: Информация за култивирането
Предимства и недостатъци на клетъчната линия BeWo
Изследователски приложения на BeWo клетките
Изследователски публикации с участието на BeWo клетки
Ресурси за клетъчната линия BeWo: Протоколи, видеоклипове и др

1. Общи характеристики и произход на клетките BeWo

Предварителните познания за произхода и общите характеристики на дадена клетъчна линия са от решаващо значение за използването ѝ във вашите изследвания. В тази част на статията се разглеждат произходът на клетъчната линия BeWo, нейните характерни особености и много други. Тук ще научите: Какво представлява клетъчната линия за хориокарцином BeWo? Какво представлява синцитизацията на BeWo? Откъде идват клетките BeWo? Каква е морфологията на клетките BeWo? Каква е плоидността на BeWo?

Плацентарната клетъчна линия BeWo произхожда от злокачествен гестационен хориокарцином на мъжка фетална плацента през 1968 г. [1]. По този начин тя служи като безценен модел за изследване на плацентата.
Клетките на BeWo имат епителиална морфология.
Клетките на BeWo са сравнително малки, вариращи между 20 и 30 µM [2].
BeWo клетките имат стабилен кариотип. Техният брой на стволовите линии е хипо-тетраплоиден. Модалният хромозомен номер на BeWo клетките е 86. Той може да варира от 71 до 178.
BeWo клетките произвеждат няколко хормона, т.е. човешки хорион соматоматропин, човешки хорион гонадотропин (hCG) и стероидни хормони.
BeWo клетките експресират молекулярни маркери, включително CK 7, E-cadherin и VE-cadherin.

Подлиния B30

B30 е подлинията на BeWo клетките. Тя се използва за изследване на приемането и преноса на хранителни вещества. Това се дължи на техния енергичен растеж върху порести мембрани.

BeWo и JEG-3

Клетъчните линии BeWo JEG-3 произлизат от хориокарциноми и се използват в изследванията на плацентата. Клетките BeWo произвеждат хормони в по-ниски нива от JEG-3, като човешки хорионгонадотропин (hCG) и естрадиол.

Визуализация на човешката яйцеклетка във времето, илюстрираща етапите на образуване на бластоцист, както се наблюдава под микроскоп.

2. Клетъчна линия BeWo: Информация за култивиране

Поддържането на клетъчна култура може да бъде трудно, ако не знаете ключови подробности. Като например: Какво е времето за удвояване на BeWo? Каква е клетъчната среда на BeWo? Как се култивира клетъчната линия BeWo? и Как се замразяват клетките BeWo?

Ключови моменти за култивиране на клетките BeWo

Време за удвояване:	Времето за удвояване на популацията на клетките BeWo е приблизително 30 часа.
Прилепнали или в суспензия:	BeWo е адхезивна клетъчна линия.
Гъстота на засяване на клетките:	Препоръчителната плътност на посяване за клетките BeWo е 1 x¹⁰⁴ ^{клетки/cm2}. За посяването старата среда се отстранява от клетките и те се изплакват с 1 x PBS. След това се добавя Accutase (разтвор за пасиране) и клетките се инкубират за 8 до 10 минути при стайна температура. След това отделените клетки се добавят към хранителната среда и се центрофугират. След това събраните клетки се ресуспендират и се изсипват в нова колба.
Растежна среда:	За отглеждането на BeWo клетките се използва среда Ham's F12K, съдържаща 10 % FBS, 2,0 mM L-глутамин, 2,0 mM натриев пируват и 2,5 g/L NaHCO3. Клетъчната среда на BeWo трябва да се подменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за растеж:	Клетките BeWo се поддържат в овлажнен инкубатор при температура 37 градуса по Целзий и 5 % CO2.
Съхранение:	Замразените BeWo клетки се съхраняват при температура под -150 °C в електрически фризер за ултраниски температури или в парната фаза на течен азот.
Процес на замразяване и среда:	Препоръчва се BeWo клетките да се замразяват в среда за замразяване CM-1 или CM-ACF. Клетките се замразяват по метода на бавното замразяване. Този метод позволява понижаване на температурата само с 1 градус в минута, като по този начин предпазва клетките от шок и защитава жизнеспособността им.
Процес на размразяване:	Замразените клетки се размразяват, като се потапят в предварително настроена водна баня с температура 37 °C за 40 до 60 секунди, докато остане малка ледена бучка. След това се добавя свежа среда за растеж и клетките се центрофугират, за да се отстранят компонентите на замразяващата среда. Събраната клетъчна пелета се ресуспендира и се разпределя в колба за култивиране за растеж.
Ниво на биологична безопасност:	За работа и поддържане на клетъчни култури BeWo е необходима лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.

Заснемане на епителната, полигоналната морфология и островърхия растеж на човешката клетъчна линия на хориокарцинома BEWO чрез 10x и 20x увеличение под микроскоп.

3. Предимства и недостатъци на клетъчната линия BeWo

Клетките BeWo притежават уникални характеристики и се отличават със специфични предимства и недостатъци. В този раздел ще разгледаме някои от тях, които заслужават внимание.

Предимства

Основните предимства на клетъчната линия за хориокарцином BeWo са:

Ин витро модел на плацентарни клетки
Клетките BeWo предоставят in vitro модел за изучаване на поведението на трофобластните клетки и плацентарната синцитиализация, възпроизвеждайки процеси, които е трудно да се наблюдават in vivo.
Производство на хормони
BeWo клетките секретират хормони, като hCG и плацентарния лактоген, което ги прави ценни за проучвания на хормоналната регулация и изследвания в областта на репродуктивната биология.

Недостатъци

Недостатъците на трофобластните клетки BeWo са:

Ракова клетъчна линия
Клетките BeWo са получени от хориокарцином, който е тумор на плацентата. Този произход може да не отразява напълно нормалната функция на плацентарните клетки.

4. Изследователски приложения на клетките BeWo

Клетъчната линия BeWo се използва широко в плацентарните изследвания. Тук са посочени няколко специфични приложения на тази клетъчна линия:

Изследвания, свързани с плацентата и бременността: Клетките BeWo са от основно значение за изследванията на плацентата и бременността. Изследователите използват тези клетки, за да проучат преноса на вещества, включително лекарства, хранителни вещества и токсини, през плацентарната бариера. Освен това те изследват и производството и регулирането на хормони, включително човешки хорион гонадотропин (hCG), плацентарен лактоген и стероидни хормони. Това е важно за разбирането на хормоналните промени по време на бременността. Изследванията, проведени през 2018 г., проучват ефекта на бромираните забавители на горенето (BFR) върху активността на сулфотрансферазата в човешка трофобластна клетъчна линия (BeWo). Този ензим участва в регулирането на вътреклетъчните нива на хормона на щитовидната жлеза [3].
Изследване на инфекциите и заболяванията: Клетките BeWo се използват и за изследване на взаимодействието между патогени и плацентни клетки. Тези изследвания са ценни за разбирането на болестите, които могат да се предават от майката на плода, и за разработването на стратегии за защита на здравето на плода. Освен това тази клетъчна линия помага на изследователите да изследват усложнения, които възникват по време на бременност, като например прееклампсия. Например в проучване, проведено от Михалина Бралевска през 2023 г., е използван трофобластният клетъчен модел BeWo и е установено, че както хромогранин А (CgA), така и пептидът, получен от него, катестатин (CST), могат да имат роля в сложния процес на патогенезата на прееклампсията (ПЕ) [4]. Продължавайки напред, друго проучване изследва противораковия потенциал на трихозантина, като използва клетъчната линия на хориокарцинома BeWo. Изследването също така положи допълнителни усилия за откриване на биомаркери чрез извършване на сравнителен протеомен анализ преди и след експеримента [5].

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 300123

5. Научни публикации с участието на BeWo Cells

Тук са представени някои важни научни публикации, в които са включени трофобластни клетки BeWo.

AMPK сигнализацията регулира митофагията и производството на митохондриален АТФ в човешка трофобластна клетъчна линия BeWo

В това проучване в Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) се предлага, че AMPK сигнализацията активира митофагията в трофобластните клетки BeWo чрез FUNDC1 и PRKN-подпомагани пътища на митофагията. В резултат на това митофагията спомага за поддържане на производството на АТФ и потенциала на митохондриалната мембрана.

Етилпарабенът индуцира апоптотична клетъчна смърт в клетките на човешката плацента BeWo по пътя на Caspase-3

Тази статия е публикувана в Animal Cells and Systems (2020). В изследването се предлага етилпарабенът да опосредства апоптозата на BeWo клетките чрез регулиране на пътя на каспаза 3.

Характеризиране на потенциала за разполагане на ксенобиотици и стероиди в човешка плацентарна тъкан и клетъчни линии (BeWo, JEG-3, JAR и HTR-8/SVneo) чрез количествена протеомика

В това проучване в раздела "Метаболизъм и диспозиция на лекарствата" (2023 г.) са използвани плацентни клетъчни линии, включително BeWo, JAR, JEG-3 и HTR-8/SVneo, за да се изследва депонирането на ксенобиотици и стероиди в клетките.

Апелин и апелинов рецептор в човешката плацента: Експресия, сигнален път и регулация на пролиферацията и клетъчния цикъл на трофобластните клетки JEG-3 и BeWo

В тази научна статия в International Journal of Molecular Medicine (2020) се предлага, че апелинът, лиганд на APJ рецептора, насърчава пролиферацията на BeWo клетките чрез APJ и ERK1/2, stat3 и AMPK сигнализация. По този начин той би могъл да бъде съществен адипокин, регулиращ развитието на плацентата.

Антисептични медикаменти и хранителни вещества за плода: ефекти върху холиновите транспортери в човешка плацентарна клетъчна линия

В това проучване в Epilepsia (2021) са изследвани ефектите на феталните хранителни вещества и антисеизмичните лекарства върху холиновите транспортери в трофобластна клетъчна линия от човешки произход, BeWo.

6. Ресурси за клетъчна линия BeWo: Протоколи, видеоклипове и др

Ето някои налични онлайн ресурси за BeWo клетките:

Ин витро трансфекция: Този видеоклип ще ви помогне да научите протокола за in vitro трансфекция на плазмидна ДНК за адхерентни клетки.

Следната връзка съдържа информация за клетъчните култури за BeWo клетките:

BeWo клетки: Този уебсайт съдържа основна информация за клетъчните култури за клетъчната линия BeWo. Това включва информация относно клетъчните среди и условията за култивиране. Той съдържа също протоколи за субкултивиране и работа с криоконсервирани и пролиферативни култури.

Препратки

Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines (Цитогеномика на шест човешки трофобластни клетъчни линии). Placenta, 2021 г. 103: p. 72-75.
Колокольцова, Т., и др, Характеристики на трофобластните клетки в дългосрочна култура. Бюлетин по експериментална биология и медицина, 2017. 164: p. 259-265.
Leonetti, C.P., C.M. Butt, and H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo (Нарушаване на активността на сулфотрансферазата на тиреоидния хормон от бромирани химикали за забавяне на горенето в клетъчната линия на човешкия хориокарцином). Chemosphere, 2018 г. 197: p. 81-88.
Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment (Намаляване на нивото на CgA-произведените CST протеини в трофобластни клетъчни линии HTR-8/SVneo и BeWo, причинено от преекламптичната среда). International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
Hu, Y., et al., Comparative proteomic analysis of drug trichosanthin addition to BeWo cell line (Сравнителен протеомен анализ на добавяне на лекарствен трихозантин към клетъчна линия BeWo ). Молекули, 2022 г. 27(5): p. 1603.