SW-620 Hücreleri - Kolon Kanseri Araştırmaları ve Deneyleri Üzerindeki Etkisi
SW-620 hücreleri Dukes evre C insan kolorektal kanser hücre hattını oluşturur. Yüksek tümörijenik ve metastatik potansiyele sahiptirler. Bu nedenle, kanser ve toksikoloji çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadırlar. Bu makale kolon kanseri hücre hattı SW-620'nin temel yönlerini inceleyecektir.
SW-620 hücrelerinin kökeni ve genel özellikleri
Kökeni ve genel özellikleri, bir hücre hattı hakkındaki başlıca bilgilerdir. Bunun önceden bilinmesi, araştırma çalışmalarına dahil etmeyi düşünen araştırmacılar için çok önemlidir. Makalenin bu bölümünde SW-620 hücre hattının temel özellikleri ve kökeni açıklanacaktır. Temel olarak şunları öğreneceksiniz: SW620 hücre hattı nedir? SW620 hücre hattının özellikleri nelerdir? SW620'nin kökeni nedir? SW-640 hücre boyutu nedir? SW620 ve SW480 arasındaki fark nedir?
- Bir kolorektal karsinom hücre hattı olan SW-620, kolon adenokarsinomu olan 51 yaşındaki Kafkasyalı bir erkeğin mediatize lenf nodu lezyonundan köken almıştır [1]. Bu hücre hattı A Leibovitz ve meslektaşları tarafından depolanmıştır.
- SW-620 hücreleri epitelyal bir morfolojiye sahiptir. Ayrıca mikrovilluslarla eşleşen küçük yuvarlak ve bipolar hücrelerden oluşur.
- SW-620 hücre boyutu 14.4 ± 0.3 μm çapındadır.
- Bu kolon kanseri hücreleri hiperdiploid bir karyotipe sahiptir. SW-620 hücreleri için modal kromozom sayısı 50'dir ve bu sayı 45 ila 53 arasında değişebilir.
SW-480 vs SW-620
SW480 ve SW620 kolorektal kanser hücre hatlarıdır. SW-480 birincil bir tümörden türetilirken, SW-620 metastaz yapmış bir lenf düğümünden oluşturulmuştur. Ayrıca, bu hücre hatlarından geliştirilen ksenogreftler birbirinden farklıdır. SW620 ksenogreftleri tümör hücre tabakaları üretirken, SW480 ksenogreftleri gland benzeri yapılar oluşturur [2]. Her iki hücre dizisi de aynı mutasyon profillerini paylaşmaktadır.
SW-620 Hücreleri: Kültürleme bilgileri
Bir hücre hattının temel hücre kültürü konseptini kavramak, uygun kullanım ve bakımı sağlayabileceğinden zorunludur. Bu bölümde, SW-620 kültürüne ilişkin bilmenize yardımcı olabilecek bazı önemli noktalara değinilmektedir: SW-620 ortamı nedir? SW-620'nin ikiye katlanma süresi nedir? SW-620 hücrelerini nasıl kültüre alırsınız?
SW-620 Hücrelerinin Kültüre Alınması için Önemli Noktalar
|
İki Katına Çıkma Süresi: |
SW-620 ikiye katlanma süresi 20 ila 26 saat arasında değişir. |
|
Yapışık veya Süspansiyon Halinde: |
SW-620 hücre hattı yapışıktır. Hücreler kültür kabının yüzeyinde tek tabakalar oluşturur. |
|
Alt Kültivasyon Oranı: |
SW-620 hücreleri 1: 3 bölünme oranında alt kültüre alınır. Yapışık hücreler magnezyum ve kalsiyum içermeyen fosfat salin tamponu (1X) ile durulanır. Ardından, pasajlama solüsyonu Accutase eklenir ve hücreler ortam sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübe edilir. Taze ortam eklenir ve hücreler santrifüjlenir. Daha sonra, hasat edilen hücreler bir büyüme ortamında dikkatlice yeniden süspanse edilir ve büyüme için yeni şişelere dağıtılır. |
|
Büyüme Ortamı: |
SW-620 hücrelerinin ideal büyümesi için %10 fetal sığır serumu, 4,5 g/L Glukoz, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 ve 1,0 mM Sodyum piruvat ile desteklenmiş DMEM ortamı kullanılır. Ortam haftada iki kez yenilenmelidir. |
|
Büyüme Koşulları: |
SW-620 kolon karsinom hücreleri 37°C sıcaklıkta ve %5CO2 ile nemlendirilmiş bir inkübatörde kültürlenir. |
|
Depolama: |
Dondurulduktan sonra SW-620 hücreleri -150°C'nin altındaki sıcaklıklarda ultra düşük sıcaklıktaki dondurucularda veya sıvı nitrojenin buhar fazında saklanır. |
|
Dondurma İşlemi ve Ortamı: |
CM-1 veya CM-ACF, SW-620 hücreleri için ideal bir dondurma ortamıdır. SW-620 hücrelerini dondurmak için yavaş bir dondurma işlemi kullanılır. Dakikada sadece 1°C'lik bir sıcaklık düşüşüne izin verir, böylece hücre canlılığını korur. |
|
Çözdürme İşlemi: |
Dondurulmuş SW-620 hücreleri 40 ila 60 saniye boyunca 37°C'de önceden ayarlanmış bir su banyosunda çözdürülür. Çözdürme işleminden sonra kültür ortamı eklenir ve hücreler santrifüjlenerek donmuş ortam öğeleri uzaklaştırılır. Bundan sonra, elde edilen hücre peleti bir büyüme ortamında yeniden süspanse edilir ve hücreler büyüme için yeni bir şişeye dökülür. |
|
Biyogüvenlik Seviyesi: |
SW-620 kültürlerinin işlenmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 (BSL-1) laboratuvarı gereklidir. |
SW-620 Hücrelerinin Avantajları
Avantajlar
- KolonKarsinomunun Modellenmesi: SW-620 hücreleri, kolon karsinomu için kritik bir model görevi görerek, özellikle ksenograft modellerinde tümör ve metastaz mekanizmalarının derinlemesine incelenmesine olanak tanır.
- Kanser Araştırmaları ve Terapötikler: Bu hücreler kanser biyolojisinin, kemoterapötik etkinliğin ve anoikis dahil hücre ölümü mekanizmalarının araştırılmasını kolaylaştırır.
- CD133 İfadesi: SW-620 hücrelerinde CD133 ekspresyonu, kanser kök hücre biyolojisi ve bunun tümörigenez ve tedavi direnci üzerindeki etkileri hakkında bilgi sağlar.
- Akış Sitometrisi Uygulamaları: Bu hücreler üzerinde yapılan akış sitometrisi analizi, hücre popülasyonlarının, apoptoz düzeylerinin ve proliferasyonun değerlendirilmesini sağlar.
SW-620 hücre hattının araştırma uygulamaları
SW-620 hücrelerinin umut verici fayda sağladığı araştırma alanları aşağıda tartışılmaktadır:
- Kanser araştırmaları: SW-620, kolorektal kanser biyolojisini incelemek için çok değerli bir hücre modelidir. Araştırmacılar bu in vitro modeli kanser hücresi büyümesi, istilası ve göçünü yönlendiren moleküler mekanizmaları keşfetmek için kullanmaktadır. Ayrıca, SW620 hücre hattı mutasyonlarını, yani p53, APC ve KRAS'ı incelemek için kullanılabilir. 2021'de yapılan araştırma, SW620 hücre hattı KRAS mutasyonunun yeni bir ilaç olan FL118'in duyarlılığı üzerindeki etkisini inceledi. KRAS'ın aşırı ekspresyonunun kolorektal hücrelerin FL118 ile indüklenen apoptozunu artırdığını, susturulmasının ise azalttığını gözlemlediler. Bu sonuçlar, KRAS mutasyonu olan kolon karsinomu hastalarında FL118 kullanımını öngörmeye yardımcı olabilir [3].
- İlaç Tarama ve Geliştirme: SW-620 hücre hattı, kolon kanserine karşı potansiyel ilaç adaylarını taramak ve test etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacılar, hedefe yönelik tedavi yaklaşımlarının geliştirilmesine yol açabilecek ilaçların sitotoksisitesini ve etkinliğini değerlendirmek için bu hücreleri kullanmaktadır. Örneğin bir çalışmada SW-620 hücre hattı kullanılarak tarçın ve karanfilin tekli uçucu yağ bileşiklerinin anti-kolorektal kanser aktiviteleri araştırılmıştır [4].
- Metastaz çalışmaları: Yüksek metastatik potansiyeli nedeniyle SW-620 hücreleri, kanser hücresi metastazının altında yatan moleküler yolları araştırmak için kullanılabilir. Zhou Yang ve meslektaşları gibi Grainy-head-like 2 (GRHL2) geninin kolon kanseri ilerlemesi ve metastazındaki rolünü bulmuşlardır. GRHL2 gen ekspresyonunun epitelyal-mezenkimal geçişin (EMT) baskılanması yoluyla kolorektal kanser ilerlemesini ve metastazı engellediğini öne sürmüşlerdir [5].
SW620 Hücre Hattınızı Güvence Altına Alın
SW-620 hücreleri: Yayınlar
Bu bölümde SW-620 hücreleri ile ilgili bazı ilginç ve en çok atıf alan araştırma yayınları incelenecektir.
Molecular Carcinogenesis (2017) dergisinde yayımlanan bu çalışmada, bir polifenol olan ürolitin A'nın kolorektal kanser hücre hattı SW620'de otofajiyi indüklediği öne sürülmüştür. Ayrıca kanser hücresi metastazını da baskılamıştır.
Oncology Letters'daki (2018) bu makalede, SW-620 hücreleri kullanılarak bir bis-benzilizokinolin alkaloidi olan tetrandrinin anti-metastatik potansiyeli araştırılmıştır.
Bu makale Biochemical and Biophysical Research Communications (2018) dergisinde yayımlanmıştır. CDCA3 (Cell division cycle associated 3) geninin kolorektal kanser hücrelerinde upregüle olduğunu ve NF-κB sinyalizasyonunu aktive ederek proliferasyonlarını desteklediğini öne sürmüştür.
International Journal of Molecular Sciences (2021) çalışması, bispesifik bir antikorun (ABL001) ve kemoterapötik ilaçların SW620 ksenograftında tümör ilerlemesi üzerindeki sinerjik etkisini araştırdı.
Bu makale Cells (2018) dergisinde yayınlanmıştır. Bu makalede, Bacopa monnieri, Bacopaside II ekstresi SW-620 ve diğer kolorektal kanser hücrelerinde antitümör aktiviteleri açısından araştırılmıştır.
SW-620 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
Aşağıda SW-620 kolon karsinom hücrelerini içeren birkaç çevrimiçi kaynak bulunmaktadır.
- SW-620 transfeksiyonu: Bu makalede SW-620 hücre hattının stabil transfeksiyonu için protokol kısaca açıklanmaktadır.
Aşağıdaki bağlantı SW620 hücre kültürü protokolünü içermektedir.
- SW-620 hücre kültürü protokolü: Bu bağlantı SW-620 hücre hattı hakkında temel bilgiler sağlayacaktır. Ayrıca SW-620 hücrelerini alt kültüre alma ve kriyoprezerve edilmiş ve çoğalan SW620 kültürlerini işleme protokolünü öğrenmenize yardımcı olacaktır.
- Hücre kültürü protokolleri: Bu video, yapışık hücre pasajlama, dondurma ve çözme protokollerini öğrenmek için harika bir kaynaktır.
SW620 Hücreleri Hakkında Sıkça Sorulan Sorular
Referanslar
- Siekmann, W., et al., Lidokain ve ropivakainin primer (SW480) ve metastatik (SW620) kolon kanseri hücre hatları üzerindeki etkisi. Oncol Lett, 2019. 18(1): p. 395-401.
- Hewitt, R.E., ve diğerleri, Bir kolon kanseri ilerleme modelinin doğrulanması. J Pathol, 2000. 192(4): p. 446-54.
- Thangaiyan, R., ve diğerleri , Kras mutasyon alt tipleri, survivin, Mcl-1, XIAP, cIAP2 ve MdmX'in yeni bir inhibitörü olan FL118'e karşı kolorektal kanser hücre duyarlılığını belirgin şekilde etkiler. Amerikan Translasyonel Araştırma Dergisi, 2021. 13(7): p. 7458.
- Petrocelli, G., et al., Kolorektal kanserin (CRC) önlenmesi ve tedavisi için bitki esansiyel yağlarında bulunan moleküller. Molecules, 2021. 26(4): p. 885.
- Yang, Z., et al., GRHL2, epitelyal-mezenkimal geçişi baskılayarak kolorektal kanser progresyonunu ve metastazı inhibe eder. Kanser biyolojisi ve tedavisi, 2019. 20(9): p. 1195-1205.