Hücre Kültürü Ortamları

En yaygın kullanılan sentetik hücre kültürü ortamlarından biri Minimum Essential Medium Eagle'dır (MEM). Harry Eagle tarafından geliştirilen bu besiyeri ilk olarak 1959 yılında piyasaya sürülmüş ve o zamandan beri tek tabakalı ve yapışık hücre hatlarında yetiştirilen çeşitli hücre türleri için popüler bir seçim haline gelmiştir.
EMEM'in içinde ne var?
EMEM, Eagle'ın minimum temel besiyerinin Earle'ün Dengeli Tuz Çözeltisi, esansiyel olmayan amino asitler, L-glutamin, sodyum piruvat ve sodyum bikarbonat içeren değiştirilmiş bir versiyonudur. Bu sodyum bikarbonat seviyesinin havadaki %5 CO2'de kullanılmak üzere tasarlandığına dikkat etmek önemlidir. Etkinliğini korumak için, kullanılmadığı zamanlarda ortamın karanlıkta 2°C ila 8°C arasında saklanması önerilir.
EMEM ne için kullanılır?
Eagle's minimal essential medium (EMEM) doku kültüründe hücreleri muhafaza edebilen bir hücre kültürü ortamıdır. Ortam daha yüksek konsantrasyonlarda amino asit içerir ve kültürlenmiş memeli hücrelerinin protein bileşimine daha doğru bir şekilde yaklaşılmasını sağlar. EMEM, fibroblastlar, insan karaciğer kanseri hücre hattı (HepG2) hücreleri ve insan fetal beyin progenitör türevli astrosit hücreleri (PDA) dahil olmak üzere çeşitli hücreleri yetiştirmek için kullanılabilir. Tipik olarak fetal sığır serumu (FBS), buzağı veya at serumu varlığında kullanılır.
EMEM'in diğer hücre kültürü ortamlarından farkı nedir?
EMEM ve Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) bazı benzerlikleri paylaşırken, aynı zamanda farklıdırlar. Her iki besiyerinde de protein bulunmaz ve bir hücreye enerji sağlamak ve onu doku kültüründe tutmak için gereken amino asitleri, tuzları, glikozu ve vitaminleri içerir. Ancak DMEM formülasyonu, EMEM'e kıyasla dört kat daha fazla vitamin ve amino asit ile iki ila dört kat daha fazla glikoz içerecek şekilde modifiye edilmiştir. EMEM'in de orijinal MEM formülasyonundan farklı olduğunu belirtmek gerekir.


Kalite Kontrol

Steril filtreli


Depolama ve Raf Ömrü

2°C ila +8°C arasında, ışıktan koruyarak saklayın.
Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6-8 hafta içinde kullanın.


Nakliye Koşulları

Ortam sıcaklığı


Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için dondurmaktan ve sık sık +37°C'ye kadar ısıtmaktan kaçının.
Besiyerini 37°C'nin üzerinde ısıtmayın veya mikrodalga fırın gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın.
Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı çıkarın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına kadar ısıtın.



Kompozisyon



Kategori
Bileşenler
Konsantrasyon (mg/L)


Amino Asitler
L-Arginin HCl
126.00


L-Sistin 2 HCl
31.30


L-Glutamin
292.00


L-Histidin HClH2O
42.00


L-İzolösin
52.00


L-Lösin
52.00


L-Lizin HCl
72.50


L-Metiyonin
15.00


L-Fenilalanin
32.00


L-Threonine
48.00


L-Triptofan
10.00


L-Tirozin 2 Na 2H2O
51.90


L-Valine
46.00


Vitaminler
Kolin Klorür
1.00


Vitaminler
D-Kalsiyum Pantotenat
1.00


Folik Asit
1.00


miyo-İnositol
2.00


Nikotinamid
1.00


Piridoksal HCl
1.00


Riboflavin
0.10


Tiamin HCl
1.00


İnorganik Tuzlar
CaCl2 2H2O
265.00


İnorganik Tuzlar
KCl
400.00


MgSO4
97.67


NaCl
6800.00


NaHCO3
2200.00


NaH2PO4
122.00


Diğer Bileşenler
D-Glikoz
1000.00


Diğer Bileşenler
Fenol Kırmızı Sodyum Tuzu
11.00

Cytion'ın Dondurma Ortamı CM-1, çözülme sonrası en yüksek düzeyde hücre canlılığı ve işlevselliği sağlamak için tasarlanmış son teknoloji ürünü bir kriyoprezervasyon ortamıdır. Bu çok yönlü besiyeri, hem insan hem de hayvan hücreleri dahil olmak üzere geniş bir hücre tipi yelpazesi için uygundur ve bu da onu çeşitli araştırma uygulamaları için önemli bir araç haline getirir. Kriyoprotektanlar ve temel besin maddelerinin titizlikle dengelenmiş bir kombinasyonuyla formüle edilen Freeze Medium CM-1, dondurma işlemi sırasında buz kristali oluşumunu ve hücresel stresi en aza indirir, böylece hücresel bütünlüğü korur.
Freeze Medium CM-1'in temel özellikleri şunlardır:

Geniş Uyumluluk: Birincil hücreler, kök hücreler ve yerleşik hücre hatları dahil olmak üzere çok çeşitli hücre tipleri için etkilidir.
Yüksek Canlılık: Çözülme sonrası hücre iyileşmesini ve canlılığını en üst düzeye çıkarmak için optimize edilmiş olup güvenilir deneysel sonuçlar sağlar.
Kullanıma Hazır: Hemen uygulama için uygun şekilde hazırlanır ve sterilize edilir, hazırlık süresini ve kontaminasyon riskini azaltır.
Geliştirilmiş Stabilite: Standart kriyoprezervasyon koşulları altında tutarlı performansı koruyarak tekrarlanabilir sonuçlar sağlar.
Uzun Raf Ömrü: CM-1, buzdolabında bir yıla kadar saklanabilen, serum içeren, kullanıma hazır bir kriyoprezervasyon ortamıdır.


Hücreleri Dondurmak için CM-1 Kullanımı

CM-1'i hem yapışık hem de süspansiyon hücrelerini dondurmak için kullanmak üzere aşağıdaki adımları izleyin

Yapışık hücreler için hücreleri yıkayın ve kültür substratından ayırın. Süspansiyon hücreleri için doğrudan bir sonraki adıma geçin.
Uygun konsantrasyonda olduklarından emin olmak için hücreleri sayın.
Hücreleri santrifüjleyerek peletleyin, ardından CM-1 dondurma ortamında yeniden süspanse edin.
Yeniden süspanse edilen hücreleri kriyoviyallere aktarın.
Hücreleri uzun süreli depolamaya aktarmadan önce yavaş dondurma yöntemi kullanın





Yöntem
Açıklama
Adımlar





❄️
Manuel Dondurma

Hücre canlılığını sağlamak için kademeli sıcaklık düşüşünü içeren adım adım bir yöntem

1️⃣ Hücreleri 40 dakika boyunca 4°C dondurucuda dondurma ortamına yerleştirin.
2️⃣ 24 saat boyunca -80°C dondurucuya aktarın.
3️⃣ Uzun süreli koruma için hücreleri sıvı nitrojen içinde saklayın



❄️
Bay Frosty'yi Kullanmak

Elektrik gücü olmadan kontrollü dondurma oranlarına izin veren kullanışlı bir cihaz

1️⃣ Hücreleri dondurma ortamı ile kriyoviyallerde hazırlayın.
2️⃣ Kriyoviyalleri Mr. Frosty kabına yerleştirin.
3️⃣ Sıvı nitrojene aktarmadan önce -80°C'de 24 saat saklayın



❄️
Kontrollü Fiyatlı Dondurucu

Thermo Fisher veya diğer üreticiler tarafından kontrollü sıcaklık düşürme için tasarlanmış yüksek hassasiyetli bir dondurucu

1️⃣ Cihazı sıcaklığı kademeli olarak düşürecek şekilde programlayın.
2️⃣ Hazırlanan hücreleri dondurucuya yerleştirin.
3️⃣ Dondurma döngüsünden sonra hücreleri sıvı nitrojene aktarın









Kriyoviyalleri -130°C'nin altındaki sıcaklıklarda veya uzun süreli muhafaza için sıvı nitrojen içinde saklayın.


İçindekiler

FBS, DMSO, Glikoz, Tuzlar içerir
Tamponlama kapasitesi: pH = 7,2 ila 7,6


Cytion Freeze Medium CM-1, kriyoprezervasyon için güvenilir bir çözüm sunarak çok çeşitli araştırma uygulamaları için çözülme sonrası yüksek hücre canlılığı ve işlevselliği sağlar.

Biyolojik araştırmaların benzersiz gereksinimlerini karşılamak üzere tasarlanmış Ham's F-12 besiyerinin özel bir modifikasyonu olan Ham's F-12K (Kaighn's) Besiyeri ile tanışın. Bu gelişmiş besiyeri, özellikle azaltılmış serum koşullarında primer insan hepatositlerinin yanı sıra sıçan ve tavuk karaciğer hücrelerinin yetiştirilmesini geliştirerek belirgin avantajlar sunar.

Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, hücre kültürü koşullarını optimize etmek için özenle formüle edilmiştir. Amino asitler ve sodyum piruvat gibi temel bileşenlerin yanı sıra putresin, timidin, hipoksantin ve çinko gibi ek elementlerin yüksek seviyelerini sağlayan zenginleştirilmiş bir bileşime sahiptir. Bu eklemeler, araştırmacıların besiyerini minimal serumla veya belirli hücre tipleri için tanımlanmış bileşenlerle desteklemesini sağlayarak hassas deneysel koşulları kolaylaştırır.

Özellikle, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium protein veya büyüme faktörü içermez. Sonuç olarak, büyüme faktörleri ve Fetal Sığır Serumu (FBS) ile takviye genellikle gereklidir, bu da araştırmacıların ortamı kendi spesifik hücre hatlarının gereksinimlerine göre uyarlamasına olanak tanır. Optimum performans için, FBS konsantrasyonu her hücre hattı için dikkatlice optimize edilmeli, böylece optimum büyüme ve işlevsellik sağlanmalıdır.

Fizyolojik pH'ı korumak için Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, bir sodyum bikarbonat tampon sistemi (2,5 g/L) kullanır ve ekim sırasında kontrollü bir %5-10 CO2 ortamı gerektirir. Bu, ortamın pH değerinin hücre büyümesi ve canlılığı için ideal aralıkta kalmasını sağlar
Kalite kontrol

20-25°C'de pH = 7,2 +/
- 0,02.
Her parti sterilite ve mikoplazma ve bakteri yokluğu açısından test edilmiştir.

Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37°C'ye kadar ısıtma ürünün kalitesini en aza indirir.
Besiyerini 37°C'den fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga cihazlar) kullanmayın.
Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın.
Temel besiyeri hariç tüm besiyerlerinin raf ömrü üretim tarihinden itibaren 8 haftadır.

Kompozisyon




Bileşenler
mg/L


İnorganik Tuzlar
Kalsiyum klorür x 2H2O
135,24



Bakır(II) sülfat x 5H2O
0,00



Demir (II) sülfat x 7H2O
0,83



Magnezyum klorür x 6H2O
105,72



Magnezyum sülfat x 7H2O
394,49



Potasyum klorür
283,29



Potasyum dihidrojen fosfat
58,52



Sodyum klorür
7597,20



di-Sodyum hidrojen fosfatsusuz
115,02



Çinko sülfat x 7H2O
0,14


Diğer Bileşenler
D(+)-Glikoz susuz
1260,00



Hipoksantin
4,08



DL-α-Lipoik asit
0,21



Fenol kırmızısı
3,00



Putresin x 2HCl
0,32



Sodyum piruvat
220,00



NaHCO3
2500,00



Timidin
0,73


Amino Asitler
L-Alanin
17,82



L-Arginin x HCl
421,40



L-Asparagin x H2O
30,02



L-Aspartik asit
26,62



L-Sistein x HCl x H2O
70,24



L-Glutamin
292,20



L-Glutamik asit
29,42



Glisin
15,01



L-Histidin x HCl x H2O
41,92



L-İzolösin
7,87



L-Lösin
26,24



L-Lizin x HCl
73,04



L-Metiyonin
8,95



L-Fenilalanin
9,91



L-Proline
69,06



L-Serin
21,02



L-Threonine
23,82



L-Triptofan
4,08



L-Tirozin
10,87



L-Valine
23,42


Vitaminler
D(+)-Biyotin
0,07



D-Kalsiyum pantotenat
0,48



Kolin klorür
13,96



Folik asit
1,32



miyo-İnositol
18,02



Nikotinamid
0,04



Piridoksin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Tiamin x HCl
0,34



B12 Vitamini
1,36

RPMI ortamı olarak da bilinen RPMI 1640 Ortamı, çeşitli memeli hücrelerini yetiştirmek için biyolojik araştırmalarda yaygın olarak kullanılan çok yönlü bir hücre kültürü ortamıdır. George E. Moore, Robert E. Gerner ve H. Addison Franklin tarafından 1966 yılında ünlü Roswell Park Kapsamlı Kanser Merkezi'nde geliştirilen bu besiyeri, adını Roswell Park Memorial Enstitüsü'ndeki (RPMI) kökeninden almıştır.
Başlangıçta hem süspansiyon hem de tek tabakalı kültürlerde insan lösemik hücrelerinin büyümesini desteklemek için tasarlanan RPMI 1640 Besiyeri, araştırmacılar ve ticari tedarikçiler tarafından yapılan modifikasyonlarla çok çeşitli memeli hücreleri için uygun hale gelmiştir. HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrositler ve karsinomlar gibi hücre hatlarıyla son derece uyumludur.
RPMI 1640 Medium, benzersiz bileşimi nedeniyle diğer hücre kültürü ortamlarından ayrılır. Önemli miktarda fosfat, amino asit ve vitamin içerir. Özellikle, Eagle's Minimal Essential Medium veya Dulbecco's Modified Eagle Medium'da bulunmayan biyotin, B12 vitamini ve PABA içerir. Ayrıca, RPMI 1640 Medium önemli ölçüde yüksek konsantrasyonlarda inositol ve kolin vitaminleri sergiler. Ancak protein, lipid veya büyüme faktörü içermez. Sonuç olarak, hücre büyümesi için en uygun koşulları sağlamak üzere genellikle %10 Fetal Sığır Serumu (FBS) ile takviye gereklidir.
RPMI 1640 Medium'un tamponlama sistemi sodyum bikarbonata dayanır ve fizyolojik olarak uygun bir pH'ı korumak için %5-10 CO2 ortamı gerektirir. İndirgeyici ajan glutatyonun dahil edilmesi, bu ortamı diğerlerinden daha da ayırır.
Kalite Kontrol

Steril filtreli


Depolama ve Raf Ömrü

2°C ila +8°C arasında, ışıktan koruyarak saklayın.
Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6-8 hafta içinde kullanın.


Nakliye Koşulları

Ortam sıcaklığı


Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için dondurmaktan ve sık sık +37°C'ye kadar ısıtmaktan kaçının.
Besiyerini 37°C'nin üzerinde ısıtmayın veya mikrodalga cihazlar gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın.
Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı çıkarın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına kadar ısıtın.



Kompozisyon




Kategori
Bileşenler
Konsantrasyon (mg/L)


Amino Asitler
Glisin
10.00



L-Alanil-L-Glutamin
434.40



L-Arginin
200.00



L-AsparaginH2O
56.82



L-Aspartik Asit
20.00



L-Sistin 2HCl
65.20



L-Glutamik Asit
20.00



L-Histidin HClH2O
20.27



L-Hidroksi-L-Prolin
20.00



L-İzolösin
50.00



L-Lösin
50.00



L-Lizin HCl
40.00



L-Metiyonin
15.00



L-Fenilalanin
15.00



L-Proline
20.00



L-Serin
30.00



L-Threonine
20.00



L-Triptofan
5.00



L-Tirozin 2Na 2H2O
28.83



L-Valine
20.00


Vitaminler
p-Amino Benzoik Asit
1.00



D-Biotin
0.20



Kolin Klorür
3.00



D-Kalsiyum Pantotenat
0.25



Folik Asit
1.00



miyo-İnositol
35.00



Nikotinamid
1.00



Piridoksin HCl
1.00



Riboflavin
0.20



Tiamin HCl
1.00



B12 Vitamini
0.005


İnorganik Tuzlar
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Diğer Bileşenler
D-Glikoz
2000.00



İndirgenmiş L-Glutatyon
1.00



Fenol Kırmızı Sodyum Tuzu
5.30

DMEM: Ham's F12, biyolojik araştırmalar için hücre kültüründe yaygın olarak tanınan ve yaygın olarak kullanılan bir bazal ortamdır. Özellikle Fetal Sığır Serumu (FBS) ile desteklendiğinde, çeşitli memeli hücre hatlarının büyümesi için temel bir besin kaynağı olarak hizmet eder.

Bu benzersiz formülasyon Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ve Ham's F-12'yi (Ham's Nutrient Mixture F-12) hassas bir 1:1 oranında birleştirir. L-glutamin ilavesi bileşimini daha da geliştirir.

Eagle's Minimal Essential Medium'dan (EMEM) türetilen DMEM, selefine kıyasla daha yüksek bir amino asit ve vitamin konsantrasyonu sunar. Buna karşılık, Ham's F-12, Ham's F-10 besiyerine dayanır ve tamamlayıcı bir dizi temel bileşen sağlar.

Optimum hücre büyümesini desteklemek için DMEM:Ham's F12'yi tipik %5-10 konsantrasyonda FBS ile takviye etmek yaygın bir uygulamadır. Ortamda büyüme hormonları, lipidler ve hücresel gelişim için çok önemli proteinler bulunmadığından bu ekleme gereklidir.

DMEM:Ham's F12 bir pH tampon sistemi içerir ve genellikle bir pH göstergesi olan fenol kırmızısı ile desteklenir. DMEM:Ham's F12 veya bikarbonat tampon sistemi kullanan herhangi bir ortamda kültürlenen hücreler, uygun pH seviyelerini korumak için %5-10'luk kontrollü bir CO2 ortamı gerektirir.


Kalite Kontrol

Steril filtreli


Depolama ve Raf Ömrü

2°C ila +8°C arasında, ışıktan koruyarak saklayın.
Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6-8 hafta içinde kullanın.


Nakliye Koşulları

Ortam sıcaklığı


Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için dondurmaktan ve sık sık +37°C'ye kadar ısıtmaktan kaçının.
Besiyerini 37°C'nin üzerinde ısıtmayın veya mikrodalga fırın gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın.
Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı çıkarın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına kadar ısıtın.


Kompozisyon



Kategori
Bileşenler
Konsantrasyon (mg/L)


Amino Asitler
Glisin
18.75


L-Alanin
4.45


L-Arginin HCl
147.50


L-Asparagin H₂O
7.50


L-Aspartik Asit
6.65


L-Sistein HCl H₂O
17.56


L-Sistin 2 HCl
31.29


L-Glutamik Asit
7.35


L-Glutamin
365.00


L-Histidin HCl H₂O
31.48


L-İzolösin
54.47


L-Lösin
59.05


L-Lizin HCl
91.25


L-Metiyonin
17.24


L-Fenilalanin
35.48


L-Proline
17.25


L-Serin
26.25


L-Threonine
53.45


L-Triptofan
9.02


L-Tirozin Disodyum Tuzu
48.10


L-Valine
52.85


Vitaminler
D-Biotin
0.0035


Kolin Klorür
8.98


D-Kalsiyum Pantotenat
2.24


Folik Asit
2.66


miyo-İnositol
12.60


Nikotinamid
2.02


Piridoksin HCl
0.031


Piridoksal HCl
2.00


Riboflavin
0.219


Tiamin HCl
2.17


B12 Vitamini
0.68


İnorganik Tuzlar
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Diğer Bileşenler
D-Glikoz
3151.00


Hipoksantin
2.40


HEPES
3574.50


Linoleik Asit
0.042


Lipoik Asit
0.105


Fenol Kırmızı Sodyum Tuzu
8.63


Putresin 2 HCl
0.081


Sodyum Piruvat
55.00


Timidin
0.365

McCoy's 5A Medium, birincil hücre kültürlerinde virüslerin büyümesini ve çoğalmasını kolaylaştırmak için tasarlanmış, şiddetle tavsiye edilen ve özel bir besiyeridir. Çeşitli biyolojik araştırma uygulamalarında olağanüstü performansı ile önemli bir tanınırlık kazanmıştır. McCoy's 5A Medium'un öne çıkan uygulamalarından biri, insan kolon karsinomu hücre hatlarının kültürlenmesinde kullanılmasıdır. Özellikle, lösin bakımından zengin tekrar içeren G-protein-bağlı reseptör (LGR5) ve kolon kanserinin metastazındaki rolü üzerine yapılan çalışmalarda kullanılmıştır. Bu besiyeri, HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b ve TENN dahil olmak üzere çeşitli kolon karsinomu hücre hatlarının kültürlenmesinde etkili bir şekilde kullanılmıştır ve araştırmacıların kolon kanseri metastazının altında yatan mekanizmaları daha derinlemesine incelemelerini sağlamıştır. Kanser araştırmalarındaki uygulamasına ek olarak, McCoy's 5A Ortamı osteoblastların incelenmesinde de vazgeçilmez olduğu kanıtlanmıştır. Standart hücre kültürü ortamlarında kalsiyum eksikliği olan hidroksiapatitin iyon reaktivitesini araştıran araştırmacılar, osteoblastları kültürlemek için bu ortamı kullanmıştır. Bu uygulama, osteoblastlar ve kalsiyum eksikliği olan hidroksiapatit arasındaki etkileşimlerin daha iyi anlaşılmasını kolaylaştırarak kemik araştırmaları alanındaki ilerlemelere katkıda bulunmuştur. McCoy's 5A Ortamı, karaciğer tümör hücrelerine optimal destek sağlamak için Basal Medium Eagle'da bulunan amino asitleri modifiye ederek titizlikle formüle edilmiştir. Bu zenginleştirilmiş formülasyon, çeşitli yerleşik hücre hatlarının yanı sıra birincil hücreler için de uygun olmasını sağlayarak, çeşitli araştırma ortamlarında çok yönlülüğünü ve uygulanabilirliğini daha da artırmaktadır. McCoy's 5A Medium, biyokimyasal ve fizyolojik etkilerini karaciğer tümör hücrelerinin ötesine genişletir. Kemik iliği, deri, diş eti, böbrek, omentum, adrenal, akciğer, dalak, sıçan embriyosu ve diğer hücre tiplerinin birincil kültürlerinde büyümeyi desteklemek için başarıyla kullanılmıştır. Bu geniş uygulama yelpazesi, kapsamlı biyolojik araştırmalar için çeşitli hücre tiplerinin büyümesini ve bakımını desteklemede McCoy's 5A Medium'un geniş kullanım alanını kanıtlamaktadır. Formülasyon Bu McCoy's 5A ortamı (modifiye), 3,0 g/L glikoz, stabil glutamin, 2,0 mM sodyum piruvat ve 2,2 g/L NaHCO3 içerir. Kalite kontrol pH = 7,2 +/
- 0,02, 20-25 °C'de.  Her parti sterillik ve mikoplazma ve bakteri bulunmadığı konusunda test edilmiştir. Saklama Karanlıkta +2°C ila +8°C arasında buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37°C'ye kadar ısıtma, ürünün kalitesini en aza indirir.  Ortamı 37°C'nin üzerine ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga fırınlar) kullanmayın.  Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın. Temel besiyeri hariç tüm besiyerlerinin raf ömrü, açılma tarihinden itibaren 6 ila 8 haftadır. Bileşim Bileşenler mg/L İnorganik TuzlarKalsiyum klorür x 2H2O132,00 Magnezyum sülfat97,67 Potasyum klorür400 Sodyum klorür6.460 Disodyum hidrojen fosfat (susuz)504,00 Diğer BileşenlerD(+)-Glikoz (susuz)3.000 Glutatyon (indirgenmiş)0 Et Peptonu600 Fenol kırmızısı sodyum tuzu11 Amino AsitlerL-Alanin13 L-Arginin x HCl42,1 L-Asparagin x H2O45,03 L-Aspartik asit19,97 L-Sistein x HCl x H2O31,75 L-Glutamin (kararlı)21 L-Glutamik asit22 Glisin7,51 L-Histidin x HCl x H2O20,96 L-Hidroksiprolin19,67 L-İzolösin39,3 L-Lösin39,36 L-Lizin x HCl36,54 L-Metiyonin14,92 L-Fenilalanin16,52 L-Prolin17,27 L-Serin26,28 L-Treonin17,87 L-Triptofan3,06 L-Tirozin disodyum tuzu26,10 L-Valin17,57 Vitaminlerp-Aminobenzoik asit1 Askorbik asit0,56 D(+)-Biotin0 D-Kalsiyum pantotenat0,2 Kolin klorür5 Folik asit10 Miyo-inositol36 Nikotinamid0,5 Nikotinik asit0 Piridoksal HCl0,5 Piridoksin HCl0,5 Riboflavin0 Tiamin HCl0 B12 vitamini2

Medium 199, birincil eksplantların yetiştirilmesi için özel olarak formüle edilmiş çok yönlü ve yaygın olarak kullanılan bir hücre kültürü ortamıdır. Bu kapsamlı besiyeri, çeşitli hücre tipleri için tam olarak tanımlanmış bir besin kaynağı sağlamak üzere temel vitaminleri, amino asitleri ve diğer faktörleri bir araya getirir. Özellikle transformasyona uğramamış hücreler için uygundur ve biyolojik araştırmalar için paha biçilmez bir araçtır.
Medium 199 bu alanda bir dizi uygulama sunmaktadır. Kümülüs-oosit kompleksini (COC) etkili bir şekilde muhafaza edebilir ve oositlerin in vitro olgunlaşmasını destekleyebilir. Ayrıca, Alman Holstein ineklerinden ovum toplanması sırasında aspirasyon hatlarının durulanmasında kullanılır. Ayrıca, Medium 199 sıçanlardan elde edilen kardiyak endotelyal hücrelerin kültürü için mükemmel bir ortam görevi görmektedir. Bu uygulamalar, Medium 199'un çok yönlülüğünü ve çeşitli deneysel ihtiyaçlara uyarlanabilirliğini göstermektedir.
Tarihçe
1950'lerde Medium 199'un geliştirilmesi doku kültürü ortamlarında önemli bir ilerlemeye işaret etmiştir. Bu ürünün piyasaya sürülmesinden önce, birçok kültür ortamı hayvan kaynaklı ürünlere ve doku özlerine dayanıyordu. Ancak Morgan ve meslektaşları hücre kültürleri için tamamen tanımlanmış bir besin kaynağı formüle ederek bu alanda devrim yarattı. Vitaminlerin, amino asitlerin ve diğer faktörlerin farklı kombinasyonlarını içeren deneyleri sayesinde, Medium 199'un olağanüstü büyümeyi teşvik edici özelliklerini keşfettiler.
Kalite kontrol

20-25°C'de pH = 7,2 +/
- 0,02.
Her parti sterilite ve mikoplazma ve bakteri yokluğu açısından test edilmiştir.

Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37° C'ye kadar ısıtma ürünün kalitesini en aza indirir.
Besiyerini 37° C'den daha fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga cihazlar) kullanmayın.
Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın.
Temel besiyeri dışındaki tüm besiyerlerinin raf ömrü üretim tarihinden itibaren 8 haftadır.

Kompozisyon




Bileşenler
mg/L


İnorganik Tuzlar
Kalsiyum klorür x 2H2O
264,92



Demir (III) nitrat x 9H2O
0,72



Magnezyum sülfat
97,67



Potasyum klorür
400,00



Sodyum asetat x 3H2O
82,95



Sodyum klorür
6,800.00



Sodyum dihidrojen fosfat x H2O
140,00


Diğer Bileşenler
Adenin sülfat
10,00



AMP
0,20



ATP
1,00



Kolesterol
0,20



2'-Deoksiriboz
0,50



D(+)-Glikoz susuz
1,000.00



Glutatyon (kırmızı)
0,05



Guanin x HCl
0,30



Hipoksantin
0,30



Fenol kırmızısı
10,00



D-Riboz
0,50



Timin
0,30



Tween 80
4,90



Urasil
0,30



Ksantin
0,30



NaHCO3
2,200.00


Amino Asitler
L-Alanin
25,00



L-Arginin x HCl
70,00



L-Aspartik asit
30,00



L-Sistein x HCl x H2O
0,10



L-Sistin
20,00



L-Glutamin stabil
149,00



L-Glutamik asit
67,00



Glisin
50,00



L-Histidin x HCl x H2O
21,88



L-Hidroksiprolin
10,00



L-İzolösin
20,00



L-Lösin
60,00



L-Lizin x HCl
70,00



L-Metiyonin
15,00



L-Fenilalanin
25,00



L-Proline
40,00



L-Serin
25,00



L-Threonine
30,00



L-Triptofan
10,00



L-Tirozin
40,00



L-Valine
25,00


Vitaminler
4-Amino benzoik asit
0,05



Askorbik asit
0,05



D(+)-Biyotin
0,01



Kalsiferol
0,10



D-Kalsiyum pantotenat
0,01



Kolin klorür
0,50



Folik asit
0,01



miyo-İnositol
0,05



Menadion
0,01



Nikotinik asit
0.025



Nikotinamid
0.025



Piridoksal x HCl
0.025



Piridoksol x HCl
0.025



Riboflavin
0,01



DL-α-Tokoferol fosfat disodyum tuzu
0,01



Tiamin x HCl
0,01



A Vitamini asetat
0,14

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) hücre kültürü için kompleks ve zenginleştirilmiş bir büyüme ortamıdır. IMDM, selenyum içeren DMEM'in bir modifikasyonudur ve DMEM'e kıyasla ek amino asitler, vitaminler ve inorganik tuzlara sahiptir. Demir içermez ve Fetal Sığır Serumu (FBS) ile takviye gerektirir. IMDM bir sodyum bikarbonat tampon sistemi kullanır ve fizyolojik pH'ı korumak için %5-10 CO2 ortamı gerektirir.
IMDM, Jurkat, COS-7 ve makrofaj hücreleri dahil olmak üzere hızla çoğalan, yüksek yoğunluklu hücre kültürleri için çok uygundur. Bir dizi hücre kültürü uygulaması için mevcut olan çeşitli IMDM modifikasyonları, ortam seçici aracı kullanılarak bulunabilir. Sıvı besiyerleri tüm hücre kültürü uygulamaları için gerekli besinleri sağlar. Yüksek kaliteli hücre kültürü ortamlarımızın her biri, kültür ortamının tutarlı performansı ve stabilitesi için gerekli olan ilk yayınlanan formüle veya modifikasyonlara göre üretilmektedir.
IMDM ve DMEM
IMDM ferrik nitrat yerine potasyum nitrat, HEPES ve sodyum piruvat içerir. IMDM'deki ek bileşenler onu özel hücre tipleri ve spesifik uygulamalar için DMEM'den daha uygun hale getirir.
IMDM vs RPMI
IMDM ve RPMI, PMA/iyonomisin stimülasyonu ile ilgili olabilecek farklı formülasyonlara sahiptir. Önemli bir fark Ca2+ konsantrasyonudur. RPMI 0,42 mM Ca2+ içerirken IMDM 1,49 mM içerir.
Kalite kontrol

20-25°C'de pH = 7,2 +/
- 0,02.
Her parti sterilite ve mikoplazma ve bakteri yokluğu açısından test edilmiştir.

Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37° C'ye kadar ısıtma ürünün kalitesini en aza indirir.
Besiyerini 37° C'den daha fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga cihazlar) kullanmayın.
Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın.
Temel besiyeri dışındaki tüm besiyerlerinin raf ömrü üretim tarihinden itibaren 8 haftadır.
Kompozisyon




Bileşenler
mg/L


İnorganik Tuzlar
Kalsiyum klorür x 2 H2O
219,00



Potasyum klorür
330,00



Potasyum nitrat
0.076



Magnezyum sülfat susuz
97,73



Sodyum klorür
4,505.00



Sodyum dihidrojen fosfat susuz
109,00



Sodyum selenit
0,02


Diğer Bileşenler
D(+)-Glikoz susuz
4,500.00



HEPES
5,958.00



Sodyum piruvat
110,00



Fenol kırmızısı
15,00


Amino Asitler
L-Alanin
25,00



L-Arginin x HCl
84,00



L-Asparagin x H2O
25,00



L-Aspartik asit
30,00



L-Sistin x 2HCl
91,24



L-Glutamin
584,00



L-Glutamik asit
75,00



Glisin
30,00



L-Histidin x HCl x H2O
42,00



L-İzolösin
104,80



L-Lösin
104,80



L-Lizin x HCl
146,20



L-Metiyonin
30,00



L-Fenilalanin
66,00



L-Proline
40,00



L-Serin
42,00



L-Threonine
95,20



L-Triptofan
16,00



L-Tirozin x 2Na
104,20



L-Valine
93,60


Vitaminler
D(+)-Biyotin
0.013



D-Kalsiyum pantotenat
4,00



Kolin klorür
4,00



Folik asit
4,00



miyo-İnositol
7,20

Ham's F-12 Nutrient Mix olarak da bilinen Ham's F-12 Medium, özellikle hücre kültürü için tasarlanmış yaygın olarak kullanılan bir bazal besiyeridir. Çin Hamster Yumurtalık (CHO) hücreleri, akciğer hücreleri ve fare L hücrelerinin serumsuz, tek hücreli kaplanması için yaygın olarak kullanılmaktadır. Ayrıca Ham's F-12, Klonal Toksisite Deneyi (CTA) için tercih edilen ortamdır.
Önemli avantajlarından biri, serum takviyesine ihtiyaç duymadan hücre büyümesini destekleme yeteneğidir. Bu, serum bileşenlerinin neden olduğu potansiyel etkileşimi ortadan kaldırarak tutarlı ve güvenilir deneysel sonuçlar sağlar. Ham's F-12 Medium, serumsuz bir kültür ortamı sağlayarak araştırmacılara araştırmaları üzerinde daha fazla kontrol sunar.
Ham's F-12 Medium'un bir diğer önemli özelliği de tek hücreli kaplamaya uygun olmasıdır. Bu da onu CHO hücreleri, akciğer hücreleri ve fare L hücreleri dahil olmak üzere çeşitli hücre hatları için mükemmel bir seçim haline getirir. Besiyerinin optimize edilmiş besin bileşimi, tek tek hücrelerin verimli bir şekilde bağlanmasını ve büyümesini kolaylaştırarak, gelişmiş tekrarlanabilirliğe sahip homojen hücre kültürlerinin oluşturulmasını sağlar.
Ayrıca Ham's F-12 Medium, Klonal Toksisite Testi (CTA) için tercih edilen ortam olarak kabul görmüştür. Bu deney, maddelerin hücreler üzerindeki sitotoksik etkilerinin değerlendirilmesinde kritik bir rol oynamaktadır. Araştırmacılar, CTA'da Ham's F-12 Medium kullanarak çeşitli bileşiklerin veya tedavilerin tek tek hücreler üzerindeki etkisini doğru bir şekilde değerlendirebilir ve toksikolojik profillere ilişkin değerli bilgiler sağlayabilir.
Kalite kontrol

20-25°C'de pH = 7,2 +/
- 0,02.
Her parti sterilite ve mikoplazma ve bakteri yokluğu açısından test edilmiştir.

Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37° C'ye kadar ısıtma ürünün kalitesini en aza indirir.
Besiyerini 37° C'den daha fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga cihazlar) kullanmayın.
Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın.
Temel besiyeri dışındaki tüm besiyerlerinin raf ömrü üretim tarihinden itibaren 8 haftadır.

Kompozisyon




Bileşenler
mg/L


İnorganik Tuzlar
Kalsiyum klorür x 2H2O
44,00



Bakır(II) sülfat x 5H2O
0,00



Demir (II) sülfat x 7H2O
0,83



Magnezyum klorür x 6H2O
122,00



Potasyum klorür
223,65



Sodyum klorür
7599,00



di-Sodyum hidrojen fosfatsusuz
142,04



Çinko sülfat x 7H2O
0,86


Diğer Bileşenler
D(+)-Glikoz susuz
1801,60



Hipoksantin
4,08



Linoleik asit
0,08



DL-α-Lipoik asit
0,21



Fenol kırmızısı
1,20



Putresin x 2HCl
0,16



Sodyum piruvat
110,00



Timidin
0,73



NaHCO3
1176,00


Amino Asitler
L-Alanin
8,91



L-Arginin x HCl
210,70



L-Asparagin x H2O
15,01



L-Aspartik asit
13,31



L-Sistein x HCl x H2O
35,12



L-Alanil-L-Glutamin
217,30



L-Glutamik asit
14,71



Glisin
7,51



L-Histidin x HCl x H2O
20,96



L-İzolösin
3,94



L-Lösin
13,12



L-Lizin x HCl
36,54



L-Metiyonin
4,48



L-Fenilalanin
4,96



L-Proline
34,53



L-Serin
10,51



L-Threonine
11,91



L-Triptofan
2,04



L-Tirozin
5,44



L-Valine
11,71


Vitaminler
D(+)-Biyotin
0,01



D-Kalsiyum pantotenat
0,24



Kolin klorür
13,96



Folik asit
1,32



miyo-İnositol
18,02



Nikotinamid
0,04



Piridoksin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Tiamin x HCl
0,34



B12 Vitamini
1,36

NCI-H295R Hücre Büyüme Ortamı
Özel NCI-H295R hücreleri de dahil olmak üzere memeli hücre hatlarının büyümesini ve bakımını teşvik etmek için özel olarak tasarlanmış, ustalıkla hazırlanmış bir besin çözümü olan gelişmiş NCI-H295R Hücre Büyüme Ortamını keşfedin. Bu besiyeri, Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ve Ham's F-12'nin (Nutrient Mixture F-12) hassas bir 1:1 oranında benzersiz karışımıyla öne çıkar ve hücre kültürünün karmaşık ihtiyaçlarını karşılamak için temel takviyelerle zenginleştirilmiştir.
Üstün Hücre Kültürü Performansı için Geliştirilmiş Formülasyon

Takviye Edilmiş Temel: DMEM'in yüksek amino asit ve vitamin konsantrasyonlarını Ham's F-12'nin çeşitli besin maddeleriyle birleştiren temel ortam zaten zengindir. Bu güçlü karışıma, önemli büyüme faktörleri, hormonlar ve proteinler sağlayan %5 Fetal Sığır Serumu (FBS) ekledik.
Özel Katkı Maddeleri: FBS'nin ötesinde, bu besiyeri İnsülin, Transferrin, Sığır Serum Albümini, Selenöz Asit ve Lineloik Asit gibi kritik takviyelerle güçlendirilmiştir. Bu ilaveler belirli hücresel gereksinimleri karşılayarak gelişmiş hücre büyümesini, metabolik işlevi ve genel sağlığı destekler.
L-Glutamin Desteği: L-glutamin varlığı, temel metabolik süreçleri destekleyerek ve güçlü hücre çoğalmasını teşvik ederek besiyerinin etkinliğini daha da artırır.

Hücre Kültürü için Optimize Edilmiştir

pH Kontrollü Ortam: Bir bikarbonat tampon sistemi ve fenol kırmızısı indikatörü içeren ortam, stabil bir pH ortamı sağlar. 5 CO2 atmosferi için optimize edilmiştir ve hassas pH izleme ve ayarlamasına olanak tanır.
Kalite ve Saflık: Her bir temel besiyeri lotu sterilite, mikoplazma ve bakteri açısından titiz testlerden geçirilerek besiyerinin bütünlüğü sağlanır. PH bakımı yapılan bir besiyeri ile bu besiyerinin tutarlı kalitesine ve performansına güvenebilirsiniz.

Kullanım ve Depolama
Besiyerini +2°C ila +8°C arasında, ışıktan uzakta buzdolabında saklayarak kalitesini koruyun. Etkinliğini korumak için donma veya aşırı ısınma gibi aşırı uçlardan kaçının. Kısmi kullanım için, gerekli miktarı oda sıcaklığında hafifçe ısıtın ve besiyerinin bileşenlerinden ödün vermeden uygun duruma getirilmesini sağlayın.
Raf ömrü
Üretim tarihinden itibaren 8 haftalık raf ömrüne sahip olan NCI-H295R Hücre Büyütme Ortamı, hücre kültürü ihtiyaçlarınız için güvenilir bir seçimdir ve araştırmanızın canlılığını ve üretkenliğini sağlar.

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) biyolojik araştırmalarda çok çeşitli memeli hücrelerinin büyümesini desteklemek için tasarlanmış çok yönlü ve yaygın olarak kullanılan bir bazal ortamdır. Primer fibroblastlar, nöronlar, glial hücreler, HUVEC'ler, düz kas hücrelerinin yanı sıra HeLa, 293, Cos-7 ve PC-12 gibi popüler hücre hatlarının kültürü için ideal bir ortam olarak hizmet eder.
DMEM'i diğer ortamlardan ayıran şey benzersiz bileşimidir. Orijinal Eagle's Minimal Essential Medium'a kıyasla amino asit ve vitamin konsantrasyonunda dört katlık etkileyici bir artış içerir. Başlangıçta düşük glikoz (1 g/L) ve sodyum piruvat ile geliştirilen DMEM, sıklıkla sodyum piruvat içeren veya içermeyen daha yüksek glikoz seviyeleri ile kullanılmaktadır. DMEM'in protein, lipid veya büyüme faktörü içermemesi, takviye gerektirmesi dikkat çekicidir. Optimum büyümeyi sağlamak için yaygın bir yaklaşım DMEM'i %10 Fetal Sığır Serumu (FBS) ile desteklemektir. Ayrıca DMEM, fizyolojik pH'ı korumak için %5-10 CO2 ortamı gerektiren bir sodyum bikarbonat tampon sistemi kullanır.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM), çeşitli yapışık hücre fenotiplerinin büyüme ihtiyaçlarını karşılayan, hücre ve doku kültürü için tanımlanmış ortamlar arasında oldukça saygındır. Dulbecco'nun modifikasyonu olarak bilinen gelişmiş ek formülasyon sayesinde 1950'lerde tavuk hücrelerini yetiştirmek için geliştirilen orijinal Eagle's Medium'u aşmaktadır. Bu modifikasyon, belirli amino asitlerin ve vitaminlerin içeriğini orijinal besiyerine kıyasla dört kata kadar önemli ölçüde artırır.
Hücre kültürü alanında DMEM, birincil hücreler, kök hücreler ve dönüştürülmüş hücreler dahil olmak üzere farklı hücre tipleri için büyüme ortamı olarak hayati bir rol oynamaktadır. Araştırmacılar ayrıca ilaç keşfi, doku mühendisliği ve hücre sinyal yollarının incelenmesi gibi çok çeşitli araştırma uygulamaları için DMEM'in değiştirilmiş versiyonunu kullanmaktadır.

Kalite Kontrol

Steril filtreli


Depolama ve Raf Ömrü

2°C ila +8°C arasında, ışıktan koruyarak saklayın.
Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6-8 hafta içinde kullanın.


Nakliye Koşulları

Ortam sıcaklığı


Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için dondurmaktan ve sık sık +37°C'ye kadar ısıtmaktan kaçının.
Besiyerini 37°C'nin üzerinde ısıtmayın veya mikrodalga fırın gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın.
Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı çıkarın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına kadar ısıtın.


Kompozisyon



Kategori
Bileşenler
Konsantrasyon (mg/L)


Amino Asitler
Glisin
30.00



L-Arginin HCl
84.00



L-Sistin 2 HCl
62.57



L-Glutamin
584.00



L-Histidin HClH2O
42.00



L-İzolösin
105.00



L-Lösin
105.00



L-Lizin HCl
146.00



L-Metiyonin
30.00



L-Fenilalanin
66.00



L-Serin
42.00



L-Threonine
95.00



L-Triptofan
16.00



L-Tirozin 2 Na 2H2O
103.79



L-Valine
94.00


Vitaminler
Kolin klorür
4.00



D-Kalsiyum Pantotenat
4.00



Folik Asit
4.00



miyo-İnositol
7.20



Nikotinamid
4.00



Piridoksal HCl
4.00



Riboflavin
0.40



Tiamin HCl
4.00


İnorganik Tuzlar
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Diğer Bileşenler
D-Glikoz
4500.00



Fenol Kırmızı Sodyum Tuzu
15.90



Sodyum Piruvat
110.00