Ramos Hücreleri - B-Hücreli Lenfoma Araştırması: Ramos Hücrelerinin Önemi
Ramos hücreleri biyomedikal araştırmalarda yaygın olarak kullanılan bir B lenfosit hücre hattıdır. Özellikle immünoloji ve kanser çalışmalarında birincil uygulama alanı bulmaktadır. Araştırmacılar bu hücreleri sitotoksik ilaçları değerlendirmek ve B hücresi yüzey antijenlerini, mutasyonları ve apoptotik mekanizmaları incelemek için kullanmaktadır.
Ramos hücresinin kökeni ve genel özellikleri s
Bir hücre hattının kökenini ve temel özelliklerini anlamak, araştırmanız için uygunluğuna karar vermede çok önemli bir rol oynar. Bu nedenle, üzerinde herhangi bir çalışmaya başlamadan önce bu bilgileri iyice değerlendirmeniz tavsiye edilir. Bu bölüm aşağıdaki sık sorulan soruları kapsamaktadır: Ramos kanser hücre hattı nedir? Ramos hücre hattı CD19 nedir? Ramos hücre hattı CD20 nedir? Ramos hücrelerinin kökeni nedir? Ramos hücre hattındaki belirteçler nelerdir? Ramos hücre boyutu nedir? Ramos hücre hattının morfolojisi nedir?
- Ramos hücre hattı 1972 yılında kurulmuştur. Bu hücreler, Amerikan tipi Burkitt lenfomalı 3 yaşındaki Kafkasyalı bir çocuğun asit sıvısından elde edilmiştir [1].
- İmmünoglobulin M (IgM), CD19, CD20 ve CD22 gibi temel B hücresi belirteçlerini ifade ederler.
- Ramos hücreleri Epstein bar virüsü-negatif hücrelerdir. Ancak kalıcı olarak Epstein-Barr virüsü-pozitif hücrelere dönüşebilirler.
- Bu B lenfoblast hücreleri yuvarlak şekilli bir morfolojiye sahiptir.
Ramos mavi hücreleri vs Ramos B hücreleri
Ramos mavi hücreleri ve Ramos B hücrelerinin her ikisi de insan Burkitt lenfoma hücreleridir. Her ikisi de Epstein bar virüsü için negatiftir. Bu hücreler arasındaki fark, Ramos mavi hücrelerinin SEAP (salgılanan embriyonik alkalin fosfat) adı verilen NF-κB/AP-1 ile indüklenebilir bir raportör geni ifade etmesi, beyaz Ramos hücrelerinin ise ifade etmemesidir.
Ramos Hücrelerinin Kültürlenmesi
Makalenin bu bölümü, Ramos hücreleriyle ilgili zorunlu hücre kültürü bilgilerini öğrenmenize yardımcı olmaya adanmıştır. Burada şunları öğreneceksiniz: Hücre hatlarının ikiye katlanma süresi nedir? Önerilen ortam nedir? Ramos hücrelerini nasıl kültürlersiniz?
Ramos Hücrelerini Kültürlemek için Önemli Noktalar
|
İki Katına Çıkma Süresi: |
Ramos hücrelerinin ikiye katlanma süresi kabaca 20,4 ± 1,5 saattir. Ancak, sağlanan hücre kültürü koşullarına bağlı olarak sapma gösterebilir. |
|
Yapışık veya Süspansiyon Halinde: |
Ramos hücreleri süspansiyon halinde büyür. |
|
Hücre yoğunluğu: |
Ramos hücre hattı için optimum hücre yoğunluğu 3 x105 hücre/ml 'dir. Alt kültürleme için süspansiyon halindeki hücreler santrifüjleme yoluyla toplanır. Hücreler taze besiyeri ile eklenir ve dikkatlice yeniden süspanse edilir. Daha sonra, hücreler 3 ila 9 x105 hücre/ml yoğunlukta yeni şişeye dökülmüştür. |
|
Büyüme Ortamı: |
Ramos hücrelerini kültürlemek için %10 fetal sığır serumu, 2,1 mM stabil Glutamin ve 2,0 g/L NaHCO3 ile desteklenmiş RPMI 1640 kullanılır. ortam haftada 2 kez değiştirilmelidir. |
|
Büyüme Koşulları: |
İnsan Burkitt lenfoma hücre hattı (Ramos) nemlendirilmiş bir inkübatörde %5 CO2 ve 37°C sıcaklıkta tutulur. |
|
Depolama: |
Dondurulmuş Ramos hücreleri, hücrelerin canlılığını daha uzun süre korumak için -150 santigrat derecenin altındaki sıcaklıkta veya sıvı nitrojenin buhar fazında tutulur. |
|
Dondurma İşlemi ve Ortamı: |
Ramos hücreleri için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamı önerilir. Dakikada kademeli olarak 1 santigrat derece sıcaklık düşüşüne izin veren yavaş bir dondurma işlemi kullanılır. Bu yavaş dondurma işlemi hücreleri herhangi bir şoktan korur ve canlılıklarını artırır. |
|
Çözdürme İşlemi: |
Çözdürme işlemi için donmuş hücreler, küçük bir buz kümesi kalana kadar 40 ila 60 saniye boyunca 37°C'de önceden ısıtılmış bir su banyosunda tutulur. Bundan sonra taze besiyeri eklenir ve hücreler santrifüjlenerek donmuş besiyeri öğeleri uzaklaştırılır. Pelet tekrar süspanse edilir ve hücreler kültür ortamı içeren yeni bir şişeye dağıtılır. |
|
Biyogüvenlik Seviyesi: |
Biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvarı, Epstein-Barr virüsü negatif Ramos hücre kültürlerini korumak için gereklidir. Ancak, Ramos hücreleri kalıcı olarak Epstein-Barr virüsü pozitif hale getirildiğinde biyogüvenlik seviyesi 2'ye kaydırılır. |
Ramos: Avantajlar ve Sınırlamalar
Diğer hücre dizileri gibi Ramos hücrelerinin de belirgin avantajları ve sınırlamaları vardır. Bu bölümde, araştırma kullanımlarını önemli ölçüde etkileyebilecek bazı önemli avantajlar incelenecektir.
Avantajlar
- Burkitt lenfoma hücre modeli: Ramos hücreleri bir Burkitt lenfoma hastasından geliştirilmiştir, bu da onları lenfoid maligniteleri incelemek için uygun bir hücre modeli haline getirir
- Kolay Kültürleme: Ramos hücrelerinin laboratuvarda kültürü ve bakımı kolaydır. Basit hücre kültürü gereksinimlerine ve koşullarına sahiptirler
Sınırlamalar
- İn Vitro model: Ramos hücreleri hasta tümörlerinin genetik karmaşıklığını tam olarak temsil etmeyebilir, bu da uygulanabilirliklerini sınırlandırır. Ayrıca, Ramos hücre hattı kullanılarak yapılan deneylerden elde edilen sonuçlar in vivo koşulları tam olarak yansıtmayabilir ve bu da potansiyel olarak çeviri zorluklarına yol açabilir
ramos hücrelerinin araştırma alanındaki uygulamaları
Ramos biyomedikal alanda umut verici uygulamalar sunmaktadır. Ramos hücrelerinin zorunlu araştırma kullanımlarından bazıları şunlardır:
- Lenfoma Biyolojisi: Ramos hücreleri genel olarak lenfoma biyolojisini incelemek için kullanılır. Lenfoid malignitelerin altında yatan genetik ve moleküler faktörleri keşfetmek için kullanılırlar. Ayrıca, araştırmacılar bu Burkitt lenfoma hücrelerini kullanarak hastalığın başlaması, ilerlemesi ve heterojenliği hakkında bilgi edinirler. Genetik mutasyonlar ve sinyal yolları da araştırılarak potansiyel olarak daha kesin tanı ve tedavi yaklaşımlarının geliştirilmesine yol açmaktadır. 2019'da yapılan bir çalışmada, GCN5 (General control non-depressible 5) Histon asetiltransferaz inhibisyonunun, BCR sinyalizasyonunu bozarak insan Burkitt lenfoma hücrelerinin (Ramos) tümörijenitesini azalttığı bulunmuştur. Bu nedenle, GCN5 lenfoma ilaç tedavisi geliştirmek için uygun bir hedef olarak önerilmektedir [2].
- İlaç taraması ve testi: Ramos hücre hattı, ilaç taraması ve testi amacıyla yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacılar, potansiyel terapötik bileşiklerin hücre çoğalmasını ve büyümesini inhibe etmedeki ve lenfoma hücrelerinde hücre ölümünü indüklemedeki etkinliğini değerlendirir. Bu, umut verici ilaç adaylarının belirlenmesine yardımcı olarak lenfoma hastaları için hedefe yönelik tedavilerin geliştirilmesini kolaylaştırır. Araştırma, Annona meyve kabuğu, posası ve tohumlarının metanolik özütünün Ramos hücrelerinin çoğalması üzerinde orta düzeyde, kloroform özütünün ise güçlü etkiler sergilediğini göstermiştir. Bu nedenle, çalışma Annona meyvelerinin lenfomanın önlenmesi ve tedavisinde etkili olabileceğini öne sürmüştür [3].
Araştırmalarınız için Ramos Hücreleri
Ramos hücrelerini içeren yayınlar
Makalenin bu bölümünde Ramos hücre hattını içeren birkaç ilginç araştırma yayını listelenmektedir:
Burkitt lenfoma B hücrelerinin uygunluğu için CD 79b ve CD 19'un sürekli sinyali gereklidir
Bu araştırma 2018 yılında The EMBO dergisinde yayımlanmıştır. Çalışma, Ramos B hücrelerinin uygunlukları ve rekabetçi büyümeleri için Ramos hücreleri CD19 ve CD79b (BCR sinyal bileşeni Igβ) belirteçlerinin ifadesine ihtiyaç duyduklarını ortaya koymuştur.
Neoplasia'da (2021) yayınlanan bu çalışmada Ramos hücreleri kullanılmış ve karışık soy kinaz alanının (MLKL) Burkitt lenfoma hücrelerinde (Ramos) epigenetik olarak düzenlendiği öne sürülmüştür. Bu nedenle, nekroptoz ile ilişkili tedavilerin tedavi başarısı için umut verici bir prognostik belirteçtir.
PBK/TOPK Tyr74'ün JAK2 tarafından fosforilasyonu Burkitt lenfoma tümör büyümesini teşvik eder
Cancer Letters (2022) dergisinde yayımlanan bu araştırma makalesi, JAK2/TOPK/histon H3 sinyal ekseninin B lenfoma hücre hatlarının in vitro çoğalmasında önemli bir rol oynadığını ortaya koymuştur.
Bu makale 2020 yılında Toxins dergisinde yayımlanmıştır. Çalışma, verotoksin-1 tedavisinin Ramos B hücrelerinde endoplazmik retikulum (ER) stresini indüklediğini öne sürdü. Bu, lenfoma hücre hatlarında apoptotik veya hayatta kalma sinyalinin başlamasına yol açar.
Avicenna Journal of Phytomedicine'de (2020) yer alan bu çalışmada, doğal bir bileşik olan silimarinin, Ramos hücre hattında TLR8 (Toll benzeri reseptör 8) ekspresyonunu ve apoptozu baskıladığı bildirilmiştir.
Ramos hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
Aşağıda Ramos hücreleri hakkında birkaç çevrimiçi kaynak yer almaktadır:
- Ramos hücre transfeksiyonu: Bu belge Ramos hücre hattının transfeksiyonu için protokolü öğrenmenize yardımcı olacaktır.
Aşağıdaki bağlantı Ramos hücre kültürü protokolünü içermektedir:
- Ramos hücreleri: Bu web sitesi Ramos hücre hattı hakkında temel bilgiler içermektedir. Ayrıca Ramos hücrelerinin alt kültürlenmesi ve çoğalan ve kriyoprezerve edilmiş kültürlerin işlenmesi için bir protokol içerir. Ayrıca, Ramos hücre ortamı, ikiye katlama süresi ve hücre yoğunluğu ile ilgili bilgiler de mevcuttur.
Ramos Hücreleri Hakkında Temel Bilgiler: Sıkça Sorulan Sorular
Referanslar
- Kerntke, C.G., B lenfositlerinde CD19 ve CD23 ile etkileşimi sırasında membran IgE'nin organizasyon ve sinyal kapasitesinin analizi. 2021, Georg-August-Universität Göttingen.
- Farria, A.T., et al., GCN5 HAT inhibisyonu, MYC hedef gen ekspresyonunu azaltarak ve BCR sinyal yollarını engelleyerek insan Burkitt lenfoma hücre sağkalımını azaltır. Oncotarget, 2019. 10(56): p. 5847.
- Al-Shaya, H.M., et al., Annona meyvesinin fitokimyasal profili ve antioksidasyon aktivitesi ve lenfoma hücre proliferasyonu üzerindeki etkisi. Gıda Bilimi ve Beslenme, 2020. 8(1): p. 58-68.