Hep2 Hücreleri ve Larenks Kanseri Araştırmalarındaki Rolleri
Hep 2 hücreleri, romatoloji, kanser araştırmaları ve immünoloji gibi biyomedikal araştırma alanlarında yaygın olarak kullanılan önemli bir in vitro modeldir. Larenks karsinomundan kaynaklanan bu insan hücreleri, köken dokusunun ve larenks neoplazmlarının spesifik özelliklerinin aydınlatılmasında önemli bir rol oynamıştır. Bu hücrelerin önemi, translasyonel kanser araştırmalarında iyi bilinmektedir; bu araştırmalarda, kanserlerin gırtlak doğası ve kökeni hakkındaki anlayışımıza büyük katkı sağlamışlardır ve gırtlak kanseri araştırma yayınlarında önemli bir yer tutmaktadırlar [1].
- Büyüme Ortamı
- Hep 2 hücrelerinin kültürlenmesi için EMEM veya Eagle's minimal essential medium kullanılır. Bu besiyeri, ideal hücre büyümesi için %10 FBS, 1,0 g/L glikoz, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-glutamin, %1 NEAA ve 1 mM sodyum piruvat ile takviye edilir. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez yenilenmelidir.
- İkiye Katlanma Süresi
- Hep 2 hücreleri için bildirilen ikiye katlanma süresi yaklaşık 40 saattir.
- Büyüme Tipi
- Hep 2 hücreleri yapışkandır ve tek tabaka halinde büyür.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-1
- Satın Alabileceğiniz Yer
- Cytion — Hep2 Sipariş Et
Hep 2 hücrelerinin kökeni ve genel özellikleri
Bir hücre hattının kökeni ve genel özellikleri, araştırmalarda uygulanabilirliğini belirler. Bu bölüm, Hep 2 hücrelerinin kökeni ve bazı önemli özellikleri hakkında bilgi edinmenize yardımcı olacaktır. Örneğin, şunları öğreneceksiniz: HEp-2 hücre hattı nedir? Hep 2 hücrelerinin kaynağı nedir? Ve Hep 2'nin morfolojisi nedir?
- Ölümsüz bir insan epitel hücre hattı olan Hep 2, ilk olarak 1954 yılında H.W. Toolan tarafından laringeal karsinom hücreleri olarak tanımlanmıştır. Ancak son zamanlarda, Hep 2 hücre hattının servikal adenokarsinom hücrelerinden oluştuğu ve Hela hücre hattının kontaminasyonundan kaynaklandığı bildirilmiştir [2].
- Hep 2 hücreleri, Hela marker kromozomları içerir ve sırasıyla immünoperoksidaz boyama ve PCR ile doğrulandığı üzere, keratin ve insan papillomavirüs DNA dizileri için pozitif bulunur.
- Hela hücre hattının bir türevi olan Hep 2, epitel benzeri bir morfolojiye sahiptir.
- Hep 2 hücre hattı, neredeyse triploid bir karyotip ile hem yapısal hem de sayısal kromozom bozuklukları sergilemektedir [3].
HEp-2 hücre hattı: Kültüre alma bilgileri
Bir hücre hattıyla çalışmaya başlamadan önce, bu hücre hattının kültürüyle ilgili aşağıdaki önemli noktaları bilmeliyiz. Bu bilgiler, hücre hattını etkili bir şekilde kültürlemek ve sürdürmek için yararlı olabilir. Bilmeniz gerekenler: HEp-2 hücrelerinin ikiye katlanma süresi nedir? Hep 2 hücreleri yapışkan mıdır? Hep2 hücrelerinin tohumlama yoğunluğu nedir?
Popülasyon Çoğalma Süresi:
Hep 2 hücreleri için bildirilen ikiye katlanma süresi yaklaşık 40 saattir.
Yapışkan mı yoksa Süspansiyon Halinde mi:
Hep 2 hücreleri yapışkandır ve tek tabaka halinde büyür.
Tohumlama Yoğunluğu:
Hep 2 hücre kültürü için 1 x 104 hücre/cm2 tohumlama yoğunluğu idealdir. Tohumlama için, yapışkan Hep 2 hücreleri 1 x PBS çözeltisi ile durulanır, ardından Accutase ayrıştırma çözeltisi ile inkübe edilir. Oda sıcaklığında 8–10 dakika inkübasyondan sonra, hücreler besiyerinde yeniden süspansiyon haline getirilir ve santrifüjlenir. Toplanan hücreler daha sonra taze besiyerine dağıtılır ve kültürleme için yeni şişelere dökülür.
Büyüme Ortamı:
Hep 2 hücrelerini kültürlemek için EMEM veya Eagle's minimal essential medium kullanılır. Bu besiyeri, ideal hücre büyümesi için %10 FBS, 1,0 g/L glikoz, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-glutamin, %1 NEAA ve 1 mM sodyum piruvat ile takviye edilir. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez yenilenmelidir.
Büyüme Koşulları:
Diğer memeli hücre hatları gibi, Hep 2 de 37°C sıcaklığa ayarlanmış ve sürekli %5 CO2 beslemesi olan nemlendirilmiş bir inkübatörde kültürlenir.
Saklama:
Hep 2 hücreleri, uzun süreli saklama için ultra düşük sıcaklıklı elektrikli dondurucularda (-150 °C'nin altında) veya sıvı azot buhar fazında saklanabilir.
Dondurma Süreci ve Ortamı:
Hep 2 hücreleri için önerilen dondurma ortamları CM-1 veya CM-ACF'dir. Hücreler, sıcaklığın kademeli olarak 1 °C düşmesini sağlayan ve hücre canlılığını koruyan yavaş dondurma işlemi kullanılarak dondurulmalıdır.
Çözme Süreci:
Dondurulmuş hücre şişesi, küçük bir buz parçası kalana kadar 37°C'lik su banyosunda çalkalanarak hızla çözülür. Hücreler daha sonra taze besiyerine eklenir ve dondurma besiyeri bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Daha sonra, hücre peleti besiyerinde yeniden süspansiyon haline getirilir ve hücreler kültür şişelerine dağıtılır. Hücrelerin yapışması için yaklaşık 24 saat dinlenmeleri gerekir.
Biyogüvenlik Seviyesi
Hep 2 hücre kültürlerinin işlenmesi ve bakımı için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar önerilir.
Hep 2 Hücrelerinin Avantajları ve Sınırlamaları
Hemen hemen tüm hücre hatları, araştırma alanında kullanılmalarına katkıda bulunan kendine özgü bir avantaj ve sınırlama kombinasyonu sergiler. Bu bölümde, Hep 2 hücre hattıyla ilişkili birkaç temel artı ve eksi ele alınacaktır.
Avantajlar
Hep 2 hücre hattının başlıca avantajları şunlardır:
- İnsan Kökenli: Hep 2, insan epitel hücrelerinden türetilmiştir, bu da onu insan hastalıkları ve viral enfeksiyonları incelemek için değerli bir in vitro model haline getirir.
- ANA Tespiti: Hep 2 hücre hattı, çok sayıda antijen sunan doğal bir protein dizisine sahiptir, bu da onu antinükleer antikorları (ANA) tespit etmek için mükemmel bir substrat haline getirir. Bu özellik, serumda ANA'nın spesifik ve yüksek hassasiyetli taramasını mümkün kılar, bu da onu bağ dokusu hastalıklarını tanımlamak için çok önemli bir tanı aracı haline getirir.
Sınırlamalar
- Kromozomal Anormallikler: Hep 2 hücreleri, çok sayıda sayısal ve yapısal kromozomal anormallik sergiler. Bu anormallikler, hücre davranışını etkileyebilir ve belirli laboratuvar deneylerinde uygulanabilirliklerini kısıtlayabilir.
- Tümör Oluşturma Özelliği: Tümör kaynaklı bir insan epitel hücre hattı olan Hep 2, epitel hücrelerinde tipik olarak bulunmayan genetik anormalliklere sahip olabilir. Sonuç olarak, Hep 2 hücrelerinin kullanımı, normal hücresel fizyolojiye odaklanan belirli çalışmalarda kısıtlanabilir.
Biyomedikal Araştırmada Hep 2 Hücre Hattının Genişleyen Uygulamaları
Hep 2 hücre hattı, biyomedikal araştırmalardaki çok sayıda uygulama için örnek bir model olarak öne çıkmaktadır. Çok yönlülüğüyle tanınan bu hücreler, reseptör analizinden karmaşık hastalıkların incelenmesine kadar in vitro deneylerde kritik roller üstlenmektedir.
Hep 2 Hücreleri ile Tümör Oluşturucu Mekanizmaların ve Terapötik Hedeflerin Keşfi
Tümörjenik olan Hep 2 hücreleri, kanser biyolojisinin inceliklerini araştırmak için çok önemlidir. Kanser sinyal yolakları ve mekanistik çalışmalar hakkında içgörüler sağlarlar ve antikanser ilaçlarının taranması ve değerlendirilmesinde temel bir unsurdurlar. Örneğin, miRNA-33a'nın kanser hücresi proliferasyonu üzerindeki etkisini tanımlamak için Hep 2'nin kullanıldığı kapsamlı bir çalışma yapılmıştır. Bulgular, miRNA-33a'nın bilinen bir onkogen olan PIM1 ile etkileşimi yoluyla antiproliferatif etkilerini ortaya koymuş ve yeni bir terapötik hedef önermiştir [4]. Başka bir örnekte ise, Hep 2, Marsdenia tenacissima çinko oksit nanopartiküllerinin terapötik potansiyelini değerlendirmek için kullanılmış ve bu nanopartiküllerin antiproliferatif ve apoptotik etkinliği vurgulanmıştır [5].
Hep 2 Hücre Bilgileriyle Viroloji Araştırmalarını İlerletmek
Hep 2 hücrelerinin çeşitli insan virüslerine karşı duyarlılığı, onları viroloji araştırmalarında paha biçilmez bir kaynak haline getirmektedir. Bu hücreler, virüs ile konakçı hücre mekanizmaları arasındaki karmaşık etkileşimi ortaya çıkarmak için SARS-CoV-2 viral genlerinin ekspresyonunda etkili bir şekilde kullanılmıştır [6]. Bu uygulama, COVID-19 gibi viral enfeksiyonları anlamak ve bunlarla mücadele etmek küresel bir öncelik haline geldiği günümüzde özellikle önemlidir.
Hücresel İşlevlerin Deşifre Edilmesi: Hep 2 Hücrelerinde Gen Manipülasyonu
Hep 2 hücre hattının genetik manipülasyona uyarlanabilirliği, mekanistik çalışmalardaki yararını vurgulamaktadır. Araştırmacılar, gen ekspresyonunu modüle etmek ve hücresel işlevlerde belirli genlerin rollerini aydınlatmak için bu özelliğinden yararlanmaktadır. Dikkat çeken bir çalışmada, Hep 2 hücrelerinde RNA bağlayıcı protein RBM6'nın aşırı ekspresyonu gerçekleştirilmiş ve bu, proteinin tümör baskılayıcı potansiyelinin araştırılmasını kolaylaştırarak kanserin moleküler temelleri hakkında değerli bilgiler sağlamıştır [7].
Hep 2 Hücre Hattı Uygulamalarıyla Hastalık Tanısının İyileştirilmesi
Bu araştırma alanlarının ötesinde, Hep 2 hücreleri, özellikle sistemik lupus eritematozus gibi otoimmün hastalıkların tanısında kritik öneme sahip olan ANA'ların saptanmasında tanı yetenekleriyle tanınmaktadır. Hep 2 hücrelerinin ANA'ları sunma hassasiyeti, tanıyı ve hedefe yönelik tedavilerin geliştirilmesini destekleyerek, otoimmün patolojiler hakkındaki anlayışımızı derinleştirir ve hasta bakımını iyileştirir.
Bu çeşitli uygulamalar sayesinde, Hep 2 hücreleri, translasyonel kanser araştırmalarındaki ilerlemelere, viral enfeksiyonların incelenmesine ve hücresel mekanizmaların keşfine önemli katkılarda bulunmuştur. Klinik açıdan ilgili verilerin elde edilmesine yaptıkları katkı paha biçilmezdir ve hem laboratuvarda hem de klinikte vazgeçilmez rollerini teyit etmektedir. Araştırmalar gelişmeye devam ettikçe, Hep 2 hücre hattı yeni tedavilerin keşfedilmesine yardımcı olarak ve insan sağlığı ve hastalıkları hakkındaki bilgimizi genişleterek ön saflarda yer almaya devam edecektir.
HEp-2 Hücre Hattınızı Hemen Temini
Hep 2 hücreleri: Araştırma Yayınları
Aşağıda, Hep 2 hücreleri ile ilgili ilginç ve en çok atıf alan bazı araştırma yayınları yer almaktadır.
- Marsdenia tenacissima'dan elde edilen çinko oksit nanopartiküllerinin sentezi, gırtlak kanseri hücrelerinde (Hep-2) hücre çoğalmasını engeller
ve apoptozu tetikler Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2019) dergisinde yayınlanan bu makale, Hep 2 hücre hattında biyosentezlenmiş Marsdenia tenacissima çinko oksit nanopartiküllerinin anti-kanser potansiyelini araştırmıştır. - Biyolojik olarak formüle edilmiş hesperidin yüklü PLGA nanopartikülleri, kanser hücrelerinde
mitokondriyal aracılı içsel apoptoz yolunu engeller Bu makale, 2021 yılında Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışma, Hep 2 hücrelerinde biyolojik olarak formüle edilmiş hesperidin yüklü Poli (laktik-ko-glikolik asit) (PLGA) nanopartiküllerinin anti-kanser özelliklerini incelemiştir. - Solunum sinsityal virüs enfeksiyonuna
karşı Lophatherum gracile etanol ekstraktının antiviral aktivitesi 2019 yılında Journal of Ethnopharmacology dergisinde yayınlanan bu makale, solunum sinsityal virüs enfeksiyonunu incelemek ve buna karşı antiviral ilaçları taramak için Hep 2 hücrelerini kullanmıştır. Çalışma, bir şifalı bitki olan Lophatherum gracile'nin etanol ekstraktının solunum sinsityal virüs enfeksiyonuna karşı umut verici antiviral potansiyelini bildirmiştir. - Dört aromatik bitkinin sulu ekstraktlarının, Candida albicans'ın insan HEp-2 epitel hücrelerine
yapışmasına karşı aktivitesinin değerlendirilmesi Bu araştırma, Gene Reports (2020) dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışma, dört aromatik bitkinin sulu ekstraktlarının, Candida albicans'ın insan Hep 2 epitel hücrelerine yapışmasına karşı inhibe edici potansiyelini araştırmıştır. - Wnt1 ile indüklenebilir sinyal proteini 1, YAP1/TEAD1/GLUT1 yolunu
kullanarak laringeal skuamöz hücreli karsinomun glikolizini ve kemoresistansını düzenler Bu çalışma 2019 yılında Journal of Cellular Physiology dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma, Wnt1 ile indüklenebilir sinyal proteini 1'in (WISP1) YAP1/TEAD1/GLUT1 yoluyla etkileşime girdiğini ve Hep 2 hücre hattında glikoz metabolizmasını ve kemoresistansı düzenlediğini bildirmektedir.
Hep2 Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
Hep 2, iyi bilinen bir hücre hattıdır. Hep 2 hücre hattını konu alan çeşitli kaynaklar mevcuttur.
- Hep2 hücre hattının alt kültürlenmesi: Bu video, Hep 2 hücrelerinin alt kültürlenmesi için adım adım bir kılavuzdur.
- Hep 2 hücreleri ANA taraması: Bu video, Hep 2 hücre hattı kullanılarak yapılan antinükleer antikor (ANA) taramasını açıklamaktadır.
- Hep 2 kültürü: Bu bağlantı, Hep 2 hücreleri hakkında temel hücre kültürü bilgilerini içerir. Hücre bölme, hücre dondurma ve çözme işlemlerini kapsar.
Biyomedikal Araştırmalarda HEp-2 Hücreleri Hakkında Sıkça Sorulan Sorular
Kaynakça
- Fusi, M. ve S. Dotti, HEp-2 hücre hattının tamamen hayvansal bileşen içermeyen kültür sistemlerine adaptasyonu ve hücre büyümesinin gerçek zamanlı analizi. Biotechniques, 2021. 70(6): s. 319-326.
- Gorphe, P., Larenks kanseri için translasyonel araştırmada Hep-2 hücre hattının kapsamlı bir incelemesi. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): s. 644-649.
- Wang, M., et al., İnsan HEp-2 kaynaklı laringeal ksenograft tümördeki kanserle ilişkili fibroblastlar, epitelyal-mezenkimal geçiş yoluyla kanser hücrelerinden türetilmemiştir; fenotipik olarak aktive olmuş ancak karyotipik olarak normaldir. PLoS One, 2015. 10(2): s. e0117405.
- Karatas, O.F., PIM1'i hedef alarak gırtlak kanseri Hep-2 hücrelerinde miR-33a'nın antiproliferatif potansiyeli. Head Neck, 2018. 40(11): s. 2455-2461.
- Wang, Y., et al., Marsdenia tenacissima'dan elde edilen çinko oksit nanopartiküllerinin sentezi, gırtlak kanseri hücrelerinde (Hep-2) hücre çoğalmasını inhibe eder ve apoptozu indükler. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: s. 111624.
- Zhang, J. ve ark., SARS-CoV-2 proteinlerinin subselüler lokalizasyonuna ilişkin sistemik ve moleküler bir çalışma. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): s. 269.
- Wang, Q., et al., Bir tümör baskılayıcı gen olarak RNA bağlayıcı protein RBM6, laringokarsinomda büyümeyi ve ilerlemeyi baskılar. Gene, 2019. 697: s. 26-34.
