BEWO Hücre Hattı

BeWo, biyomedikal araştırmalarda yaygın olarak kullanılan insan koriokarsinomundan türetilmiş bir hücre hattıdır. Plasental gelişimin karmaşık sürecini ve insan trofoblastlarının sinsitiyalizasyonunu keşfetmek için değerli bir in vitro model olarak hizmet eder. Araştırmacılar ayrıca bu hücreleri trofoblast hücre davranışını, hormon üretimini ve plasenta boyunca madde taşınmasını incelemek için de kullanmaktadır. Ayrıca, BeWo hücreleri toksikoloji, enfeksiyon ve hastalık bulaşma çalışmalarında da uygulamalar sunmaktadır.

Bu makale, BeWo hücreleri hakkında, araştırmanızda bu hücrelerle ilgilenmenize yardımcı olabilecek temel bilgileri kapsamaktadır. Şunları içerecektir:

BeWo hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
BeWo hücre hattı: Kültürleme bilgileri
BeWo hücre hattının avantajları ve dezavantajları
BeWo hücrelerinin araştırma uygulamaları
BeWo Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları
BeWo Hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

1. BeWo hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni

Bir hücre hattının kökeni ve genel özellikleri hakkında önceden bilgi sahibi olmak, araştırmanızda kullanımı için çok önemlidir. Makalenin bu bölümünde BeWo hücre hattının kökeni, karakteristik özellikleri ve çok daha fazlası ele alınmaktadır. Burada şunları öğreneceksiniz: BeWo koriokarsinom hücre hattı nedir? BeWo sinsitiyalizasyonu nedir? BeWo hücreleri nereden geliyor? BeWo hücre morfolojisi nedir? BeWo'nun ploidi nedir?

Plasental hücre hattı BeWo, 1968 yılında bir erkek fetal plasentanın malign gestasyonel koriokarsinomundan kaynaklanmıştır [1]. Bu nedenle, plasental araştırmalar için çok değerli bir model olarak hizmet vermektedir.
BeWo hücreleri epitel benzeri bir morfoloji sergiler.
BeWo hücreleri nispeten küçüktür ve 20 ila 30 µM arasında değişir [2].
BeWo hücreleri stabil bir karyotip sergiler. Kök çizgi sayıları hipo-tetraploiddir. BeWo hücrelerinin modal kromozom sayısı 86'dır. Bu sayı 71 ila 178 arasında değişebilir.
BeWo hücreleri insan koryonik somatomammotropini, insan koryonik gonadotropini (hCG) ve steroid hormonları gibi çeşitli hormonlar üretir.
BeWo hücreleri CK 7, E-cadherin ve VE-cadherin dahil olmak üzere moleküler belirteçleri ifade eder.

B30 alt hattı

B30, BeWo hücrelerinin alt hattıdır. Besin maddelerinin alımını ve taşınmasını araştırmak için kullanılır. Bu durum, gözenekli membranlar üzerindeki güçlü büyümelerine bağlanmaktadır.

BeWo ve JEG-3

BeWo JEG-3 hücre hatları koryokarsinomlardan türetilir ve plasental araştırmalarda kullanılır. BeWo hücreleri, insan koryonik gonadotropini (hCG) ve estradiol gibi JEG-3'ten daha düşük seviyelerde hormon üretir.

Mikroskop altında gözlemlenen blastosist oluşum aşamalarını gösteren, insan yumurtası doğurganlığının hızlandırılmış görselleştirmesi.

2. BeWo hücre hattı: Kültürleme bilgileri

Temel ayrıntıları bilmediğiniz sürece bir hücre kültürünün bakımını yapmak zor olabilir. Örneğin: BeWo'nun ikiye katlanma süresi nedir? BeWo hücre ortamı nedir? BeWo hücre hattını nasıl kültüre alırsınız ve BeWo hücrelerini nasıl dondurursunuz?

BeWo Hücrelerini Kültürlemek için Önemli Noktalar

İki Katına Çıkma Süresi:	BeWo hücreleri için popülasyon ikiye katlanma süresi yaklaşık 30 saattir.
Yapışık veya Süspansiyon Halinde:	BeWo yapışık bir hücre hattıdır.
Hücre ekim yoğunluğu:	BeWo hücreleri için önerilen ekim yoğunluğu 1 x¹⁰⁴ ^hücre/cm2'dir. Tohumlama için eski ortam hücrelerden çıkarılır ve hücreler 1 x PBS ile durulanır. Daha sonra Accutase (pasajlama solüsyonu) eklenir ve hücreler ortam sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübe edilir. Ardından, ayrılan hücrelere kültür ortamı eklenir ve santrifüjlenir. Hasat edilen hücreler daha sonra yeniden süspanse edilir ve yeni bir şişeye dökülür.
Büyüme Ortamı:	BeWo hücrelerini büyütmek için %10 FBS, 2,0 mM L-Glutamin, 2,0 mM Sodyum piruvat ve 2,5 g/L NaHCO3 içeren Ham's F12K ortamı kullanılır. BeWo hücre ortamı haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.
Büyüme Koşulları:	BeWo hücreleri 37 derece Celcius sıcaklığında ve %5 CO2 kaynağı ile nemlendirilmiş bir inkübatörde muhafaza edilir.
Depolama:	Dondurulmuş BeWo hücreleri -150°C'nin altında bir elektrikli ultra düşük sıcaklık dondurucuda veya sıvı nitrojenin buhar fazında saklanır.
Dondurma İşlemi ve Ortam:	BeWo hücrelerinin CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamında dondurulması tavsiye edilir. Hücreler yavaş dondurma yöntemi kullanılarak dondurulur. Bu yöntem, sıcaklıkta dakikada sadece 1 derecelik bir düşüşe izin verir, böylece hücrelerin herhangi bir şok yaşamasını önler ve hücrelerin canlılığını korur.
Çözdürme İşlemi:	Dondurulmuş hücreler, küçük bir buz kümesi kalana kadar 40 ila 60 saniye boyunca önceden ayarlanmış 37°C su banyosuna daldırılarak çözdürülür. Ardından taze büyüme ortamı eklenir ve hücreler santrifüjlenerek dondurucu ortam bileşenlerinden arındırılır. Toplanan hücre peleti yeniden süspanse edilir ve büyüme için bir kültür şişesine dağıtılır.
Biyogüvenlik Seviyesi:	BeWo hücre kültürlerinin işlenmesi ve bakımı için Biyogüvenlik Seviyesi 1 laboratuvarı gereklidir.

İnsan koryokarsinom hücre hattı BEWO'nun epitelyal, poligonal morfolojisi ve adacık benzeri büyümesinin mikroskop altında 10x ve 20x büyütme ile yakalanması.

3. BeWo hücre hattının avantajları ve dezavantajları

BeWo hücreleri benzersiz özellikler sergiler ve belirli artılar ve eksilerle birlikte gelir. Bu bölümde, kayda değer olanlardan bazılarını inceleyeceğiz.

Avantajlar

BeWo koriokarsinom hücre hattının başlıca avantajları şunlardır:

İn Vitro Plasental Hücre Modeli
BeWo hücreleri, trofoblast hücre davranışını ve plasental sinsityalizasyonu incelemek için in vitro bir model sağlar ve in vivo gözlemlenmesi zor süreçleri çoğaltır.
Hormon Üretimi
BeWo hücreleri hCG ve plasental laktojen gibi hormonlar salgılayarak hormonal düzenleme çalışmaları ve üreme biyolojisi araştırmaları için değerli hale gelir.

Dezavantajlar

BeWo trofoblast hücrelerinin dezavantajları şunlardır:

Kanser hücre hattı
BeWo hücreleri bir plasental tümör olan koriokarsinomdan türetilmiştir. Bu köken normal plasental hücre işlevini tam olarak temsil etmeyebilir.

4. BeWo hücrelerinin araştırma uygulamaları

BeWo hücre hattı plasental araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattının belirtilen birkaç uygulamasından burada bahsedilmektedir:

Plasenta ve gebelikle ilgili araştırmalar: BeWo hücreleri plasenta ve gebelikle ilgili araştırmalarda çok önemlidir. Örneğin araştırmacılar bu hücreleri ilaçlar, besinler ve toksinler de dahil olmak üzere maddelerin plasenta bariyeri boyunca taşınmasını incelemek için kullanmaktadır. Ayrıca, insan koryonik gonadotropini (hCG), plasental laktojen ve steroid hormonları dahil olmak üzere hormonların üretimini ve düzenlenmesini de araştırmaktadırlar. Bu, hamilelik sırasındaki hormonal değişiklikleri anlamak için önemlidir. 2018'de yapılan araştırmada, bromlu alev geciktiricilerin (BFR'ler) insan trofoblastik hücre hattındaki (BeWo) sülfotransferaz aktivitesi üzerindeki etkisi incelenmiştir. Bu enzim, tiroid hormonunun hücre içi seviyelerinin düzenlenmesinde rol oynamaktadır [3].
Enfeksiyon ve Hastalık araştırmaları: BeWo hücreleri, patojenler ve plasental hücreler arasındaki etkileşimi incelemek için de kullanılmaktadır. Bu araştırma, anneden fetüse bulaşabilen hastalıkları anlamak ve fetüs sağlığını korumak için stratejiler geliştirmek açısından değerlidir. Ayrıca bu hücre hattı, araştırmacıların preeklampsi gibi hamilelik sırasında ortaya çıkan komplikasyonları araştırmasına yardımcı oluyor. Örneğin, Michalina Bralewska tarafından 2023 yılında yapılan bir çalışmada BeWo trofoblast hücre modeli kullanılmış ve hem Kromogranin A (CgA) hem de ondan türetilen peptit olan katestatinin (CST) preeklampsi (PE) patogenezinin karmaşık sürecinde rol oynayabileceği bulunmuştur [4]. İlerleyen bir başka çalışmada, BeWo koriokarsinom hücre hattı kullanılarak trikosantinin anti-kanser potansiyeli araştırılmıştır. Araştırma ayrıca deneyden önce ve sonra karşılaştırmalı proteomik analiz gerçekleştirerek biyobelirteçleri keşfetmek için ekstra bir çaba sarf etmiştir [5].

€430,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 300123

5. BeWo Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları

İşte BeWo trofoblast hücrelerini içeren bazı önemli araştırma yayınları.

AMPK Sinyali İnsan Trofoblast Hücre Hattı BeWo'da Mitofaji ve Mitokondriyal ATP Üretimini Düzenliyor

Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) dergisindeki bu çalışma, AMPK sinyalinin BeWo trofoblast hücrelerinde FUNDC1 ve PRKN kolaylaştırmalı mitofaji yolları aracılığıyla mitofajiyi aktive ettiğini öne sürmüştür. Sonuç olarak mitofaji, ATP üretiminin ve mitokondriyal membran potansiyelinin korunmasına yardımcı olur.

Etilparaben, insan plasentası BeWo hücrelerinde Caspase-3 yolu üzerinden apoptotik hücre ölümünü indükler

Bu makale Animal Cells and Systems (2020) dergisinde yayımlanmıştır. Çalışma, etilparabenin kaspaz 3 yolunu düzenleyerek BeWo hücrelerinin apoptozuna aracılık ettiğini ileri sürmüştür.

İnsan Plasental Doku ve Hücre Hatlarının (BeWo, JEG-3, JAR ve HTR-8/SVneo) Ksenobiyotik ve Steroid Atılım Potansiyelinin Kantitatif Proteomik ile Karakterizasyonu

Drug Metabolism and Disposition (2023) dergisinde yer alan bu çalışmada, hücrelerdeki ksenobiyotik ve steroid birikimini araştırmak için BeWo, JAR, JEG-3 ve HTR-8/SVneo gibi plasental hücre hatları kullanılmıştır.

İnsan plasentasında apelin ve apelin reseptörü: Ekspresyon, sinyal yolu ve trofoblast JEG-3 ve BeWo hücrelerinin proliferasyonu ve hücre döngüsünün düzenlenmesi

Uluslararası Moleküler Tıp Dergisi'ndeki (2020) bu araştırma makalesi, APJ reseptörünün ligandı olan Apelin'in, APJ ve ERK1/2, stat3 ve AMPK sinyalizasyonu yoluyla BeWo hücre proliferasyonunu teşvik ettiğini öne sürdü. Bu nedenle, plasentanın gelişimini düzenleyen önemli bir adipokin olabilir.

Antiseizure ilaçlar ve fetal besinler: insan plasental hücre hattında kolin taşıyıcıları üzerindeki etkiler

Epilepsia'daki (2021) bu çalışmada, insan kaynaklı trofoblastik hücre hattı BeWo'da fetal besinlerin ve anti-nöbetlerin kolin taşıyıcıları üzerindeki etkileri araştırılmıştır.

6. BeWo Hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

BeWo hücreleri hakkında bazı çevrimiçi kaynaklar aşağıda verilmiştir:

İn vitro transfeksiyon: Bu video, yapışık hücreler için in vitro plazmid DNA transfeksiyon protokolünü öğrenmenize yardımcı olacaktır.

Aşağıdaki bağlantı BeWo hücreleri için hücre kültürü bilgilerini içermektedir:

BeWo hücreleri: Bu web sitesi BeWo hücre hattı hakkında temel hücre kültürü bilgilerini içerir. Bu, hücre ortamı ve kültür koşulları ile ilgili bilgileri içerir. Ayrıca kriyoprezerve ve proliferatif kültürlerin alt kültürlenmesi ve işlenmesine yönelik protokoller de bulunmaktadır.

Referanslar

Weber, M., ve diğerleri, Altı insan trofoblastik hücre hattının sitogenomiği. Plasenta, 2021. 103: p. 72-75.
Kolokol'tsova, T., ve diğerleri, Uzun süreli kültürde trofoblastların özellikleri. Deneysel Biyoloji ve Tıp Bülteni, 2017. 164: p. 259-265.
Leonetti, C.P., C.M. Butt ve H.M. Stapleton , İnsan koryokarsinoma plasenta hücre hattında bromlu alev geciktirici kimyasallar tarafından tiroid hormonu sülfotransferaz aktivitesinin bozulması, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
Bralewska, M., T. Pietrucha, ve A. Sakowicz, Preeklamptik Ortamın Neden Olduğu HTR-8/SVneo ve BeWo Trofoblastik Hücre Hatlarında CgA Kaynaklı CST Protein Seviyesinde Azalma. Uluslararası Moleküler Bilimler Dergisi, 2023. 24(8): p. 7124.
Hu, Y., ve diğerleri, BeWo hücre hattına ilaç trichosanthin ilavesinin karşılaştırmalı proteomik analizi. Moleküller, 2022. 27(5): p. 1603.