A431 Hücreleri - Dermatolojik Araştırmalarda Epidermoid Karsinom Hücrelerinin Derinlemesine Analizi

A431 bir insan epidermoid kanser hücre hattıdır. Başta kanser biyolojisi, immün-onkoloji ve toksikoloji çalışmaları olmak üzere biyomedikal araştırma alanında yaygın olarak kullanılmaktadır. Ek olarak, A431 hücreleri EGFR'yi (epidermal büyüme faktörü reseptörü) aşırı eksprese eder, bu nedenle hücre döngüsünü ve kanserle ilişkili hücre sinyal yollarını incelemek için değerli bir in vitro model olarak kullanılır.

Bu makale A431 kanser hücre hattının temellerini açıklayacaktır. Aşağıdakileri öğreneceksiniz:

A431 hücreleri: Genel özellikleri ve kökeni
A431 hücre hattı: Kültürleme bilgileri
A431 hücre hattının avantajları ve dezavantajları
A431 hücrelerinin araştırma uygulamaları
A431 Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları
A431 Hücre hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

1. A431 hücreleri: Genel özellikler ve köken

Makalenin bu bölümü, A431 hücre hattı ile çalışmadan önce bilmeniz gereken genel bilgileri öğrenmenize yardımcı olacaktır. Örneğin, A431 hücre hattının kökeni nedir? A431 hücre hattının özellikleri nelerdir? A431 hücrelerinin morfolojisi nedir? A431 hücreleri nereden gelmektedir?

Bir insan deri kanseri hücre hattı olan A431, 85 yaşında bir kadın epidermoid karsinom hastasının epidermisinden elde edilmiştir [1]. Katı tümörlerden birçok başka hücre hattı geliştiren D.J. Giard ve arkadaşları tarafından kurulmuştur.
A-431 hücreleri epitelyal morfolojiye sahiptir. Toplanırlar ve hücre kümeleri oluştururlar.
Cilt kanseri hücre hattı a431 hipertriploiddir. Bu hücre hattı için modal kromozom sayısı 74'tür ve bu sayı hücrelerin yaklaşık %36'sında görülür. Daha yüksek ploidiler de bir hücre popülasyonunun yaklaşık %1'inde bulunur.

Deri altında büyüyen ve alttaki dokulara sızan tümör.

2.a431 hücre hattı: Kültürleme bilgileri

Bir hücre hattının hücre kültürü gerekliliklerini ve prosedürlerini bilmek, kullanımını sorunsuz hale getirebilir. Makalenin bu bölümü, A431 hücre hattını kültüre almak için önemli noktaları öğrenmenize yardımcı olacaktır. Bildiğiniz gibi, A431 hücrelerinin ikiye katlanma süresi nedir? A431 kanser hücre hattı yapışık mıdır? A431 için hangi büyüme ortamı kullanılır?

A431 Hücrelerini Kültüre Etmek için Önemli Noktalar

İki Katına Çıkma Süresi:	A431 hücreleri için popülasyon ikiye katlanma süresi 80 ila 100 saat arasında değişmektedir.
Yapışık veya Süspansiyon Halinde:	A431 yapışık bir hücre hattıdır.
Tohumlama Yoğunluğu:	1 x¹⁰⁴ ^hücre/cm2 hücre yoğunluğu A431 hücre hattı için idealdir. Hücrelerin bu yoğunlukta konfluent hale gelmesi neredeyse 4 gün sürer. Yapışık hücreler PBS (1x) ile yıkanır ve Accutase pasajlama solüsyonu ile inkübe edilir. Daha sonra, hücreler bir kültür ortamında yeniden süspanse edilmiş ve santrifüjlenmiştir. Hasat edilen hücreler tekrar süspanse edilmiş ve büyüme için yeni flasklara dağıtılmıştır.
Büyüme Ortamı:	A431 hücre hattını kültürlemek için %10 fetal sığır serumu, 4,5 g/L Glukoz, 1,0 mM Sodyum piruvat, 1,5 g/L NaHCO3 ve 4 mM L-Glutamin ile desteklenmiş DMEM ortamı kullanılır. Ortam haftada 2 ila 3 günde bir değiştirilmelidir.
Büyüme Koşulları:	A431 kanser hücreleri 37°C sıcaklıkta %5 CO2 kaynağı ile donatılmış nemlendirilmiş bir inkübatörde büyütülür.
Depolama:	Hücre hattı, hücre canlılığının korunmasına yardımcı olduğu için -150°C'nin altında bir sıcaklıkta elektrikli dondurucuda veya sıvı nitrojenin buhar fazında saklanabilir.
Dondurma İşlemi ve Ortam:	CM-1 veya CM-ACF, A431 hücreleri için kullanılan ve şiddetle tavsiye edilen iki dondurma ortamıdır. Hücreler, sıcaklığın dakikada sadece 1 derece düşmesini sağlayan yavaş dondurma yöntemi kullanılarak dondurulur.
Çözdürme İşlemi:	Dondurulmuş A431 hücreleri 40 ila 60 saniye boyunca antimikrobiyal madde içeren 37°C su banyosunda çözdürülür. Sadece küçük bir buz kümesi kaldığında, hücrelere kültür ortamı eklenir ve santrifüjlenir. Toplanan hücreler yeniden süspanse edilir ve büyüme için kültür şişelerine dökülür.
Biyogüvenlik Seviyesi:	A431 kültürlerinin kullanımı ve bakımı için biyogüvenlik seviyesi bir önerilir.

Farklı hücre yoğunluklarında A-431 sferoidleri.

3.a431 hücre hattının avantajları ve dezavantajları

A431 hücre hattı ayırt edilebilir özelliklere sahiptir ve çeşitli avantaj ve dezavantajlar sunar. Aşağıda bunlardan birkaçını özetledik.

Avantajlar

A431 kanser hücre hattının başlıca avantajları şunlardır:

EGFR aşırı ekspresyonu	A431 hücreleri epidermal büyüme faktörü reseptörünü (EGFR) aşırı eksprese eder. EGFR sinyalini ve bunun kanserdeki etkilerini incelemek için pozitif bir kontrol görevi görürler. Ayrıca yeni kanser tedavilerini değerlendirmek için de kullanılırlar.
Tümörijenisite	A431 hücreleri tümörijeniktir ve tümör oluşturma yeteneğine sahiptir. Tümör büyüme dinamiklerini incelemek ve yeni kanser tedavilerini değerlendirmek için değerli araçlar olan ksenograft kanser modellerini geliştirmek için kullanılabilirler.

Dezavantajları

A431 hücrelerinin dezavantajları şunlardır:

Genetik anormallikler	A431, kendisini orijinal tümör özelliklerinden ayırabilecek genetik mutasyonlar ve değişiklikler içeren bir kanser hücre hattıdır.
Mikrobiyal kontaminasyon	A431, başta bakteriyel kontaminasyon olmak üzere mikrobiyal kontaminasyona yatkındır. Bununla birlikte, standart aseptik kültür koşullarının sürdürülmesi A431 hücre kültürlerinde bu tür kontaminasyonun önlenmesine yardımcı olabilir.

€430,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 300112

4. A431 hücrelerinin araştırma uygulamaları

A431 hücre hattı kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu cilt kanseri hücre hattının birkaç umut verici uygulaması burada listelenmiştir. Kanser biyolojisi: A431 cilt kanseri hücre hattı, kanser büyümesi, gelişimi, metastazı ve istilasını yönlendiren hücresel ve moleküler mekanizmaları araştırmak için harika bir araştırma aracıdır.

Araştırmacılar, farklı kanser hücresi süreçlerinde yer alan hücre sinyal yolaklarını yoğun bir şekilde incelemek için bu hücre hattını kapsamlı bir şekilde kullanmışlardır. Örneğin, 2018 yılında yapılan bir çalışmada PI3K/AKT/mTOR sinyal yolağının kanser hücresi proliferasyonunda rol oynadığı ve bu yolağın inhibisyonunun A431 deri tümörü hücrelerinde apoptozu indüklediği araştırılmıştır [2]. Ayrıca, başka bir çalışma da PI3K/AKT/mTOR yolağının deri kanseri hücre metastazı ve epitelden mezenkimal geçişe (EMT) katkısını bildirerek kanser gelişimi ve ilerlemesinde önemli rol oynadığını göstermiştir [3]. İlaç testi ve değerlendirmesi: A431 hücreleri, potansiyel anti-kanser ilaç adaylarının etkinliğini ve etkililiğini değerlendirmek için kullanılır. Araştırmacılar, Nurhidayah Ab. tarafından yürütülen çeşitli laboratuvar deneyleri yaparak ilaçların kanser hücresi proliferasyonu, metastaz, invazyon ve apoptoz üzerindeki etkilerini belirlemişlerdir. Rahim ve meslektaşları 2022 yılında A431 hücrelerini kullanarak biyojenik olarak sentezlenen Alstonia angustiloba bitkisi gümüş nanopartiküllerinin terapötik potansiyelini değerlendirdi. Bulgular angustiloba-AgNP'lerin deri skuamöz karsinom hücreleri üzerinde antiproliferatif etkiler gösterdiğini ortaya koymuştur [4]. Tümör Xenograft modelleri: A431 hücre hattı tümörijeniktir ve bir fare modeline inoküle edildiğinde tümör oluşturabilir. Bu nedenle, in vivo kanser biyolojisini araştırmak için fare ksenograft modelleri geliştirmek için yararlı bir araçtır. Çeşitli çalışmalar, tümör ksenograft modelleri geliştirmek için A431 kanser hücre hattını kullanmıştır. Örneğin Yu Jin Lim ve ekibi, eksojen epidermal büyüme faktörünün (EGF) in vivo anti-tümör ve radyosensitize edici etkilerini değerlendirmek için A431 hücrelerini kullanarak bir deri tümörü ksenograft fare modeli geliştirmiştir [5]. A431 Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları A431 deri karsinomu hücre hattını içeren bazı önemli araştırma yayınlarını aşağıda bulabilirsiniz. Biyopolimerik PVA-AuNPs ve PCL-Curcumin yüklü elektrospun nanoliflerin etkinliği ve A431 deri kanseri hücre hattına karşı antikanser aktiviteleri Bu makale 2020 yılında Materials Today Communications'da yayınlanmıştır. Çalışma, poli-ε-kaprolakton kurkumin yüklü elektrospun nanoliflerin ve polivinil alkol-AuNP'lerin A431 kanser hücrelerine karşı antikanser potansiyelini değerlendirdi. miRNA-221, PTEN'i hedefleyerek kutanöz skuamöz hücreli karsinom progresyonunu teşvik eder Cellular & Molecular Biology Letters'da (2019) yayınlanan bu çalışma, microRNA-221'in PTEN genini hedefleyerek kutanöz skuamöz hücreli karsinomda onkojenik bir rol oynadığını öne sürdü. Catharanthus roseus'tan izole edilen Eutypella spp-CrP14'ten elde edilen fungal vinkristin, insan skuamöz karsinom hücre hattı-A431'de apoptozu indükler BMC Complementary Medicine and Therapies'de (2016) yer alan bu araştırma, bir mantardan, Eutypella spp - CrP14'ten izole edilen ikincil bir metabolit olan vinkristinin A431 hücrelerinde apoptozu indüklediğini göstermektedir. A431 hücrelerinde CDC42SE1'in aşırı ekspresyonu, Akt yolağını inhibe ederek hücre proliferasyonunu azaltmıştır Bu çalışma 2019 yılında Cells dergisinde yayınlanmıştır. Bu araştırma, CDC42SE1 genini, aşağı regülasyonu tümörigenezi kolaylaştırdığı için cilt kanseri ilerlemesinin önemli bir biyobelirteci olarak önermiştir. Metformin, PI3K/Akt sinyal yolunu modüle ederek A431 hücrelerinin çoğalmasını engeller Bu araştırma 2015 yılında Experimental and therapeutic medicine dergisinde yayınlanmıştır. Metforminin PI3K/Akt sinyal yolunu düzenleyerek cilt kanseri hücre hattı a431'in proliferasyonunu baskıladığını öne sürmüştür. 6. A431 Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası İşte A431 cilt kanseri hücre hattını içeren bazı çevrimiçi kaynaklar. A-431 hücrelerinin transfekte edilmesi: Bu bağlantı A431 kanser hücrelerinin transfekte edilmesi için adım adım bir kılavuz sağlar. Aşağıdaki bağlantı A431 hücreleri için hücre kültürü bilgileri içerir. A431 kanser hücre hattı: Bu bağlantı A431 hücre hattı hakkında gerekli hücre kültürü bilgilerini içerir. Kültür ortamı, hücre yoğunluğu, kriyoprezerve ve proliferatif kültürlerin kullanımı vb. bilgileri içerir: Bu web sitesi A431 hücre hattının kültürlenmesi için kısa bir protokol içermektedir.

Referanslar

Quadri, M., et al., Kutanöz Skuamöz Hücreli Karsinomun in vitro ve in vivo Araştırılması: Yeni 3D Araçlar ve Hayvan Modelleri. Front Med (Lozan), 2022. 9: p. 875517.

Zeng, N., et al., A431 deri karsinomu hücre hattına karşı kafeik asit n-bütil esterin antikanser aktivitesi, apoptozun indüksiyonu ve mTOR/PI3K/AKT sinyal yolunun inhibisyonu yoluyla gerçekleşir Geri çekme in/10.3892/mmr. 2021.12011.

Moleküler tıp raporları, 2018. 17(4): p. 5652-5657.

Rahaman, A., et al., Eucalyptol, cilt kanseri metastazını inhibe etmek için PI3K/Akt/mTOR yolağını hedefler.

Carcinogenesis, 2022. 43(6): p. 571-583. Rahim, N.A., et al., Alstonia angustiloba-gümüş nanopartiküllerinin deri skuamöz hücreli karsinomunda (A431 hücre hattı) antiproliferatif mekanizmalarının araştırılması.

Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: p. 131814. Lim, Y.J., et al., A431 hücreli fare ksenograft modellerinde eksojen bir epidermal büyüme faktörü ile tümör büyümesinin baskılanması ve gelişmiş radyolojik yanıt.

Kanser Araştırmaları ve Tedavisi: Kore Kanser Derneği Resmi Dergisi, 2015. 47(4): p. 921-930.