เซลล์ U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP

€800.00*การแปล: "การแปล"

ผลิตภัณฑ์จะถูกจัดส่งในสภาพแช่แข็งบนน้ำแข็งแห้งในหลอดเก็บตัวอย่างแบบฉนวนความเย็น (cryotubes) โดยแต่ละหลอดจะบรรจุเซลล์ประมาณ 3 × 10 ⁶ เซลล์ สำหรับสายเซลล์ที่เกาะผนัง หรือ 5 × 10⁶ เซลล์ สำหรับสายเซลล์แบบแขวนลอย (โปรดดูรายละเอียดเพิ่มเติมในใบรับรองการวิเคราะห์ (CoA) ของแต่ละล็อต)

ราคาไม่รวมภาษีและค่าจัดส่ง

cryovial

หมายเลขสินค้า: 300444

เอกสารข้อมูลความปลอดภัย

แผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

ใบรับรองการวิเคราะห์ (CoA)

ข้อตกลงบุคคลที่สาม

คำอธิบาย	U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP เป็นสายเซลล์มะเร็งกระดูกชนิด osteosarcoma ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรม มาจากสายเซลล์มนุษย์ U-2 OS ซึ่งเป็นสายเซลล์ต้นแบบ สายเซลล์นี้ถูกพัฒนาขึ้นโดยการแก้ไขจีโนมด้วยเทคโนโลยี CRISPR/Cas9 เพื่อเพิ่มแท็ก SNAP เข้าไปที่ตำแหน่งของยีน NUP96 ทำให้สามารถสังเกตและศึกษาพลวัตของโครงสร้างรูพรุนในนิวเคลียสได้นิวเคลียร์พอร์คอมเพล็กซ์ (NPCs) มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการควบคุมการขนส่งนิวเคลียส-ไซโทพลาสซึม และ NUP96 เป็นองค์ประกอบที่สำคัญของ NPC ซึ่งมีบทบาทสำคัญอย่างยิ่งต่อความสมบูรณ์ของโครงสร้างและการทำงานของมัน ในโคลน U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP หมายเลข 33 การรวมตัวของแท็ก SNAP ที่ตำแหน่ง NUP96 ช่วยให้สามารถเชื่อมต่อสารเรืองแสงหรือสารเคมีอื่นๆ ได้เฉพาะเจาะจงและแบบโควาเลนต์ ซึ่งสามารถใช้สำหรับการถ่ายภาพเซลล์ที่มีชีวิตและการทดสอบทางชีวเคมีอื่นๆคุณสมบัตินี้ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาพลวัตระดับโมเลกุลของการขนส่งระหว่างนิวเคลียสและไซโทพลาซึม, การเข้าใจโรคที่เกี่ยวข้องกับ NPC, และการคัดกรองสารบำบัดที่มีผลต่อการทำงานของ NPC สายเซลล์นี้ยังคงลักษณะของสายเซลล์ต้นกำเนิด U-2 OS ซึ่งรวมถึงระดับความเสถียรทางพันธุกรรมที่สูงและความง่ายในการเพาะเลี้ยง ทำให้เหมาะสำหรับการคัดกรองแบบผ่านสูงและการศึกษาในระยะยาวทางชีววิทยาของเซลล์ เนื่องจากความเฉพาะเจาะจงของการดัดแปลงที่บริเวณยีน NUP96 ทำให้โคลน U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP หมายเลข 33 เป็นแบบจำลองที่มีเอกลักษณ์สำหรับการศึกษาองค์ประกอบของ NPC อย่างละเอียดในบริบทของการทำงานและการทำงานผิดปกติของเซลล์นักวิจัยสามารถใช้ระบบ SNAP-tag เพื่อติดฉลาก NUP96 ได้อย่างเฉพาะเจาะจงและรวดเร็ว ซึ่งช่วยให้สามารถมองเห็นการเปลี่ยนแปลงของ NPC แบบเรียลไทม์ภายใต้สภาวะทางสรีรวิทยาและพยาธิสภาพได้ โคลนเฉพาะนี้สามารถทำหน้าที่เป็นแพลตฟอร์มที่แข็งแกร่งสำหรับการวิจัยพื้นฐานและการศึกษาทางชีวการแพทย์ประยุกต์ ซึ่งจะมีส่วนสำคัญต่อสาขาชีววิทยาเซลล์ พันธุศาสตร์ และมะเร็งวิทยา
สิ่งมีชีวิต	มนุษย์
เนื้อเยื่อ	กระดูก
โรค	มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา

อายุ	15 ปี
เพศ	เพศหญิง
เชื้อชาติ	คอเคเชียน
คุณสมบัติการเติบโต	ยึดติด

การอ้างอิง	U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300444)
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ	1
NCBI TaxID	9606
เซลโลซอรัสหมายเลขทะเบียน	CVCL_B7FL
ผู้ฝากเงิน	ห้องปฏิบัติการเอลเลนเบิร์ก (EMBL)
สถานะของสิ่งมีชีวิตดัดแปลงพันธุกรรม	GMO-S1: สายพันธุ์เซลล์มะเร็งกระดูกของมนุษย์ (U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP, clone 33) นี้มี NUP96-SNAP ที่ถูกดัดแปลงด้วย CRISPR ซึ่งช่วยให้สามารถติดฉลากทางเคมีของรูพรุนในนิวเคลียสด้วย SNAP-tag ได้ การดัดแปลงนี้ถูกรวมเข้าอย่างคงที่ การจำแนกประเภทนี้ใช้เฉพาะในเยอรมนีเท่านั้นและอาจแตกต่างกันในที่อื่น

การแสดงออกของโปรตีน	NUP96-SNAP (โปรตีนคอมเพล็กซ์รูพรุ่งนิวเคลียร์ 96, SNAP-tag)

อาหารเลี้ยงเชื้อ	McCoys 5a, w: 3.0 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: เสถียร กลูตามีน, w: 2.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820200a)
อาหารเสริม	เติมสารอาหารเสริมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, กลูโคส 3.0 กรัม/ลิตร, กลูตามีนที่เสถียร, โซเดียมไพรูเวต 2.0 มิลลิโมลาร์, โซเดียมไฮโดรเจนคาร์บอเนต 2.2 กรัม/ลิตร, NEAA 1%
สารละลายตัวแยก	แอคคูเทส
การเพาะเลี้ยงเชื้อแบบแยกส่วน	นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด	1 x 10^{^4} เซลล์/ซม.^²
การฟื้นฟูของเหลว	2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
สื่อเลี้ยงเซลล์แบบแช่แข็ง	ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
การละลายและการเพาะเลี้ยงเซลล์	ยืนยันว่าขวดยังคงแช่แข็งอย่างสมบูรณ์เมื่อได้รับสินค้า เนื่องจากเซลล์ถูกจัดส่งบนน้ำแข็งแห้งเพื่อรักษาอุณหภูมิที่เหมาะสมระหว่างการขนส่ง เมื่อได้รับแล้ว ให้เก็บ cryovial ทันทีที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150 องศาเซลเซียส เพื่อรักษาความสมบูรณ์ของเซลล์ หรือดำเนินการตามขั้นตอนที่ 3 หากจำเป็นต้องเพาะเลี้ยงทันที สำหรับการเพาะเลี้ยงทันที ให้ละลายน้ำแข็งในหลอดอย่างรวดเร็วโดยแช่หลอดในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37°C พร้อมน้ำสะอาดและสารต้านจุลชีพ คนเบา ๆ เป็นเวลา 40-60 วินาที จนกระทั่งเหลือเพียงก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก ดำเนินการขั้นตอนต่อไปทั้งหมดภายใต้สภาวะปลอดเชื้อในตู้ลมไหล โดยฆ่าเชื้อขวดแช่แข็งด้วยแอลกอฮอล์ 70% ก่อนเปิด เปิดขวดยาฆ่าเชื้ออย่างระมัดระวัง และถ่ายโอนสารแขวนลอยเซลล์ลงในหลอดปั่นเหวี่ยงขนาด 15 มิลลิลิตรที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อที่อุณหภูมิห้อง 8 มิลลิลิตร โดยคนเบา ๆ ปั่นเหวี่ยงส่วนผสมที่ความเร็ว 300 x g เป็นเวลา 3 นาที เพื่อแยกเซลล์ออกจากกัน แล้วเทส่วนใสที่อยู่ด้านบนซึ่งมีสารแช่แข็งตกค้างออกอย่างระมัดระวัง ค่อยๆ ผสมเซลล์ที่ตกตะกอนให้ละลายในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ 10 มิลลิลิตร สำหรับเซลล์ที่เกาะติด ให้แบ่งสารแขวนลอยลงในขวดเลี้ยงเชื้อ T25 สองขวด สำหรับการเลี้ยงแบบแขวนลอย ให้ถ่ายอาหารเลี้ยงเชื้อทั้งหมดลงในขวด T25 ขวดเดียว เพื่อส่งเสริมการปฏิสัมพันธ์และการเจริญเติบโตของเซลล์อย่างมีประสิทธิภาพ ปฏิบัติตามระเบียบปฏิบัติของกลุ่มวัฒนธรรมย่อยที่กำหนดไว้สำหรับการเติบโตและการบำรุงรักษาของเซลล์ไลน์อย่างต่อเนื่อง เพื่อให้มั่นใจในผลลัพธ์การทดลองที่เชื่อถือได้
บรรยากาศการบ่มเพาะ	37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น
การเคลือบขวด	สำหรับการยึดเกาะและการมีชีวิตที่ดีที่สุดหลังการละลาย เราแนะนำให้ใช้ขวดหรือจานเคลือบคอลลาเจน
ขั้นตอนการแช่แข็ง	เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
เงื่อนไขการจัดส่ง	เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
เงื่อนไขการเก็บรักษา	สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

ความปราศจากเชื้อ	การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

หมายเลขล็อต	ประเภทใบรับรอง	วันที่	หมายเลขแคตตาล็อก
300444-040724	ใบรับรองการวิเคราะห์	23. May. 2025	300444

โปรดทราบว่าสายเซลล์นี้ไม่สามารถใช้ได้ภายใต้ข้อตกลง Cytion MTA มาตรฐาน เนื่องจากต้องใช้ข้อตกลงกับบุคคลที่สามและ/หรือต้องเจรจากับผู้ให้สิทธิ์เดิม

ขับเคลื่อนโดย Bioz ดูรายละเอียดเพิ่มเติมได้ที่ Bioz

เซลล์ U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP

ข้อมูลทั่วไป

ลักษณะ

ข้อมูลด้านกฎระเบียบ

ข้อมูลชีวโมเลกุล

การจัดการ

การควบคุมคุณภาพ / โปรไฟล์ทางพันธุกรรม / HLA

ใบรับรองการวิเคราะห์ (CoA)

ข้อตกลงบุคคลที่สาม