อาหารเลี้ยงเซลล์

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์พื้นฐานที่มีความหลากหลายสูงและถูกใช้อย่างแพร่หลาย ออกแบบมาเพื่อสนับสนุนการเจริญเติบโตของเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลากหลายชนิดในงานวิจัยทางชีววิทยา เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์ที่เหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับการเพาะเลี้ยงไฟโบรบลาสต์ปฐมภูมิ, เซลล์ประสาท, เซลล์เกลีย, HUVECs, เซลล์กล้ามเนื้อเรียบ รวมถึงสายพันธุ์เซลล์ยอดนิยมอย่าง HeLa, 293, Cos-7 และ PC-12
สิ่งที่ทำให้ DMEM แตกต่างจากสื่ออาหารเลี้ยงเซลล์ชนิดอื่น ๆ คือองค์ประกอบที่เป็นเอกลักษณ์เฉพาะตัว โดย DMEM มีปริมาณกรดอะมิโนและวิตามินสูงกว่าสูตรดั้งเดิมของ Eagle's Minimal Essential Medium ถึงสี่เท่า ในขั้นต้น DMEM ถูกพัฒนาขึ้นโดยใช้กลูโคสต่ำ (1 กรัมต่อลิตร) และโซเดียมไพรูเวต ต่อมาจึงนิยมใช้ DMEM ร่วมกับกลูโคสในระดับที่สูงขึ้น ทั้งแบบที่มีหรือไม่มีโซเดียมไพรูเวตDMEM ไม่มีโปรตีน, ไขมัน, หรือปัจจัยการเจริญเติบโต ทำให้จำเป็นต้องมีการเสริมเพิ่มเติม เพื่อให้ได้การเจริญเติบโตที่ดีที่สุด วิธีการทั่วไปคือการเสริม DMEM ด้วย 10% ของเซรั่มจากวัวตัวเมียที่ตั้งครรภ์ (FBS) นอกจากนี้ DMEM ยังใช้ระบบบัฟเฟอร์โซเดียมไบคาร์บอเนต ซึ่งต้องการสภาพแวดล้อมที่มี CO2 5-10% เพื่อรักษาค่า pH ให้อยู่ในระดับทางสรีรวิทยา
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) เป็นที่ยอมรับอย่างสูงในหมู่สื่อเพาะเลี้ยงเซลล์และเนื้อเยื่อที่กำหนดไว้ เพื่อตอบสนองความต้องการในการเจริญเติบโตของเซลล์ชนิดต่าง ๆ ที่ยึดติดกับพื้นผิวได้ดี มันเหนือกว่า Eagle's Medium ต้นฉบับที่พัฒนาขึ้นในทศวรรษ 1950 สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ไก่ ผ่านการปรับปรุงสูตรเสริมที่รู้จักกันในชื่อการดัดแปลงของ Dulbeccoการปรับเปลี่ยนนี้ช่วยเพิ่มปริมาณของกรดอะมิโนและวิตามินที่เลือกไว้ได้อย่างมีนัยสำคัญถึงสี่เท่าเมื่อเทียบกับอาหารเลี้ยงเชื้อต้นแบบ
ในสาขาการเพาะเลี้ยงเซลล์ DMEM มีบทบาทสำคัญอย่างยิ่งในฐานะอาหารเลี้ยงเซลล์สำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์หลากหลายชนิด รวมถึงเซลล์ต้นกำเนิด เซลล์ต้นกำเนิด และเซลล์ที่ถูกเปลี่ยนแปลง นักวิจัยยังใช้ DMEM ที่ได้รับการปรับปรุงให้เหมาะสมสำหรับการนำไปใช้ในงานวิจัยหลากหลายสาขา เช่น การค้นคว้ายา การสร้างเนื้อเยื่อ และการศึกษาเส้นทางการสื่อสารของเซลล์

การควบคุมคุณภาพ

ผ่านการกรองแบบปลอดเชื้อ


การเก็บรักษาและอายุการเก็บรักษา

เก็บไว้ที่ +2°C ถึง +8°C ป้องกันแสง
เมื่อเปิดแล้ว ให้เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C และใช้ภายใน 6–8 สัปดาห์


เงื่อนไขการจัดส่ง

อุณหภูมิแวดล้อม


การบำรุงรักษา

เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด หลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการอุ่นบ่อยครั้งถึง +37°C เนื่องจากจะทำให้คุณภาพของผลิตภัณฑ์ลดลง
ห้ามให้ความร้อนกับตัวกลางเกิน 37°C หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ เช่น เตาไมโครเวฟ
หากจะใช้เพียงบางส่วนของสารให้ใช้ปริมาณที่ต้องการและอุ่นให้ถึงอุณหภูมิห้องก่อนใช้


องค์ประกอบ



หมวดหมู่
ส่วนประกอบ
ความเข้มข้น (มิลลิกรัมต่อลิตร)


กรดอะมิโน
ไกลซีน
30.00



แอล-อาร์จินีน เฮสเพอไรดิน
84.00



แอล-ซิสเตอีน 2 เฮกซะไฮโดรคลอไรด์
62.57



แอล-กลูตามีน
584.00



แอล-ฮีสติดีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ไฮโดรเจน 2 โมเลกุล
42.00



แอล-ไอโซลิวซีน
105.00



แอล-ลิวซีน
105.00



แอล-ไลซีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์
146.00



แอล-เมไทโอนีน
30.00



แอล-ฟีนิลอะลานีน
66.00



แอล-ซีรีน
42.00



แอล-ทรีโอนีน
95.00



แอล-ทริปโตเฟน
16.00



แอล-ไทโรซีน 2 โซเดียม2H2O
103.79



แอล-วาลีน
94.00


วิตามิน
โคลีนคลอไรด์
4.00



ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต
4.00



กรดโฟลิก
4.00



ไมโอ-อิโนซิทอล
7.20



นิโคตินาไมด์
4.00



ไพริดอกซาล เฮเซอเรต เฮเซอเรต
4.00



ไรโบฟลาวิน
0.40



ไทอามีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์
4.00


เกลืออนินทรีย์
แคลเซียมคลอไรด์2ไฮโดรเจน2 ออกไซด์
265.00



เหล็ก(II)ไนเตรต 9น้ำ1 โมเลกุล
0.10



โพแทสเซียมคลอไรด์
400.00



แมกนีเซียมซัลเฟต7H2O
200.10



NaCl
6400.00



โซเดียมไบคาร์บอเนต
3700.00



NaH2PO42H2O
141.73


ส่วนประกอบอื่น ๆ
ดี-กลูโคส
4500.00



โซเดียมฟีนอลเรด
15.90



โซเดียมไพรูเวต
110.00

Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) เป็นหนึ่งในอาหารเลี้ยงเซลล์พื้นฐานที่ใช้กันอย่างแพร่หลายมากที่สุดสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลากหลายชนิด โดยเฉพาะเซลล์สายพันธุ์ที่เกาะติด พื้นฐานสูตรนี้พัฒนาโดย Harry Eagle ประกอบด้วยกรดอะมิโนที่จำเป็น วิตามิน และเกลืออนินทรีย์ที่จำเป็นต่อการสนับสนุนการเจริญเติบโตของทั้งเซลล์ต้นกำเนิดและเซลล์สายพันธุ์ภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงมาตรฐาน

สูตรน้ำพร้อมใช้ที่ผ่านการกรองฆ่าเชื้อแล้วนี้ เสริมด้วยสารละลายเกลือสมดุล Earle (EBSS) แอล-กลูตามีน 2 มิลลิโมลาร์ ดี-กลูโคส (1.0 กรัม/ลิตร) และโซเดียมไบคาร์บอเนต (NaHCO3) 2.2 กรัม/ลิตร ทำให้เหมาะสำหรับใช้ในบรรยากาศตู้ฟักที่ควบคุมด้วย CO2 (โดยทั่วไป 5% CO2). ฟีนอลเรดที่รวมอยู่ทำหน้าที่เป็นตัวบ่งชี้ค่า pH ช่วยให้สามารถตรวจสอบสภาพของอาหารเลี้ยงเซลล์ได้อย่างสะดวกด้วยสายตาในระหว่างการเพาะเลี้ยงเซลล์

คุณสมบัติเด่น

สูตร MEM แบบดั้งเดิมของ Classic Eagle พร้อมด้วย Earle's Balanced Salt Solution (EBSS)
ประกอบด้วย L-กลูตามีน 2 มิลลิโมลาร์ – พร้อมใช้งานทันที
2.2 กรัม/ลิตร โซเดียมไบคาร์บอเนต – ปรับเป็นบัฟเฟอร์สำหรับบ่มที่ 5 % CO2
โดยใช้ D-glucose (1.0 กรัม/ลิตร) เป็นแหล่งคาร์บอนหลัก
โดยใช้ฟีโนลเรดเป็นตัวบ่งชี้ค่าพีเอช
ไม่มี HEPES และไม่มีโซเดียมไพรูเวต
น้ำยาเหลวที่ผ่านการกรองแบบปราศจากเชื้อ พร้อมใช้งาน
ค่า pH 7.0 – 7.6


การใช้งานทั่วไป
EMEM สนับสนุนการเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลากหลายชนิด รวมถึง HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 และเซลล์ต้นกำเนิดหลายชนิด การใช้งานทั่วไปได้แก่:

การบำรุงรักษาตามปกติและการขยายสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติด
การแพร่กระจายของไวรัสและกระบวนการผลิตวัคซีน
การทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์และการประยุกต์ใช้ทางชีววิเคราะห์
การศึกษาการถ่ายโอนยีนและการแสดงออกของโปรตีน
การวิจัยพื้นฐานในชีววิทยาของเซลล์และชีววิทยาโมเลกุล

สำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์ที่ดีที่สุด EMEM มักจะเสริมด้วยเซรั่มจากเลือดวัวตัวเมียที่ตั้งท้อง 5–10 % (FBS) และขึ้นอยู่กับสายพันธุ์ของเซลล์ อาจเสริมด้วยกรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น (NEAA) และยาปฏิชีวนะ เช่น เพนิซิลลิน/สเตียโรมัยซิน

การจัดการและการเก็บรักษา
เก็บขวดที่ยังไม่เปิดไว้ที่ +2 °C ถึง +8 °C ป้องกันแสง หลังจากเปิดแล้ว ให้ใช้ภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ L-Glutamine ในสารละลายจะเสื่อมสภาพอย่างช้าๆ
- เราแนะนำให้ใช้สื่อภายใน 4 สัปดาห์หลังจากเปิดเพื่อประสิทธิภาพที่ดีที่สุด หรือเสริมด้วย L-Glutamine ใหม่ก่อนใช้งานหากเก็บไว้นานกว่านั้น ปล่อยให้สื่ออุ่นถึง 37 °C ก่อนนำไปเติมในเซลล์

คุณภาพ
ผลิตภายใต้มาตรฐานคุณภาพที่เข้มงวด แต่ละชุดผ่านการทดสอบความปลอดเชื้อ ค่า pH ความเข้มข้นของออสโมลาลิตี้ และระดับเอนโดทอกซิน เพื่อให้มั่นใจในประสิทธิภาพที่สม่ำเสมอในการใช้งานกับการเพาะเลี้ยงเซลล์

ข้อมูลจำเพาะของสินค้า



ข้อกำหนด
รายละเอียด



ประเภทสินค้าMEM
หมวดหมู่สินค้าอาหารเลี้ยงเซลล์
รูปแบบของเหลว
ปราศจากเชื้อใช่
ขนาด500 มิลลิลิตร
แอล-กลูตามีนด้วยแอล-กลูตามีน (2 มิลลิโมลาร์)
กลูโคสด้วยกลูโคส (1.0 กรัม/ลิตร)
โซเดียมไบคาร์บอเนตด้วย NaHCO3 (2.2 กรัม/ลิตร)
HEPESไม่มี HEPES
โซเดียมไพรูเวตปราศจากโซเดียมไพรูเวต
ฟีโนลเรดด้วยฟีนอลเรด
น้ำเกลือสารละลายเกลือสมดุลของเอิร์ล (EBSS)
พีเอช7.0 – 7.6
ปริมาณเอนโดทอกซินไม่ได้ระบุ
การจัดเก็บ+2 °C ถึง +8 °C



สูตร (ส่วนประกอบต่อลิตร)



องค์ประกอบ
ความเข้มข้น (มิลลิกรัมต่อลิตร)




เกลืออนินทรีย์


แคลเซียมคลอไรด์ · 2H2Oสองร้อยหกสิบห้าจุดศูนย์ศูนย์
แมกนีเซียมซัลเฟต97.72
โพแทสเซียมคลอไรด์สี่ร้อยศูนย์ศูนย์
โซเดียมคลอไรด์หกพันแปดร้อยบาท
โซเดียมไดไฮโดรเจนฟอสเฟต ชนิดไม่มีน้ำหนึ่งร้อยยี่สิบสองจุดศูนย์ศูนย์
โซเดียมไบคาร์บอเนต (NaHCO3)สองพันสองร้อยยี่สิบ


กรดอะมิโน

แอล-อาร์จินีน · เฮสเพอริดินหนึ่งร้อยยี่สิบหกจุดศูนย์ศูนย์
แอล-ซิสเตอีน · 2HCl31.30
แอล-กลูตามีนสองร้อยเก้าสิบสองจุดศูนย์ศูนย์
แอล-ฮิสทิดีน · เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ · น้ำสี่สิบสองจุดศูนย์ศูนย์
แอล-ไอโซลิวซีนห้าสิบสองจุดศูนย์ศูนย์
แอล-ลิวซีนห้าสิบสองจุดศูนย์ศูนย์
แอล-ไลซีน · เฮกซะไฮโดรคลอไรด์เจ็ดสิบสองจุดห้าศูนย์
แอล-เมไทโอนีน15.00
แอล-ฟีนิลอะลานีนสามสิบสองจุดศูนย์ศูนย์
แอล-ทรีโอนีนสี่สิบแปดจุดศูนย์ศูนย์
แอล-ทริปโตเฟนสิบโมง
แอล-ไทโรซีน · 2Na · 2H2O51.90
แอล-วาลีนสี่สิบหกจุดศูนย์ศูนย์


วิตามิน

ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนตหนึ่งจุดศูนย์ศูนย์
โคลีนคลอไรด์หนึ่งจุดศูนย์ศูนย์
กรดโฟลิกหนึ่งจุดศูนย์ศูนย์
ไมโอ-อิโนซิทอล2.00
นิโคตินาไมด์หนึ่งจุดศูนย์ศูนย์
ไพริดอกซัล · เฮกซะไฮโดรคลอไรด์หนึ่งจุดศูนย์ศูนย์
ไรโบฟลาวิน0.10
ไทอามีน · เฮกซะไฮโดรคลอไรด์หนึ่งจุดศูนย์ศูนย์


ส่วนประกอบอื่น ๆ

D(+)-กลูโคสหนึ่งพันบาทถ้วน
ฟีโนลเรดสิบโมง

Ham's F-12 Medium หรือที่รู้จักกันในชื่อ Ham's F-12 Nutrient Mix เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์พื้นฐานที่ใช้กันอย่างแพร่หลาย ออกแบบมาโดยเฉพาะสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ มีการใช้งานอย่างกว้างขวางสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบปราศจากซีรัมและการเพาะเลี้ยงเซลล์เดี่ยวของเซลล์รังไข่หนูแฮมสเตอร์จีน (CHO) เซลล์ปอด และเซลล์ L ของหนูนอกจากนี้ Ham's F-12 ยังเป็นสารกลางที่เลือกใช้สำหรับการทดสอบความเป็นพิษต่อคลอน (Clonal Toxicity Assay หรือ CTA)
หนึ่งในข้อได้เปรียบที่โดดเด่นของมันคือความสามารถในการสนับสนุนการเจริญเติบโตของเซลล์โดยไม่จำเป็นต้องมีการเติมเซรั่มเข้าไป ซึ่งช่วยกำจัดปัญหาการรบกวนที่อาจเกิดจากส่วนประกอบของเซรั่ม ทำให้ได้ผลลัพธ์การทดลองที่สม่ำเสมอและน่าเชื่อถือ ด้วยการให้สภาพแวดล้อมการเพาะเลี้ยงที่ปราศจากเซรั่ม Ham's F-12 Medium ช่วยให้ผู้วิจัยสามารถควบคุมการทดลองของตนได้ดีขึ้น
อีกหนึ่งคุณสมบัติสำคัญของ Ham's F-12 Medium คือความเหมาะสมสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบเซลล์เดี่ยว ซึ่งทำให้เป็นทางเลือกที่ยอดเยี่ยมสำหรับเซลล์ไลน์หลากหลายชนิด รวมถึงเซลล์ CHO, เซลล์ปอด และเซลล์ L ของหนู สารอาหารที่ปรับสูตรอย่างเหมาะสมในอาหารเลี้ยงเซลล์นี้ช่วยส่งเสริมการยึดเกาะและการเจริญเติบโตของเซลล์แต่ละเซลล์อย่างมีประสิทธิภาพ ส่งผลให้เกิดการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่มีความสม่ำเสมอและสามารถทำซ้ำได้ดียิ่งขึ้น
นอกจากนี้ Ham's F-12 Medium ยังได้รับการยอมรับว่าเป็นตัวกลางที่ได้รับความนิยมสำหรับการทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์แบบโคลน (Clonal Toxicity Assay หรือ CTA) ซึ่งการทดสอบนี้มีบทบาทสำคัญในการประเมินผลกระทบของสารต่อเซลล์ โดยการใช้ Ham's F-12 Medium ในการทดสอบ CTA นักวิจัยสามารถประเมินผลกระทบของสารประกอบหรือการรักษาต่างๆ ต่อเซลล์แต่ละเซลล์ได้อย่างแม่นยำ ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกที่มีค่าเกี่ยวกับโปรไฟล์ความเป็นพิษของสารนั้นๆ
การควบคุมคุณภาพ

pH = 7.2 +/
- 0.02 ที่ 20-25 องศาเซลเซียส
แต่ละล็อตได้รับการทดสอบความปราศจากเชื้อและความไม่มีเชื้อราและแบคทีเรียแล้ว

การบำรุงรักษา

เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด การแช่แข็งและการอุ่นให้ถึง +37°C จะลดคุณภาพของผลิตภัณฑ์
ห้ามให้ความร้อนกับตัวกลางเกิน 37 องศาเซลเซียส หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ (เช่น เครื่องใช้ไมโครเวฟ)
หากจะใช้เพียงบางส่วนของสารละลาย ให้ตักปริมาณที่ต้องการออกจากขวดแล้วนำไปอุ่นที่อุณหภูมิห้อง
อายุการเก็บรักษาสำหรับทุกชนิดของอาหารเลี้ยงเชื้อ ยกเว้นอาหารเลี้ยงเชื้อพื้นฐาน คือ 8 สัปดาห์นับจากวันที่ผลิต

องค์ประกอบ




ส่วนประกอบ
มิลลิกรัมต่อลิตร


เกลืออนินทรีย์
แคลเซียมคลอไรด์ x 2H2O
สี่สิบสี่พัน



คอปเปอร์(II) ซัลเฟต x 5H2O
ศูนย์,ศูนย์



เหล็ก (II) ซัลเฟต x 7H2O
0.83



แมกนีเซียมคลอไรด์ x 6H2O
หนึ่งร้อยยี่สิบสองพัน



โพแทสเซียมคลอไรด์
223,65



โซเดียมคลอไรด์
เจ็ดพันห้าร้อยเก้าสิบเก้า,00



ไดโซเดียมไฮโดรเจนฟอสเฟตไม่มีน้ำ
หนึ่งร้อยสี่สิบสองพันสี่



ซิงค์ซัลเฟต x 7H2O
0.86


ส่วนประกอบอื่น ๆ
กลูโคส (D(+)-) อนไฮเดรต
หนึ่งพันแปดร้อยหนึ่ง,หกศูนย์



ไฮโปแซนทีน
4,08



กรดไลโนเลอิก
0.08



กรดดีแอล-แอลฟา-ไลโปอิก
0.21



ฟีโนล เรด
1,20



พุตเทรสซีน x 2HCl
0,16



โซเดียมไพรูเวต
หนึ่งร้อยสิบ



ไทมีดีน
0.73



โซเดียมไบคาร์บอเนต
หนึ่งพันหนึ่งร้อยเจ็ดสิบหก,ศูนย์


กรดอะมิโน
แอล-อะลานีน
8,91



แอล-อาร์จินีน x เฮสเพอร์ไฮโดรคลอไรด์
210,70



แอล-แอสพาราจีน x น้ำ
15,01



กรดแอล-แอสปาร์ติก
13,31



แอล-ซิสเตอีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ
35,12



แอล-อะลานิล-แอล-กลูตามีน
217,30



กรดแอล-กลูตามิก
14,71



ไกลซีน
เจ็ดพันห้าร้อยหนึ่ง



แอล-ฮิสทิดีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ
20,96



แอล-ไอโซลิวซีน
3,94



แอล-ลิวซีน
13,12



แอล-ไลซีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์
36,54



แอล-เมไทโอนีน
4,48



แอล-ฟีนิลอะลานีน
4,96



แอล-โพรลีน
34,53



แอล-ซีรีน
10,51



แอล-ทรีโอนีน
11,91



แอล-ทริปโตเฟน
2,04



แอล-ไทโรซีน
5,44



แอล-วาลีน
11,71


วิตามิน
ดี(+)-ไบโอติน
0.01



ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต
0.24



โคลีนคลอไรด์
13,96



กรดโฟลิก
1,32



ไมโอ-อิโนซิทอล
18,02



นิโคตินาไมด์
0.04



ไพริดอกซีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์
0.06



ไรโบฟลาวิน
0.04



ไทอามีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์
0.34



วิตามินบี12
1,36

DMEM:Ham's F12 เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์พื้นฐานที่ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางและใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีววิทยาในห้องปฏิบัติการเพาะเลี้ยงเซลล์ ใช้เป็นแหล่งสารอาหารพื้นฐานสำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลากหลายสายพันธุ์ โดยเฉพาะเมื่อเติมเซรั่มจากเลือดลูกวัว (FBS)

สูตรเฉพาะนี้ผสมผสาน Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) และ Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) ในอัตราส่วนที่แม่นยำ 1:1 การเติม L-glutamine ช่วยเสริมองค์ประกอบให้ดียิ่งขึ้น

DMEM ซึ่งพัฒนามาจาก Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM) มีความเข้มข้นของกรดอะมิโนและวิตามินสูงกว่าสูตรเดิม ในทางตรงกันข้าม Ham's F-12 มีพื้นฐานมาจาก Ham's F-10 medium โดยให้ชุดองค์ประกอบที่จำเป็นซึ่งเสริมกัน

เพื่อสนับสนุนการเจริญเติบโตของเซลล์อย่างเหมาะสม การเติม FBS ลงใน DMEM:Ham's F12 ที่ความเข้มข้นทั่วไป 5-10% เป็นวิธีปฏิบัติที่พบได้บ่อย การเติมนี้มีความจำเป็นเนื่องจากอาหารเลี้ยงเซลล์ขาดฮอร์โมนการเจริญเติบโต ไขมัน และโปรตีนที่จำเป็นต่อการพัฒนาของเซลล์

DMEM:Ham's F12 ประกอบด้วยระบบบัฟเฟอร์ pH และมักเสริมด้วยฟีโนลเรด ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ pH เซลล์ที่เพาะเลี้ยงใน DMEM:Ham's F12 หรืออาหารเลี้ยงเซลล์ใด ๆ ที่ใช้ระบบบัฟเฟอร์ไบคาร์บอเนต จำเป็นต้องอยู่ในสภาพแวดล้อมที่มีคาร์บอนไดออกไซด์ควบคุมที่ 5-10% เพื่อรักษาระดับ pH ที่เหมาะสม 


การควบคุมคุณภาพ

ผ่านการกรองแบบปลอดเชื้อ


การเก็บรักษาและอายุการเก็บรักษา

เก็บไว้ที่ +2°C ถึง +8°C ป้องกันแสง
เมื่อเปิดแล้ว ให้เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C และใช้ภายใน 6–8 สัปดาห์


เงื่อนไขการจัดส่ง

อุณหภูมิแวดล้อม


การบำรุงรักษา

เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด หลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการอุ่นบ่อยครั้งถึง +37°C เนื่องจากจะทำให้คุณภาพของผลิตภัณฑ์ลดลง
ห้ามให้ความร้อนกับตัวกลางเกิน 37°C หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ เช่น เตาไมโครเวฟ
หากจะใช้เพียงบางส่วนของสารให้ใช้ปริมาณที่ต้องการและอุ่นให้ถึงอุณหภูมิห้องก่อนใช้


องค์ประกอบ



หมวดหมู่
ส่วนประกอบ
ความเข้มข้น (มิลลิกรัมต่อลิตร)


กรดอะมิโน
ไกลซีน
18.75


แอล-อะลานีน
สี่โมงสี่สิบห้านาที


แอล-อาร์จินีน เฮสเพอไรดิน
หนึ่งร้อยสี่สิบเจ็ดจุดห้าศูนย์


แอล-แอสพาราจีน ไฮโดรเจน 2 อะตอม
เจ็ดโมงห้าสิบ


กรดแอล-แอสปาร์ติก
6.65


แอล-ซิสเตอีน เอชซีแอล เอช₂โอ
17.56


แอล-ซิสเตอีน 2 เฮกซอนไฮโดรคลอไรด์
31.29


แอล-กลูตามิก แอซิด
7.35


แอล-กลูตามีน
365.00


แอล-ฮิสทิดีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ ไฮโดรเจน 2 โมเลกุล
31.48


แอล-ไอโซลิวซีน
54.47


แอล-ลิวซีน
ห้าสิบเก้าจุดศูนย์ห้า


แอล-ไลซีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์
91.25


แอล-เมไทโอนีน
17.24


แอล-ฟีนิลอะลานีน
35.48


แอล-โพรลีน
17.25


แอล-ซีรีน
26.25


แอล-ทรีโอนีน
53.45


แอล-ทริปโตเฟน
9.02


แอล-ไทโรซีน 2 โซเดียม 2 น้ำ 2
55.79


แอล-วาลีน
52.85


วิตามิน
ดี-ไบโอติน
0.0035


โคลีนคลอไรด์
แปดจุดเก้าแปด


ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต
2.24


กรดโฟลิก
2.66


ไมโอ-อิโนซิทอล
12.60


นิโคตินาไมด์
2.02


ไพริดอกซีน เฮเซ็กซ์คลอไรด์
0.031


ไพริดอกซัล เฮซิลไฮโดรคลอไรด์
2.00


ไรโบฟลาวิน
0.219


ไทอามีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์
2.17


วิตามินบี12
0.68



เกลืออนินทรีย์
แคลเซียมคลอไรด์ 2 ไฮโดรเจน 2 ออกไซด์
หนึ่งร้อยห้าสิบสี่จุดห้าศูนย์


CuSO4 5 H2O
0.0013


เหล็ก(II)ไนเตรต 9 น้ำ
0.05


เฟอรัสซัลเฟต 7 น้ำ
0.417


โพแทสเซียมคลอไรด์
311.80


แมกนีเซียมคลอไรด์ 6 น้ำ
61.20


แมกนีเซียมซัลเฟต 7 น้ำ
หนึ่งร้อยจุดศูนย์ศูนย์


NaCl
หกพันเก้าร้อยเก้าสิบหกจุดศูนย์ศูนย์


โซเดียมไบคาร์บอเนต
หนึ่งพันสองร้อยบาท


Na2HPO4
เจ็ดสิบเอ็ดจุดศูนย์สอง


NaH2PO4 2 H2O
เจ็ดสิบจุดแปดเจ็ด


ซิงค์ซัลเฟต 7 ไฮโดรเจน 2 โอ
0.432



ส่วนประกอบอื่น ๆ
ดี-กลูโคส
3151.00


ไฮโปแซนธิน
2.40


HEPES
3,574.50


กรดไลโนเลอิก
0.042


กรดไลโปอิก
0.105


โซเดียมฟีนอลเรด
แปดจุดหกสาม


พุตเทรสซีน 2 เฮกซ์อะมิโนไคด์
0.081


โซเดียมไพรูเวต
ห้าสิบห้าบาทถ้วน


ไทมีดีน
0.365

ขอแนะนำ Ham's F-12K (Kaighn's) Medium สื่ออาหารสูตรพิเศษที่พัฒนาต่อยอดจาก Ham's F-12 medium เพื่อตอบสนองความต้องการเฉพาะในงานวิจัยทางชีววิทยา สื่ออาหารขั้นสูงนี้มอบข้อได้เปรียบที่โดดเด่น ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในการเพาะเลี้ยงเซลล์ตับมนุษย์ต้นกำเนิด เซลล์ตับหนู และเซลล์ตับไก่ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในสภาวะที่มีซีรัมต่ำ

Ham's F-12K (Kaighn's) Medium ได้รับการพัฒนาอย่างพิถีพิถันเพื่อปรับสภาพการเพาะเลี้ยงเซลล์ให้เหมาะสมที่สุด ประกอบด้วยส่วนประกอบที่เข้มข้นสูง ซึ่งให้ระดับของส่วนประกอบที่จำเป็น เช่น กรดอะมิโนและโซเดียมไพรูเวตในปริมาณที่สูงขึ้น รวมถึงองค์ประกอบเพิ่มเติม เช่น พูเทรซิน ไทมิดีน ไฮโปแซนธิน และสังกะสี การเติมส่วนประกอบเหล่านี้ช่วยให้นักวิจัยสามารถเสริมอาหารเลี้ยงเซลล์ด้วยซีรัมหรือส่วนประกอบที่กำหนดในปริมาณน้อยสำหรับเซลล์ประเภทเฉพาะ ทำให้สามารถสร้างสภาวะการทดลองที่แม่นยำได้

ที่น่าสังเกตคือ สารอาหาร Ham's F-12K (Kaighn's) Medium ไม่มีโปรตีนหรือปัจจัยการเจริญเติบโต ดังนั้น การเสริมด้วยปัจจัยการเจริญเติบโตและเซรั่มจากเลือดวัวในครรภ์ (FBS) จึงมักจำเป็น ซึ่งช่วยให้นักวิจัยสามารถปรับแต่งสารอาหารให้เหมาะกับความต้องการของสายพันธุ์เซลล์เฉพาะของพวกเขาได้ สำหรับประสิทธิภาพที่ดีที่สุด ความเข้มข้นของ FBS ต้องได้รับการปรับให้เหมาะสมอย่างระมัดระวังสำหรับแต่ละสายพันธุ์เซลล์ เพื่อให้มั่นใจถึงการเจริญเติบโตและการทำงานที่ดีที่สุด

เพื่อรักษาค่า pH ทางสรีรวิทยา สารอาหาร Ham's F-12K (Kaighn's) ใช้ระบบบัฟเฟอร์โซเดียมไบคาร์บอเนต (2.5 กรัม/ลิตร) ซึ่งจำเป็นต้องควบคุมสภาพแวดล้อมให้มี CO2 อยู่ระหว่าง 5-10% ในระหว่างการเพาะเลี้ยง เพื่อให้แน่ใจว่าค่า pH ของสารอาหารอยู่ในช่วงที่เหมาะสมสำหรับการเจริญเติบโตและความมีชีวิตของเซลล์.
การควบคุมคุณภาพ

pH = 7.2 +/
- 0.02 ที่ 20-25 องศาเซลเซียส
แต่ละล็อตได้รับการทดสอบความปราศจากเชื้อและความไม่มีไมโคพลาสมาและแบคทีเรียแล้ว

การบำรุงรักษา

เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด การแช่แข็งหรือการอุ่นให้ถึง +37°C จะลดคุณภาพของผลิตภัณฑ์
ห้ามให้ความร้อนกับตัวกลางเกิน 37 องศาเซลเซียส หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ (เช่น เครื่องใช้ไมโครเวฟ)
หากจะใช้เพียงบางส่วนของสารละลาย ให้ตักปริมาณที่ต้องการออกจากขวดแล้วนำไปอุ่นที่อุณหภูมิห้อง
อายุการเก็บรักษาสำหรับอาหารเลี้ยงเชื้อทุกชนิด ยกเว้นอาหารเลี้ยงเชื้อพื้นฐาน คือ 8 สัปดาห์นับจากวันที่ผลิต

องค์ประกอบ




ส่วนประกอบ
มิลลิกรัมต่อลิตร


เกลืออนินทรีย์
แคลเซียมคลอไรด์ x 2H2O
หนึ่งร้อยสามสิบห้าพันสองร้อยสี่



คอปเปอร์(II) ซัลเฟต x 5H2O
ศูนย์,ศูนย์



เหล็ก (II) ซัลเฟต x 7H2O
0.83



แมกนีเซียมคลอไรด์ x 6H2O
หนึ่งร้อยห้าหมื่นเจ็ดร้อยยี่สิบ



แมกนีเซียมซัลเฟต x 7H2O
394,49



โพแทสเซียมคลอไรด์
283,29



โพแทสเซียมไดไฮโดรเจนฟอสเฟต
58,52



โซเดียมคลอไรด์
เจ็ดพันห้าร้อยเก้าสิบเจ็ดจุดสองศูนย์



ไดโซเดียมไฮโดรเจนฟอสเฟตไม่มีน้ำ
หนึ่งแสนห้าพันสอง



ซิงค์ซัลเฟต x 7H2O
0,14


ส่วนประกอบอื่น ๆ
กลูโคส (D(+)-) อนไฮเดรต
หนึ่งพันสองร้อยหกสิบ



ไฮโปแซนทีน
4,08



กรดดีแอล-แอลฟา-ไลโปอิก
0.21



ฟีโนล เรด
3,00



พุตเทรสซีน x 2HCl
0.32



โซเดียมไพรูเวต
สองร้อยยี่สิบ



โซเดียมไบคาร์บอเนต
สองพันห้าร้อย



ไทมีดีน
0.73


กรดอะมิโน
แอล-อะลานีน
17,82



แอล-อาร์จินีน x เกลือไฮโดรคลอไรด์
421,40



แอล-แอสพาราจีน x น้ำ
30,02



กรดแอล-แอสพาร์ติก
26,62



แอล-ซิสเตอีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ
เจ็ดสิบพันสองร้อยสี่



แอล-กลูตามีน
292,20



กรดแอล-กลูตามิก
29,42



ไกลซีน
15,01



แอล-ฮิสทิดีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ
41,92



แอล-ไอโซลิวซีน
7,87



แอล-ลิวซีน
26,24



แอล-ไลซีน x เอชซีแอล
73,04



แอล-เมไทโอนีน
8,95



แอล-ฟีนิลอะลานีน
9,91



แอล-โพรลีน
69,06



แอล-ซีรีน
21,02



แอล-ทรีโอนีน
23,82



แอล-ทริปโตเฟน
4,08



แอล-ไทโรซีน
10,87



แอล-วาลีน
23,42


วิตามิน
ดี(+)-ไบโอติน
0.07



ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต
0.48



โคลีนคลอไรด์
13,96



กรดโฟลิก
1,32



ไมโอ-อิโนซิทอล
18,02



นิโคตินาไมด์
0.04



ไพริดอกซีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์
0.06



ไรโบฟลาวิน
0.04



ไทอามีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์
0.34



วิตามินบี12
1,36

McCoy's 5A Medium เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดกลางที่ได้รับการแนะนำอย่างสูงและออกแบบมาโดยเฉพาะเพื่อส่งเสริมการเจริญเติบโตและการจำลองตัวของไวรัสในเซลล์เพาะเลี้ยงขั้นต้น ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางในด้านประสิทธิภาพที่โดดเด่นในการใช้งานวิจัยทางชีววิทยาหลากหลายประเภท หนึ่งในตัวอย่างการใช้งานที่โดดเด่นของ McCoy's 5A Medium คือการใช้ในกระบวนการเพาะเลี้ยงเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาตัวรับชนิด G-protein-coupled ที่มีลำดับกรดอะมิโนซ้ำและอุดมด้วยลิวซีน (LGR5) และบทบาทของมันในการแพร่กระจายของมะเร็งลำไส้ใหญ่ สื่อนี้ได้ถูกนำมาใช้อย่างมีประสิทธิภาพในการเพาะเลี้ยงเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่หลายสายพันธุ์ รวมถึง HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b และ TENN ซึ่งช่วยให้นักวิจัยสามารถศึกษาเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกที่อยู่เบื้องหลังการแพร่กระจายของมะเร็งลำไส้ใหญ่ได้ นอกเหนือจากการนำไปใช้ในงานวิจัยมะเร็งแล้ว สื่อ McCoy's 5A Medium ยังได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีความจำเป็นอย่างยิ่งในการศึกษาเซลล์ออสทีโอบลาสต์ (osteoblasts) นักวิจัยที่ทำการศึกษาปฏิกิริยาของไอออนในไฮดรอกซีอะพาไทต์ที่ขาดแคลเซียมในสื่อเพาะเลี้ยงเซลล์มาตรฐานได้ใช้สื่อนี้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ออสทีโอบลาสต์ การนำไปใช้ในครั้งนี้ได้ช่วยให้เกิดความเข้าใจที่ดีขึ้นเกี่ยวกับปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์ออสทีโอบลาสต์กับไฮดรอกซีอะพาไทต์ที่ขาดแคลเซียม ซึ่งช่วยส่งเสริมการก้าวหน้าในสาขาการวิจัยเกี่ยวกับกระดูก McCoy's 5A Medium ได้รับการพัฒนาอย่างพิถีพิถันโดยการปรับแต่งกรดอะมิโนที่พบใน Basal Medium Eagle เพื่อให้การสนับสนุนที่เหมาะสมที่สุดสำหรับเซลล์เนื้องอกในตับ สูตรที่เสริมคุณค่านี้ทำให้เหมาะสมกับสายเซลล์ที่หลากหลาย รวมถึงเซลล์ต้นกำเนิด เพิ่มความหลากหลายในการใช้งานและการประยุกต์ใช้ในสภาพแวดล้อมการวิจัยต่างๆ McCoy's 5A Medium ขยายผลทางชีวเคมีและสรีรวิทยาของมันให้ครอบคลุมเซลล์เนื้องอกในตับได้มากขึ้น มันถูกนำมาใช้สำเร็จในการสนับสนุนการเจริญเติบโตในวัฒนธรรมเซลล์ต้นกำเนิดของไขกระดูก, ผิวหนัง, เหงือก, ไต, เยื่อบุช่องท้อง, ต่อมหมวกไต, ปอด, ม้าม, ตัวอ่อนหนู และเซลล์ชนิดอื่น ๆ ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ความหลากหลายของการใช้งานนี้ยืนยันถึงประโยชน์อันกว้างขวางของ McCoy's 5A Medium ในการสนับสนุนการเจริญเติบโตและการรักษาเซลล์ชนิดต่าง ๆ สำหรับการวิจัยทางชีววิทยาอย่างครอบคลุม สูตร McCoy's 5A medium (modified) นี้ประกอบด้วย กลูโคส 3.0 กรัม/ลิตร, กลูตามีนที่เสถียร, โซเดียมไพรูเวต 2.0 มิลลิโมลาร์ และ NaHCO3 2.2 กรัม/ลิตร การควบคุมคุณภาพ pH = 7.2 +/
- 0.02 ที่ 20-25°C.  แต่ละล็อตได้รับการทดสอบความปราศจากเชื้อและความไม่มีเชื้อราและแบคทีเรียแล้ว การบำรุงรักษา เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด การแช่แข็งและการอุ่นถึง +37°C จะลดคุณภาพของผลิตภัณฑ์  ห้ามให้ความร้อนกับตัวกลางเกิน 37°C หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ (เช่น เครื่องใช้ไมโครเวฟ)  หากจะใช้เพียงบางส่วนของสารละลาย ให้ตักปริมาณที่ต้องการออกจากขวดแล้วอุ่นให้อยู่ในอุณหภูมิห้อง อายุการเก็บรักษาสำหรับทุกชนิดของอาหารเลี้ยงเชื้อ ยกเว้นอาหารเลี้ยงเชื้อพื้นฐาน คือ 6 ถึง 8 สัปดาห์นับตั้งแต่วันที่เปิดใช้ องค์ประกอบ ส่วนประกอบ มิลลิกรัมต่อลิตร เกลืออนินทรีย์แคลเซียมคลอไรด์ x 2H2Oหนึ่งร้อยสามสิบสองจุดศูนย์ศูนย์ แมกนีเซียมซัลเฟต97.67 โพแทสเซียมคลอไรด์สี่ร้อยศูนย์ศูนย์ โซเดียมคลอไรด์หกพันสี่ร้อยหกสิบ ไดโซเดียมไฮโดรเจนฟอสเฟต (ชนิดไม่มีน้ำ)504.00 ส่วนประกอบอื่น ๆD(+)-กลูโคส (ไม่มีน้ำ)สามพันบาทถ้วน กลูตาไธโอน (รีดิวซ์)0.50 เพปโทนเนื้อหกร้อยบาทถ้วน โซเดียมฟีนอลเรดสิบเอ็ดโมง กรดอะมิโนแอล-อะลานีน13.36 แอล-อาร์จินีน x เฮสเพอร์ไฮโดรคลอไรด์42.14 แอล-แอสพาราจีน x น้ำสี่สิบห้าจุดศูนย์สาม กรดแอล-แอสปาร์ติก19.97 แอล-ซิสเตอีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ31.75 แอล-กลูตามีน (เสถียร)219.15 กรดแอล-กลูตามิก22.07 ไกลซีน7.51 แอล-ฮีสติดีน x เกลือไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ20.96 แอล-ไฮดรอกซีโพรลีน19.67 แอล-ไอโซลิวซีน39.36 แอล-ลิวซีน39.36 แอล-ไลซีน x เอชซีแอล36.54 แอล-เมไทโอนีน14.92 แอล-ฟีนิลอะลานีน16.52 แอล-โพรลีน17.27 แอล-ซีรีน26.28 แอล-ทรีโอนีน17.87 แอล-ทริปโตเฟน3.06 แอล-ไทโรซีน ไดโซเดียมซัลต์26.10 แอล-วาลีน17.57 วิตามินกรดพารา-อะมิโนเบนโซอิกหนึ่งจุดศูนย์ศูนย์ กรดแอสคอร์บิก0.56 ดี(+)-ไบโอติน0.20 ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต0.20 โคลีนคลอไรด์ห้าโมงตรง กรดโฟลิกสิบโมง ไมโอ-อิโนซิทอลสามสิบหกจุดศูนย์ศูนย์ นิโคตินาไมด์0.50 กรดนิโคตินิก0.50 ไพริดอกซัล เฮเซียมคลอไรด์0.50 ไพริดอกซีน เฮเซ็กซ์คลอไรด์0.50 ไรโบฟลาวิน0.20 ไทอามีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์0.20 วิตามินบี122.00

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์ที่มีความซับซ้อนและอุดมไปด้วยสารอาหารสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์IMDM เป็นการดัดแปลงของ DMEM ที่มีซีลีเนียมและประกอบด้วยกรดอะมิโน วิตามิน และเกลืออนินทรีย์เพิ่มเติมเมื่อเทียบกับ DMEM มันขาดธาตุเหล็กและต้องการการเสริมด้วยเซรั่มจากเลือดวัวในครรภ์ (FBS) IMDM ใช้ระบบบัฟเฟอร์โซเดียมไบคาร์บอเนตและต้องการสภาพแวดล้อมที่มี CO2 5-10% เพื่อรักษาค่า pH ทางสรีรวิทยา
IMDM เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่มีความหนาแน่นสูงและเพิ่มจำนวนอย่างรวดเร็ว รวมถึงเซลล์ Jurkat, COS-7 และเซลล์แมโครฟาจ การปรับเปลี่ยน IMDM ต่างๆ ที่มีให้สำหรับการใช้งานเพาะเลี้ยงเซลล์หลากหลายประเภทสามารถพบได้โดยใช้เครื่องมือเลือกสื่อ สื่อเหลวให้สารอาหารที่จำเป็นสำหรับการใช้งานเพาะเลี้ยงเซลล์ทุกประเภท สื่อเพาะเลี้ยงเซลล์คุณภาพสูงของเราแต่ละชนิดผลิตตามสูตรที่เผยแพร่ครั้งแรกหรือการปรับเปลี่ยนที่จำเป็นเพื่อให้ได้ประสิทธิภาพและความเสถียรที่สม่ำเสมอของสื่อเพาะเลี้ยง
IMDM เทียบกับ DMEM
IMDM ประกอบด้วยโพแทสเซียมไนเตรตแทนที่เหล็กไนเตรต และ HEPES และโซเดียมไพรูเวต ส่วนประกอบเพิ่มเติมใน IMDM ทำให้เหมาะสมกับเซลล์ชนิดเฉพาะและการใช้งานเฉพาะมากกว่า DMEM
IMDM เทียบกับ RPMI
IMDM และ RPMI มีสูตรที่แตกต่างกันซึ่งอาจมีความเกี่ยวข้องกับการกระตุ้นด้วย PMA/ไอโอโนไมซิน ความแตกต่างที่สำคัญประการหนึ่งคือความเข้มข้นของ Ca2+ ในขณะที่ RPMI มี Ca2+ อยู่ที่ 0.42 mM IMDM มีอยู่ที่ 1.49 mM
การควบคุมคุณภาพ

pH = 7.2 +/
- 0.02 ที่ 20-25°C.
แต่ละล็อตได้รับการทดสอบความปราศจากเชื้อและความไม่มีเชื้อราและแบคทีเรียแล้ว

การบำรุงรักษา

เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด การแช่แข็งและการอุ่นถึง +37°C จะลดคุณภาพของผลิตภัณฑ์
ห้ามให้ความร้อนกับตัวกลางเกิน 37° C หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ (เช่น เตาไมโครเวฟ)
หากจะใช้เพียงบางส่วนของสารละลาย ให้ตักปริมาณที่ต้องการออกจากขวดแล้วนำไปอุ่นที่อุณหภูมิห้อง
อายุการเก็บรักษาสำหรับทุกชนิดของอาหารเลี้ยงเชื้อ ยกเว้นอาหารเลี้ยงเชื้อพื้นฐาน คือ 8 สัปดาห์นับตั้งแต่วันที่ผลิต
องค์ประกอบ




ส่วนประกอบ
มิลลิกรัมต่อลิตร


เกลืออนินทรีย์
แคลเซียมคลอไรด์ x 2 H2O
สองร้อยสิบเก้าพันเก้าร้อย



โพแทสเซียมคลอไรด์
สามร้อยสามสิบ



โพแทสเซียมไนเตรต
0.076



แมกนีเซียมซัลเฟต อนีดรัส
97,73



โซเดียมคลอไรด์
สี่พันห้าร้อยห้าบาท



โซเดียมไดไฮโดรเจนฟอสเฟต ชนิดไม่มีน้ำ
หนึ่งร้อยเก้าหมื่นเก้าร้อย



โซเดียมเซเลไนต์
0.02


ส่วนประกอบอื่น ๆ
กลูโคส (D(+)-) อนไฮเดรต
สี่พันห้าร้อยบาท



HEPES
ห้าพันเก้าร้อยห้าสิบแปดบาท



โซเดียมไพรูเวต
หนึ่งร้อยสิบ



ฟีโนลเรด
15,000


กรดอะมิโน
แอล-อะลานีน
ยี่สิบห้าพัน



แอล-อาร์จินีน x เฮสเพอร์ไรด์
แปดสิบสี่,00



แอล-แอสพาราจีน x น้ำ
ยี่สิบห้าพัน



กรดแอล-แอสปาร์ติก
สามสิบพัน



แอล-ซิสเตอีน x 2HCl
91,24



แอล-กลูตามีน
584,00



กรดแอล-กลูตามิก
เจ็ดสิบห้าพัน



ไกลซีน
สามสิบพัน



แอล-ฮิสทิดีน x เกลือไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ
สี่สิบสองพัน



แอล-ไอโซลิวซีน
หนึ่งร้อยสี่พันแปดร้อย



แอล-ลิวซีน
หนึ่งร้อยสี่พันแปดร้อย



แอล-ไลซีน x เอชซีแอล
หนึ่งร้อยสี่สิบหกพันสองร้อย



แอล-เมไทโอนีน
สามหมื่น



แอล-ฟีนิลอะลานีน
หกสิบหกพัน



แอล-โพรลีน
สี่สิบพัน



แอล-ซีรีน
สี่สิบสองพัน



แอล-ทรีโอนีน
95,20



แอล-ทริปโตเฟน
16,000



แอล-ไทโรซีน x 2Na
หนึ่งร้อยสี่พันสองร้อย



แอล-วาลีน
93,60


วิตามิน
ดี(+)-ไบโอติน
0.013



ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต
สี่พัน



โคลีนคลอไรด์
สี่พัน



กรดโฟลิก
สี่พัน



ไมโอ-อิโนซิทอล
เจ็ดพันสองร้อย

RPMI 1640 Medium หรือที่รู้จักกันในชื่อ RPMI medium เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์ที่มีความหลากหลายสูงและถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีววิทยาเพื่อเพาะเลี้ยงเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลากหลายชนิด พัฒนาโดย George E. Moore, Robert E. Gerner และ H. Addison Franklin ในปี 1966 ที่ศูนย์มะเร็ง Roswell Park Comprehensive Cancer Center อันมีชื่อเสียง อาหารเลี้ยงเซลล์นี้ได้ชื่อมาจากสถาบัน Roswell Park Memorial Institute (RPMI) ซึ่งเป็นแหล่งกำเนิด
RPMI 1640 Medium ได้รับการออกแบบในขั้นต้นเพื่อสนับสนุนการเจริญเติบโตของเซลล์เม็ดเลือดขาวมะเร็งในมนุษย์ทั้งในแบบแขวนลอยและแบบชั้นเดียว โดยผ่านการปรับปรุงโดยนักวิจัยและผู้จัดจำหน่ายเชิงพาณิชย์จนกลายเป็นที่เหมาะสมสำหรับเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลากหลายชนิด มีความเข้ากันได้อย่างดีเยี่ยมกับสายเซลล์เช่น HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocytes และ carcinomas
RPMI 1640 Medium โดดเด่นจากสื่อเพาะเลี้ยงเซลล์อื่น ๆ เนื่องจากองค์ประกอบที่เป็นเอกลักษณ์ มีฟอสเฟต กรดอะมิโน และวิตามินในปริมาณมาก โดยเฉพาะอย่างยิ่งมีไบโอติน วิตามินบี12 และ PABA ซึ่งไม่มีใน Eagle's Minimal Essential Medium หรือ Dulbecco's Modified Eagle Mediumนอกจากนี้ สารอาหาร RPMI 1640 Medium ยังแสดงค่าความเข้มข้นของวิตามินอินโนซิทอลและโคลีนที่สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ อย่างไรก็ตาม สารอาหารนี้ไม่มีโปรตีน ไขมัน หรือปัจจัยการเจริญเติบโต ดังนั้น การเติมเซรั่มจากเลือดของลูกวัวในครรภ์ (Fetal Bovine Serum หรือ FBS) ในปริมาณ 10% จึงมักจำเป็นเพื่อให้ได้สภาวะที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์
ระบบการบัฟเฟอร์ของ RPMI 1640 Medium อาศัยโซเดียมไบคาร์บอเนตและจำเป็นต้องมีสภาพแวดล้อมที่มี CO2 5-10% เพื่อรักษาค่า pH ที่เหมาะสมทางสรีรวิทยา การเพิ่มสารรีดิวซ์กลูตาไธโอนยังช่วยแยกความแตกต่างของอาหารเลี้ยงเซลล์นี้จากอาหารชนิดอื่นอีกด้วย
การควบคุมคุณภาพ

ผ่านการกรองแบบปลอดเชื้อ


การเก็บรักษาและอายุการเก็บรักษา

เก็บไว้ที่ +2°C ถึง +8°C ป้องกันแสง
เมื่อเปิดแล้ว ให้เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C และใช้ให้หมดภายใน 6–8 สัปดาห์


เงื่อนไขการจัดส่ง

อุณหภูมิแวดล้อม


การบำรุงรักษา

เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด หลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการอุ่นบ่อยครั้งถึง +37°C เนื่องจากจะทำให้คุณภาพของผลิตภัณฑ์ลดลง
ห้ามให้ความร้อนกับตัวกลางเกิน 37°C หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ เช่น เครื่องใช้ไมโครเวฟ
หากจะใช้เพียงบางส่วนของสารให้ใช้ปริมาณที่ต้องการและทำให้อุ่นถึงอุณหภูมิห้องก่อนใช้



องค์ประกอบ




หมวดหมู่
ส่วนประกอบ
ความเข้มข้น (มิลลิกรัมต่อลิตร)


กรดอะมิโน
ไกลซีน
10.00



แอล-อะลานิล-แอล-กลูตามีน
434.40



แอล-อาร์จินีน
200.00



แอล-แอสพาราจีนไฮโดรเจน 2 อะตอม
56.82



กรดแอล-แอสพาร์ติก
20.00



แอล-ซิสเทอีน 2HCl
65.20



แอล-กลูตามิก แอซิด
20.00



แอล-ฮีสติดีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ไฮโดรเจน 2 อะต
20.27



แอล-ไฮดรอกซี-แอล-โพรลีน
20.00



แอล-ไอโซลิวซีน
50.00



แอล-ลิวซีน
50.00



แอล-ไลซีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์
40.00



แอล-เมไทโอนีน
15.00



แอล-ฟีนิลอะลานีน
15.00



แอล-โพรลีน
20.00



แอล-ซีรีน
30.00



แอล-ทรีโอนีน
20.00



แอล-ทริปโตเฟน
5.00



แอล-ไทโรซีน 2Na2H2O
28.83



แอล-วาลีน
20.00


วิตามิน
กรดพารา-อะมิโนเบนโซอิก
1.00



ดี-ไบโอติน
0.20



โคลีนคลอไรด์
3.00



ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต
0.25



กรดโฟลิก
1.00



ไมโอ-อิโนซิทอล
35.00



นิโคตินาไมด์
1.00



ไพริดอกซีน เฮเซเดียมคลอไรด์
1.00



ไรโบฟลาวิน
0.20



ไทอามีน เฮเซ็กซ์คลอไรด์
1.00



วิตามินบี12
0.005


เกลืออนินทรีย์
แคลเซียมไนเตรต4H2O
100.00



โพแทสเซียมคลอไรด์
400.00



แมกนีเซียมซัลเฟต7H2O
100.00



NaCl
6000.00



โซเดียมไบคาร์บอเนต
2000.00



Na2HPO4
800.00


ส่วนประกอบอื่น ๆ
ดี-กลูโคส
2000.00



แอล-กลูตาไธโอน รีดิวซ์
1.00



โซเดียมฟีนอลเรด
5.30