DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3
DMEM:Ham's F12 เป็นสื่อพื้นฐานที่ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางและใช้กันอย่างแพร่หลายในการเพาะเลี้ยงเซลล์เพื่อวิจัยทางชีววิทยา สื่อนี้ทำหน้าที่เป็นแหล่งสารอาหารหลักสำหรับการเจริญเติบโตของสายเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมต่าง ๆ โดยเฉพาะเมื่อเสริมด้วยเซรั่มจากลูกวัว (FBS)
สูตรเฉพาะนี้ผสมผสาน Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) และ Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) ในสัดส่วนที่แม่นยำ 1:1 การเพิ่ม L-glutamine เข้าไปช่วยเสริมสร้างองค์ประกอบของสื่อเลี้ยงเซลล์ให้ดียิ่งขึ้น
DMEM ซึ่งพัฒนาจาก Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM) มีความเข้มข้นของกรดอะมิโนและวิตามินที่สูงขึ้นเมื่อเทียบกับสูตรเดิม ส่วน Ham's F-12 นั้นมีพื้นฐานจาก Ham's F-10 medium ซึ่งให้ชุดองค์ประกอบจำเป็นที่เสริมกัน
เพื่อสนับสนุนการเจริญเติบโตของเซลล์อย่างเหมาะสม การเสริม FBS ลงใน DMEM:Ham's F12 ด้วยความเข้มข้นทั่วไป 5-10% เป็นวิธีปฏิบัติที่นิยม การเสริมนี้จำเป็นเนื่องจากสื่อเพาะเลี้ยงขาดฮอร์โมนการเจริญเติบโต ไขมัน และโปรตีน ซึ่งมีความสำคัญต่อการพัฒนาของเซลล์
DMEM:Ham's F-12 มีระบบบัฟเฟอร์ pH และมักได้รับการเสริมด้วยเฟโนลเรด ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ค่า pH เซลล์ที่เพาะเลี้ยงใน DMEM:Ham's F-12 หรือสื่อเพาะเลี้ยงใด ๆ ที่ใช้ระบบบัฟเฟอร์ไบคาร์บอเนต จำเป็นต้องอยู่ในสภาพแวดล้อมที่มี CO₂ ควบคุมที่ระดับ 5-10% เพื่อรักษาระดับ pH ให้เหมาะสม
การควบคุมคุณภาพ
- กรองแบบปลอดเชื้อ
การเก็บรักษาและอายุการเก็บ
- เก็บไว้ที่ +2°C ถึง +8°C และหลีกเลี่ยงแสง
- เมื่อเปิดใช้แล้ว ให้เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C และใช้ให้หมดภายใน 6–8 สัปดาห์
เงื่อนไขการขนส่ง
- อุณหภูมิห้อง
การดูแลรักษา
- เก็บในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด หลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการอุ่นขึ้นบ่อยครั้งถึง +37°C เนื่องจากจะทำให้คุณภาพผลิตภัณฑ์ลดลง
- อย่าให้ความร้อนของสื่อเพาะเลี้ยงเกิน 37°C หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ เช่น เครื่องไมโครเวฟ
- หากจะใช้เพียงส่วนหนึ่งของสื่อเพาะเลี้ยง ให้แยกปริมาณที่ต้องการออกมาและอุ่นให้ถึงอุณหภูมิห้องก่อนใช้งาน
ส่วนประกอบ
| ประเภท | ส่วนประกอบ | ความเข้มข้น (mg/L) |
| กรดอะมิโน | ไกลซีน | 18.75 |
| L-อะลานีน | 4.45 | |
| L-อาร์จินีน HCl | 147.50 | |
| L-แอสพาราจีน H₂O | 7.50 | |
| L-แอสปาร์ติก แอซิด | 6.65 | |
| L-Cysteine HCl H₂O | 17.56 | |
| L-Cystine 2 HCl | 31.29 | |
| กรดแอล-กลูตามิก | 7.35 | |
| L-กลูตามีน | 365.00 | |
| L-ヒスチジン HCl H₂O | 31.48 | |
| L-ไอโซลิวซีน | 54.47 | |
| L-ลูซีน | 59.05 | |
| L-ไลซีน HCl | 91.25 | |
| L-เมธิโอนีน | 17.24 | |
| L-ฟีนิลอะลานีน | 35.48 | |
| L-โพรลีน | 17.25 | |
| L-เซรีน | 26.25 | |
| L-ทรีโอนีน | 53.45 | |
| L-ทริปโตเฟน | 9.02 | |
| L-ไทโรซีน 2 Na 2 H2O | 55.79 | |
| L-วาลีน | 52.85 | |
| วิตามิน | D-ไบโอติน | 0.0035 |
| คลอไรด์โคลีน | 8.98 | |
| D-แคลเซียมแพนโทเทเนต | 2.24 | |
| กรดโฟลิก | 2.66 | |
| myo-Inositol | 12.60 | |
| นิโคตินามิด | 2.02 | |
| ไพริดอกซีน HCl | 0.031 | |
| ไพริดอกซาล HCl | 2.00 | |
| ไรโบฟลาวิน | 0.219 | |
| ไทอามีน HCl | 2.17 | |
| วิตามินบี12 | 0.68 | |
| เกลืออนินทรีย์ | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ 7 H₂O | 100.00 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO3 | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄·2 H₂O | 70.87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0.432 | |
| ส่วนประกอบอื่น ๆ | D-กลูโคส | 3151.00 |
| ไฮพอ็กซานทิน | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| กรดไลโนเลอิก | 0.042 | |
| กรดลิโปอิก | 0.105 | |
| โซเดียมเฟโนลเรด | 8.63 | |
| Putrescine 2 HCl | 0.081 | |
| โซเดียมไพรูเวต | 55.00 | |
| ไทมีดีน | 0.365 |