EMEM (MEM Eagle), w: 2 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: EBSS
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) เป็นหนึ่งในอาหารเลี้ยงเซลล์พื้นฐานที่ใช้กันอย่างแพร่หลายมากที่สุดสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลากหลายชนิด โดยเฉพาะเซลล์สายพันธุ์ที่เกาะติด พื้นฐานสูตรนี้พัฒนาโดย Harry Eagle ประกอบด้วยกรดอะมิโนที่จำเป็น วิตามิน และเกลืออนินทรีย์ที่จำเป็นต่อการสนับสนุนการเจริญเติบโตของทั้งเซลล์ต้นกำเนิดและเซลล์สายพันธุ์ภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงมาตรฐาน
สูตรน้ำพร้อมใช้ที่ผ่านการกรองฆ่าเชื้อแล้วนี้ เสริมด้วยสารละลายเกลือสมดุล Earle (EBSS) แอล-กลูตามีน 2 มิลลิโมลาร์ ดี-กลูโคส (1.0 กรัม/ลิตร) และโซเดียมไบคาร์บอเนต (NaHCO3) 2.2 กรัม/ลิตร ทำให้เหมาะสำหรับใช้ในบรรยากาศตู้ฟักที่ควบคุมด้วย CO2 (โดยทั่วไป 5% CO2). ฟีนอลเรดที่รวมอยู่ทำหน้าที่เป็นตัวบ่งชี้ค่า pH ช่วยให้สามารถตรวจสอบสภาพของอาหารเลี้ยงเซลล์ได้อย่างสะดวกด้วยสายตาในระหว่างการเพาะเลี้ยงเซลล์
คุณสมบัติเด่น
- สูตร MEM แบบดั้งเดิมของ Classic Eagle พร้อมด้วย Earle's Balanced Salt Solution (EBSS)
- ประกอบด้วย L-กลูตามีน 2 มิลลิโมลาร์ – พร้อมใช้งานทันที
- 2.2 กรัม/ลิตร โซเดียมไบคาร์บอเนต – ปรับเป็นบัฟเฟอร์สำหรับบ่มที่ 5 % CO2
- โดยใช้ D-glucose (1.0 กรัม/ลิตร) เป็นแหล่งคาร์บอนหลัก
- โดยใช้ฟีโนลเรดเป็นตัวบ่งชี้ค่าพีเอช
- ไม่มี HEPES และไม่มีโซเดียมไพรูเวต
- น้ำยาเหลวที่ผ่านการกรองแบบปราศจากเชื้อ พร้อมใช้งาน
- ค่า pH 7.0 – 7.6
การใช้งานทั่วไป
EMEM สนับสนุนการเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลากหลายชนิด รวมถึง HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 และเซลล์ต้นกำเนิดหลายชนิด การใช้งานทั่วไปได้แก่:
- การบำรุงรักษาตามปกติและการขยายสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติด
- การแพร่กระจายของไวรัสและกระบวนการผลิตวัคซีน
- การทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์และการประยุกต์ใช้ทางชีววิเคราะห์
- การศึกษาการถ่ายโอนยีนและการแสดงออกของโปรตีน
- การวิจัยพื้นฐานในชีววิทยาของเซลล์และชีววิทยาโมเลกุล
สำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์ที่ดีที่สุด EMEM มักจะเสริมด้วยเซรั่มจากเลือดวัวตัวเมียที่ตั้งท้อง 5–10 % (FBS) และขึ้นอยู่กับสายพันธุ์ของเซลล์ อาจเสริมด้วยกรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น (NEAA) และยาปฏิชีวนะ เช่น เพนิซิลลิน/สเตียโรมัยซิน
การจัดการและการเก็บรักษา
เก็บขวดที่ยังไม่เปิดไว้ที่ +2 °C ถึง +8 °C ป้องกันแสง หลังจากเปิดแล้ว ให้ใช้ภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ L-Glutamine ในสารละลายจะเสื่อมสภาพอย่างช้าๆ - เราแนะนำให้ใช้สื่อภายใน 4 สัปดาห์หลังจากเปิดเพื่อประสิทธิภาพที่ดีที่สุด หรือเสริมด้วย L-Glutamine ใหม่ก่อนใช้งานหากเก็บไว้นานกว่านั้น ปล่อยให้สื่ออุ่นถึง 37 °C ก่อนนำไปเติมในเซลล์
คุณภาพ
ผลิตภายใต้มาตรฐานคุณภาพที่เข้มงวด แต่ละชุดผ่านการทดสอบความปลอดเชื้อ ค่า pH ความเข้มข้นของออสโมลาลิตี้ และระดับเอนโดทอกซิน เพื่อให้มั่นใจในประสิทธิภาพที่สม่ำเสมอในการใช้งานกับการเพาะเลี้ยงเซลล์
ข้อมูลจำเพาะของสินค้า
| ข้อกำหนด | รายละเอียด |
|---|---|
| ประเภทสินค้า | MEM |
| หมวดหมู่สินค้า | อาหารเลี้ยงเซลล์ |
| รูปแบบ | ของเหลว |
| ปราศจากเชื้อ | ใช่ |
| ขนาด | 500 มิลลิลิตร |
| แอล-กลูตามีน | ด้วยแอล-กลูตามีน (2 มิลลิโมลาร์) |
| กลูโคส | ด้วยกลูโคส (1.0 กรัม/ลิตร) |
| โซเดียมไบคาร์บอเนต | ด้วย NaHCO3 (2.2 กรัม/ลิตร) |
| HEPES | ไม่มี HEPES |
| โซเดียมไพรูเวต | ปราศจากโซเดียมไพรูเวต |
| ฟีโนลเรด | ด้วยฟีนอลเรด |
| น้ำเกลือ | สารละลายเกลือสมดุลของเอิร์ล (EBSS) |
| พีเอช | 7.0 – 7.6 |
| ปริมาณเอนโดทอกซิน | ไม่ได้ระบุ |
| การจัดเก็บ | +2 °C ถึง +8 °C |
สูตร (ส่วนประกอบต่อลิตร)
| องค์ประกอบ | ความเข้มข้น (มิลลิกรัมต่อลิตร) |
|---|---|
| เกลืออนินทรีย์ | |
| แคลเซียมคลอไรด์ · 2H2O | สองร้อยหกสิบห้าจุดศูนย์ศูนย์ |
| แมกนีเซียมซัลเฟต | 97.72 |
| โพแทสเซียมคลอไรด์ | สี่ร้อยศูนย์ศูนย์ |
| โซเดียมคลอไรด์ | หกพันแปดร้อยบาท |
| โซเดียมไดไฮโดรเจนฟอสเฟต ชนิดไม่มีน้ำ | หนึ่งร้อยยี่สิบสองจุดศูนย์ศูนย์ |
| โซเดียมไบคาร์บอเนต (NaHCO3) | สองพันสองร้อยยี่สิบ |
| กรดอะมิโน | |
| แอล-อาร์จินีน · เฮสเพอริดิน | หนึ่งร้อยยี่สิบหกจุดศูนย์ศูนย์ |
| แอล-ซิสเตอีน · 2HCl | 31.30 |
| แอล-กลูตามีน | สองร้อยเก้าสิบสองจุดศูนย์ศูนย์ |
| แอล-ฮิสทิดีน · เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ · น้ำ | สี่สิบสองจุดศูนย์ศูนย์ |
| แอล-ไอโซลิวซีน | ห้าสิบสองจุดศูนย์ศูนย์ |
| แอล-ลิวซีน | ห้าสิบสองจุดศูนย์ศูนย์ |
| แอล-ไลซีน · เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | เจ็ดสิบสองจุดห้าศูนย์ |
| แอล-เมไทโอนีน | 15.00 |
| แอล-ฟีนิลอะลานีน | สามสิบสองจุดศูนย์ศูนย์ |
| แอล-ทรีโอนีน | สี่สิบแปดจุดศูนย์ศูนย์ |
| แอล-ทริปโตเฟน | สิบโมง |
| แอล-ไทโรซีน · 2Na · 2H2O | 51.90 |
| แอล-วาลีน | สี่สิบหกจุดศูนย์ศูนย์ |
| วิตามิน | |
| ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต | หนึ่งจุดศูนย์ศูนย์ |
| โคลีนคลอไรด์ | หนึ่งจุดศูนย์ศูนย์ |
| กรดโฟลิก | หนึ่งจุดศูนย์ศูนย์ |
| ไมโอ-อิโนซิทอล | 2.00 |
| นิโคตินาไมด์ | หนึ่งจุดศูนย์ศูนย์ |
| ไพริดอกซัล · เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | หนึ่งจุดศูนย์ศูนย์ |
| ไรโบฟลาวิน | 0.10 |
| ไทอามีน · เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | หนึ่งจุดศูนย์ศูนย์ |
| ส่วนประกอบอื่น ๆ | |
| D(+)-กลูโคส | หนึ่งพันบาทถ้วน |
| ฟีโนลเรด | สิบโมง |