Celice SH-SY5Y - Raziskave nevroblastoma in nevroznanstveni pomen celic SH-SY5Y
Celična linija SH-SY5Y, pridobljena iz človeškega nevroblastoma, se pogosto uporablja v medicinskih raziskavah za raziskovanje nevrodegenerativnih bolezni in razvoj zdravil. Raziskovalci uporabljajo te celice v njihovi prvotni nediferencirani obliki ali pa jih diferencirajo v celice, podobne nevronom.
Splošne informacije in izvor celične linije SH-SY5Y
V tem poglavju so opisane osnovne informacije o celični liniji SH-SY5Y, vključno z njenim izvorom, opredelitvijo in celično strukturo. Obravnavali bomo vprašanja, kot sta njena morfologija in izvor celic.
- SH-SY5Y je celična linija človeškega izvora, ki je nastala s subkloniranjem celične linije nevroblastoma SK-N-SH leta 1970.
- Matična celična linija SK-N-SH je bila razvita iz biopsije kostnega mozga štiriletne bolnice z nevroblastomom.
- Celice SH-SY5Y so fenotipsko adrenergične in izražajo dopaminergične označevalce, zato so uporaben in vitro model za preučevanje nevrodegenerativnih bolezni, nevrogeneze in značilnosti možganskih celic [1].
- Celice SH-SY5Y rastejo kot skupki živih nevroblastičnih celic z nevriti in so ohlapno zlepljene.
- Velikost celic SH-SY5Y je 12 μm.
- Modalno število kromosomov celic SH-SY5Y je 47, imajo pa redek označevalec števila kromosomov 1, trisomijo 1q, ki jo povzroči vstavitev dodatne kopije segmenta 1q v dolgo roko kromosoma 1.
Gojenje celic SH-SY5Y
V nevrobioloških raziskovalnih laboratorijih so celice SH-SY5Y najbolj gojene nevroblastomske celice. Za delo s temi celicami je treba razumeti, katera vrsta rastnega gojišča je primerna za njihovo gojenje, njihove značilnosti rasti, optimalno gostoto setve in pravilno metodo za zamrzovanje. V tem razdelku so navedene bistvene informacije o gojenju celic SH-SY5Y, ki vam bodo pomagale pri teh vidikih.
Ključne točke za gojenje celic SH-SY5Y
|
Čas podvojitve populacije: povprečni čas podvojitve populacije celic SH-SY5Y je približno 3 do 4 dni. |
|
Prilepljene ali v suspenziji: SH-SY5Y so ohlapno zlepljene celice. Ko so posejane z veliko gostoto, rastejo kot skupki. |
|
Gostota setve: SH-SY5Y je 1 x 104 celic/cm2. Kultura SH-SY5Y je sestavljena iz prilegajočih se in lebdečih celic. |
|
Rastno gojišče: Za gojenje celične linije SH-SY5Y je idealno gojišče DMEM:Ham's F12, dopolnjeno s 3,1 g/l glukoze, 10 % FBS in 1,6 mM L-glutamina. |
|
Growth Conditions (Temperature, CO2): Celice SH-SY5Y gojimo pri temperaturi 37 °C v vlažnem inkubatorju s 5-odstotnim dovajanjem CO2. |
|
Shranjevanje: Za ohranjanje vitalnosti celic SH-SY5Y jih shranjujemo v parni fazi tekočega dušika pri temperaturi pod -150 °C. |
|
Postopek zamrzovanja in medij: Za zamrzovanje celic SH-SY5Y se uporabljajo mediji za zamrzovanje CM-1 ali CM-ACF. Za zamrzovanje te linije nevroblastomskih celic se uporablja metoda počasnega zamrzovanja, pri kateri se temperatura postopoma znižuje za 1 °C. |
|
Postopek odtaljevanja: Zamrznjene viale s celicami SH-SY5Y postavimo v vodno kopel, nastavljeno na temperaturo 37 °C. Vialo hitro mešamo, dokler se celice ne odtalijo in ostane le majhen ledeni skupek. |
|
Raven biološke varnosti: SH-SY5Y celice se lahko gojijo v laboratoriju 1. stopnje biološke varnosti. |
SH-SY5Y: Prednosti in omejitve
Prednosti
- Diferenciacija v nevrone: SH-SY5Y celice je mogoče diferencirati v funkcionalne nevrone z uporabo posebnih spojin, kar je bolj priročna alternativa primarnim nevronom in preprečuje etične pomisleke, povezane z njihovo uporabo [2].
- In vitro model za nevrodegenerativne bolezni: Zaradi izražanja molekularnih označevalcev, vključno z dopaminergičnimi nevronskimi označevalci, so celice SH-SY5Y primerne za preučevanje nevrodegenerativnih bolezni, kot je Parkinsonova bolezen.
Omejitve
- Nesinhroniziran celični cikel: Pri celičnih kulturah SH-SY5Y so celični cikli nesinhronizirani in so v nediferenciranem stanju [3].
- Nedoločeno stanje diferenciacije: Celice SH-SY5Y imajo nedefinirano diferenciacijsko stanje, ki sega od tumorigenega nevroblastomskega stanja do postmitotičnih nevronov ali nevronskih progenitornih celic. Ne izražajo molekularnih označevalcev, kot jih izražajo zrele nevronske celice [4].
Celice SH-SY5Y za nevrofarmakologijo in odkrivanje zdravil in vitro
Uporaba celic SH-SY5Y
Raziskave nevrodegenerativnih bolezni: Celice SH-SY5Y se uporabljajo za preučevanje nevrodegenerativnih bolezni, kot sta Alzheimerjeva in Parkinsonova bolezen. V študiji so na primer celice SH-SY5Y obdelali z amiloidnim peptidom β 1-42, da bi vzpostavili in vitro model Alzheimerjeve bolezni. Razvito celično linijo so nato transfundirali s pcDNA-17A in shRNA 17A, da bi preučili učinek dolge nekodirajoče RNK 17A na celice, podobne Alzheimerjevi bolezni. Študija je pokazala, da dolgodelujoča RNK-17A uravnava apoptozo in avtofagijo celic SH-SY5Y, ki posnemajo Alzheimerjevo bolezen [5].
Razvoj zdravil: Celice SH-SY5Y se uporabljajo za presejanje in preverjanje zdravil za njihov terapevtski učinek na nevrodegenerativne bolezni. V študiji iz leta 2021 so na primer v celicah SH-SY5Y s herbicidom (parakvat) povzročili parkinsonizem, nato pa so te celice uporabili za raziskovanje terapevtskega potenciala flavonoida, naringenina. Spojina je v celičnih modelih pokazala zaščitni učinek pred nevrodegeneracijo in nevrotoksičnostjo, ki ju povzroča Parkinsonova bolezen, kar kaže na njen potencial za razvoj zdravljenja PD [6].
Raziskovalne publikacije s celicami SH-SY5Y
O celicah SH-SY5Y je bilo opravljenih veliko raziskav. V tem razdelku je predstavljenih nekaj pomembnih primerov.
- LncRNA17A uravnava avtofagijo in apoptozo celične linije SH-SY5Y kot in vitro modela za Alzheimerjevo bolezen: V tej publikaciji je bilo predlagano, da LncRNA17A posreduje pri apoptozi in avtofagiji celic SH-SY5Y, eksperimentalno pretvorjenih v model Alzheimerjeve bolezni.
- Naringenin ublaži izgubo dopaminergičnih nevronov, ki jo povzroči parakvat, v celicah SH-SY5Y in na podganjem modelu Parkinsonove bolezni: Ta študija je predlagala spojine naringenina kot nevroprotektivno sredstvo proti eksperimentalno razvitemu celičnemu in živalskemu modelu Parkinsonove bolezni.
- Biokemijska karakterizacija proliferativne in diferencirane celične linije SH-SY5Y kot modela za Parkinsonovo bolezen: Diferencirane celice SH-SY5Y smo uporabili za karakterizacijo in oceno več biokemičnih procesov, ki se pogosto preučujejo pri Parkinsonovi bolezni.
- In vitro učinki acitretina na človeške nevronske celice SH-SY5Y: SH-SY5Y celice so bile uporabljene za preučevanje diferenciacije nevronov. Raziskovalci so raziskali, da Acitretin spodbuja diferenciacijo nevronov ter zdravi nevrodegenerativne in nevrorazvojne motnje ter možganske tumorje.
- Preobrazba celične linije SH-SY5Y v nevronom podobne celice: Preučevanje elektrofizioloških in biomehanskih sprememb: Ta študija je pretvorila celice nevralnega blastoma SH-SY5Y v nevrone z obdelavo z retinojsko kislino in molekulami nevrotrofičnega faktorja, ki izvira iz možganov (BDNF), ter preučila biokemične in elektrofiziološke spremembe v njih.
Viri za celice SH-SY5Y: SysY5Y: protokoli, videoposnetki in drugo: protokoli, videoposnetki in drugo
O tej znani celični liniji nevroblastoma je na voljo več spletnih virov. Ti viri vas lahko poučijo o ravnanju s kulturami SH-SY5Y in njihovem vzdrževanju.
Protokoli za gojenje celic
Naslednji spletni članki vam lahko pomagajo pri spoznavanju metod gojenja, zamrzovanja in odmrzovanja celic SH-SY5Y.
- Kultiviranje celic SH-SY5Y:SH-SY5Y: Osnovneinformacije o celicah SH-SY5Y, vključno z odmrzovanjem, zamrzovanjem in subkultiviranjem celic.
- Subkultiviranje SH-SY5Y: SH-SY5Y: informacije o uporabljenih gojiščih in korakih subkultiviranja celic SH-SY5Y.
- Transfekcija celic SH-SY5Y: V tem dokumentu je opisan protokol prehodne transfekcije za celično linijo SH-SY5Y.
- Protokol diferenciacije: V tem videoposnetku je pojasnjen protokol za diferenciacijo celic SH-SY5Y.
Pričakujemo, da bo ta članek zagotovil koristne informacije o ravnanju s celicami SH-SY5Y, gojenju in uporabi v raziskovalnih študijah; če želite delati s to nevroblastomsko celično linijo, razmislite o naročilu pri nas.
Celična linija SH-SY5Y: Pogosto zastavljena vprašanja
Reference
- Carvajal-Oliveros, A., et al., celična linija BE (2)-M17 ima boljši dopaminergični fenotip kot SH-SY5Y, ki se tradicionalno uporablja za raziskave Parkinsonove bolezni in je večinoma serotonergična. IBRO Neuroscience Reports, 2022. 13: p. 543-551.
- Kovalevich, J. in D. Langford, Considerations for the use of SH-SY5Y neuroblastoma cells in neurobiology (Razmisleki o uporabi nevroblastomskih celic SH-SY5Y v nevrobiologiji). Neuronal cell culture: methods and protocols, 2013: str. 9-21.
- Martin, E.-R., J. Gandawijaya in A. Oguro-Ando, A novel method for generating glutamatergic SH-SY5Y neuron-like cells utilizing B-27 supplement. Frontiers in Pharmacology, 2022: str. 4042.
- Feles, S., et al., Streamlining culture conditions for the neuroblastoma cell line SH-SY5Y: a preerequisite for functional studies (Racionalizacija pogojev gojenja nevroblastomske celične linije SH-SY5Y: predpogoj za funkcionalne študije). Methods and Protocols, 2022. 5(4): p. 58.
- Wang, X., M. Zhang in H. Liu, LncRNA17A regulira avtofagijo in apoptozo celične linije SH-SY5Y kot in vitro modela za Alzheimerjevo bolezen. Bioznanost, biotehnologija in biokemija, 2019. 83(4): p. 609-621.
- Ahmad, M.H., et al., Naringenin ublaži s parakvatom povzročeno izgubo dopaminergičnih nevronov v celicah SH-SY5Y in modelu Parkinsonove bolezni pri podganah. Nevrofarmakologija, 2021. 201: p. 108831.