Celice SH-SY5Y – raziskave nevroblastoma in nevroznanstvena pomembnost celic SH-SY5Y

Celična linija SH-SY5Y, pridobljena iz človeškega nevroblastoma, se v medicinskih raziskavah obsežno uporablja za preučevanje nevrodegenerativnih bolezni in razvoj zdravil. Raziskovalci te celice uporabljajo v njihovi prvotni nediferencirani obliki ali jih diferencirajo v celice, podobne nevronom.

Splošne informacije in izvor celične linije SH-SY5Y

V tem poglavju bomo obravnavali osnovne informacije o celični liniji SH-SY5Y, vključno z njenim izvorom, opredelitvijo in celično strukturo. Odgovorili bomo na vprašanja, kot so njena morfologija in izvor celic.

• SH-SY5Y je celična linija človeškega izvora, ki je nastala s subkloniranjem celične linije nevroblastoma SK-N-SH leta 1970.
• Izvorna celična linija SK-N-SH je bila razvita iz biopsije kostnega mozga štiriletne deklice z neuroblastomom.
• Celice SH-SY5Y so fenotipsko adrenergične in izražajo dopaminergične markerje, kar jih naredi za uporaben in vitro model za preučevanje nevrodegenerativnih bolezni, nevrogeneze in značilnosti možganskih celic [1].
• Celice SH-SY5Y rastejo v skupkih živih nevroblastnih celic z nevriti in so ohlapno adhezivne.
• Velikost celic SH-SY5Y je 12 μm.
• Modalno število kromosomov za celice SH-SY5Y je 47, imajo pa tudi redko značilnost kromosoma številka 1, trisomijo 1q, ki jo povzroča vstavitev dodatnega izvoda segmenta 1q v dolgo roko kromosoma 1.

Gojenje celic SH-SY5Y

V nevrobioloških raziskovalnih laboratorijih so celice SH-SY5Y najpogosteje gojene nevroblastomske celice. Za delo s temi celicami je bistveno razumeti, kakšen tip gojišča je primeren za njihovo gojenje, kakšne so njihove značilnosti rasti, kakšna je optimalna gostota posevka ter kakšna je pravilna metoda njihovega zamrzovanja. V tem poglavju boste našli bistvene informacije o gojenju celic SH-SY5Y, ki vam bodo v pomoč pri teh vidikih.

Ključne točke za gojenje celic SH-SY5Y

Čas podvojitve populacije: Povprečni čas podvojitve populacije celic SH-SY5Y je približno 3 do 4 dni.

Adhezivne ali v suspenziji: Celice SH-SY5Y so šibko adhezivne. Pri visoki gostoti posevka rastejo v skupkih.

Gostota posevka: Optimalna gostota posevka za celice SH-SY5Y je 1 × 10⁴ celic/cm². Kulture celic SH-SY5Y so sestavljene tako iz adhezivnih kot iz lebdečih celic.

Rastno gojišče: Gojišče DMEM:Ham's F12, dopolnjeno s 3,1 g/L glukoze, 10 % FBS in 1,6 mM L-glutamina, je idealno za gojenje celične linije SH-SY5Y.

Pogoji gojenja (temperatura, CO₂): Celice SH-SY5Y se gojijo pri temperaturi 37 °C v vlažnem inkubatorju z dovodom 5 % CO₂.

Shranjevanje: Da se ohrani vitalnost celic SH-SY5Y, se shranjujejo v plinski fazi tekočega dušika pri temperaturi pod -150 °C.

Postopek zamrzovanja in gojišče: Za zamrzovanje celic SH-SY5Y se uporabljata zamrzovalna gojišča CM-1 ali CM-ACF. Za zamrzovanje te celične linije nevroblastoma se uporablja metoda počasnega zamrzovanja, pri kateri se temperatura postopoma znižuje za 1 °C.

Postopek odmrzovanja: Zamrznjene viale z celicami SH-SY5Y se postavijo v vodno kopel, nastavljeno na temperaturo 37 °C. Vialo se hitro pretresa, dokler se celice ne odmrznejo in ostane le majhen kepec ledu.

Raven biološke varnosti: Celice SH-SY5Y se lahko gojijo v laboratoriju z ravnjo biološke varnosti 1.

Celice SH-SY5Y: prednosti in omejitve

Prednosti

• Diferenciacija v nevrone: Celice SH-SY5Y se lahko z uporabo specifičnih spojin diferencirajo v funkcionalne nevrone, kar predstavlja bolj priročno alternativo primarnim nevronom in omogoča izogibanje etičnim pomislekom, povezanim z njihovo uporabo [2].
• In vitro model za nevrodegenerativne bolezni: Zaradi izražanja molekularnih markerjev, vključno z dopaminergičnimi nevronskimi markerji, so celice SH-SY5Y primerne za preučevanje nevrodegenerativnih motenj, kot je Parkinsonova bolezen.

Omejitve

• Nesinhroniziran celični cikel: Kulture celic SH-SY5Y v nediferenciranem stanju kažejo nesinhronizirane celične cikle [3].
• Nedefinirano stanje diferenciacije: Celice SH-SY5Y imajo nedefinirano stanje diferenciacije, ki sega od tumorigeničnega stanja nevroblastoma do postmitotičnih nevronov ali nevralnih progenitornih celic. Ne izražajo molekularnih markerjev, ki jih izražajo zrele nevronske celice [4].

Celice SH-SY5Y za nevrofarmakologijo in odkrivanje zdravil in vitro

Uporaba celic SH-SY5Y

Raziskave nevrodegenerativnih bolezni: Celice SH-SY5Y se uporabljajo za preučevanje nevrodegenerativnih motenj, kot sta Alzheimerjeva in Parkinsonova bolezen. V eni od študij so na primer celice SH-SY5Y obdelali z amiloidnim β-peptidom 1-42, da bi vzpostavili in vitro model Alzheimerjeve bolezni. Razvita celična linija je bila nato transfektirana s pcDNA-17A in 17A shRNA, da bi preučili učinek dolge nekodirajoče RNA 17A na celice, podobne tistim pri Alzheimerjevi bolezni. Študija je pokazala, da LncRNA-17A uravnava apoptozo in avtofagijo celic SH-SY5Y, ki posnemajo Alzheimerjevo bolezen [5].

Razvoj zdravil: Celice SH-SY5Y se uporabljajo za presejanje in validacijo zdravil glede na njihov terapevtski učinek proti nevrodegenerativnim boleznim. Na primer, v študiji, izvedeni leta 2021, so v celicah SH-SY5Y z uporabo herbicida (Paraquat) povzročili parkinsonizem, nato pa so te celice uporabili za preučevanje terapevtskega potenciala flavonoida naringenina. Spojina je v celičnih modelih pokazala zaščitni učinek proti nevrodegeneraciji in nevrotoksičnosti, ki ju povzroča Parkinsonova bolezen, kar kaže na njen potencial za razvoj zdravljenja te bolezni [6].

Raziskovalne publikacije o celicah SH-SY5Y

O celicah SH-SY5Y obstaja veliko raziskovalnih študij. V tem poglavju bomo obravnavali nekaj pomembnih primerov.

• LncRNA17A uravnava avtofagijo in apoptozo celične linije SH-SY5Y kot in vitro model za Alzheimerjevo bolezen: V tej publikaciji je bilo predlagano, da LncRNA17A posreduje apoptozo in avtofagijo celic SH-SY5Y, ki so bile eksperimentalno pretvorjene v model Alzheimerjeve bolezni.
• Naringenin blaži izgubo dopaminergičnih nevronov, povzročeno s paraquatom, v celicah SH-SY5Y in na modelu Parkinsonove bolezni pri podganah: Ta študija je predlagala spojine naringenina kot nevroprotektivno sredstvo proti eksperimentalno razvitemu celičnemu in živalskemu modelu Parkinsonove bolezni.
• Biokemična karakterizacija proliferativne in diferencirane celične linije SH-SY5Y kot modela za Parkinsonovo bolezen: Diferencirane celice SH-SY5Y so bile uporabljene za karakterizacijo in oceno več biokemičnih procesov, ki se pogosto preučujejo pri Parkinsonovi bolezni.
• In vitro učinki acitretina na človeške nevronske celice SH-SY5Y: Celice SH-SY5Y so bile uporabljene za preučevanje nevronske diferenciacije. Raziskovalci so ugotovili, da acitretin spodbuja diferenciacijo nevronov ter se uporablja za zdravljenje nevrodegenerativnih in nevro-razvojnih motenj ter možganskih tumorjev.
• Preoblikovanje celične linije SH-SY5Y v nevronske celice: preučevanje elektrofizioloških in biomehanskih sprememb: V tej študiji so nevronske blastomske celice SH-SY5Y pretvorili v nevrone z obdelavo z retinoinsko kislino in molekulami nevrotrofičnega faktorja iz možganov (BDNF) ter preučili biokemične in elektrofiziološke spremembe v njih.

Viri za celice SH-SY5Y: protokoli, videoposnetki in več

Na voljo je več spletnih virov o tej znani celični liniji nevroblastoma. Ti viri vam lahko pomagajo pri učenju o ravnanju s kulturami SH-SY5Y in njihovem vzdrževanju.

Protokoli za gojenje celic

Naslednji članki na spletnih straneh vam lahko pomagajo pri učenju metod gojenja, zamrzovanja in odmrzovanja celic SH-SY5Y.

• Gojenje celic SH-SY5Y: Osnovne informacije o celicah SH-SY5Y, vključno z odmrzovanjem, zamrzovanjem in subkultiviranjem celic.
• Subkultiviranje celic SH-SY5Y: Vsebuje informacije o uporabljenih gojiščih in korakih subkultiviranja celic SH-SY5Y.
• Transfekcija celic SH-SY5Y: Ta dokument opisuje protokol za prehodno transfekcijo celične linije SH-SY5Y.
• Protokol diferenciacije: Ta video posnetek pojasnjuje protokol za diferenciacijo celic SH-SY5Y.

Upamo, da bo ta članek zagotovil koristne informacije o ravnanju s celicami SH-SY5Y, njihovem gojenju in uporabi v raziskavah; če želite delati s to celično linijo nevroblastoma, razmislite o naročilu pri nas.

Celična linija SH-SY5Y: Pogosto zastavljena vprašanja