Celična linija KG-1
Splošne značilnosti in izvor celične linije KG-1
Izvor in splošne značilnosti celične linije raziskovalcu pomagajo pri odločitvi o njeni uporabi v svojem delu. Te informacije lahko preučite, preden začnete delati z njo. Ta del članka je v celoti posvečen izvoru in značilnostim makrofagov KG-1. Tukaj boste izvedeli: Kaj so celice KG-1? Kaj je celična linija KG-1a? Kakšen je izvor celične linije KG-1? Kakšna je morfologija KG-1?
- KG-1 je limfoblastu podobna celična linija, pridobljena iz aspirata kostnega mozga belega moškega (starega 59 let) z akutno mielogeno levkemijo. Ustanovila sta jo Koeffler in Golde leta 1978. Te celice so večinoma v fazi zorenja promielocitov ali mieloblastov [1].
- Celice KG-1 imajo morfologijo, podobno limfoblastom.
- Kariotip celične linije KG-1 kaže psevdodiploidno modalno število kromosomov.
KG-1 in KG-1a
KG-1a je podlinija izvornih celic KG-1. Razvita je bila po 35 pasážah celične linije KG-1. V primerjavi s celično linijo KG-1 je manj diferencirana. Poleg tega je ta podlinija v primerjavi z izvorno celično linijo (KG-1) citokemično, morfološko in funkcionalno manj zrela.
Podatki o gojenju celične linije KG-1
V tem delu članka bomo obravnavali vse pomembne informacije o gojenju celic KG-1, ki vam lahko olajšajo delo. Tukaj boste izvedeli: Kakšen je čas podvojitve celic linije KG-1? Kakšni so pogoji za gojenje makrofagov KG-1? Kako se gojijo celice KG-1?
Ključne točke za gojenje celic KG-1
Čas podvojitve:
Čas podvojitve celic KG-1 je približno 45 ur. Vendar se lahko razlikuje glede na pogoje gojenja.
Adherente ali v suspenziji:
Celice KG-1 rastejo v suspenziji.
Gostota celic:
Optimalna gostota celic za celično linijo KG-1 je od 1 do 3 x 105 celic/ml. Za subkultiviranje se suspenzija celic prenese v sterilno epruveto in centrifugira. Zbranim celicam se nato doda svež gojišče in se previdno ponovno suspendirajo. Nato se celice razdelijo v nove kolbe in gojijo pri optimalni gostoti celic. Celice se lahko razdelijo, ko dosežejo največjo gostoto celic 1–2 × 10⁶ celic/ml.
Rastno gojišče:
IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium), ki vsebuje 10 % FBS, 4,5 g/l glukoze, 4 mM L-glutamina, 1,0 mM natrijevega piruvata in 3,0 g/l NaHCO₃ se uporablja za gojenje celic KG-1. Gojišče je treba zamenjati po treh dneh.
Pogoji rasti:
Celična linija KG1 AML se goji v vlažnem inkubatorju pri temperaturi 37 °C in z dovodom 5 % CO₂.
Shranjevanje:
Zamrznjene celice se hranijo v plinski fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku za ultra nizke temperature, da se ohrani njihova vitalnost.
Postopek zamrzovanja in gojišče:
Za zamrzovanje celic KG-1 je primerno gojišče CM-1 ali CM-ACF. Celice se zamrzujejo s postopkom počasnega zamrzovanja, da se jih zaščiti pred morebitnim šokom. Ta metoda omogoča postopno zniževanje temperature za 1 °C na minuto.
Postopek odmrzovanja:
Celice se odmrzujejo v predhodno ogreti vodni kopeli pri 37 °C, dokler ne ostane le še majhen kepec ledu. Odmrznjenim celicam se doda svež medij in se centrifugirajo, da se odstranijo sestavine zamrzovalnega medija. Celicni pelet se previdno ponovno suspendira in vlije v nove kolbe, ki vsebujejo rastni medij.
Raven biološke varnosti:
Laboratorij z ravnjo biološke varnosti 1 je nujen za vzdrževanje celičnih kultur KG-1.
Objavljeno: 2023 | Zadnji pregled: maj 2026
Celična linija KG-1: prednosti in omejitve
Tako kot druge celične linije ima tudi celična linija KG-1 za mieloidno levkemijo številne prednosti in omejitve. V tem poglavju bomo spoznali nekatere pomembnejše, ki so lahko ključne pri odločitvi o njeni uporabi v vašem raziskovalnem delu.
Prednosti
Glavne prednosti celic KG-1 so:
-
Enostavnost gojenja
Celice KG-1 se v raziskovalnih laboratorijih enostavno gojijo, saj imajo nezapletene zahteve za gojenje celic. Zaradi enostavnega vzdrževanja in pogojev za rast so dostopne širokemu spektru raziskovalcev z osnovno opremo za gojenje celic.
-
Model akutne mieloidne levkemije (AML)
Celična linija KG-1 AML, pridobljena iz moškega bolnika z akutno mieloidno levkemijo (AML), služi kot dragoceno orodje za preučevanje biologije AML in izvajanje raziskav o potencialnih terapijah, saj ponuja vpogled v osnovne mehanizme te bolezni in strategije zdravljenja.
Omejitve
Omejitve, povezane s celično linijo KG1, so:
-
Model in vitro
Celice KG-1 so dragocen in vitro model za raziskave AML; vendar je pomembno opozoriti, da morda ne odražajo v celoti kompleksnosti bolezni in vivo, saj gre za poenostavljen celični model, ki morda ne zajema vseh vidikov biologije AML.
Uporaba celic KG-1 v raziskavah
KG-1 ponuja več obetavnih možnosti uporabe v biomedicinskih raziskavah. Med pomembnejšimi raziskavami, v katerih se uporabljajo makrofagi KG-1, so:
- Raziskave raka: Celice KG-1 so bile pridobljene od bolnika z akutno mieloidno levkemijo in se zato štejejo za dragoceno raziskovalno orodje za preučevanje biologije AML. Raziskovalci te celice uporabljajo za preučevanje celičnih in molekularnih mehanizmov, ki poganjajo razvoj, rast in odpornost proti zdravilom pri AML. To vključuje tudi identifikacijo in odkrivanje novih biomarkerjev, genetskih mutacij in signalnih poti, povezanih z AML. Na primer, študija, izvedena leta 2019, je pokazala, da dolga nekodirajoča RNA linc00239 spodbuja odpornost na doksorubicin in maligno vedenje v celicah akutne mieloidne levkemije KG-1. Nadaljnje raziskave so pokazale, da lncRNA aktivira signalno pot PI3K/Akt/mTOR, s čimer povzroča te učinke v celicah AML [2].
- Toksikologija: Celična linija KG1 se pogosto uporablja v toksikoloških raziskavah. Raziskovalci preizkušajo toksičnost in učinkovitost potencialnih terapevtskih sredstev, vključno s kemoterapevtskimi zdravili in ciljnimi terapijami, na celicah mieloidne levkemije KG1, da bi identificirali obetavne kandidate za zdravila za prihodnje predklinične in klinične ocene. Raziskava, izvedena leta 2018, je analizirala toksičnost nano-niosomov, ki vsebujejo doksorubicin, na celični liniji KG1 AML. Študija je pokazala, da so nano-niosomi primeren nosilec za dostavo zdravil, saj povečujejo učinkovitost zdravljenja [3]. V drugi raziskavi so raziskovalci preučevali terapevtske učinke čaja iz koprive, pripravljenega iz listov rastline Urtica dioica. Študija je pokazala, da ta vodni izvleček listov rastline deluje protitumorsko na celice akutne mieloidne levkemije KG-1 in U937 [4].
Objave o celicah KG-1
V tem delu članka je navedenih nekaj zanimivih raziskovalnih objav o celicah KG-1.
Kvercetin poveča občutljivost človeških celic mieloidne levkemije KG-1 na TRAIL-inducirano apoptozo
Ta članek je bil objavljen v reviji Journal of Cellular Physiology (2019). Študija je pokazala, da spojina kvercetin občutljivo naredi celično linijo KG1 AML na ligand, ki inducira apoptozo, povezan s TNF (TRAIL), in lahko okrepi učinek citotoksičnosti, ki jo v celicah povzroča TRAIL.
KLF8 pospešuje rast celic akutne mieloidne levkemije in glikolizo prek poti AKT/mTOR
Ta članek v reviji »Tropical Journal of Pharmaceutical Research« (2022) predlaga, da zmanjšanje izražanja transkripcijskega faktorja 8 tipa Krüppel zavira proliferacijo celic AML in glikolizo ter spodbuja apoptozo prek regulacije signalne poti AKT/mTOR.
Učinki sorafeniba in arzenovega trioksida na celični liniji U937 in KG-1: apoptoza ali avtofagija?
Ta študija, objavljena v reviji Cell Journal (Yakhteh) (2020), je raziskovala potencialne učinke arzenovega trioksida in sorafeniba na celice U937 in KG-1.
Ta študija, objavljena v reviji Medical Oncology (2020), je ocenila OXPHOS in glikolizo kot terapevtske tarče v celični liniji AML, KG-1.
V tej publikaciji iz revije »Drug Design, Development, and Therapy« iz leta 2020 je bilo predlagano, da kurkumin in talidomid sinergistično povzročata apoptične učinke v celicah KG-1 prek zmanjšanja izražanja STAT3 in Bcl-xL.
6. Viri za celično linijo KG-1: protokoli, videoposnetki in drugo
V nadaljevanju je navedenih nekaj spletnih virov o celicah KG-1.
- Subkultiviranje suspenzijskih celic: Ta videoposnetek opisuje protokol za subkultiviranje suspenzijskih celičnih kultur, kot je KG-1.
Naslednja povezava vsebuje protokol za gojenje celic KG-1:
- Celična linija KG-1: Ta spletna stran vsebuje obsežne osnovne informacije o gojenju celic celične linije KG-1. Vključuje informacije o gojiščih za celično linijo ter protokole za subkultiviranje in ravnanje s krioprezerviranimi in proliferativnimi kulturami.
Viri
- Pelliccia, F., V. Ubertini in N. Bosco, Pomembnost molekularno-citogenetske analize pred uporabo celičnih linij v raziskavah: primer levkemijske celične linije KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): str. 237–240.
- Yang, Y., in sod., Dolga nekodirajoča RNA linc00239 spodbuja maligno vedenje in kemoresistenco proti doksorubicinu delno prek aktivacije poti PI3K/Akt/mTOR v celicah akutne mieloidne levkemije. Oncology Reports, 2019. 41(4): str. 2311–2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Priprava in preučevanje nano-niosomov, ki vsebujejo doksorubicin, ter ocena njihove toksičnosti na celični liniji KG-1 akutne mieloblastne levkemije. Payavard Salamat, 2018. 12(4): str. 309–323.
- Hodroj, M.H., et al., Čaj iz koprive zavira rast celic akutne mieloidne levkemije in vitro s spodbujanjem apoptoze. Nutrients, 2020. 12(9): str. 2629.