Celice U87MG – Raziskave glioblastoma z uporabo celic U87MG in njihov vpliv na študije raka na možganih
U-87 MG, celična linija primarnega človeškega glioblastoma, se pogosto uporablja v bioloških raziskavah. Te celice se zlasti uporabljajo na področjih nevroznanosti in imunoonkologije.
- Rastno gojišče
- Celična linija U-87 MG se goji v gojišču EMEM (Eagle's minimal essential medium), obogatenem z 1,0 g/l L-glukoze, 2,0 mM L-glutamina, 2,2 g/l NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 mM natrijevega piruvata in 10 % raztopine FBS. Gojišče je treba zamenjati vsakih 2 do 3 dni.
- Čas podvojitve
- Celice U 87 MG imajo čas podvojitve populacije v razponu od 18 do 38 ur.
- Vrsta rasti
- U 87 MG je adhezivna celična linija. Celice imajo podolgovato obliko in rastejo v monoslojih.
- Raven biološke varnosti
- BSL-1
- Na voljo pri
- Cytion — Naročite U-87 MG
- Splošne značilnosti in izvor celične linije U-87 MG
- Informacije o gojenju celic U-87 MG
- Prednosti in slabosti celic U-87 MG
- Raziskovalne aplikacije s celicami U-87 MG
- Naročite svojo celično linijo glioma U-87 MG še danes
- Celična linija U-87 MG: raziskovalne publikacije
- Viri za celice U-87 MG: protokoli, videoposnetki in več
- Vpogled v raziskave glioma U-87 MG: pogosto zastavljena vprašanja
- Sklici
- Pogosta vprašanja
Splošne značilnosti in izvor celične linije U-87 MG
V tem poglavju bomo obravnavali izvor in splošne značilnosti celične linije U87. Izvedeli boste: Kaj so celice U-87 MG? Od kod izvirajo celice U87? Kaj pomeni kratica U-87 MG? Kako velike so celice U87? Kakšna je morfologija celične linije U87?
- Celična linija U87 je celična linija glioblastoma, astrocitoma. Ustanovljena je bila leta 1966 na Univerzi v Uppsali. Celice so bile pridobljene od 44-letnega belca, ki je trpel za glioblastomom. Ta celična linija se uradno imenuje U 87 MG, kar pomeni Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Celice U 87 MG imajo morfologijo, podobno epitelijskim celicam.
- Premer celic U 87 MG znaša med 12 in 14 µm.
- Ta človeška celična linija glioblastoma je hipodiploida in ima modalno število kromosomov 44 v približno 48 % celične populacije. Vendar pa višje ploidije obstajajo tudi v 5,9 % celične populacije.
Podatki o gojenju celic U-87 MG
Preden začnete delati z celicami U 87 MG, se morate seznaniti z naslednjimi ključnimi točkami za gojenje teh glioblastomskih celic. Zlasti morate vedeti: Kakšen je čas podvojitve populacije celic U 87 MG? Kateri gojišča se uporabljajo za gojenje celic U87? Kakšna je gostota posejanja celične linije U-87 MG?
Ključne točke za gojenje celic U-87 MG
Čas podvojitve populacije:
Čas podvojitve populacije celic U 87 MG znaša od 18 do 38 ur.
Adhezivne ali v suspenziji:
U 87 MG je adhezivna celična linija. Celice imajo podolgovato obliko in rastejo v monoslojih.
Gostota posevka:
Za celično linijo glioblastoma U 87 MG se priporoča sejanje pri gostoti 1 x 10⁴ celic/cm². Adherentne celice U87 se operejo z 1× PBS in inkubirajo z raztopino Accutase. Nato se disociirane celice centrifugirajo in izolirajo. Celice se previdno ponovno suspendirajo in dodajo v nove kolbe, ki vsebujejo rastno gojišče.
Rastno gojišče:
Celična linija U 87 MG se goji v EMEM (Eagle's minimal essential medium), obogatenem z 1,0 g/L L-glukoze, 2,0 mM L-glutamina, 2,2 g/L NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 mM natrijevega piruvata in 10 % raztopine FBS. Gojišče je treba zamenjati vsakih 2 do 3 dni.
Pogoji rasti:
Celice U-87 MG za optimalno rast potrebujejo vlažen inkubator z dovodom 5 % CO₂ in temperaturo 37 °C.
Shranjevanje:
Celice U87 se hranijo bodisi v plinski fazi tekočega dušika bodisi pri temperaturi pod -150 °C, da se ohrani največja vitalnost celic glioblastoma.
Postopek zamrzovanja in gojišče:
Za zamrzovanje celic U 87 MG sta primerna zamrzovalna gojišča CM-1 ali CM-ACF. Priporoča se počasen postopek zamrzovanja, saj preprečuje šok celic in ohranja njihovo vitalnost.
Postopek odmrzovanja:
Zamrznjene viale z celicami linije U-87 MG se odmrzujejo v vodni kopeli pri 37 °C. Celicam se doda gojišče, ponovno se suspendirajo in razporedijo v nove kolbe za gojenje. Nasprotno pa se celice U87 lahko centrifugirajo, da se odstrani sredstvo za zamrzovanje, nato pa se gojijo.
Raven biološke varnosti:
Za ravnanje s celičnimi kulturami U 87 MG je potrebna stopnja biološke varnosti 1.
Prednosti in slabosti celic U-87 MG
Ko pomislimo na celično linijo, se nam najprej poraja vprašanje: Katere so prednosti uporabe celic U-87 MG? Katere so slabosti celic U-87 MG?
Prednosti
Celične linije U-87 MG se široko uporabljajo v raziskavah. Nekaj prednosti, povezanih s to celično linijo, so:
Prednosti
- Enostavna gojitev: Celice U-87 MG je enostavno gojiti v kulturi. Njihova gojitev ne zahteva posebnih ali zapletenih pogojev.
- Homogenost: U-87 MG je homogena celična linija. Večina celic v populaciji ima enako genetsko sestavo in zato podobne lastnosti. Te celice se uporabljajo za preučevanje celičnih procesov, presejanje zdravil in testiranje.
- Dobro opredeljena: Ta celična linija glioblastoma je dobro opredeljena glede na značilnosti rasti, morfologijo in gensko ekspresijo, kar jo naredi za dragoceno raziskovalno orodje.
Pomanjkljivosti
- Omejena uporabnost: U-87 MG je celična linija glioblastoma, zato je njena uporaba omejena predvsem na preučevanje glioblastomov in njihovih molekularnih mehanizmov. Morda ni primerna za preučevanje drugih vrst raka.
Raziskovalne aplikacije s celicami U-87 MG
Celična linija glioblastoma U87MG se obsežno uporablja v raziskavah raka, zlasti v raziskavah glioblastoma. Nekatere raziskovalne uporabe celic U 87 MG so:
- Raziskave biologije raka: Celična linija U87 se uporablja za preučevanje rasti in razvoja raka, osnovnih molekularnih mehanizmov, signalnih poti in mikrookolja tumorja. V študiji, objavljeni leta 2020, so uporabili in vitro model glioblastoma, celično linijo U-87 MG, za preučevanje gena BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) kot terapevtskega cilja. Ugotovitve so pokazale, da gen BMAL1 zavira proliferacijo, migracijo in invazijo celic glioblastoma s preprečevanjem izražanja genov ciklina B1, metaloproteinaze-9 in fosfo-AKT [1]. Druga raziskava, izvedena leta 2019, je uporabila celično linijo U87 in ugotovila, da lahko zmanjšana ekspresija transkripcijskega faktorja LITAF (lipopolisaharid-inducirani tumor nekrotični faktor alfa), ki ga inducira lipopolisaharid, poveča radiosenzitivnost gliomskih celic prek povečane ekspresije poti FOXO-1. LITAF je znan tudi kot p53-inducirani gen 7 (PIG7) [2].
- Odkrivanje in razvoj zdravil: Celice U-87 MG se lahko uporabljajo za presejanje in testiranje zdravil, kar raziskovalcem omogoča, da identificirajo nova potencialna zdravila proti raku ter ocenijo njihovo učinkovitost in toksičnost. V raziskavi so uporabili celično linijo glioblastoma U 87 MG za oceno protirakovnega in antioksidativnega potenciala ter protirakovnih in antioksidativnih lastnosti izvlečka Inula helenium (L.) [3]. Podobno je druga publikacija omenila uporabo celične linije U87 za testiranje citotoksičnega in apoptotičnega učinka rastlinskih izvlečkov [4]. Poleg tega je raziskava, objavljena leta 2018, preučevala citotoksični učinek seskviterpennih alkaloidov, ekstrahiranih iz rastlin rodu Nuphar, na občutljive in na zdravila odporne celične linije U-87 MG [5].
Naročite si celično linijo U87 MG glioma še danes
Celična linija U-87 MG: Raziskovalne publikacije
Tukaj je nekaj pomembnih raziskovalnih publikacij, ki obravnavajo celično linijo U 87 MG.
Ta članek, objavljen v reviji Neuroreport leta 2018, predlaga, da bi hipoksija lahko povečala migracijo in invazijo človeških glioblastomskih celic z regulacijo signalne poti PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Ta študija je bila objavljena v reviji »Frontiers in Pharmacology« leta 2020. Rezultati raziskave kažejo, da flavonoid eriodiktiool deluje protirakovo na celično linijo U87 ter zavira celično proliferacijo in metastaziranje. Ta spojina izraža svoje protitumorske lastnosti z moduliranjem signalne poti PI3K/Akt/NF-κB.
Ta raziskava, objavljena v reviji »Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine« (2018), kaže, da lahko kitajska zeliščna formula, imenovana tabletka Xihuang, inducira apoptozo v celicah U87 z delovanjem na kaskado Akt/mTOR/FOXO1, ki jo aktivirajo ROS.
LITAF poveča radiosenzitivnost človeških gliomskih celic prek poti FoxO1
Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji »Cellular and Molecular Neurobiology« leta 2019. Študija je pokazala, da transkripcijski faktor LITAF z regulacijo signalne poti FOXO-1 zavira delovanje in poveča radiosenzitivnost celic glioma.
Ta članek je bil objavljen v reviji Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Raziskovalci so uporabili celice U87MG za preučevanje citotoksičnega učinka nanodelcev PLGA, obogatenih s kurkuminom.
Viri za celice U-87 MG: protokoli, videoposnetki in več
Celična linija glioblastoma U87MG se uporablja v številnih raziskovalnih laboratorijih za raziskave raka. Nekaj virov, ki obravnavajo to celično linijo, so:
- Transfekcija celične linije U87: Ta dokument opisuje protokol transfekcije za celice U87MG.
- Transfekcija celične linije U 87 MG: Ta videoposnetek je navodilo, ki korak za korakom pojasnjuje protokol transfekcije celic U87.
Viri za protokol gojenja celic U87 so navedeni spodaj:
- Celice U87 MG: Ta povezava vsebuje osnovne informacije o celični liniji U87 MG. Vključuje kratke protokole za delitev, zamrzovanje in odmrzovanje celic.
Vpogled v raziskave glioma U87 MG: Pogosto zastavljena vprašanja
Gliomske celične linije, kot so glioblastomske celice U87, so gojene celice, pridobljene iz človeških gliomov, ki se pogosto uporabljajo v raziskavah raka za preučevanje biologije tumorjev, genetike in odzivov na zdravila. Služijo kot modeli za razumevanje obnašanja tumorjev in preizkušanje terapevtskih strategij.
Izogena celična linija se nanaša na celice, pridobljene iz ene same celice, kar zagotavlja genetsko enotnost. Pri raziskavah gliomov izogene linije zagotavljajo dosleden model za preučevanje genetskih sprememb in njihovega vpliva na rast tumorja in odziv na zdravljenje.
Profil DNK gliomskih celičnih linij je ključnega pomena za ugotavljanje genetskih sprememb, razumevanje razvoja tumorja in razvoj ciljnih terapij. Pomaga pri razvrščanju tumorjev na podlagi genetskih označevalcev, kot so mutacije IDH1.
Serum v medijih za celične kulture celicam glioma zagotavlja bistvene rastne dejavnike, hormone in hranila. Vendar lahko njegova sestava vpliva na ponovljivost poskusov, zato se vse pogosteje uporabljajo pogoji brez seruma ali z definiranim serumom.
Citotoksičnost celic v gliomskih celičnih linijah se ocenjuje s testi, kot je pretočna citometrija, ki meri zdravje, vitalnost in smrt celic po zdravljenju z zdravili ali imunskimi celicami, kot so naravne celice ubijalke (NK).
Citotoksičnost celic NK ima ključno vlogo pri raziskavah zdravljenja glioma, saj lahko celice NK prepoznajo in uničijo tumorske celice brez predhodne senzibilizacije. Preučevanje interakcij celic NK z gliomskimi celicami pomaga pri razvoju strategij za izboljšanje odstranjevanja tumorjev s pomočjo celic NK.
Izvorni tumor zagotavlja informacije o prvotnem biološkem okolju in značilnostih tumorja. Razumevanje tega pomaga pri povezovanju ugotovitev študij celičnih linij z dejanskim obnašanjem tumorja in prognozo bolnikov.
Elektronska mikroskopija omogoča podrobno vizualizacijo celičnih in subceličnih struktur v gliomskih celičnih linijah, kar je ključnega pomena za preučevanje morfologije celic, zdravja organelov in sprememb po zdravljenju.
Ligand NKG2D se izraža na tumorskih celicah in se veže na receptor NKG2D na celicah NK, kar sproži citotoksični odziv. Preučevanje te interakcije pomaga razumeti in potencialno izboljšati imunske odzive proti gliomu.
3D-modeli celičnih kultur natančneje posnemajo tumorsko mikrookolje, kar omogoča boljši vpogled v rast, migracijo in odpornost gliomov na zdravila. Ta tehnika je ključna za ustreznejše translacijske onkološke študije.
Viri
- Gwon, D.H. in sod., BMAL1 zavira proliferacijo, migracijo in invazijo celic U87MG z zmanjšanjem izražanja ciklina B1, fosfo-AKT in metaloproteinaze-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF poveča občutljivost človeških gliomskih celic na sevanje prek poti FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): str. 871–882.
- Koc, K., et al., antioksidativne in protirakave lastnosti izvlečka Inula helenium (L.) v človeški celični liniji glioblastoma U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): str. 658–661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh in A. Ghasempour, Citotoksičnost in indukcija apoptoze v celicah raka dojke, kožnega raka in glioblastoma z rastlinskimi izvlečki. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): str. 5131–5142.
- Fukaya, M. in sod., Citotoksičnost seskviterpennih alkaloidov iz rastlin rodu Nuphar na občutljive in na zdravila odporne celične linije. Food Funct, 2018. 9(12): str. 6279–6286.