Predstavitev celic THP-1: pionirsko raziskovanje levkemije
Celična linija THP-1, znana kot Tohoku Hospital Pediatrics-1, je spontano imortalizirana kultura človeških monocitnih levkemijskih celic. Služi kot vsestranski model pri preučevanju biologije monocitov, aktivnosti makrofagov ter njihove vloge pri raku in imunoterapiji. Človeška levkemijska celična linija THP-1 odraža fiziološke in funkcionalne lastnosti monocitov v periferni krvi, kar jo naredi neprecenljiv vir za raziskovanje antigenov diferenciacije monocitov in širših vidikov fiziologije monocitov. Ta članek ponuja temeljit pregled celične linije THP-1.
- Rastno gojišče
- Glej stran izdelka
- Čas podvojitve
- Glej stran izdelka
- Vrsta rasti
- Adherenten
- Raven biološke varnosti
- BSL-1
- Na voljo pri
- Cytion — Naroči THP-1
- Splošne informacije in izvor celične linije THP-1
- Gojenje človeške levkemijske celične linije THP-1
- Raziščite našo zbirko celičnih linij THP-1
- Raziskovanje biologije makrofagov s celično linijo THP-1: vpogled v diferenciacijo, delovanje in imunsko dinamiko
- Raziskovalne aplikacije celic THP-1
- Objave, ki izpostavljajo celice THP-1 v znanstvenih raziskavah
- Viri za celično linijo THP-1
- Pogosta vprašanja o celični liniji THP-1
- Sklici
- Pogosta vprašanja
Splošne informacije in izvor celične linije THP-1
Za tiste, ki se prvič srečujejo z delom s celično linijo THP-1, je bistveno razumevanje njenih osnovnih značilnosti. Obravnavali bomo njeno definicijo, izvor, morfologijo, velikost in genomsko lastnosti.
Celična linija THP-1: THP-1 je človeška monocitna levkemijska celična linija, pridobljena iz periferne krvi enoletnega bolnika, pri katerem je bila leta 1980 diagnosticirana akutna monocitna levkemija (podtip M5).
Morfologija: Celice THP-1 imajo okroglo, veliko in enotno morfologijo.
Velikost celic: Te celice so relativno velike, s povprečnim premerom, ki presega 21 µm.
Genom in ploidija: THP-1 je skoraj diploidna celična linija, analiza kariotipa pa kaže diploidno število kromosomov (n = 46).
Gojenje človeške levkemijske celične linije THP-1
Dovoljno poznavanje značilnosti celične linije poenostavi postopek njenega gojenja. Ta poglavje vsebuje ključne podrobnosti za gojenje in vzdrževanje celične linije THP-1, vključno s časom podvojitve, gojišči, lastnostmi adhezije, gostoto posejanja, pogoji rasti, shranjevanjem ter postopki zamrzovanja in odmrzovanja.
Čas podvojitve: Čas podvojitve celic THP-1 je približno 35 ur, čeprav se lahko giblje med 19 in 50 urami, odvisno od pogojev gojenja.
Adhezija: Celice THP-1 rastejo v suspenziji, vendar se lahko pod določenimi pogoji diferencirajo v adhezivne celice, podobne makrofagom.
Gostota posevka: Idealna gostota posevka znaša od 1,0×10⁵ do 1,5×10⁶ živih celic/mL. To se doseže z razredčitvijo celic iz vzgojene kulture do želene gostote.
Rastno gojišče: Priporočeno gojišče je RPMI 1640, dopolnjeno z 10 % FBS, 1 mM natrijevega piruvata in 2,5 mM L-glutamina.
Pogoji gojenja: Celice je treba gojiti v vlažnem inkubatorju z dovodom 5 % CO₂ pri 37 °C.
Shranjevanje: Za dolgoročno shranjevanje je treba celice shraniti pri temperaturi pod -150 °C, da se ohrani njihova vitalnost.
Postopek zamrzovanja: Za metodo počasnega zamrzovanja uporabite gojišča CM-1 ali CM-ACF, pri čemer naj se temperatura znižuje za 1 °C na minuto.
Postopek odmrzovanja: Hitro pretresajte 40–60 sekund v vodni kopeli pri 37 °C, ki vsebuje protimikrobno sredstvo, nato pa celice prenesite v kolbe z gojiškim medijem.
Raven biološke varnosti: Z celicami THP-1 je treba ravnati v laboratorijih z ravnjo biološke varnosti 1.
Ta poenostavljen in znanstveno natančen opis zagotavlja bistvene informacije o celični liniji THP-1 ter raziskovalcem pomaga pri delu s tem dragocenim raziskovalnim orodjem.
Raziskovanje biologije makrofagov s celično linijo THP-1: vpogled v diferenciacijo, delovanje in dinamiko imunskega sistema
Celice THP-1 kot model za analizo diferenciacije in delovanja makrofagov
V zvezi s celicami THP-1 imata diferenciacija makrofagov in njihove funkcije poseben pomen. Celice THP-1 so linija človeških monocitov iz levkemije, ki se pogosto uporablja kot model za in vitro preučevanje biologije monocitov in makrofagov. Ob obdelavi s forbolom 12-miristatom 13-acetatom (PMA) se lahko diferencirajo v celice, podobne makrofagom, kar posnema prehod, ki ga periferni monociti v telesu preidejo, da postanejo makrofagi. Po diferenciaciji se lahko makrofagi, pridobljeni iz THP-1, s pomočjo specifičnih dražljajev polarizirajo v makrofage tipa M1 ali M2, kar odraža pro-vnetna stanja, povezana z M1, oziroma protivnetna stanja in stanja obnove tkiva, povezana z M2.
Ti diferencirani makrofagi THP-1 ohranjajo ključne funkcije, kot so fagocitoza, predstavitev antigena in proizvodnja citokinov, kar jih naredi neprecenljiv in vitro sistem za preučevanje molekularnih in celičnih mehanizmov, na katerih temeljijo odzivi makrofagov na različne signale. Študije, v katerih so bile uporabljene celice THP-1, so omogočile vpogled v dejavnosti makrofagov, vključno z odzivi na povzročitelje okužb, interakcijami z rakavimi celicami ter vlogo makrofagov pri imunoregulaciji in vnetju. Celice THP-1 služijo tudi kot močno orodje za presejanje potencialnih terapevtskih spojin, ki lahko modulirajo aktivnost makrofagov, ter za raziskovanje imunoloških vidikov vpletenosti makrofagov v patogenezo in rešitev bolezni.
Raziskovanje polarizacije in aktivnosti makrofagov s celicami THP-1
Celice THP-1 so ključne pri preučevanju polarizacije človeških makrofagov, procesa, ki je bistven za razumevanje imunskih odzivov v zdravju in bolezni. Z diferenciacijo celic THP-1 v makrofage tipa M0, M1 in M2 lahko raziskovalci preučujejo klasično aktivacijo makrofagov (M1), povezano s pro-vnetnimi odzivi, ter polarizacijo makrofagov tipa M2, ki je povezana z protivnetnimi ali celilnimi procesi. Ta model polarizacije makrofagov omogoča globlje razumevanje funkcij makrofagov v različnih kontekstih, vključno z razvojem tumorjev in odzivom rakavih celic na terapije.
THP-1 v raziskavah raka: od apoptoze do kemoresistence
Celična linija THP-1 igra ključno vlogo pri preučevanju apoptoze rakavih celic in mehanizmov, na katerih temeljijo odzivi tumorskih celic na zdravljenje. Preskusi, ki uporabljajo celice THP-1, kot so ADCP-preskusi, usmerjeni v specifične rakave celice, pomagajo pojasniti interakcije med makrofagi in tumorskimi celicami, vključno s celicami HepG2. Poleg tega raziskovanje aktivnosti kaspaz v celicah THP-1 prispeva k našemu razumevanju apoptoze, ključnega procesa pri napredovanju raka in njegovem zdravljenju. Vpliv kemoterapevtskih sredstev, kot je etopozid, na celice THP-1 ponuja vpogled v vlogo teh celic pri kemoresistenci, kar še dodatno poudarja njihov pomen v raziskavah raka.
Celice THP-1 in imunoterapija: ciljanje in odziv
Na področju imunoterapije se celice THP-1 uporabljajo za modeliranje interakcije med imunskimi celicami in rakom, pri čemer se preučuje, kako je mogoče makrofage izkoristiti za ciljno delovanje na rakave celice, kot so celice Raji. Proučevanje ekspresije mRNA in beljakovin v celicah THP-1 pomaga pri razumevanju zapletenih signalnih poti, vključenih v imunski odziv, ter potenciala za terapevtsko posredovanje. Ta raziskava je ključnega pomena za razvoj strategij za usmerjanje aktivnosti makrofagov v smeri izboljšanja imunoterapevtskih izidov.
Celična linija THP-1 je zaradi svoje sposobnosti, da posnema periferne monocite in se polarizira v makrofage, postala temelj pri raziskovanju človeške levkemije, biologije makrofagov ter njihovega vpliva na raka in imunoterapijo. Njena vsestranskost in pomembnost v različnih testih jo naredita za nepogrešljivo orodje za poglobitev našega razumevanja vloge imunskega sistema pri zdravju in bolezni.
Odkrijte našo zbirko celičnih linij THP-1
Raziskovalne uporabe celic THP-1
Preden začnete delati s katero koli celično linijo, se seznanite z njenimi raziskovalnimi uporabami in razumite, kako te celice uporabiti v svoji študiji. Tukaj smo navedli nekaj pomembnih raziskovalnih uporab celične linije THP-1.
Celična linija THP-1 se pogosto uporablja v imunoloških raziskavah, saj se lahko diferencira v različne imunske celice. Tukaj je nekaj primerov študij, v katerih so bile uporabljene celice THP-1:
- V študiji iz leta 2018 so s pomočjo celic THP-1 pridobili makrofage ter preučevali vnetne poti in z njimi povezane mehanizme. Raziskovalci so ugotovili, da lahko beljakovina, imenovana apolipoprotein A-1 vezavni protein (AIBP), zaustavi vnetne poti z vezavo na apoA-1 in stabilizacijo transporterja A1, ki veže ATP (ABCA1) [3].
- V drugi študiji so s pomočjo celic THP-1 razvili monocitne celice in preučevali učinke nevroprotektivne dokozaheksaenojske kisline (DHA) na te celice v kontekstu Alzheimerjeve bolezni. Študija je raziskovala potencialne mehanizme, ki so podlaga za interakcijo beljakovine amiloid beta (Aβ) [4].
- Makrofagi, pridobljeni iz celične linije THP-1, so bili v drugi študiji uporabljeni za preučevanje potenciala eksosomov, ki jih izločajo celice duktalnega adenokarcinoma trebušne slinavke (PDAC), za spodbujanje rasti tumorjev [5].
Objave, ki izpostavljajo celice THP-1 v znanstvenih raziskavah
O celicah THP-1 obstaja veliko študij. Tukaj smo navedli nekaj relevantnih primerov:
- Protein, ki se veže na apolipoprotein A-1, zavira vnetne signalne poti z vezavo na apolipoprotein A-1 v makrofagih THP-1. Ta študija je bila objavljena v reviji Circulation leta 2018. V tej raziskavi so makrofage, pridobljene iz celične linije THP-1, obdelali z lipopolisaharidom, da bi sprožili vnetne poti. Študija je predlagala, da beljakovina, ki se veže na apolipoprotein A-1, preprečuje vnetne kaskade z vezavo na beljakovino apolipoprotein A-1.
- DHA zmanjšuje Aβ-inducirano nekroptozo prek signalne poti RIPK1/RIPK3 v monocitih THP-1. Ta raziskava je predlagala, da dokozaheksaenojska kislina (DHA) zavira nekroptozo, ki jo inducira amiloidni beta protein v monocitih, izpeljanih iz THP-1, v kontekstu Alzheimerjeve bolezni
- Učinki eksosomov celic raka trebušne slinavke, ki spodbujajo rast tumorja, na makrofage, izpeljane iz celic THP-1: V tej publikaciji so Linton in sodelavci opazili učinek eksosomov, ki jih izločajo celice duktalnega adenokarcinoma trebušne slinavke, na makrofage, izpeljane iz celične linije THP-1, ki spodbujajo rast raka.
- Učinki ločevanja odpadkov na okoljski mikrobiom, vitalnost celic THP-1 in vnetne odzive: Ta študija je uporabila makrofage, izpeljane iz celične linije THP-1, in preučevala učinek mikrobioma, prisotnega v industriji ločevanja odpadkov, na izločanje pro-vnetnih citokinov s strani teh celic.
- Standardizirani protokoli za diferenciacijo celic THP-1 v makrofage z različnimi fenotipi M (IFNγ+ LPS), M (IL-4) in M (IL-10): Ta študija opisuje protokole za indukcijo diferenciacije celic THP-1 in razvoj makrofagov z določenimi fenotipi.
- Proaterogena proteoglikanaza ADAMTS-1 je v makrofagih, pridobljenih iz THP-1, zavirana z lavrinsko kislino prek signalnih poti PI3K in JNK. Ta članek je bil objavljen v reviji »Molecular Biology Reports« leta 2019. Ta študija je raziskovala terapevtski potencial lavrinske kisline na makrofagih, pridobljenih iz celic THP-1. Rezultati so pokazali, da lavrinska kislina stabilizira aterosklerotični plak in zavira trombozo z moduliranjem izražanja ADAMS-1 (proaterogene proteoglikanaze).
Viri za celično linijo THP-1
V tem poglavju bomo obravnavali vse spletne vire o celicah THP-1. To vam bo v veliko pomoč pri učenju protokolov za gojenje, diferenciacijo in transfekcijo.
Protokoli za gojenje celic
Tukaj je nekaj virov, ki pojasnjujejo protokole gojenja in ravnanja s celicami THP-1.
- Protokol gojenja in diferenciacije: Ta dokument vsebuje podrobne in izčrpne informacije o gojiščih za celice, subkultiviranju, zamrzovanju in odmrzovanju ter protokolih diferenciacije teh celic.
- Subkultiviranje celic THP-1: Ta dokument vsebuje protokol subkultiviranja za celice THP-1.
Protokoli transfekcije
- Transfekcija celic THP-1: Ta povezava se nanaša na transfekcijo celic THP-1 s plazmidno DNK.
- Ta dokument opisuje protokol transfekcije celic THP-1.
Videoposnetki v zvezi s celicami THP-1
THP-1 je široko gojena celična linija. Na voljo je veliko video gradiva, ki pojasnjuje ravnanje s to celično linijo in njeno gojenje:
- Kultiviranje celic THP-1: Ta video prikazuje kultiviranje celične linije THP-1.
- Transfekcija celične linije THP-1: Ta video prikazuje protokol za visoko učinkovito transfekcijo celic THP-1.
Upamo, da ta članek vsebuje ustrezne informacije o gojenju, diferenciaciji, prednostih in raziskovalnih uporabah celic THP-1. Če nameravate ta in vitro celični model akutne mieloidne levkemije uporabiti v svojih raziskavah, razmislite o naročilu pri nas.
Pogosta vprašanja o celični liniji THP-1
Viri
- Chanput, W., J.J. Mes in H.J. Wichers, Celična linija THP-1: in vitro celični model za pristop imunomodulacije. International immunopharmacology, 2014. 23(1): str. 37–45.
- Chanput, W., V. Peters in H. Wichers, Celice THP-1 in U937. Vpliv bioaktivnih snovi v hrani na zdravje: modeli in vitro in ex vivo, 2015: str. 147–159.
- Zhang, M. in sod., Beljakovina, ki se veže na apolipoprotein A-1, zavira vnetne signalne poti z vezavo na apolipoprotein A-1 v makrofagih THP-1. Circulation Journal, 2018. 82(5): str. 1396–1404.
- Yuan, S., in sod., DHA zmanjšuje Aβ-inducirano nekroptozo prek signalne poti RIPK1/RIPK3 v monocitih THP-1. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2020. 126: str. 110102.
- Linton, S.S., et al., Učinki eksosomov celic raka trebušne slinavke, ki spodbujajo rast tumorja, na makrofage, pridobljene iz THP-1. PLoS One, 2018. 13(11): str. e0206759.