Celična linija T98G
Celice T98G predstavljajo človeško celično linijo glioblastoma, ki se običajno uporablja v biomedicinskih raziskavah. Te celice se zlasti uporabljajo v raziskavah raka na možganih za preučevanje ključnih celic in molekularnih dejavnikov, ki prispevajo k njegovemu nastanku. Poleg tega raziskovalcem pomagajo pri presejanju in testiranju novih zdravil proti raku, kar lahko pripomore k razvoju zdravil.
Splošne značilnosti in izvor celične linije T98G
Ta del članka vam bo pomagal spoznati osnovne značilnosti celične linije T98G. Vključuje informacije o izvoru celične linije, morfologiji, velikosti in ploidiji. Poleg tega bo izčrpno odgovoril na naslednja vprašanja: Kaj so celice T98G? Kakšna vrsta celic je T98G? Od kod izvira linija T98G? Katere so značilnosti celične linije T98G? Kaj je glioblastomska celična linija T98G U87?
- Celično linijo T98G je vzpostavil GH Stein. Sestavljena je iz fibroblastom podobnih celic, ki so bile pridobljene iz možganskega tkiva 61-letnega belca z glioblastomom multiforme [1].
- Celice T98G niso tumorogene; ob vbrizganju v gole miši ne povzročajo tumorjev. Vendar pa se ob ustrezni pritrditvi v celični kulturi nagibajo k proliferaciji.
- Te celice imajo morfologijo, podobno fibroblastom.
- Celična linija glioblastoma T98G predstavlja hiperpentaploidijo. Modalno število kromosomov se giblje med 128 in 132. Višje ploidije lahko obstajajo pri 1,39 % celične populacije.
T98 v primerjavi s T98G
Obe sta človeški celični liniji glioblastoma in imata podoben izvor. Edina razlika med tema celičnima linijama je število kromosomov. T98G ima skoraj dvakrat več kromosomov kot T98. Zato je T98G znana kot poliploida različica T98.
T98G v primerjavi z U87
U87 in T98G sta obe človeški celični liniji glioblastoma, ki se uporabljata v raziskavah raka na možganih. U87 kaže bolj agresiven fenotip v primerjavi z GBM T98G.
2. Podatki o gojenju celične linije T98G
Pred začetkom dela s celično linijo je ključnega pomena poznavanje informacij o njenem gojenju. To vam bo pomagalo pri enostavnem in priročnem ravnanju s celično linijo v laboratoriju. Vedeti morate: Kakšen je čas podvojitve za celično linijo T98G? Kateri gojišče je najbolj primerno za celice T98G? Kakšne so značilnosti rasti celic T98G? Kakšna je gostota posevka celic T98G? Kako zamrzniti celice T98G?
Ključne točke za gojenje celic T98G
Čas podvojitve:
Približni čas podvojitve celic T98G je 40 ur. Lahko se razlikuje glede na pogoje gojenja.
Adhezivne ali v suspenziji:
Celice T98G so adhezivne. Prilepijo se na dno gojiščnih posod in tvorijo monosloje.
Razmerje delitve:
Celice T98G se subkultivirajo v razmerju delitve od 1:2 do 1:5. Za to se celice najprej operejo z 1X PBS pufrom, nato pa inkubirajo z raztopino za pasážiranje (Accutase) 8 do 10 minut pri sobni temperaturi. Po inkubaciji se odlepljene celice dodajo v svež gojišče in centrifugirajo. Nato se zbrani celični pelet previdno ponovno suspendira, celice pa se razporedijo v kultivacijsko kolbo, ki vsebuje gojišče.
Rastno gojišče:
Za gojenje celic T98G se uporablja gojišče EMEM, ki vsebuje 10 % fetalnega govejega seruma, 2 mM L-glutamina, 2,2 g/l NaHCO₃ in EBSS. Gojišče je treba zamenjati 3 do 4-krat na teden.
Pogoji rasti:
Celice T98G se gojijo v vlažnem inkubatorju, nastavljenem na 37 °C in priključenem na vir CO₂.
Shranjevanje:
Zamrznjene celice se lahko shranjujejo pri temperaturi pod -150 °C ali v plinski fazi tekočega dušika, da se dolgoročno ohrani njihova vitalnost.
Postopek zamrzovanja in gojišče:
Za zamrzovanje celic T98G se priporoča uporaba medija za zamrzovanje celic CM-1 ali CM-ACF. Pri tem se priporoča postopek počasnega zamrzovanja, ki omogoča znižanje temperature za le 1 °C na minuto. To prepreči šok za celice in ohrani njihovo vitalnost.
Postopek odmrzovanja:
Zamrznjene celice se nežno odmrznejo tako, da se jih za 40 do 60 sekund postavi v predhodno ogreto vodno kopel pri 37 stopinjah Celzija. Nato se ponovno suspendirajo v svežem gojišču in prenesejo v novo kolbo. Po 24 urah inkubacije se gojišče zamenja, da se odstranijo sestavine sredstva za zamrzovanje.
Raven biološke varnosti:
Kulture T98G se gojijo v laboratoriju z ravnjo biološke varnosti 1.
Objavljeno: 2023 | Zadnji pregled: maj 2026
- Celična linija T98G: prednosti in slabosti
- Uporaba celic T98G
- 2. Informacije o gojenju celične linije T98G
- Ključne točke za gojenje celic T98G
- Splošne značilnosti in izvor celične linije T98G
- 5. Raziskovalne publikacije o celicah T98G
- Viri za celice T98G: protokoli, videoposnetki in več
- Pogosta vprašanja
Celična linija T98G: prednosti in slabosti
T98G je široko uporabljena celična linija glioblastoma človeškega izvora. Ima več prednosti in slabosti, ki jo ločujejo od drugih. Nekaj pomembnejših je obravnavanih v tem delu članka.
Prednosti
Prednosti celic T98G so:
-
Dobro karakterizirana
Dobro uveljavljena in dobro karakterizirana celična linija. Obširno proučena in dokumentirana v strokovni literaturi.
-
In vitro model
Predstavlja značilnosti glioblastoma, najbolj agresivnega možganskega tumorja. Dragoceno orodje za raziskovanje bolezni, razumevanje biologije in razvoj zdravljenja.
Pomanjkljivosti
Pomanjkljivosti, povezane s celicami T98G, so:
-
Heterogenost
Genetska heterogenost v populaciji celic T98G lahko vodi do neskladnosti v eksperimentalnih rezultatih in otežuje interpretacijo podatkov.
Uporaba celic T98G
Celična linija T98G je dragoceno orodje, ki se uporablja v raziskavah raka. Tukaj je navedenih nekaj glavnih raziskovalnih uporab celic T98G:
- Raziskave raka: Celicna linija T98G je dragoceno orodje za preučevanje biologije glioblastomskih tumorjev. Te celice se uporabljajo predvsem za preučevanje zapletenih molekularnih poti, ki so osnova za razvoj in napredovanje glioblastoma. Poleg tega se uporabljajo za identifikacijo genetskih mutacij, ki spodbujajo rast tumorja, ter drugih mehanizmov rakavih celic. Yang Chen in sodelavci so raziskovali te celice in ugotovili, da prekomerna ekspresija miRNA-21 zmanjša ravni PDCD4 (beljakovina 4 za programirano celično smrt) v celicah T98G. To vodi do zaviranja apoptoze celic T98G, ki jo posreduje PDCD4. Študija tako kaže, da je miRNA-21 potencialna tarča za razvoj terapij [2]. Podobno kot v tej študiji so Fanqiang Kong in sodelavci preučevali vlogo mikroRNA-15a pri proliferaciji in invaziji celic glioblastoma T98G. Ugotovili so, da miRNA-15a-5p spodbuja te celične procese z delovanjem na molekulo celične adhezije 1 (CADM1) [3].
- Testiranje zdravil in razvoj terapij: T98G služi kot odličen in vitro model glioblastoma za presejanje novih zdravil in zagotavlja platformo za ocenjevanje učinkovitosti potencialnih terapij proti raku. Raziskovalci prav tako testirajo različne spojine in terapije, da bi identificirali in odkrili kandidate za zdravila z najbolj obetavnimi lastnostmi proti glioblastomu. To vodi k razvoju novih zdravil in strategij zdravljenja, kar ponuja upanje bolnikom z glioblastomom. V eni od takih študij so preučevali protirakavni potencial naravne spojine, imenovane korilagin, v celični liniji T98G GBM, odporni na temozolomid. Ugotovitve študije kažejo, da korilagin v kombinaciji s temozolomidom v celicah povzroča močnejše antiproliferativne in antiapoptotične učinke [4].
5. Raziskovalne publikacije o celicah T98G
V nadaljevanju so navedene nekatere zanimive in pogosto citirane raziskovalne publikacije o T98G, celični liniji glioblastoma.
Kemoterapevtski učinek SR9009, agonista REV-ERB, na človeške glioblastomske celice T98G
Ta publikacija v reviji ASN Neuro (2019) je preučevala protirakove učinke agonista REV-ERB, imenovanega SR9009, na celice glioblastoma T98G.
Ta raziskovalni članek v reviji Neurochemical Research (2019) je predlagal, da natrijev butirat in kvercetin sinergistično zavirata zaščitno avtofagijo v celicah T98G in povečujeta celično apoptozo.
Ta študija, objavljena v reviji Genes (2023), je na celični liniji T98G, prilagojeni hipoksiji, izvedla sekvenciranje RNA in predlagala IRE1 (enzim 1, ki potrebuje inozitol) kot obetaven terapevtski cilj.
MikroRNA-548c-3p zavira proliferacijo in migracijo celic glioma T98G z zmanjšanjem izražanja c-Myb
Ta članek je bil objavljen v reviji Oncology Letters (2017). Študija je pokazala, da miRNA-548c-3p deluje na onkogene T98G (c-Myb) in tako zavira proliferacijo in migracijo celic T98G.
Ta članek v reviji »Journal of Medicinal Plants Research« (2011) predlaga, da kloroformni ekstrakt Dracocephalum tanguticum izvaja antiproliferativne učinke na celice T98G z moduliranjem genov kaspaze-3, Bax in P21.
Viri za celice T98G: protokoli, videoposnetki in več
Tukaj so navedene razpoložljive vire, ki vsebujejo protokole za gojenje in transfekcijo celic T98G.
- Transfekcija celic T98G: Ta raziskovalni članek vsebuje protokol za transfekcijo celic T98G. Na kratko pojasnjuje metodo in potrebna reagenta.
Naslednje povezave vam bodo v veliko pomoč pri učenju protokola za gojenje celic T98G in olajšale delo z njim.
- Celice T98G: Ta spletna stran vsebuje ključne informacije o protokolih za gojenje celic T98G, vključno s subkultiviranjem ter ravnanjem s proliferativnimi in krioprezerviranimi kulturami. Poleg tega vam bo pomagala spoznati gojišča za celice, pogoje gojenja in čas podvojitve.
Viri
- Haehl, E., Radioresistenca, ki jo povzročajo endotelne celice pri glioblastomu. 2021, Univerza v Tübingenu.
- Chen, Y., et al., MikroRNA-21 zavira izražanje tumorskega supresorja PDCD4 v človeški glioblastomski celici T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): str. 197–205.
- Kong, F., et al., MikroRNA-15a-5p spodbuja proliferacijo in invazijo celic glioblastoma T98G prek ciljanja molekule celične adhezije 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): str. 1–1.
- Milani, R., et al., Corilagin inducira visoke stopnje apoptoze v celični liniji glioma T98G, odporni na temozolomid. Oncol Res, 2018. 26(9): str. 1307–1315.