Celice P19 – Raziskave embrionalnega karcinoma z uporabo celic P19
P19 je linija celic mišjega embrionalnega karcinoma. Široko se uporablja v biomedicinskih raziskavah, predvsem za preučevanje razvojne biologije, biologije matičnih celic, celične diferenciacije in presejanja zdravil. Ker imajo celice P19 sposobnost diferenciacije, so lahko koristne pri raziskovanju kompleksnih bioloških procesov, kot sta nastajanje tkiva in zgodnji embrionalni razvoj. V tem članku bomo obravnavali osnovne značilnosti celic P19, pridobljenih iz miši.
- Rastno gojišče
- DMEM/Ham's F12 gojišče, ki vsebuje 5 % fetalnega govejega seruma, 3,1 g/l glukoze, 1,6 mM L-glutamina, 1,0 mM natrijevega piruvata, 15 mM HEPES in 1,2 g/l NaHCO₃.
- Čas podvojitve
- Čas podvojitve, naveden za celično linijo P19, je približno 2 do 3 dni.
- Vrsta rasti
- Embrionalna karcinomska celična linija P19 je adhezivna.
- Raven biološke varnosti
- BSL-1
- Na voljo pri
- Cytion — Naroči P19
- Splošne značilnosti in izvor celic P19
- Informacije o gojenju celic P19
- Celična linija P19: prednosti in slabosti
- Raziskovalne aplikacije celic P19
- Danes kupite svojo celično linijo P19
- Celice P19: raziskovalne publikacije
- Viri za celično linijo P19: protokoli, videoposnetki in več
- Raziskovanje celične linije P19: Pogosta vprašanja
- Sklici
- Pogosta vprašanja
Splošne značilnosti in izvor celic P19
Pred začetkom dela s celično linijo je nujno poznati njene splošne značilnosti in izvor. V tem poglavju bomo obravnavali naslednje: Kaj je celična linija P19? Kakšna je velikost celice P19? Kakšen je izvor celic P19?
- P19 je vrsta pluripotentnih celic embrionalnega karcinoma, prvotno pridobljenih iz teratokarcinoma, ki se je razvil pri miši C3H/He. Celično linijo sta leta 1982 prvič vzpostavila McBurney in Rogers.
- Celice P19 se lahko neprekinjeno razmnožujejo v gojišču, dopolnjenem s serumom. Ob izpostavljenosti netoksičnim zdravilom, kot sta retinoinska kislina in dimetilsulfoksid (DMSO), se lahko diferencirajo v druge vrste celic [1].
- Te mišje karcinomske celice imajo epitelijsko podobno morfologijo.
- Celična linija P19 ima euploidni moški kariotip (n = 40; XY).
Podatki o gojenju celic P19
Celicna linija P19 se zaradi svojih edinstvenih lastnosti pogosto goji v raziskovalnih laboratorijih. Njeno gojenje je enostavno in obvladljivo. V tem poglavju so navedene vse ključne informacije, ki jih potrebujete za vzdrževanje in gojenje celicne kulture P19. Spoznali bomo: Kakšen je čas podvojitve celic P19? Kako se goji celična linija P19? Ali je P19 adhezivna celična linija?
Ključne točke za gojenje celic P19
Čas podvojitve:
Čas podvojitve, naveden za celično linijo P19, je približno 2 do 3 dni.
Adhezivna ali v suspenziji:
Celična linija embrionalnega karcinoma P19 je adhezivna.
Razmerje pri subkultiviranju:
Celice P19 je treba subkultivirati vsake 48 ur, pri čemer je treba za te celice ohranjati razmerje delitve 1:10. Adherentne celice se operejo z 1X fosfatnim pufrom in inkubirajo z Accutase, dokler se celice ne razdružijo. Celicam se doda gojišče in se poberejo s centrifugiranjem. Pobrane celice se previdno ponovno suspendirajo in razdelijo v nove kolbe.
Rastno gojišče:
DMEM/Ham's F12 gojišče, ki vsebuje 5 % fetalnega govejega seruma, 3,1 g/l glukoze, 1,6 mM L-glutamina, 1,0 mM natrijevega piruvata, 15 mM HEPES in 1,2 g/l NaHCO₃ se uporablja za gojenje celic P19.
Pogoji rasti:
Za rast in gojenje celične linije embrionalnega karcinoma P19 je nujna vlažna inkubatorja, nastavljena na 37 °C z dovodom 5 % CO₂.
Shranjevanje:
Zamrznjene viale s celicami P19 je treba shranjevati pri temperaturi pod -150 °C v zamrzovalniku ali v plinski fazi tekočega dušika, da se ohrani dolgoročna vitalnost celic.
Postopek zamrzovanja in gojišče:
Za zamrzovanje celic P19 se lahko uporabita gojišča CM-1 ali CM-ACF s postopkom počasnega zamrzovanja, ki celice ščiti pred šokom in ohranja njihovo vitalnost.
Postopek odmrzovanja:
Zamrznjene celice P19 se lahko odmrznejo v vodni kopeli pri 37 °C s hitrim pretresanjem viale v času od 40 do 60 sekund. Celicam se doda svež medij in se centrifugirajo, da se odstranijo elementi zamrzovalnega medija. Celice se ponovno suspendirajo in se prelijejo v novo kolbo za rast.
Raven biološke varnosti:
Za celično linijo P19 so potrebni laboratorijski pogoji ravni biološke varnosti 1.
Celična linija P19: prednosti in slabosti
V tem poglavju bomo obravnavali prednosti in slabosti celične linije P19.
Prednosti
- Potencial za diferenciacijo: Celice P19 se lahko diferencirajo v različne celične tipe, vključno s kardiomiociti, nevroni in mikroglialnimi celicami. Za diferenciacijo potrebujejo netoksična zdravila, kot sta retinoinska kislina in dimetilsulfoksid (DMSO). Retinoinska kislina spodbuja razvoj nevronov, mikroglije in astroglije, medtem ko DMSO sproži razvoj utripajočih kardiomiocitov in celic gladke mišice. Zato so celice P19 koristne pri preučevanju celične diferenciacije in razvojnih procesov.
- Modelni sistem: Pluripotentna linija embrionalnih karcinomskih celic P19 je dragocen model za preučevanje zgodnjega embrionalnega razvoja. Raziskovalci uporabljajo celice P19 za razlago celičnih signalnih poti ter celičnih in molekularnih mehanizmov, vpletenih v te procese.
Pomanjkljivosti
- Mišji izvor: P19 je mišja linija embrionalnih karcinomskih celic. Zato ugotovitve iz študij, ki uporabljajo te celice, morda niso v celoti prenosljive na človeško biologijo in procese.
Raziskovalne aplikacije celic P19
Celice P19 imajo zaradi svoje sposobnosti diferenciacije ter pomena za razvojno biologijo in raziskave matičnih celic več raziskovalnih uporab. Med pomembne raziskovalne uporabe embrionalnih karcinomskih celic P19 spadajo:
- Študije celične diferenciacije: Kot vemo, se celice P19 lahko diferencirajo v nevrone, mikroglialne celice, celice gladke mišice in kardiomiocite; zato se pogosto uporabljajo za preučevanje procesov celične diferenciacije. Poleg tega pomagajo pri raziskovanju nevralnega in srčnega razvoja ter z njima povezanih mehanizmov. Študija, izvedena leta 2018, je ugotovila, da reaktivne kisikove spojine (ROS) usmerjajo diferenciacijo celic P19 v določene celične tipe in preprečujejo indukcijo drugih [3]. Druga študija je raziskovala proces nevralne diferenciacije, pri kateri posreduje retinoinska kislina, in ugotovila vpletenost signalne poti PI3K/Akt/GSK3β [4].
- Razvojna biologija: Celice P19 so neprecenljiv model za preučevanje zgodnjega embrionalnega razvoja. Raziskovalcem pomagajo razumeti zapletene biološke procese, kot je nastajanje tkiva med razvojem zarodka. V raziskavi so uporabili celice P19 in preučevali molekularne dejavnike, ki prispevajo k nastanku ventrikularne septalne okvare (VSD). Ugotovitve so pokazale, da dolga nekodirajoča RNA SNHG6 prispeva k VSD z negativno regulacijo miRNA-101 in aktivacijo poti Wnt/β-katenin [5].
- Testiranje zdravil: Celicna linija P19 mišjega embrionalnega karcinoma se uporablja tudi za presejanje potencialnih kandidatov za zdravila. V eni od študij so uporabili diferencirane nevrone iz celic P19 in preučevali nevroprotektivne učinke zaviranja acetilholinesteraze s sintetičnim L-Dopa in vodnim izvlečkom semen rastline Mucuna pruriens. Rezultati so pokazali, da je rastlinski izvleček v primerjavi z L-Dopa pokazal obetavne rezultate [6].
Kupite svojo celično linijo P19 še danes
Celice P19: Raziskovalne publikacije
V tem delu članka bomo predstavili nekaj zanimivih raziskovalnih publikacij, ki obravnavajo celice P19.
Ta članek je bil objavljen v reviji Oncology Reports leta 2017. Študija je predlagala, da hipofizni spolni hormoni spodbujajo adhezijo, proliferacijo in migracijo celičnih linij teratokarcinoma, vključno s celicami P19.
Dolga nekodirajoča RNA uc.4 vpliva na celično diferenciacijo prek signalne poti TGF-beta
Ta objava v reviji Experimental & Molecular Medicine (2018) je uporabila celice P19 in proučevala funkcijo dolge nekodirajoče RNA uc.4. Ugotovitve so pokazale, da uc.4 vpliva na celično diferenciacijo prek modulacije signalne poti TGF-beta.
Ta raziskovalni članek je bil objavljen leta 2018 v reviji »Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine«. Študija je ugotovila, da lahko naravni izvleček možganskega tkiva in tridimenzionalna celična kultura pospešita diferenciacijo celic embrionalnega karcinoma P19 v nevronske celice.
Ta študija je bila objavljena v reviji Journal of Ethnopharmacology leta 2020. Študija je pokazala, da lahko izvleček listov Cichorium intybus L. inducira diferenciacijo celic embrionalnega karcinoma P19 v β-celice trebušne slinavke, ki proizvajajo inzulin.
Ta raziskava je bila objavljena v reviji »Molecules« (2022). V tej študiji so raziskovali nevroprotektivne učinke in učinke zaviranja acetilholinesteraze izvlečka semen Mucuna pruriens na nevrone celic P19.
Viri za celično linijo P19: protokoli, videoposnetki in več
V nadaljevanju je navedenih nekaj virov o celicah P19.
- Protokol nevronske diferenciacije celic P19: Ta članek vsebuje protokol nevronske diferenciacije celic P19 in druge koristne informacije o diferenciaciji celic P19.
- Transfekcija celic P19: Ta povezava vam bo pomagala spoznati protokol transfekcije celic P19.
Naslednja povezava vsebuje protokol za gojenje celic P19.
- Celice P19: Ta spletna stran vsebuje vse koristne informacije o celični liniji P19, vključno s pogoji za gojenje, gojišči za celice P19, delitvijo celic in še veliko več.
Raziskovanje celične linije P19: Pogosto zastavljena vprašanja
Viri
- McBurney, M.W., P19 embrionalne karcinomske celice. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): str. 135–40.
- Bressler, J., et al., Linija embrionalnih karcinomskih celic P19: model za preučevanje interakcij med geni in okoljem. Cell Culture Techniques, 2011: str. 223–240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey in G. Rödel, Mitohondrijski ROS usmerjajo diferenciacijo pluripotentnih mišjih celic P19. Stem Cell Research, 2018. 30: str. 180–191.
- Fu, F. in sod., All-trans-retinoinska kislina inducira diferenciacijo celic P19 v nevrone, vključene v signalno pot PI3K/Akt/GSK3β. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): str. 4386–4396.
- Jiang, Y., in sod., Dolga nekodirajoča RNA SNHG6 prispeva k nastanku ventrikularne septalne okvare prek negativne regulacije miR-101 in aktivacije poti Wnt/β-katenin. Die Pharmazie – Mednarodna revija za farmacevtske znanosti, 2019. 74(1): str. 23–28.
- Kamkaen, N., et al., Vodni izvleček semen Mucuna pruriens je v primerjavi s sintetičnim L-dopom izboljšal nevroprotektivne učinke in učinke zaviranja acetilholinesteraze. Molecules, 2022. 27(10): str. 3131.