Celice NCI-H460 – Raziskovanje pljučnega raka s pomočjo spoznanj o celicah NCI-H460
NCI-H460 so celice nedrobnoceličnega pljučnega raka človeškega izvora, ki se pogosto uporabljajo v raziskavah pljučnega karcinoma in toksikologije. Ta celična linija je dragoceno orodje za preučevanje različnih vidikov biologije raka, ki vključujejo razvoj tumorja, rast in odpornost na zdravila. Poleg tega so celice NCI-H460 primeren model za razvoj protirakavih reagentov.
- Gojišče
- Kot gojišče za NCI-H460 se uporablja RPMI 1640. Dodaja se mu 10 % fetalnega govejega seruma, 2,1 mM stabilnega glutamina in 2,0 g/L NaHCO3. Gojišče je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.
- Čas podvojitve
- Čas podvojitve celic NCI-H460 je približno 33 ur.
- Vrsta rasti
- Pljučne rakave celice NCI-H460 so adhezivne.
- Raven biološke varnosti
- BSL-4
- Na voljo pri
- Cytion — Naročite NCI-H460
Celice NCI-H460: Izvor in splošne značilnosti
Poreklo in splošne značilnosti celične linije pomembno vplivajo na njene raziskovalne uporabe. Ta del članka vam bo pomagal spoznati poreklo in glavne značilnosti celic pljučnega raka NCI-H460. Spoznali boste: Kaj so celice NCI-H460? Kakšna je vrsta celične linije NCI-H460? Kakšna je morfologija celic NCI-H460?
- Celična linija NCI-H460 izvira iz plevralnega izliva evropskega moškega z velikoceličnim pljučnim rakom. Ustanovil jo je leta 1982 A. F. Gazdar s sodelavci.
- Celice pljučnega raka NCI-H460 imajo epitelijsko morfologijo.
- NCI-H460 je tumorigena celična linija s hipotriploidnim kariotipom. Modalno število kromosomov za te celice je 57. Celice NCI-H460 imajo v primerljivem deležu tudi modalno število kromosomov 58.
- Te celice pljučnega raka imajo številne mutacije, podobne tistim pri nedrobnoceličnih pljučnih tumorjih, kot je na primer mutacija KRAS, ki sodeluje pri celični proliferaciji, rasti, invaziji in metastaziranju.
Informacije o gojenju celic NCI-H460
Za pravilno ravnanje in vzdrževanje celične linije NCI-H460 morate poznati naslednje ključne točke. V nadaljevanju boste našli informacije o času podvojitve celic NCI-H460, gojišču za NCI-H460 ter osnovnih postopkih gojenja celic pljučnega raka NCI-H460.
Ključne točke za gojenje celic NCI-H460
Čas podvojitve:
Čas podvojitve celic NCI-H460 je približno 33 ur.
Adhezivne ali v suspenziji:
Celice pljučnega raka NCI-H460 so adhezivne.
Razmerje pri delitvi kulture:
Priporočeno razmerje za delitev celične linije NCI-H460 je 1:2 in 1:4. Po odstranitvi starega gojišča se adhezivne celice speremo z 1 x fosfatnim pufrom. Nato se celice inkubirajo z raztopino za pasážiranje Accutase 8 do 10 minut pri sobni temperaturi. Disociirane celice se ponovno suspendirajo v gojišču in centrifugirajo. Pridobljene celice se ponovno suspendirajo in prelijejo v novo kolbo za gojenje.
Rastni medij:
Kot gojišče za NCI-H460 se uporablja RPMI 1640. Dodaja se mu 10 % fetalnega govejega seruma, 2,1 mM stabilnega glutamina in 2,0 g/l NaHCO₃. Gojišče je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.
Pogoji rasti:
Kulture NCI-H460 se vzdržujejo pri temperaturi 37 °C v vlažnem inkubatorju s stalnim dovajanjem 5 % CO₂.
Shranjevanje:
Pljučne rakave celice NCI-H460 se lahko dolgoročno shranjujejo v plinski fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku za izredno nizke temperature.
Postopek zamrzovanja in gojišče:
Za zamrzovanje in shranjevanje celic NCI-H460 se uporablja gojišče CM-1 ali CM-ACF. Priporoča se metoda počasnega zamrzovanja, da se ohrani čim večja vitalnost celic.
Postopek odmrzovanja:
Zamrznjene celice NCI-H460 se odmrzujejo v predhodno ogreti vodni kopeli (pri temperaturi 37 °C) 40 do 60 sekund, dokler ne ostane le še majhen kepec ledu. Odtaljenim celicam se doda svež gojišče in se centrifugirajo, da se odstranijo sestavine zamrzovalnega gojišča. Zbrani celični pelet se ponovno suspendira, celice pa se razporedijo v nove kolbe, ki vsebujejo gojišče za rast. Celice NCI-H460 se lahko na površino kolbe pritrdijo šele po skoraj 24 urah.
Raven biološke varnosti:
S celicami pljučnega raka NCI-H460 se ravna in jih goji v laboratorijih stopnje biološke varnosti 1.
Objavljeno: 2023 | Zadnji pregled: maj 2026
Prednosti in slabosti celic NCI-H460
NCI-H460 je celična linija, ki se pogosto uporablja v raziskavah pljučnega raka. V tem poglavju bomo obravnavali splošne prednosti in slabosti celic pljučnega raka NCI-H460.
Prednosti
Prednosti celične linije NCI-H460 za nedrobnoceličnega pljučnega raka so:
-
Izvor tumorja
Celična linija NCI-H460 izvira iz bolnika z velikoceličnim pljučnim karcinomom in predstavlja ta poseben tip pljučnega raka. Uporablja se kot model za preučevanje biologije pljučnega raka in razvoj novih ter učinkovitih načinov zdravljenja. Celice NCI-H460 imajo tumorigeni potencial in jih je mogoče vbrizgati imunodeficientnim mišim, da se ustvarijo in vivo tumorji za preučevanje rasti in razvoja tumorja ter učinkovitosti potencialnih zdravil.
-
Visoke stopnje proliferacije
NCI-H460 kaže višje stopnje rasti kot druge celične linije nedrobnoceličnega pljučnega raka, kot je na primer A549. Ta prednost povečuje njihovo razpoložljivost in raziskovalcem pomaga pri izvajanju ponovljivih in časovno občutljivih poskusov.
Pomanjkljivosti
Pomanjkljivosti, povezane s celicami pljučnega raka NCI-H460, so:
-
Homogenost
Celice NCI-H460 so homogene, saj so bile pridobljene iz tumorja enega samega bolnika. Zato jim na splošno primanjkuje kompleksnosti in heterogenosti, ki ju opazimo v tumorjih bolnikov.
Raziskovalne aplikacije celic NCI-H460
Celice pljučnega raka NCI-H460 se obsežno uporabljajo v študijah, povezanih s pljučnim karcinomom. Tukaj je nekaj pomembnih raziskovalnih uporab celic NCI-H460:
- Raziskave pljučnega raka: Celice NCI-H460 so neprecenljiv model za preučevanje celičnih in molekularnih mehanizmov, vpletenih v razvoj, rast in metastaziranje tumorja. Poleg tega se uporabljajo za preučevanje ključnih signalnih poti, molekularnih tarč in različnih genetskih mutacij, povezanih s progresijo pljučnega raka. Za učinkovito preučevanje teh dejavnikov je bilo na celicah NCI-H460 opravljenih več študij. Študija, izvedena leta 2019, je predlagala, da je prekomerno izraženi jedrski ubikvitarni substrat kazeina in ciklin-odvisnih kinaz (NUCKS) vpleten v rast tumorskih celic prek regulacije signalne poti PI3K/AKT [1]. Podobno je študija in vitro in in vivo uporabila celice NCI-H460 za preučevanje vloge gena eIF4E. Ugotovitve so pokazale, da je gen eIF4E vpleten v rast pljučnega karcinoma in angiogenezo ter da ga je mogoče uporabiti kot tarčo za razvoj obetavnih zdravil proti pljučnemu raku [2].
- Odkrivanje in razvoj zdravil: NCI-H460, človeška celična linija pljučnega raka, se široko uporablja v študijah odkrivanja in razvoja zdravil. Raziskovalci te celice uporabljajo za preučevanje toksičnosti in učinkovitosti novih kandidatov za zdravila, ciljnih terapij ter zdravljenj, usmerjenih predvsem v mutacije KRAS v celicah NCI-H460. V študiji, ki so jo leta 2023 izvedli Haoyue Hu in sodelavci, so z uporabo celic NCI-H460 preučevali protirakove učinke zdravila anlotinib. Rezultati so pokazali, da je anlotinib delno vplival na rast pljučnih rakavih celic z mutacijo KRAS z zaviranjem signalne kaskade MEK/ERK [3]. Podobno so z uporabo celic NCI-H460 preučevali fenolno spojino, karnozno kislino, glede na njene antiproliferativne in proapoptotske lastnosti [4].
- Odpornost na zdravila: Celična linija NCI-H460 je idealna za preučevanje mehanizmov odpornosti pljučnega karcinoma na zdravila. Raziskovalci te celice uporabljajo za razvoj modelov odpornosti na zdravila, da bi identificirali ključne gene, molekularne dejavnike in signalne poti. Na primer, v eni od študij so razvili celice NCI-H460, odporne na pemetreksed, večciljno protifolatsko zdravilo, da bi proučili osnovne molekularne mehanizme odpornosti na pemetreksed v celicah nedrobnoceličnega pljučnega raka [5].
Kupite celično linijo NCI-H460: vaša vstopna točka v raziskave pljučnega raka
Raziskovalne publikacije o celicah NCI-H460
Tukaj je nekaj zanimivih raziskovalnih publikacij o celični liniji pljučnega karcinoma NCI-H460.
Naravni glukan iz črnega fižola zavira proliferacijo rakavih celic prek poti PI3K-Akt in MAPK
Ta študija, objavljena v reviji Molecules (2023), je pokazala, da naravni α-1,6-glukan BBWPW iz črnega fižola zavira proliferacijo celic NCI-H460 prek regulacije poti PI3K/AKT/MAPK.
Ta članek v reviji »Phytomedicine« (2019) je pokazal, da dioscin-6′-O-acetat, nova naravna spojina, deluje antiproliferativno na celice pljučnega raka NCI-H460.
miRNA-425-5p pospešuje rast pljučnega raka prek signalne osi PTEN/PI3K/AKT
Raziskava v reviji BMC Pulmonary Medicine (2020) navaja, da mikroRNA-425-5p pospešuje nastanek pljučnega karcinoma prek signalne poti PTEN/PI3K/AKT.
Ta članek v reviji »Molecular Medicine Reports« (2017) je predstavil protitumorski potencial in osnovne mehanizme delovanja spojine kinalizarina v celicah NCI-H460 in drugih celicah pljučnega raka.
Ta raziskava, objavljena v reviji »Food and Function« (2019), poudarja potencialni protirakavi učinek izvlečka Eucalyptus globulus Labill. na celicah NCI-H460. Rezultati so pokazali, da je rastlinski izvleček te učinke dosegel s povečanjem ekspresije p53 v celicah NCI-H460 in modulacijo profila celičnega cikla.
Viri za celično linijo NCI-H460: protokoli, videoposnetki in več
Tukaj je nekaj spletnih virov, posvečenih celicam pljučnega raka NCI-H460.
- Transfekcija celic NCI-H460: Ta video vodič je podrobna navodila za transfekcijo celic NCI-H460 s plazmidno DNK.
Naslednje povezave vsebujejo nujne informacije o gojenju celic H460.
- Celice NCI-H460: Ta spletna stran ponuja pomembne informacije o gojiščih za celice NCI-H460 ter postopkih subkultiviranja, zamrzovanja in odmrzovanja.
- Prenos celic NCI-H460: Ta dokument vas bo vodil skozi postopek prenosa in subkultiviranja celične linije NCI-H460. Poleg tega vam bo pomagal spoznati protokol transfekcije za celice NCI-H460.
Raziskovanje celične linije NCI-H460: pogosta vprašanja in vpogledi
Celična linija NCI-H460 izvira od bolnika z velikoceličnim pljučnim karcinomom, zato je dragocen model za preučevanje te vrste pljučnega raka.
Celice NCI-H460 se uporabljajo za raziskovanje biologije pljučnega raka, razvoj novih načinov zdravljenja in oceno učinkovitosti morebitnih zdravil. Vbrizgamo jih lahko tudi v imunodeficientne miši in tako ustvarimo modele tumorjev in vivo za preučevanje rasti in razvoja tumorjev.
Tako celični liniji NCI-H460 kot A549 sta pridobljeni iz pljučnega karcinoma, vendar NCI-H460 predstavlja velikocelični karcinom, A549 pa adenokarcinom. Ta razlika v histološkem podtipu vpliva na njihove značilnosti in obnašanje.
Da, celice NCI-H460 imajo tumorigen potencial in jih je mogoče vsaditi v imunodeficientne miši za ustvarjanje ksenografskih modelov, kar olajša preučevanje velikoceličnega pljučnega karcinoma in vivo.
Kombinacija paklitaksela z drugimi spojinami lahko okrepi njegov citotoksični učinek na celice NCI-H460, kar bi lahko izboljšalo rezultate zdravljenja pljučnega raka.
Da, celice NCI-H460 izražajo hipoksantin gvanin fosforibosiltransferazo, ki je bistvena za presnovo nukleotidov in razmnoževanje celic.
Celice NCI-H460 se pogosto uporabljajo v raziskavah raka in toksikoloških raziskavah za preučevanje rasti tumorjev, ocenjevanje citotoksičnih učinkov spojin in raziskovanje mehanizmov odpornosti na zdravila.
Celice NCI-H460 običajno izražajo nevrofilamentne tripletne beljakovine, ki sodelujejo pri vzdrževanju citoskeletne strukture in imajo lahko vlogo pri migraciji in invaziji rakavih celic.
Pot κB je med drugim vpletena v uravnavanje proliferacije in preživetja celic NCI-H460, kar ponuja potencialne tarče za terapevtsko posredovanje pri pljučnem raku.
Da, celice NCI-H460 se pogosto uporabljajo kot in vitro modeli za ocenjevanje citotoksičnih učinkov kemoterapevtikov, vključno s paklitakselom in karboplatinom, kar pripomore k razvoju učinkovitega zdravljenja raka.
Viri
- Hu, C., et al., NUCKS spodbuja proliferacijo, migracijo in invazijo celic pljučnega raka prek signalne poti Pi3k/Akt. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): str. E55–61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, nov zaviralec interakcije eIF4E/eIF4G, zavira rast celic pljučnega raka in angiogenezo prek signalne poti Ras/MNK/ERK/eIF4E. Kemijsko-biološke interakcije, 2022. 352: str. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib ima protirakavne učinke na celice pljučnega raka z mutacijo KRAS prek zaviranja poti MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: str. 3579–3587.
- Corveloni, A.C., et al., Karnozinska kislina kaže antiproliferativne in proapoptotične učinke v tumorskih celicah pljuč NCI-H460 in netumorskih celicah IMR-90. Journal of Toxicology and Environmental Health, del A, 2020. 83(10): str. 412–421.
- Xu, Y.-L. in sod., Vzpostavitev in karakterizacija celic NCI-H460/PMT, odpornih na pemetreksed. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (prej Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): str. 731–739.