Celična linija BEWO
BeWo je celična linija, pridobljena iz človeškega horionkarcinoma, ki se pogosto uporablja v biomedicinskih raziskavah. Služi kot dragocen in vitro model za raziskovanje zapletenega procesa razvoja placente in sincizacije človeških trofoblastov. Raziskovalci te celice uporabljajo tudi za preučevanje vedenja trofoblastnih celic, proizvodnje hormonov in prevoza snovi skozi placento. Poleg tega se celice BeWo uporabljajo tudi v študijah toksikologije, okužb in prenašanja bolezni.
Ta članek zajema temeljna znanja o celicah BeWo, ki vam lahko pomagajo pri delu z njimi v vaših raziskavah. Vključuje:
- Splošne značilnosti in izvor celic BeWo
- Celična linija BeWo: informacije o gojenju
- Prednosti in slabosti celične linije BeWo
- Raziskovalne uporabe celic BeWo
- Raziskovalne publikacije o celicah BeWo
- Viri za celično linijo BeWo: protokoli, videi in več
Splošne značilnosti in izvor celic BeWo
Predhodno poznavanje izvora in splošnih značilnosti celične linije je ključnega pomena za njeno uporabo v raziskavah. V tem delu članka bomo raziskali izvor celične linije BeWo, njene značilnosti in še veliko več. Tukaj boste izvedeli: Kaj je celična linija BeWo za horionkarcinom? Kaj je sincizacija BeWo? Od kod izvirajo celice BeWo? Kakšna je morfologija celic BeWo? Kakšna je ploidija BeWo?
- Placentalna celična linija BeWo izvira iz malignega gestacijskega horionkarcinoma moške placente iz leta 1968 [1]. Zato služi kot neprecenljiv model za raziskave placente.
- Celice BeWo imajo epitelijsko morfologijo.
- Celice BeWo so relativno majhne, njihova velikost pa se giblje med 20 in 30 µM [2].
- Celice BeWo imajo stabilen kariotip. Število kromosomov v njihovi matični liniji je hipo-tetraploidno. Modalno število kromosomov celic BeWo je 86. Lahko se giblje od 71 do 178.
- Celice BeWo proizvajajo več hormonov, tj. človeški horionski somatomamotropin, človeški horionski gonadotropin (hCG) in steroidne hormone.
- BeWo celice izražajo molekularne markerje, vključno s CK 7, E-kadherinom in VE-kadherinom.
Podlinija B30
B30 je podlinija celic BeWo. Uporablja se za preučevanje privzema in transporta hranil. To se pripisuje njihovi bujni rasti na poroznih membranah.
BeWo in JEG-3
Celične linije BeWo in JEG-3 izhajajo iz horionkarcinomov in se uporabljajo v raziskavah placente. Celice BeWo proizvajajo hormone v manjših količinah kot celice JEG-3, na primer človeški horionski gonadotropin (hCG) in estradiol.
Celična linija BeWo: Navodila za gojenje
Vzdrževanje celične kulture je lahko zahtevno, če ne poznate ključnih podrobnosti. Na primer: Kakšen je čas podvojitve celic BeWo? Kaj je gojišče za celice BeWo? Kako gojiti celično linijo BeWo? In kako zamrzniti celice BeWo?
Ključne točke za gojenje celic BeWo
Čas podvojitve:
Čas podvojitve populacije celic BeWo je približno 30 ur.
Adhezivne ali v suspenziji:
BeWo je adhezivna celična linija.
Gostota posejanja celic:
Priporočena gostota sejanja za celice BeWo je 1 x 10⁴ celic/cm². Za sejanje se iz celic odstrani staro gojišče, celice pa se sperete z 1x PBS. Nato se doda Accutase (raztopina za pasážiranje) in celice se inkubirajo 8 do 10 minut pri sobni temperaturi. Nato se odlepljene celice dodajo v gojišče in centrifugirajo. Pridobljene celice se nato ponovno suspendirajo in prelijejo v novo kolbo.
Rastno gojišče:
Za gojenje celic BeWo se uporablja gojišče Ham's F12K, ki vsebuje 10 % FBS, 2,0 mM L-glutamina, 2,0 mM natrijevega piruvata in 2,5 g/L NaHCO₃. Gojišče za celice BeWo je treba zamenjati 2 do 3-krat na teden.
Pogoji rasti:
Celice BeWo se gojijo v vlažnem inkubatorju, nastavljenem na temperaturo 37 stopinj Celzija in z dovodom 5 % CO₂.
Shranjevanje:
Zamrznjene celice BeWo se shranjujejo pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku za izredno nizke temperature ali v plinski fazi tekočega dušika.
Postopek zamrzovanja in gojišče:
Za zamrzovanje celic BeWo se priporoča uporaba zamrzovalnega medija CM-1 ali CM-ACF. Celice se zamrzujejo s postopkom počasnega zamrzovanja. Ta postopek omogoča padec temperature le za 1 stopinjo na minuto, s čimer se prepreči šok za celice in ohrani njihova vitalnost.
Postopek odmrzovanja:
Zamrznjene celice se odmrzujejo tako, da se jih za 40 do 60 sekund potopi v vnaprej nastavljeno vodno kopel s temperaturo 37 °C, dokler ne ostane le še majhen kepec ledu. Nato se doda svež gojišče, celice pa se centrifugirajo, da se odstranijo sestavine zamrzovalnega medija. Zbrani celični pelet se ponovno suspendira in prenese v kultivacijsko kolbo za rast.
Raven biološke varnosti:
Za ravnanje s celičnimi kulturami BeWo in njihovo vzdrževanje je potreben laboratorij stopnje biološke varnosti 1.
Objavljeno: 2023 | Zadnji pregled: maj 2026
Prednosti in slabosti celične linije BeWo
Celice BeWo imajo edinstvene lastnosti ter posebne prednosti in slabosti. V tem poglavju bomo raziskali nekatere od najbolj pomembnih.
Prednosti
Glavne prednosti celične linije BeWo iz horionkarcinoma so:
-
In vitro model placentnih celic
Celice BeWo zagotavljajo in vitro model za preučevanje vedenja trofoblastnih celic in sincizacije placente, s čimer posnemajo procese, ki jih je v živo težko opazovati.
-
Proizvodnja hormonov
Celice BeWo izločajo hormone, kot sta hCG in placentni laktogen, zaradi česar so dragocene za študije hormonske regulacije in raziskave na področju reproduktivne biologije.
Pomanjkljivosti
Pomanjkljivosti trofoblastnih celic BeWo so:
-
Rakava celična linija
Celice BeWo izvirajo iz horionkarcinoma, ki je placentni tumor. Ta izvor morda ne odraža v celoti normalne funkcije placentnih celic.
Raziskovalne aplikacije celic BeWo
Celična linija BeWo se obsežno uporablja v raziskavah placente. Tukaj je navedenih nekaj konkretnih uporab te celične linije:
- Raziskave placente in nosečnosti: Celice BeWo so ključne v raziskavah placente in nosečnosti. Raziskovalci te celice uporabljajo za preučevanje prehoda snovi, vključno z zdravili, hranili in toksini, skozi placentno pregrado. Poleg tega preučujejo tudi proizvodnjo in regulacijo hormonov, vključno s človeškim horionskim gonadotropinom (hCG), placentnim laktogenom in steroidnimi hormoni. To je pomembno za razumevanje hormonskih sprememb med nosečnostjo. Raziskava, izvedena leta 2018, je preučevala vpliv bromiranih zaviralcev gorenja (BFR) na aktivnost sulfotransferaze v človeški trofoblastni celični liniji (BeWo). Ta encim sodeluje pri uravnavanju intracelularnih ravni ščitničnega hormona [3].
- Raziskave okužb in bolezni: Celice BeWo se uporabljajo tudi za preučevanje interakcije med patogeni in placentnimi celicami. Te raziskave so pomembne za razumevanje bolezni, ki se lahko prenašajo z matere na plod, ter za razvoj strategij za zaščito zdravja ploda. Poleg tega ta celična linija pomaga raziskovalcem pri preučevanju zapletov, ki se pojavijo med nosečnostjo, kot je preeklampsija. Na primer, študija, ki jo je leta 2023 izvedla Michalina Bralewska, je uporabila model trofoblastnih celic BeWo in ugotovila, da imata tako kromogranin A (CgA) kot tudi iz njega izpeljani peptid, katestatin (CST), imata vlogo v zapletenem procesu patogeneze preeklampsije (PE) [4]. Nadalje je druga študija raziskala protirakav potencial trichosantina z uporabo celične linije BeWo za horionkarcinom. Raziskava si je prav tako posebej prizadevala odkriti biomarkerje z izvedbo primerjalne proteomske analize pred in po poskusu [5].
5. Raziskovalne publikacije o celicah BeWo
Tukaj je nekaj pomembnih raziskovalnih publikacij, ki obravnavajo trofoblastne celice BeWo.
Ta študija, objavljena v reviji Frontiers in Bioscience-Landmark (2022), predlaga, da signalizacija AMPK aktivira mitofagijo v trofoblastnih celicah BeWo prek poti mitofagije, ki jih posredujeta FUNDC1 in PRKN. Posledično mitofagija pomaga ohranjati proizvodnjo ATP in potencial mitohondrijske membrane.
Etilparaben inducira apoptično celično smrt v človeških placentnih celicah BeWo prek poti kaspaze-3
Ta članek je bil objavljen v reviji Animal Cells and Systems (2020). Študija predlaga, da etilparaben posreduje apoptozo celic BeWo prek regulacije poti kaspaze 3.
Ta študija, objavljena v reviji Drug Metabolism and Disposition (2023), je uporabila placentne celične linije, vključno z BeWo, JAR, JEG-3 in HTR-8/SVneo, za preučevanje odlaganja ksenobiotikov in steroidov v celicah.
Ta raziskovalni članek v reviji International Journal of Molecular Medicine (2020) predlaga, da apelin, ligand receptorja APJ, spodbuja proliferacijo celic BeWo prek signalnih poti APJ in ERK1/2, stat3 ter AMPK. Zato bi lahko bil bistven adipokin, ki uravnava razvoj placente.
Ta študija v reviji Epilepsia (2021) je raziskala vplive hranilnih snovi za plod in zdravil proti epileptičnim napadom na transporterje holina v človeški liniji trofoblastnih celic BeWo.
Viri za celično linijo BeWo: protokoli, videi in več
Tukaj je nekaj spletnih virov, ki so na voljo za celice BeWo:
- In vitro transfekcija: Ta video vam bo pomagal spoznati protokol in vitro transfekcije plazmidne DNK za adhezivne celice.
Naslednja povezava vsebuje informacije o celični kulturi za celice BeWo:
- Celice BeWo: Ta spletna stran vsebuje bistvene informacije o celični kulturi celic BeWo. To vključuje informacije o celičnih medijih in pogojih gojenja. Vsebuje tudi protokole za subkultiviranje in ravnanje s kriokonzerviranimi in proliferativnimi kulturami.
Sklici
- Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: str. 72–75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Značilnosti trofoblastov v dolgotrajni kulturi. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: str. 259–265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt in H.M. Stapleton, Motnja aktivnosti sulfotransferaze ščitničnih hormonov zaradi bromiranih kemikalij za zaviranje gorenja v človeški celični liniji placente koriokarcinoma, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: str. 81–88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha in A. Sakowicz, Zmanjšanje ravni beljakovine CST, pridobljene iz CgA, v trofoblastnih celičnih linijah HTR-8/SVneo in BeWo, ki ga povzroča preeklampsijsko okolje. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): str. 7124.
- Hu, Y. in sod., Primerjalna proteomska analiza dodajanja zdravila trichosanthin v celično linijo BeWo. Molecules, 2022. 27(5): str. 1603.