Celična linija BxPC-3
BxPC-3 je celična linija raka trebušne slinavke človeškega izvora. Široko se uporablja v raziskavah raka. Raziskovalci te celice uporabljajo predvsem za preučevanje biologije raka trebušne slinavke, identifikacijo terapevtskih ciljev in razvoj zdravil proti raku.
- Rastno gojišče
- Za gojenje celične linije BxPC-3 se uporablja gojišče RPMI 1640. Za doseganje idealne rasti celic se mu doda 10 % govejega fetalnega seruma, 2,1 mM stabilnega glutamina in 2,0 g/l NaHCO3. Medij je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.
- Čas podvojitve
- Čas podvojitve celic BxPC-3 je med 48 in 60 urami.
- Vrsta rasti
- BxPC-3 je adhezivna celična linija.
- Raven biološke varnosti
- BSL-3
- Na voljo pri
- Cytion — Naroči BxPC-3
Ta članek vsebuje ključne informacije o celični liniji BxPC-3, ki vam lahko znatno pomagajo pri delu z njo. V glavnem bo obravnaval:
- Splošne informacije in izvor celične linije BxPC-3
- Gojenje celic BxPC-3
- Celična linija BxPC-3: prednosti in omejitve
- Uporaba celic BxPC-3 v raziskavah
- Raziskovalne publikacije o celicah BxPC-3
- Viri za celično linijo BxPC-3: protokoli, videi in več
Splošne informacije in izvor celične linije BxPC-3
Poznavanje izvora celične linije je ključnega pomena za njeno uporabnost v raziskavah. Poznavanje njenih značilnosti, vključno z morfologijo, velikostjo celic in ploidijo, omogoča enostavnejšo in priročnejšo uporabo. V tem dokumentu boste spoznali izvor in splošne lastnosti celic BxPC-3: Kaj so celice BxPC-3? Kaj je celična linija BxPC-3? Kakšen je izvor celične linije BxPC-3? Kakšna je morfologija celic BxPC-3?
- BxPC-3, človeške celice pankreatičnega karcinoma, so bile pridobljene leta 1986 iz 61-letne evropske ženske z adenokarcinomom trebušne slinavke. Potrjeno je bilo, da so te celice tumorogene tudi po tem, ko je pacientka prestala več sej radioterapije in kemoterapije. Zato je vzpostavljena celična linija neprecenljiv model za preučevanje razvoja in napredovanja raka.
- Celice BxPC-3 imajo morfologijo, podobno epitelijskim celicam.
- Modalno število kromosomov za BxPC-3 je 59. Te celice imajo homozigotno delecijo na kromosomu 18q, ki kodira za protein SMAD4/DPC4. Poleg tega celični liniji manjka mutacija BxPC-3 kras, ki je pogosta pri tumorjih trebušne slinavke. V teh celicah raka trebušne slinavke je prisotna tudi delecija BxPC-3 braf.
Kakšna je razlika med BxPC3 in PANC-1?
Celice BxPC-3 PADC (duktalni adenokarcinom trebušne slinavke) in PANC-1 so primarne celične linije raka trebušne slinavke z epitelijsko morfologijo. Pri tem imajo prve celice bolj epitelijske lastnosti, medtem ko druge kažejo več mezenhimalnih lastnosti [1].
Gojenje celic BxPC-3
Celična linija BxPC-3 se pogosto uporablja v raziskovalnih laboratorijih za raka. Za učinkovito gojenje te celične linije raka na trebušni slinavki morate poznati naslednje ključne točke. Spoznali boste: Kakšen je čas podvojitve za bxpc3? Kako gojiti celično linijo BxPC-3?
Ključne točke za gojenje celic BxPC-3
Čas podvojitve populacije:
Čas podvojitve celic BxPC-3 je med 48 in 60 urami.
Adherente ali v suspenziji:
BxPC-3 je adhezivna celična linija.
Razmerje delitve:
Celice BxPC-3 se subkultivirajo v razmerju 1:2 do 1:4. Celice se operejo z 1 x PBS in inkubirajo z raztopino za pasážiranje, imenovano accutase. Po 8–10 minutah se celicam doda svež medij in celice se centrifugirajo. Pelet se ponovno suspendira v gojišču, celice pa se prelijejo v novo posodo za gojenje.
Gojilno gojišče:
Za gojenje celične linije BxPC-3 se uporablja gojišče RPMI 1640. Za doseganje idealne rasti celic se mu doda 10 % fetalnega govejega seruma, 2,1 mM stabilnega glutamina in 2,0 g/l NaHCO3. Gojilno sredstvo je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.
Pogoji rasti:
Celične kulture BxPC-3 se gojijo v vlažnem inkubatorju pri 37 °C, priključenem na vir 5 % CO2.
Shranjevanje:
Zamrznjene celice se običajno shranjujejo pri temperaturi pod -150 °C ali v plinski fazi tekočega dušika, da se ohrani njihova vitalnost.
Postopek zamrzovanja in medij:
Za zamrzovanje celičnih kultur BxPC-3 se lahko uporabi CM-1 ali CM-ACF. Uporablja se postopek počasnega zamrzovanja, ki omogoča le 1 °C padec temperature, da se prepreči šok celic.
Postopek odmrzovanja:
Zamrznjene celice BxPC-3 se odmrzujejo v vnaprej nastavljeni vodni kopeli pri 37 °C za 40 do 60 sekund. Ko ostane le še majhen kepec ledu, se celicam doda svež gojišče in se centrifugirajo, da se odstranijo elementi sredstva za zamrzovanje. Nato se celični pelet ponovno suspendira in celice se razporedijo v kolbo za rast.
Raven biološke varnosti:
Celične kulture BxPC-3 se gojijo v laboratorijih z ravnjo biološke varnosti 1.
Celična linija BxPC-3: prednosti in omejitve
BxPC-3 je znana celična linija pankreatičnega adenokarcinoma, ki ima več prednosti in omejitev. Ključne prednosti in slabosti celične linije so navedene tukaj.
Prednosti
Glavne prednosti celic BxPC-3 so:
-
In vitro model raka trebušne slinavke
Celice BxPC-3, pridobljene od bolnikov z adenokarcinomom trebušne slinavke, kažejo ustrezne značilnosti, zaradi česar so primeren model za preučevanje vedenja raka trebušne slinavke in vitro.
-
Tumorigena celična linija
Celice BxPC-3 imajo tumorogene lastnosti in lahko tvorijo tumorje, ko se jih vbrizga golim ali imunsko oslabljenim mišim. Ti tumorji so zelo podobni primarnim tumorjem adenokarcinoma trebušne slinavke, zaradi česar je model ksenotransplantata BxPC-3 idealen za preučevanje rasti in napredovanja raka.
Omejitve
Omejitve, povezane s celično linijo BxPC-3, so:
-
Križna kontaminacija
Celična linija BxPC-3, tako kot vsaka druga, prinaša tveganje navzkrižne kontaminacije. Raziskovalci morajo biti previdni in pri ravnanju s temi celicami upoštevati stroge protokole za preprečevanje kontaminacije.
-
Počasna stopnja rasti
Celice BxPC-3 imajo relativno počasno stopnjo proliferacije, s časom podvojitve med 48 in 60 urami. Ta lastnost lahko zahteva daljša inkubacijska obdobja za določene poskuse, kar lahko povzroči zamude v napredku raziskav.
Uporaba celic BxPC-3 v raziskavah
Celice BxPC-3 ponujajo številne možnosti uporabe v raziskavah raka. Najpogostejše uporabe so:
- Raziskave raka trebušne slinavke: Celice BxPC-3 posnemajo adenokarcinom trebušne slinavke in se zato uporabljajo za raziskovanje genetskih in molekularnih mehanizmov, ki so osnova za razvoj in rast tumorja. Poleg tega raziskovalci s pomočjo teh celic odkrivajo nove biomarkere in terapevtske tarče. Poleg tega celice BxPC-3 v znatni meri izražajo angiogene faktorje, tj. interleukin-8 (IL-8), prostaglandin E2 (PGE2) in vaskularni endotelni rastni faktor (VEGF), zaradi česar so primerne za preučevanje angiogeneze. Angiogeneza je ključni proces, povezan z rastjo raka in metastaziranjem. Študija, objavljena leta 2022, je pokazala, da prekomerna ekspresija laminina-5 gama-2 (LAMC2) v BxPC3 PDAC (duktalni adenokarcinom trebušne slinavke) poveča njegovo tumorigenozo prek regulacije signalne poti BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR signalno pot [2].
- Odkrivanje in razvoj zdravil: celična linija BxPC-3 služi kot neprecenljiv model za testiranje zdravil proti raku. Raziskovalci preučujejo citotoksične, antimetastatične in apoptične učinke potencialnih zdravil na BxPC3 PDAC. Študija, ki so jo leta 2020 izvedli Alexandria Turner in sodelavci, je raziskovala apoptične lastnosti izvlečkov plodov Elaeocarpus reticulatus v celicah raka trebušne slinavke BxPC-3 [3]. Podobno je bila leta 2020 izvedena raziskava, ki je ugotovila protirakav potencial metanolnega izvlečka rastline Oxialis obtriangulata v celicah BxPC-3. Poleg tega so raziskovalci preučili tudi celični mehanizem, prek katerega je rastlinski izvleček izvajal terapevtske učinke [4].
5. Raziskovalne publikacije o celicah BxPC-3
V tem poglavju so navedene nekatere najbolj citirane in zanimive publikacije o celični liniji BxPC-3.
Licokumaron inducira celično smrt pri adenokarcinomu trebušne slinavke BxPC-3 z zaviranjem DYRK1A
Ta publikacija v reviji Chemico-Biological Interactions (2020) je raziskovala apoptične učinke naravnega proizvoda, licokumarona, na celice raka trebušne slinavke BxPC-3.
Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji Anticancer Research (2022). Študija je predlagala, da hidroksiklorokin povzroča smrt celic BxPC3 z zaviranjem gena BCL-XL.
Ta raziskava je bila objavljena leta 2020 v reviji Journal of Cellular Biochemistry. Študija navaja, da naravna spojina, salidrosid, kaže protirakave lastnosti v celicah BxPC-3 z uravnavanjem signalne kaskade HIF-1α (hipoksijo inducibilni faktor) in LOXL2.
Ta članek v reviji Biomedicine & Pharmacotherapy kaže, da se ibrutinib lahko uporablja kot odličen radiosenzibilizator pri bolnikih z rakom trebušne slinavke. In vitro študija na celicah BxPC-3 kaže, da zmanjšuje fosforilacijo EGFR v celicah BxPC3 ter izražanje pAKT in genov v spodnjem delu signalne poti, ki jih radioterapija povzroča.
Chelidonin inducira apoptozo prek regulacije GADD45a-p53 v človeških celicah raka trebušne slinavke
Ta študija v reviji Integrative Cancer Therapies predlaga, da naravni produkt, chelidonin, izvaja apoptično aktivnost v človeških celicah trebušne slinavke BxPC-3 prek regulacije signalizacije BxPC3 p53 in GADD45a.
Viri za celično linijo BxPC-3: protokoli, videi in več
Celična linija BxPC-3 ima številne privlačne prednosti, zaradi katerih je primerna za raziskovalne namene. Mnogi spletni viri o celični liniji BxPC-3 omenjajo protokole za njeno ravnanje, vzdrževanje in transfekcijo.
- Transfekcija BxPC3: Ta video je podrobni vodnik za učenje protokola transfekcije za celice BxPC-3.
Ta del članka vsebuje nekaj povezav, ki pojasnjujejo protokole za gojenje celic BxPC3.
- Kultura celic BxPC3: Ta spletna stran vam bo pomagala pri učenju protokolov za subkultiviranje in ravnanje s kriokonzerviranimi in proliferativnimi kulturami BxPC-3.
Sklici
- Kim, Y., et al., Primerjalno proteomsko profiliranje celičnih linij duktalnega adenokarcinoma trebušne slinavke. Mol Cells, 2014. 37(12): str. 888–98.
- Kirtonia, A., et al., Prekomerna ekspresija laminina-5 gama-2 spodbuja nastanek tumorjev duktalnega adenokarcinoma trebušne slinavke prek kaskade EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): str. 362.
- Turner, A., et al., Izvlečki plodov Elaeocarpus reticulatus zmanjšujejo vitalnost in inducirajo apoptozo v celicah raka trebušne slinavke in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: str. 2073–2084.
- An, E.-J., et al., Protirakavni potencial Oxialis obtriangulata v celicah raka trebušne slinavke prek regulacije poti, posredovane z ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): str. 2301.