Neuro-2a cellinje

Neuro-2a är en musdriven neural cellinje som används i stor utsträckning inom neurovetenskaplig forskning. Främst används dessa celler för att studera nervutveckling, differentiering, neurotoxicitet, cellsignalvägar och axonal tillväxt. Dessutom används de för läkemedelsutveckling och screeningändamål.

Denna artikel fokuserar på viktiga aspekter av Neuro-2a neuroblastomceller som kan hjälpa dig innan du påbörjar arbetet med den. Den kommer huvudsakligen att täcka:

Allmänna attribut och ursprung för Neuro-2a-celler
Information om odling av Neuro-2a-cellinjen
Fördelar och nackdelar med Neuro-2a-cellinjen
Forskningsapplikationer av Neuro-2a cellinje
Forskningspublikationer som innehåller Neuro-2a-celler
Resurser för Neuro-2a-celler: Protokoll, videor och mer

1. Allmänna attribut och ursprung för Neuro-2a-celler

Denna del av artikeln kommer att täcka bakgrunden och de grundläggande egenskaperna hos Neuro-2a-cellinjen som är väsentliga att känna till innan du arbetar med den. Här kommer du att lära dig: Vad är Neuro-2a-cellinjen? Vad är ursprunget till Neuro-2a-cellinjen? Vad är differentiering av Neuro-2a-celler? Vad är storleken på en Neuro-2a-cell? Vilken är morfologin hos Neuro-2a-celler?

Neuro-2a-celler härstammar från en spontan tumör (neuroblastom) hos en albinomus (stam A). Cellinjen etablerades av R.J. Klebe och F.H. Ruddle.
Neuroblastomcellerna Neuro-2a uppvisar neuronal och amoeboid stamcellsmorfologi.
Neuro-2a-cellernas storlek är 12 mikrometer i höjdled [1].
Kromosomantalet hos Neuro-2a-celler kan variera från 59 till 193 med ett modalt antal på 95. Karyotypen hos dessa neuroblastomceller är instabil inom ett intervall på 94 till 98 kromosomer.

Neuronal signalering illustrerad: 3D-representation av frisättning av neurotransmittorer i det synaptiska gapet av det presynaptiska neuronet, utlöst av Ca2+-inflöde, vilket leder till aktiverade jonkanaler och Na+-inflöde i det postsynaptiska neuronet.

2. Information om odling av cellinjen Neuro-2a

Neuro-2a-celler används i stor utsträckning i neurovetenskapliga forskningslaboratorier. Innan du arbetar med dessa celler bör du lära dig den nödvändiga cellodlingsinformationen som nämns nedan. Detta kan hjälpa dig att gå lätt med det. Du kommer att veta: Vad är ett Neuro-2a cellodlingsmedium? Hur odlar man Neuro-2a-celler? Vad är fördubblingstiden för Neuro-2a-celler? Vad är sådddensiteten för Neuro-2a? Vad är Neuro-2a cellodlingsprotokollet? Vad är Neuro-2a-cellmediet?

Viktiga punkter för odling av Neuro-2a-celler

Fördubblingstid:	Fördubblingstiden för Neuro-2a-celler är cirka 70 timmar.
Adherent eller i suspension:	Neuro-2a är en adherent cellinje.
Utsådd densitet:	Den optimerade cellsåddstätheten för cellinjen Neuro-2a är 1 x¹⁰⁴ ^celler/cm2. För sådd tvättas cellerna med magnesium- och kalciumfri fosfatbuffertlösning (1x). Därefter tillsätts en passagelösning (Accutase) och cellerna inkuberas i 8 till 10 minuter vid rumstemperatur. Efter celldissociation tillsätts färskt media och cellerna centrifugeras. Den skördade cellpelleten resuspenderas försiktigt och cellerna hälls i ett odlingskärl för tillväxt.
Tillväxtmedium:	EMEM används för odling av Neuro-2a-celler. Det innehåller 10% FBS, 2 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM natriumpyruvat och NEAA för idealisk celltillväxt. Media bör bytas ut 1 till 2 gånger per vecka.
Tillväxtförhållanden:	Neuro-2a-kulturer hålls i en 37°C befuktad inkubator ansluten till en 5% CO2-försörjning.
Förvaring:	Cellerna ska långtidsförvaras vid en temperatur under -150 °C i en elektrisk frys för extremt låga temperaturer eller i ångfasen av flytande kväve.
Frysningsprocess och medium:	CM-1- eller CM-ACF-medier används för att frysa Neuro-2a-celler. Cellerna fryses genom en långsam frysningsprocess som endast tillåter en sänkning av temperaturen med 1 °C per minut. Detta skyddar cellerna från chock och bibehåller deras livskraft.
Upptiningsprocess:	För att tina frysta kulturer placeras injektionsflaskan i ett 37 °C vattenbad i 40 till 60 sekunder tills endast en liten isklump återstår. Därefter tillsätts odlingsmedium och cellerna centrifugeras. Detta steg hjälper till att avlägsna frysande mediakomponenter. Cellpelleten resuspenderas sedan och cellerna överförs till en ny kolv fylld med odlingsmedium. Därefter placeras cellerna i en inkubator vid 37 °C i minst 24 timmar.
Biosäkerhetsnivå:	Laboratorieinställningar på biosäkerhetsnivå 1 är obligatoriska för att hantera och underhålla Neuro-2a-kulturer.

Mikroskopisk bild av en tidig passage av vidhäftande Neuro 2a neuroblastomceller som visar deras morfologi vid 10x och 20x förstoring.

3. Fördelar och nackdelar med cellinjen Neuro-2a

Neuro-2a-cellerna har vissa för- och nackdelar som skiljer dem från andra neuronala cellinjer. Några anmärkningsvärda för- och nackdelar med dessa celler listas här.

Fördelar och nackdelar

Fördelarna med Neuro-2a murin neuroblastomcellinje är:

Lätt att underhålla
Neuro-2a-cellinjen är inte förknippad med komplexa eller invecklade cellodlingsförfaranden. De är lätta att odla och underhålla i forskningslaboratorier.
In vitro neuronal cellmodell
Neuro-2a är en bekväm neuronal cellmodell som ofta används av forskare i neuronutvecklings- och differentieringsstudier.

Nackdelar

Nackdelarna med Neuro-2a-celler är:

Ursprungfrån mus
Neuro-2a är av musursprung, och forskare bör vara försiktiga när de extrapolerar resultat från musbaserade studier till människors hälsa och sjukdom, eftersom mus och mänsklig biologi kan skilja sig avsevärt.

4. Forskningsapplikationer för Neuro-2a cellinje

Neuro-2a-celler erbjuder många användningsområden inom neurovetenskaplig forskning. Några lovande användningsområden för denna cellinje diskuteras här:

Neuronal utveckling: Neuro-2a är en in vitro neuronal cellmodell som ofta används för att studera neuronal utveckling och relaterade processer som differentiering, axonal tillväxt och synapsbildning. I en studie som genomfördes 2020 användes Neuro-2a-celler för att utforska rollen för mikroRNA-124 i retinoinsyrainducerad neuronal celldifferentiering [2]. I en annan studie undersöktes Neuro 2a retinoic acid receptor gamma (RARG) och miRNA-124-uttryck i neuroblastomcellinjen (N2A). Denna studie föreslog att RARG är målet för miR-124 och undertrycker neuritutväxt [3].
Neurotoxicitet: Neuro-2a används också för att bedöma de toxiska effekterna av läkemedel, kemikalier eller miljöfaktorer på nervceller. I en studie utförd av Zhihong Yin och medarbetare undersöktes till exempel neurotoxiciteten hos bisfenol A (BPA), en miljökemikalie, med hjälp av Neuro-2a-celler. De observerade att BPA undertrycker differentiering och proliferation av neuronala celler genom att störa deras cellulära och synaptiska integritet [4].
Screening av läkemedel: Neuro-2a-celler används också för att utvärdera den terapeutiska aktiviteten hos flera läkemedel, föreningar och naturprodukter. I en studie användes till exempel Neuro-2a-celler för att studera den antioxidativa potentialen hos växtextrakt från Gingko biloba. Dessutom föreslog forskningen att det orsakar en minskning av Aβ-aggregeringen och kan vara en potentiell behandling av Alzheimers sjukdom [5].

430,00 €*

Innehåll: 1.5 milliliter

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 400394

5. Forskningspublikationer med Neuro-2a-celler

Här är några intressanta forskningsartiklar som behandlar cellinjen Neuro-2a.

Piperinliknande alkamider från Piper nigrum inducerar BDNF-promotorn och främjar neuritutväxt i Neuro-2a-celler

I denna studie i Journal of Natural Medicines, 2018, undersöktes de terapeutiska effekterna av alkamider isolerade från vitpeppar (P. nigrum) på Neuro-2a neuronala celler.

Nkx2. 1-nedreglering är involverad i hjärnabnormalitet som induceras av överskott av retinoinsyra

Denna forskning i Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020 föreslog att Nkx2.1-genen spelar en viktig roll i mushjärnans utveckling genom att reglera Shh-signalkaskaden.

Exponering för bisfenol A inducerar neurotoxicitet associerad med synaptisk och cytoskeletal dysfunktion i neuro-2a-celler

Denna artikel publicerades i Toxicology and Industrial Health (2023) och föreslog att en miljökemikalie, bisfenol A, utlöser neurotoxicitet i neuro-2a-celler och stör deras synaptiska och cytoskelettala dysfunktion.

Hexarelin-modulering av MAPK- och PI3K/Akt-vägar i Neuro-2A-celler hämmar väteperoxidinducerad apoptotisk toxicitet

Detta papper i Pharmaceuticals (2021) föreslog att ett läkemedel, hexarelin, modulerar PI3K / AKT och MAPK-kaskad i neuroblastomceller (Neuro-2a) och hämmar väteperoxidinducerad neuro-2a-cellapoptos.

Etanoliskt fruktextrakt av Emblica officinalis undertrycker neuroinflammation i mikroglia och främjar neuritutväxt i Neuro2a-celler

Detta forskningsdokument i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) föreslog att Emblica officinalis fruktextrakt undertrycker neuroinflammation i Neuro-2a-celler och därmed kan vara till nytta för neuroinflammatoriska sjukdomar.

6. Resurser för Neuro-2a-celler: Protokoll, videor och mycket mer

Följande är de online-resurser som finns tillgängliga på Neuro-2a-cellerna. De inkluderar Neuro-2a cellkultur och transfektionsprotokoll.

Protokoll för transfektion avNeuro-2a: Neuro-2a är en lämplig transfektionsvärd. Denna länk kommer att vägleda dig angående transfektionsprotokollet för cellinjen. Neuro 2a transfektionseffektivitet varierar från reagens till reagens.

Följande länk innehåller protokollet för cellodling av Neuro-2a.

Protokoll för cellodling av Neuro-2a: Den här länken hjälper dig att lära dig subkultureringsprotokollet för neuro 2a-celler.
Neuro-2a-celler: Webbplatsen innehåller omfattande kunskap om Neuro-2a-cellmedier, sådddensitet och protokoll för subkulturering och hantering av kryopreserverade och proliferativa kulturer.

Referenser

Lulevich, V., et al, Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neuronal cell interactions. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
Du, Q., et al., MiR-124: s roll i regleringen av retinoinsyrainducerad Neuro-2A-celldifferentiering. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
Su, X., et al., Retinoic acid receptor gamma är inriktad på mikroRNA-124 och hämmar neuritutväxt. Neuropharmakologi, 2020. 163: p. 107657.
Yin, Z., et al., Bisfenol-A-exponering inducerade neurotoxicitet och associerades med synaps och cytoskelett i Neuro-2a-celler. Toxicology in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
Chen, L., et al, Gingko biloba-extrakt (EGb) hämmar oxidativ stress i neuro 2A-celler som överuttrycker APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.