Cellodlingsmedium

Odlade celler kräver noggrann miljökontroll för framgångsrik tillväxt och underhåll. En heltäckande metod innebär att sterilitet, näringstillförsel, pH-stabilitet och temperaturkontroll säkerställs.

Sterila förhållanden och näringstillförsel

För att förhindra kontaminering och säkerställa cellernas livskraft är en steril miljö avgörande. Detta uppnås vanligen genom aseptiska tekniker och specialutrustning som t.ex. laminära flödeskåpor. Näringsämnen tillförs via odlingsmedier, som innehåller en blandning av viktiga ingredienser, bland annat

  • Oorganiska salter: Viktiga för att upprätthålla den osmotiska balansen och tillhandahålla nödvändiga joner för cellulär aktivitet.
  • Kolhydrater: Fungerar som energikällor; glukos är det mest använda sockret.
  • Aminosyror: Byggstenar i proteiner; vissa är nödvändiga och kan inte syntetiseras av cellerna.
  • Vitaminer: Fungerar som kofaktorer för enzymatiska reaktioner; B-vitaminer är nödvändiga för cellmetabolismen.
  • Fettsyror och lipider: Viktiga komponenter för cellmembranets integritet och funktion.
  • Proteiner och peptider: I serumfria medier ersätter dessa de tillväxtfaktorer och bindningsproteiner som normalt tillförs genom serum.
  • Serum: Används ofta som källa till tillväxtfaktorer, även om serumfria alternativ blir allt vanligare för att minska risken för variabilitet och kontaminering.
  • stabilitet vid pH och temperatur: Celler kräver normalt ett pH-värde på 7,2-7,4 för optimal tillväxt. Detta regleras av buffringssystem, som antingen kan vara CO2/bikarbonatbaserade eller uppnås kemiskt med hjälp av medel som HEPES. Temperaturen hålls runt 37°C för att efterlikna fysiologiska förhållanden.

Medievarianter och optimering

Under årens lopp har olika basala medier utvecklats för att tillgodose specifika celltyper:

  • Balanserade saltlösningar: Utgör grunden för mer komplexa medieformuleringar.
  • Basala medier, t.ex. Minimum Essential Medium (MEM), används för primärkulturer och diploida celler.
  • Komplexa medier: Som RPMI 1640 är de lämpade för ett bredare spektrum av mammalieceller.
  • Serumfria medier: Skräddarsydda för specifika tillämpningar, vilket minskar risken för kontaminering från komponenter som härrör från djur.

Beredning av medier och kvalitetskontroll

Medier kan beredas internt från viktiga ingredienser eller köpas som färdiga lösningar. Kvalitetskontrollen innebär att man säkerställer att det inte finns några föroreningar och att ingredienserna har rätt koncentration. Rekonstituering av pulverformiga medier kräver vatten av hög kvalitet, och beredda medier måste steriliseras, vanligtvis genom filtrering.

Serumanvändning och säkerhetsaspekter

Användning av serum, särskilt fetalt bovint serum (FBS), är vanligt på grund av dess rika innehåll av tillväxtfaktorer. På grund av farhågor om sjukdomar som BSE följs dock strikta test- och inköpsprotokoll för att garantera säkerheten.

Lagstadgade riktlinjer och trender

Regelverk styr användningen av material från djur i odlingar och betonar vikten av inköp och tester. Trenden mot att eliminera sådana material där så är möjligt återspeglas i utvecklingen av serumfria och djurfria mediealternativ.

Sammanfattningsvis spelar cellodlingsmedier en grundläggande roll för tillväxt och underhåll av celler in vitro. Varje komponent är noggrant utvald och optimerad för att efterlikna in vivo-miljön och säkerställa att cellerna har förutsättningar för tillväxt, överlevnad och funktionalitet.

DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat
DMEM (Dulbeccos Modified Eagle Medium) är ett mycket mångsidigt och allmänt använt basalt medium som är utformat för att stödja tillväxten av ett brett spektrum av däggdjursceller inom biologisk forskning. Det är ett idealiskt medium för odling av primära fibroblaster, neuroner, gliaceller, HUVEC, glatta muskelceller samt populära cellinjer som HeLa, 293, Cos-7 och PC-12.
Det som skiljer DMEM från andra medier är dess unika sammansättning. Den innehåller en imponerande fyrfaldig ökning av aminosyra
- och vitaminkoncentrationen jämfört med den ursprungliga Eagle's Minimal Essential Medium. DMEM utvecklades ursprungligen med låg glukoshalt (1 g/l) och natriumpyruvat, men används ofta med högre glukoshalter, antingen med eller utan natriumpyruvat. DMEM innehåller varken proteiner, lipider eller tillväxtfaktorer, vilket kräver tillskott. För att uppnå optimal tillväxt är ett vanligt tillvägagångssätt att komplettera DMEM med 10% fetalt bovint serum (FBS). Dessutom använder DMEM ett natriumbikarbonatbuffert-system, vilket kräver en 5-10% CO2-miljö för att upprätthålla ett fysiologiskt pH.
Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) är mycket uppskattat bland definierade medier för cell
- och vävnadsodling och tillgodoser tillväxtbehoven hos olika fenotyper av vidhäftande celler. Det överträffar det ursprungliga Eagle's Medium, som utvecklades på 1950-talet för odling av kycklingceller, genom den förbättrade tilläggsformuleringen som kallas Dulbeccos modifiering. Denna modifiering höjer innehållet av utvalda aminosyror och vitaminer upp till fyra gånger jämfört med originalmediet.
Inom cellodling spelar DMEM en viktig roll som tillväxtmedium för olika celltyper, inklusive primära celler, stamceller och transformerade celler. Forskare använder också den modifierade versionen av DMEM för ett brett spektrum av forskningsapplikationer, såsom läkemedelsupptäckt, vävnadsteknik och studier av cellsignaleringsvägar.

Kvalitetskontroll

Sterilt filtrerad


Förvaring och hållbarhetstid

Förvaras vid +2°C till +8°C, skyddad från ljus.
Efter öppning, förvara vid 4°C och använd inom 6-8 veckor.


Förhållanden vid leverans

Omgivande temperatur


Underhåll

Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Undvik frysning och frekvent uppvärmning till +37°C, eftersom det försämrar produktkvaliteten.
Värm inte upp mediet över 37°C och använd inte okontrollerade värmekällor som t.ex. mikrovågsugnar.
Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm det till rumstemperatur före användning.


Sammansättning



Kategori
Komponenter
Koncentration (mg/L)


Aminosyror
Glycin
30.00



L-arginin HCl
84.00



L-kystin 2 HCl
62.57



L-Glutamin
584.00



L-Histidin HClH2O
42.00



L-Isoleucin
105.00



L-Leucin
105.00



L-Lysin HCl
146.00



L-metionin
30.00



L-fenylalanin
66.00



L-Serin
42.00



L-Threonin
95.00



L-Tryptofan
16.00



L-tyrosin 2 Na 2H2O
103.79



L-Valin
94.00


Vitaminer
Kolinklorid
4.00



D-kalciumpantotenat
4.00



Folsyra
4.00



myo-Inositol
7.20



Nikotinamid
4.00



Pyridoxal HCl
4.00



Riboflavin
0.40



Tiamin HCl
4.00


Oorganiska salter
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Övriga komponenter
D-Glukos
4500.00



Fenolrött natriumsalt
15.90



Natriumpyruvat
110.00

25,00 €*
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Ett av de mest använda syntetiska cellodlingsmedierna är Minimum Essential Medium Eagle (MEM). Detta medium utvecklades av Harry Eagle och introducerades första gången 1959 och har sedan dess blivit ett populärt val för olika celltyper som odlas i monolager och adherenta cellinjer.
Vad finns i EMEM?
EMEM är en modifierad version av Eagle's minimum essential medium, som innehåller Earle's Balanced Salt Solution, icke-essentiella aminosyror, L-glutamin, natriumpyruvat och natriumbikarbonat. Det är viktigt att notera att denna nivå av natriumbikarbonat är avsedd för användning i 5% CO2 i luften. För att bibehålla dess effektivitet rekommenderas att mediet förvaras mörkt vid 2°C till 8°C när det inte används.
Vad används EMEM till?
Eagle's minimal essential medium (EMEM) är ett cellodlingsmedium som kan underhålla celler i vävnadsodling. Mediet innehåller högre koncentrationer av aminosyror, vilket möjliggör en mer exakt approximation av proteinsammansättningen i odlade däggdjursceller. EMEM kan användas för att odla olika celler, bland annat fibroblaster, levercancerceller från människa (HepG2) och astrocytceller från människa (PDA) som härrör från fosterhjärnans progenitor. Det används vanligen i närvaro av fetalt bovint serum (FBS), kalv
- eller hästserum.
Hur skiljer sig EMEM från andra cellodlingsmedier?
EMEM och Dulbeccos modifierade Eagle's medium (DMEM) har vissa likheter, men de skiljer sig också åt. Båda medierna saknar protein och innehåller de aminosyror, salter, glukos och vitaminer som krävs för att förse en cell med energi och upprätthålla den i vävnadskultur. DMEM-formuleringen är dock modifierad så att den innehåller upp till fyra gånger mer vitaminer och aminosyror och två till fyra gånger mer glukos än EMEM. Det är värt att notera att EMEM också skiljer sig från den ursprungliga MEM-formuleringen.


Kvalitetskontroll

Sterilt filtrerad


Förvaring och hållbarhetstid

Förvaras i +2°C till +8°C, skyddat från ljus.
Efter öppning, förvara vid 4°C och använd inom 6-8 veckor.


Förhållanden vid leverans

Omgivande temperatur


Underhåll

Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Undvik frysning och frekvent uppvärmning till +37°C, eftersom det försämrar produktkvaliteten.
Värm inte upp mediet över 37°C och använd inte okontrollerade värmekällor som t.ex. mikrovågsugnar.
Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm det till rumstemperatur före användning.



Sammansättning



Kategori
Komponenter
Koncentration (mg/L)


Aminosyror
L-arginin HCl
126.00


L-kystin 2 HCl
31.30


L-Glutamin
292.00


L-Histidin HClH2O
42.00


L-Isoleucin
52.00


L-Leucin
52.00


L-Lysin HCl
72.50


L-metionin
15.00


L-fenylalanin
32.00


L-Treonin
48.00


L-tryptofan
10.00


L-tyrosin 2 Na 2H2O
51.90


L-Valin
46.00


Vitaminer
Kolinklorid
1.00


Vitaminer
D-kalciumpantotenat
1.00


Folsyra
1.00


myo-Inositol
2.00


Nikotinamid
1.00


Pyridoxal HCl
1.00


Riboflavin
0.10


Tiamin HCl
1.00


Oorganiska salter
CaCl2 2H2O
265.00


Oorganiska salter
KCl
400.00


MgSO4
97.67


NaCl
6800.00


NaHCO3
2200.00


NaH2PO4
122.00


Övriga komponenter
D-Glukos
1000.00


Övriga komponenter
Fenolrött natriumsalt
11.00

25,00 €*
Ham's F12 Medium, med: 1,0 mM stabilt glutamin, med: 1,0 mM natriumpyruvat, med: 1,176 g/L NaHCO3
Ham's F-12 Medium, även känt som Ham's F-12 Nutrient Mix, är ett allmänt använt basalt medium speciellt utformat för cellodling. Det har använts i stor utsträckning för serumfri enkelcellsplatering av CHO-celler (Chinese Hamster Ovary), lungceller och L-celler från mus. Dessutom är Ham's F-12 det medium som väljs för en Clonal Toxicity Assay (CTA).
En av mediets främsta fördelar är dess förmåga att stödja celltillväxt utan behov av serumtillskott. Detta eliminerar potentiella störningar som orsakas av serumkomponenter, vilket säkerställer konsekventa och tillförlitliga experimentella resultat. Genom att tillhandahålla en serumfri odlingsmiljö ger Ham's F-12 Medium forskarna större kontroll över sina undersökningar.
En annan viktig egenskap hos Ham's F-12 Medium är dess lämplighet för plätering av encelliga celler. Det gör det till ett utmärkt val för en mängd olika cellinjer, bland annat CHO-celler, lungceller och L-celler från mus. Mediets optimerade näringssammansättning underlättar effektiv fastsättning och tillväxt av enskilda celler, vilket möjliggör etablering av homogena cellkulturer med förbättrad reproducerbarhet.
Ham's F-12 Medium har dessutom blivit erkänt som det föredragna mediet för CTA (Clonal Toxicity Assay). Denna analys spelar en avgörande roll för att bedöma de cytotoxiska effekterna av ämnen på celler. Genom att använda Ham's F-12 Medium i CTA kan forskare noggrant utvärdera effekterna av olika föreningar eller behandlingar på enskilda celler, vilket ger värdefulla insikter i toxikologiska profiler.
Kvalitetskontroll

pH = 7,2 +/
- 0,02 vid 20-25°C.
Varje parti har testats för sterilitet och frånvaro av mykoplasma och bakterier.

Underhåll

Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Frysning och uppvärmning upp till +37°C minimerar produktens kvalitet.
Värm inte upp mediet till mer än 37° C och använd inte okontrollerbara värmekällor (t.ex. mikrovågsugnar).
Om endast en del av mediet ska användas, ta ut denna mängd ur flaskan och värm upp den i rumstemperatur.
Hållbarheten för alla medier utom basmediet är 8 veckor från tillverkningsdatumet.

Sammansättning




Komponenter
mg/L


Oorganiska salter
Kalciumklorid x 2H2O
44,00



Koppar(II)sulfat x 5H2O
0,00



Järn(II)sulfat x 7H2O
0,83



Magnesiumklorid x 6H2O
122,00



Kaliumklorid
223,65



Natriumklorid
7599,00



di-Natriumvätefosfatvattenfri
142,04



Zinksulfat x 7H2O
0,86


Övriga komponenter
D(+)-Glukos vattenfri
1801,60



Hypoxanthin
4,08



Linolsyra
0,08



DL-α-lipoinsyra
0,21



Fenolrött
1,20



Putrescin x 2HCl
0,16



Natriumpyruvat
110,00



Tymidin
0,73



NaHCO3
1176,00


Aminosyror
L-Alanin
8,91



L-arginin x HCl
210,70



L-asparagin x H2O
15,01



L-Asparaginsyra
13,31



L-Cystein x HCl x H2O
35,12



L-Alanyl-L-glutamin
217,30



L-glutaminsyra
14,71



Glycin
7,51



L-Histidin x HCl x H2O
20,96



L-Isoleucin
3,94



L-Leucin
13,12



L-Lysin x HCl
36,54



L-metionin
4,48



L-fenylalanin
4,96



L-prolin
34,53



L-Serin
10,51



L-Threonin
11,91



L-tryptofan
2,04



L-Tyrosin
5,44



L-Valin
11,71


Vitaminer
D(+)-Biotin
0,01



D-kalciumpantotenat
0,24



Kolinklorid
13,96



Folsyra
1,32



myo-Inositol
18,02



Nikotinamid
0,04



Pyridoxin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Tiamin x HCl
0,34



Vitamin B12
1,36

25,00 €*
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 är ett allmänt erkänt och flitigt använt basalt medium för cellodling inom biologisk forskning. Det fungerar som en grundläggande näringskälla för tillväxt av olika cellinjer från däggdjur, särskilt när det kompletteras med fetalt bovint serum (FBS).

Denna unika formulering kombinerar Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) och Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i ett exakt förhållande 1:1. Tillsatsen av L-glutamin förbättrar dess sammansättning ytterligare.

DMEM, som härrör från Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), erbjuder en ökad koncentration av aminosyror och vitaminer jämfört med sin föregångare. Ham's F-12 är däremot baserat på Ham's F-10 medium, vilket ger en kompletterande uppsättning essentiella komponenter.

För att stödja optimal celltillväxt är det vanligt att DMEM:Ham's F12 kompletteras med FBS i en typisk koncentration på 5-10%. Detta tillskott är nödvändigt eftersom mediet saknar tillväxthormoner, lipider och proteiner som är avgörande för cellutvecklingen.

DMEM:Ham's F12 innehåller ett pH-buffert-system och kompletteras ofta med fenolrött, en pH-indikator. Odlade celler i DMEM:Ham's F12, eller i något annat medium som använder bikarbonatbuffertsystemet, kräver en kontrollerad CO2-miljö på 5-10% för att upprätthålla lämpliga pH-nivåer.


Kvalitetskontroll

Sterilt filtrerad


Förvaring och hållbarhetstid

Förvaras vid +2°C till +8°C, skyddad från ljus.
Efter öppnandet, förvara vid 4°C och använd inom 6-8 veckor.


Förhållanden vid leverans

Omgivande temperatur


Underhåll

Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Undvik frysning och frekvent uppvärmning till +37°C, eftersom det försämrar produktkvaliteten.
Värm inte upp mediet över 37°C och använd inte okontrollerade värmekällor som t.ex. mikrovågsugnar.
Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm det till rumstemperatur före användning.


Sammansättning



Kategori
Komponenter
Koncentration (mg/L)


Aminosyror
Glycin
18.75


L-Alanin
4.45


L-arginin HCl
147.50


L-Asparagin H₂O
7.50


L-Asparaginsyra
6.65


L-cystein HCl H₂O
17.56


L-cystin 2 HCl
31.29


L-glutaminsyra
7.35


L-glutamin
365.00


L-Histidin HCl H₂O
31.48


L-Isoleucin
54.47


L-Leucin
59.05


L-Lysin HCl
91.25


L-metionin
17.24


L-fenylalanin
35.48


L-prolin
17.25


L-Serin
26.25


L-Threonin
53.45


L-tryptofan
9.02


L-Tyrosin Dinatriumsalt
48.10


L-Valin
52.85


Vitaminer
D-Biotin
0.0035


Kolinklorid
8.98


D-kalciumpantotenat
2.24


Folsyra
2.66


myo-Inositol
12.60


Nikotinamid
2.02


Pyridoxin HCl
0.031


Pyridoxal HCl
2.00


Riboflavin
0.219


Tiamin HCl
2.17


Vitamin B12
0.68


Oorganiska salter
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Övriga komponenter
D-Glukos
3151.00


Hypoxantin
2.40


HEPES
3574.50


Linolsyra
0.042


Liponsyra
0.105


Fenolrött natriumsalt
8.63


Putrescin 2 HCl
0.081


Natriumpyruvat
55.00


Tymidin
0.365

25,00 €*
Ham's F12K Medium, m: 2,0 mM L-Glutamin, m: 2,0 mM Natriumpyruvat, m: 2,5 g/L NaHCO3
Vi introducerar Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, en specialiserad modifiering av Ham's F-12 medium som är utformad för att uppfylla de unika kraven inom biologisk forskning. Detta avancerade medium erbjuder tydliga fördelar och förbättrar odlingen av primära humana hepatocyter samt rått
- och kycklingleverceller, särskilt under förhållanden med reducerat serum.

Ham's F-12K (Kaighn's) Medium är noggrant formulerat för att optimera cellodlingsförhållandena. Det har en berikad sammansättning som ger förhöjda nivåer av essentiella komponenter som aminosyror och natriumpyruvat, samt ytterligare element som putrescin, tymidin, hypoxantin och zink. Dessa tillsatser gör det möjligt för forskare att komplettera mediet med minimalt serum eller definierade komponenter för specifika celltyper, vilket underlättar exakta experimentella förhållanden.

Ham's F-12K (Kaighn's) Medium innehåller inte proteiner eller tillväxtfaktorer. Därför är det ofta nödvändigt att komplettera med tillväxtfaktorer och Fetal Bovine Serum (FBS), vilket gör det möjligt för forskare att skräddarsy mediet efter kraven för sina specifika cellinjer. För optimal prestanda måste koncentrationen av FBS noggrant optimeras för varje cellinje, så att optimal tillväxt och funktionalitet säkerställs.

För att upprätthålla ett fysiologiskt pH använder Ham's F-12K (Kaighn's) Medium ett natriumbikarbonatbuffert-system (2,5 g/L), vilket kräver en kontrollerad 5-10% CO2-miljö under odlingen. Detta säkerställer att mediets pH-värde ligger inom det idealiska intervallet för celltillväxt och livskraft
Kvalitetskontroll

pH = 7,2 +/
- 0,02 vid 20-25°C.
Varje parti har testats för sterilitet och frånvaro av mykoplasma och bakterier.

Förvaring

Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Frysning och uppvärmning upp till +37°C minimerar produktens kvalitet.
Värm inte upp mediet till mer än 37°C och använd inte okontrollerbara värmekällor (t.ex. mikrovågsugnar).
Om endast en del av mediet ska användas, ta bort denna mängd från flaskan och värm upp den i rumstemperatur.
Hållbarheten för alla medier utom basmediet är 8 veckor från tillverkningsdatum.

Sammansättning




Komponenter
mg/L


Oorganiska salter
Kalciumklorid x 2H2O
135,24



Koppar(II)sulfat x 5H2O
0,00



Järn(II)sulfat x 7H2O
0,83



Magnesiumklorid x 6H2O
105,72



Magnesiumsulfat x 7H2O
394,49



Kaliumklorid
283,29



Kaliumdivätefosfat
58,52



Natriumklorid
7597,20



di-Natriumvätefosfatvattenfri
115,02



Zinksulfat x 7H2O
0,14


Övriga komponenter
D(+)-Glukos vattenfri
1260,00



Hypoxanthin
4,08



DL-α-lipoinsyra
0,21



Fenol röd
3,00



Putrescin x 2HCl
0,32



Natrium pyruvat
220,00



NaHCO3
2500,00



Tymidin
0,73


Aminosyror
L-Alanin
17,82



L-arginin x HCl
421,40



L-asparagin x H2O
30,02



L-Asparaginsyra
26,62



L-Cystein x HCl x H2O
70,24



L-glutamin
292,20



L-glutaminsyra
29,42



Glycin
15,01



L-Histidin x HCl x H2O
41,92



L-Isoleucin
7,87



L-Leucin
26,24



L-Lysin x HCl
73,04



L-metionin
8,95



L-fenylalanin
9,91



L-prolin
69,06



L-Serin
21,02



L-Threonin
23,82



L-tryptofan
4,08



L-tyrosin
10,87



L-Valin
23,42


Vitaminer
D(+)-Biotin
0,07



D-kalciumpantotenat
0,48



Kolinklorid
13,96



Folsyra
1,32



myo-Inositol
18,02



Nikotinamid
0,04



Pyridoxin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Tiamin x HCl
0,34



Vitamin B12
1,36

108,00 €*
McCoys 5A medium (modifierat), w: 3,0 g/L Glukos, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3
McCoy's 5A Medium är ett starkt rekommenderat och specialiserat medium som är utformat för att underlätta tillväxt och replikering av virus i primära cellkulturer. Det har fått stort erkännande för sin exceptionella prestanda i olika biologiska forskningsapplikationer. En framträdande tillämpning av McCoy's 5A Medium är dess användning vid odling av humana kolonkarcinomcellinjer. Specifikt har det använts i studien av den leucinrika repetitionsinnehållande G-proteinkopplade receptorn (LGR5) och dess roll i metastaseringen av koloncancer. Detta medium har använts effektivt vid odling av flera kolonkarcinomcellinjer, inklusive HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b och TENN, vilket har gjort det möjligt för forskare att fördjupa sig i de mekanismer som ligger till grund för metastasering av koloncancer. Förutom sin tillämpning inom cancerforskning har McCoy's 5A Medium visat sig vara oumbärligt i studien av osteoblaster. Forskare som undersöker jonreaktiviteten hos kalciumbristande hydroxiapatit i standardcellodlingsmedier har använt detta medium för att odla osteoblaster. Denna tillämpning har underlättat en bättre förståelse av interaktionerna mellan osteoblaster och kalciumbristande hydroxiapatit, vilket bidragit till framsteg inom benforskningen. McCoy's 5A Medium har noggrant formulerats genom att modifiera aminosyrorna i Basal Medium Eagle för att ge optimalt stöd för levertumörceller. Denna berikade formulering gör den lämplig för ett brett spektrum av etablerade cellinjer, såväl som primära celler, vilket ytterligare förbättrar dess mångsidighet och tillämplighet i olika forskningsmiljöer. McCoy's 5A Medium utvidgar sina biokemiska och fysiologiska effekter bortom levertumörceller. Det har framgångsrikt använts för att stödja tillväxt i primära kulturer av benmärg, hud, tandkött, njure, omentum, binjure, lunga, mjälte, råttembryo och andra celltyper. Detta breda spektrum av tillämpningar vittnar om McCoy's 5A Mediums breda användbarhet när det gäller att stödja tillväxt och underhåll av olika celltyper för omfattande biologisk forskning. Formulering Detta McCoy's 5A-medium (modifierat) innehåller 3,0 g/l glukos, stabil glutamin, 2,0 mM natriumpyruvat och 2,2 g/l NaHCO3. Kvalitetskontroll pH = 7,2 +/
- 0,02 vid 20-25 °C.  Varje parti har testats för sterilitet och frånvaro av mykoplasma och bakterier. Förvaring Förvaras i kylskåp vid +2 °C till +8 °C i mörker. Frysning och uppvärmning till +37 °C försämrar produktens kvalitet.  Värm inte mediet till mer än 37 °C och använd inte okontrollerbara värmekällor (t.ex. mikrovågsugnar).  Om endast en del av mediet ska användas, ta ut denna mängd från flaskan och värm den till rumstemperatur. Hållbarhetstiden för alla medier utom basmediet är 6 till 8 veckor från öppningsdatumet. Sammansättning Komponenter mg/L Oorganiska salterKalciumklorid x 2H2O132,00 Magnesiumsulfat97,67 Kaliumklorid400 Natriumklorid6 460,00 Dinatriumvätefosfat (vattenfritt)504,00 Övriga komponenterD(+)-glukos (vattenfri)3 000 Glutation (reducerat)0 Köttpeptone600,00 Fenolrött natriumsalt11 AminosyrorL-alanin13 L-arginin x HCl42,1 L-asparagin x H2O45,03 L-asparaginsyra19,97 L-Cystein x HCl x H2O31,75 L-glutamin (stabil)219,15 L-glutaminsyra22,07 Glycin7,51 L-histidin x HCl x H2O20,96 L-hydroxiprolin19,67 L-isoleucin39,3 L-leucin39,36 L-lysin x HCl36,54 L-metionin14,92 L-fenylalanin16,52 L-prolin17,27 L-serin26,28 L-treonin17,87 L-tryptofan3,06 L-tyrosin dinatriumsalt26,10 L-valin17,57 Vitaminerp-Aminobensoesyra1,0 Askorbinsyra0,5 D(+)-biotin0,2 D-kalciumpantotenat0,2 Kolin klorid5 Folsyra10 Myo-inositol36 Nikotinamid0,5 Nikotinsyra0,5 Pyridoxal HCl0,5 Pyridoxin HCl0,50 Riboflavin0,2 Tiamin HCl0,2 Vitamin B122,0

30,00 €*
IMDM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 3,024 g/L NaHCO3
Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) är ett komplext och berikat tillväxtmedium för cellodling. IMDM är en modifiering av DMEM som innehåller selen och har ytterligare aminosyror, vitaminer och oorganiska salter jämfört med DMEM. Det saknar järn och kräver tillskott av fetalt bovint serum (FBS). IMDM använder ett natriumbikarbonatbuffert-system och kräver en 5-10% CO2-miljö för att upprätthålla fysiologiskt pH.
IMDM lämpar sig väl för snabbt växande cellkulturer med hög densitet, inklusive Jurkat-, COS-7
- och makrofagceller. De olika modifieringarna av IMDM som finns tillgängliga för en rad olika cellodlingsapplikationer kan hittas med hjälp av verktyget för medieväljare. Flytande medier tillhandahåller viktiga näringsämnen för alla cellodlingsapplikationer. Var och en av våra högkvalitativa cellodlingsmedier tillverkas enligt den ursprungligen publicerade formeln eller de modifieringar som krävs för att säkerställa konsekvent prestanda och stabilitet hos odlingsmediet.
IMDM jämfört med DMEM
IMDM innehåller kaliumnitrat i stället för järnnitrat samt HEPES och natriumpyruvat. De ytterligare komponenterna i IMDM gör det mer lämpligt för specialiserade celltyper och specifika tillämpningar än DMEM.
IMDM jämfört med RPMI
IMDM och RPMI har olika formuleringar som kan vara relevanta för stimulering med PMA/ionomycin. En betydande skillnad är koncentrationen av Ca2+. Medan RPMI innehåller 0,42 mM Ca2+, innehåller IMDM 1,49 mM.
Kvalitetskontroll

pH = 7,2 +/
- 0,02 vid 20-25°C.
Varje parti har testats för sterilitet och frånvaro av mykoplasma och bakterier.

Underhåll

Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Frysning och uppvärmning upp till +37°C minimerar produktens kvalitet.
Värm inte upp mediet till mer än 37° C och använd inte okontrollerbara värmekällor (t.ex. mikrovågsugnar).
Om endast en del av mediet ska användas, ta ut denna mängd ur flaskan och värm upp den i rumstemperatur.
Hållbarheten för alla medier utom basmediet är 8 veckor från tillverkningsdatumet.
Sammansättning




Komponenter
mg/L


Oorganiska salter
Kalciumklorid x 2 H2O
219,00



Kaliumklorid
330,00



Kaliumnitrat
0.076



Vattenfritt magnesiumsulfat
97,73



Natriumklorid
4,505.00



Natriumdivätefosfat vattenfritt
109,00



Natriumselenit
0,02


Övriga komponenter
D(+)-Glukos vattenfri
4,500.00



HEPES
5,958.00



Natriumpyruvat
110,00



Fenolrött
15,00


Aminosyror
L-Alanin
25,00



L-arginin x HCl
84,00



L-Asparagin x H2O
25,00



L-Asparaginsyra
30,00



L-kystin x 2HCl
91,24



L-Glutamin
584,00



L-glutaminsyra
75,00



Glycin
30,00



L-Histidin x HCl x H2O
42,00



L-Isoleucin
104,80



L-Leucin
104,80



L-Lysin x HCl
146,20



L-metionin
30,00



L-fenylalanin
66,00



L-prolin
40,00



L-Serin
42,00



L-Threonin
95,20



L-tryptofan
16,00



L-Tyrosin x 2Na
104,20



L-Valin
93,60


Vitaminer
D(+)-Biotin
0.013



D-kalciumpantotenat
4,00



Kolinklorid
4,00



Folsyra
4,00



myo-Inositol
7,20

25,00 €*
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3
RPMI 1640 Medium, även känt som RPMI medium, är ett mycket mångsidigt cellodlingsmedium som används inom biologisk forskning för att odla olika däggdjursceller. Mediet utvecklades av George E. Moore, Robert E. Gerner och H. Addison Franklin 1966 vid det berömda Roswell Park Comprehensive Cancer Center och har fått sitt namn från sitt ursprung vid Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
RPMI 1640 Medium utformades ursprungligen för att stödja tillväxten av mänskliga leukemiceller i både suspension och monolagerkulturer, men har utvecklats genom modifieringar av forskare och kommersiella leverantörer för att bli lämpligt för ett brett spektrum av däggdjursceller. Det är exceptionellt kompatibelt med cellinjer som HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocyter och karcinom.
RPMI 1640 Medium skiljer sig från andra cellodlingsmedier på grund av sin unika sammansättning. Det innehåller en betydande mängd fosfat, aminosyror och vitaminer. Framför allt innehåller det biotin, vitamin B12 och PABA, som saknas i Eagle's Minimal Essential Medium eller Dulbecco's Modified Eagle Medium. Dessutom uppvisar RPMI 1640 Medium signifikant förhöjda koncentrationer av vitaminerna inositol och kolin. Det innehåller dock inte proteiner, lipider eller tillväxtfaktorer. Följaktligen krävs ofta tillsats av 10% fetalt bovint serum (FBS) för att ge optimala förutsättningar för celltillväxt.
Buffringssystemet i RPMI 1640 Medium är beroende av natriumbikarbonat och kräver en 5-10% CO2-miljö för att upprätthålla ett fysiologiskt lämpligt pH. Inkluderingen av reduktionsmedlet glutation skiljer detta medium ytterligare från andra.
Kvalitetskontroll

Sterilt filtrerad


Förvaring och hållbarhetstid

Förvaras vid +2°C till +8°C, skyddat från ljus.
Efter öppnandet, förvara vid 4°C och använd inom 6-8 veckor.


Förhållanden vid leverans

Omgivande temperatur


Underhåll

Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Undvik frysning och frekvent uppvärmning till +37°C, eftersom det försämrar produktkvaliteten.
Värm inte upp mediet över 37°C och använd inte okontrollerade värmekällor som t.ex. mikrovågsugnar.
Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm det till rumstemperatur före användning.



Sammansättning




Kategori
Komponenter
Koncentration (mg/L)


Aminosyror
Glycin
10.00



L-Alanyl-L-Glutamin
434.40



L-arginin
200.00



L-AsparaginH2O
56.82



L-Asparaginsyra
20.00



L-kystin 2HCl
65.20



L-glutaminsyra
20.00



L-Histidin HClH2O
20.27



L-hydroxi-L-prolin
20.00



L-Isoleucin
50.00



L-Leucin
50.00



L-Lysin HCl
40.00



L-metionin
15.00



L-fenylalanin
15.00



L-prolin
20.00



L-Serin
30.00



L-Threonin
20.00



L-Tryptofan
5.00



L-tyrosin 2Na 2H2O
28.83



L-Valin
20.00


Vitaminer
p-Amino bensoesyra
1.00



D-biotin
0.20



Kolinklorid
3.00



D-kalciumpantotenat
0.25



Folsyra
1.00



myo-Inositol
35.00



Nikotinamid
1.00



Pyridoxin HCl
1.00



Riboflavin
0.20



Tiamin HCl
1.00



Vitamin B12
0.005


Oorganiska salter
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Övriga komponenter
D-Glukos
2000.00



L-glutation reducerad
1.00



Fenolrött natriumsalt
5.30

25,00 €*

Vi har upptäckt att du befinner dig i ett annat land eller använder ett annat webbläsarspråk än det som för närvarande är valt. Vill du acceptera de föreslagna inställningarna?

Nära