DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham’s F12 är ett allmänt erkänt och mycket använt basmedium inom cellodling för biologisk forskning. Det fungerar som en grundläggande näringskälla för tillväxten av olika däggdjurscellinjer, särskilt när det kompletteras med fetalt bovint serum (FBS).
Denna unika sammansättning kombinerar Dulbeccos modifierade Eagle-medium (DMEM) och Ham's F-12 (Ham's näringsblandning F-12) i ett exakt förhållande på 1:1. Tillsatsen av L-glutamin förbättrar dess sammansättning ytterligare.
DMEM, som härstammar från Eagles Minimal Essential Medium (EMEM), erbjuder en högre koncentration av aminosyror och vitaminer jämfört med sin föregångare. Ham’s F-12 baseras däremot på Ham’s F-10-medium och tillför en kompletterande uppsättning av väsentliga beståndsdelar.
För att främja optimal celltillväxt är det vanligt att komplettera DMEM:Ham's F12 med FBS i en typisk koncentration på 5–10 %. Detta tillskott är nödvändigt eftersom mediet saknar tillväxthormoner, lipider och proteiner som är avgörande för cellutvecklingen.
DMEM:Ham's F12 innehåller ett pH-buffertsystem och kompletteras ofta med fenolrött, en pH-indikator. Odlade celler i DMEM:Ham's F12, eller något annat medium som använder bikarbonatbuffertsystemet, kräver en kontrollerad CO2-miljö på 5–10 % för att upprätthålla lämpliga pH-nivåer.
Kvalitetskontroll
- Sterilfiltrerat
Förvaring och hållbarhet
- Förvaras vid +2 °C till +8 °C, skyddat från ljus.
- Efter öppnandet ska produkten förvaras vid 4 °C och användas inom 6–8 veckor.
Transportvillkor
- Rumstemperatur
Förvaring
- Förvara i kylskåp vid +2 °C till +8 °C i mörker. Undvik frysning och upprepade uppvärmningar till +37 °C, eftersom detta försämrar produktens kvalitet.
- Värm inte mediet till över 37 °C och använd inte okontrollerade värmekällor, såsom mikrovågsugnar.
- Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm den till rumstemperatur före användning.
Sammansättning
| Kategori | Beståndsdelar | Koncentration (mg/l) |
| Aminosyror | Glycin | 18,75 |
| L-alanin | 4,45 | |
| L-arginin-HCl | 147,50 | |
| L-asparagin H₂O | 7,50 | |
| L-asparaginsyra | 6,65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystin-2-HCl | 31,29 | |
| L-glutaminsyra | 7,35 | |
| L-glutamin | 365,00 | |
| L-histidin-HCl-H₂O | 31,48 | |
| L-isoleucin | 54,47 | |
| L-leucin | 59,05 | |
| L-lysin-HCl | 91,25 | |
| L-metionin | 17,24 | |
| L-fenylalanin | 35,48 | |
| L-prolin | 17,25 | |
| L-serin | 26,25 | |
| L-treonin | 53,45 | |
| L-tryptofan | 9,02 | |
| L-tyrosin 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-valin | 52,85 | |
| Vitaminer | D-biotin | 0,0035 |
| Kolin klorid | 8,98 | |
| D-kalciumpantotenat | 2,24 | |
| Folsyra | 2,66 | |
| myo-inositol | 12,60 | |
| Nikotinamid | 2,02 | |
| Pyridoxin-HCl | 0,031 | |
| Pyridoxal-HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Tiamin-HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Oorganiska salter | CaCl₂·2 H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄·7H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂·6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄·7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0,432 | |
| Övriga beståndsdelar | D-glukos | 3151,00 |
| Hypoxantin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolsyra | 0,042 | |
| Liponsyra | 0,105 | |
| Fenolrött natriumsalt | 8,63 | |
| Putrescin-2-HCl | 0,081 | |
| Natriumpyruvat | 55,00 | |
| Tymidin | 0,365 |