DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 är ett allmänt erkänt och mycket använt basmedium inom cellodling för biologisk forskning. Det fungerar som en grundläggande näringskälla för tillväxten av olika däggdjurscellinjer, särskilt när det kompletteras med fetalt bovint serum (FBS).
Denna unika formulering kombinerar Dulbeccos modifierade Eagle-medium (DMEM) och Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i ett exakt förhållande på 1:1. Tillsatsen av L-glutamin förbättrar dess sammansättning ytterligare.
DMEM, som härstammar från Eagles Minimal Essential Medium (EMEM), erbjuder en högre koncentration av aminosyror och vitaminer jämfört med sin föregångare. Däremot är Hams F-12 baserat på Hams F-10-medium, vilket tillhandahåller en kompletterande uppsättning av väsentliga komponenter.
För att stödja optimal celltillväxt är det vanligt att komplettera DMEM:Ham's F12 med FBS i en typisk koncentration på 5–10 %. Detta tillskott är nödvändigt eftersom mediet saknar tillväxthormoner, lipider och proteiner som är avgörande för cellutvecklingen.
DMEM:Ham's F12 innehåller ett pH-buffertsystem och kompletteras ofta med fenolrött, en pH-indikator. Odlade celler i DMEM:Ham's F12, eller något annat medium som använder bikarbonatbuffertsystemet, kräver en kontrollerad CO2-miljö på 5–10 % för att upprätthålla lämpliga pH-nivåer.
Kvalitetskontroll
- Sterilfiltrerat
Förvaring och hållbarhet
- Förvaras vid +2 °C till +8 °C, skyddat från ljus.
- Efter öppnandet ska produkten förvaras vid 4 °C och användas inom 6–8 veckor.
Transportförhållanden
- Rumstemperatur
Förvaring
- Förvara i kylskåp vid +2 °C till +8 °C i mörker. Undvik frysning och frekvent uppvärmning till +37 °C, eftersom detta försämrar produktens kvalitet.
- Värm inte mediet över 37 °C och använd inte okontrollerade värmekällor såsom mikrovågsugnar.
- Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den nödvändiga mängden och värm den till rumstemperatur före användning.
Sammansättning
| Kategori | Beståndsdelar | Koncentration (mg/l) |
| Aminosyror | Glycin | 18,75 |
| L-alanin | 4,45 | |
| L-arginin-HCl | 147,50 | |
| L-asparagin H₂O | 7,50 | |
| L-asparaginsyra | 6,65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystin 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutaminsyra | 7,35 | |
| L-glutamin | 365,00 | |
| L-histidin HCl H₂O | 31,48 | |
| L-isoleucin | 54,47 | |
| L-leucin | 59,05 | |
| L-lysin-HCl | 91,25 | |
| L-metionin | 17,24 | |
| L-fenylalanin | 35,48 | |
| L-prolin | 17,25 | |
| L-serin | 26,25 | |
| L-treonin | 53,45 | |
| L-tryptofan | 9,02 | |
| L-tyrosin 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valin | 52,85 | |
| Vitaminer | D-biotin | 0,0035 |
| Kolin klorid | 8,98 | |
| D-kalciumpantotenat | 2,24 | |
| Folsyra | 2,66 | |
| myo-inositol | 12,60 | |
| Nikotinamid | 2,02 | |
| Pyridoxin-HCl | 0,031 | |
| Pyridoxal-HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Tiamin-HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Oorganiska salter | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na2HPO4 | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Övriga komponenter | D-glukos | 3151,00 |
| Hypoxantin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolsyra | 0,042 | |
| Liponsyra | 0,105 | |
| Fenolrött natriumsalt | 8,63 | |
| Putrescin-2-HCl | 0,081 | |
| Natriumpyruvat | 55,00 | |
| Tymidin | 0,365 |