KG-1 Cellinje
KG-1-celler är en leukemicellinje som härrör från människa och som används i stor utsträckning inom biomedicinsk forskning. De erbjuder olika tillämpningar inom immunologi, cancer och toxikologi. Forskare använder dessa celler för att studera sjukdomsmekanismer och testa potentiella behandlingar. Denna artikel kommer att ge omfattande information om KG-1-cellinjen som kan hjälpa dig i ditt arbete. Framför allt kommer den att diskutera:
- Allmänna egenskaper och ursprung för KG-1-cellinjen
- Information om odling av KG-1-cellinjen
- KG-1 cellinje: Fördelar och begränsningar
- Tillämpningar av KG-1-celler inom forskning
- Publikationer om KG-1-celler
- Resurser för KG-1 cellinje: Protokoll, videor och mer
1. Allmänna egenskaper och ursprung för KG-1-cell linje
En cellinjes ursprung och allmänna egenskaper hjälper en forskare att bestämma hur den ska användas i sitt arbete. Du kan undersöka denna information innan du börjar arbeta med den. Detta artikelavsnitt handlar om KG-1 makrofagers ursprung och egenskaper. Här kommer du att lära dig: Vad är KG-1-celler? Vad är KG-1a-cellinjen? Vad är ursprunget till KG-1-cellinjen? Vad är KG-1 morfologi?
- KG-1 är en lymfoblastliknande cellinje som härrör från benmärgsaspirat från en kaukasisk man (59 år gammal) med akut myelogen leukemi. Den etablerades av Koeffler och Golde 1978. Dessa celler befinner sig huvudsakligen i promyelocyt- eller myeloblastmognadsstadiet [1].
- KG-1-cellerna har en lymfoblastliknande morfologi.
- KG-1-cellinjens karyotyp uppvisar ett pseudodiploidalt modalt antal kromosomer.
KG-1 och KG-1a
KG-1a är en sublinje av föräldracellerna KG-1. Den utvecklades efter 35 passager av KG1-cellinjen. Den är mindre differentierad jämfört med KG-1-cellinjen. Dessutom är denna sublinje cytokemiskt, morfologiskt och funktionellt mindre mogen jämfört med modercellinjen (KG-1).
2. Information om odling av KG-1-cellinjen
Detta avsnitt av artikeln kommer att täcka all nödvändig information om KG-1-cellodling som kan underlätta ditt arbete. Här kommer du att lära dig: Vad är fördubblingstiden för KG 1-cellinjen? Vilka är odlingsförhållandena för KG-1-makrofager? Hur odlar man KG-1-celler?
Viktiga punkter för odling av KG-1-celler
|
Fördubblingstid: |
KG-1:s fördubblingstid är cirka 45 timmar. Den kan dock variera beroende på odlingsförhållandena. |
|
Vidhäftande eller i suspension: |
KG-1-cellerna växer i suspension. |
|
Celldensitet: |
Den optimala celldensiteten för KG1-cellinjen är från 1 till 3 x105 celler/ml. För att subkultivera överförs cellsuspensionen till ett sterilt rör och centrifugeras. De skördade cellerna tillsätts sedan med färskt medium och resuspenderas försiktigt. Därefter fördelas cellerna i nya kolvar och odlas vid en optimal celldensitet. Cellerna kan delas när de når en maximal celldensitet på 1 - 2 x106 celler/ml. |
|
Tillväxtmedium: |
IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) innehållande 10% FBS, 4,5 g/L glukos, 4 mM L-glutamin, 1,0 mM natriumpyruvat och 3,0 g/L NaHCO3 används för att odla KG-1-celler. Media bör bytas ut efter tre dagar. |
|
Tillväxtförhållanden: |
AML-cellinjen KG1 odlas i en befuktad inkubator vid 37°C temperatur och med 5% CO2-tillförsel. |
|
Förvaring: |
Frysta celler förvaras i ångfasen av flytande kväve eller vid en temperatur under -150 °C i en elektrisk frys för extremt låg temperatur för att skydda cellernas livskraft. |
|
Frysningsprocess och medium: |
CM-1 eller CM-ACF är lämpligt för frysning av KG-1-celler. Cellerna fryses med hjälp av en långsam frysningsprocess för att skydda cellerna från chock. Denna metod tillåter en gradvis temperatursänkning på 1 °C per minut. |
|
Upptiningsprocess: |
Cellerna tinas upp i ett förvärmt vattenbad vid 37 °C tills en liten isklump återstår. Upptinade celler tillsätts med färskt medium och centrifugeras för att avlägsna komponenter från frysmediet. Cellpelleten resuspenderas försiktigt och hälls i nya kolvar som innehåller tillväxtmedium. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
Biosäkerhetsnivå 1-laboratoriet är nödvändigt för att upprätthålla KG-1-cellkulturer. |
3. KG-1 cellinje: Fördelar och begränsningar
Liksom andra cellinjer är KG-1-cellinjen för myeloisk leukemi förknippad med många fördelar och begränsningar. I det här avsnittet tar vi upp några viktiga sådana som kan vara avgörande för om du ska använda den i din forskning.
Fördelarna med KG-1
De viktigaste fördelarna med KG-1-celler är följande:
-
Enkel odling
KG-1-celler odlas lätt i forskningslaboratorier och har okomplicerade cellodlingskrav. Deras enkla underhåll och tillväxtförhållanden ger tillgänglighet för ett brett spektrum av forskare med grundläggande cellodlingsanläggningar.
-
Modell för akut myeloisk leukemi (AML)
KG-1 AML-cellinjen, som härrör från en manlig patient med akut myeloisk leukemi (AML), är ett värdefullt verktyg för att undersöka AML:s biologi och bedriva forskning om potentiella behandlingar, vilket ger insikter i sjukdomens underliggande mekanismer och behandlingsstrategier.
begränsningar
De begränsningar som är förknippade med KG1-cellinjen är följande:
-
In vitro-modell
KG-1-celler är värdefulla in vitro-modeller för AML-forskning, men det är viktigt att notera att de kanske inte helt replikerar sjukdomens komplexitet in vivo, utan fungerar som en förenklad cellmodell som kanske inte omfattar alla aspekter av AML-biologin.
4. Tillämpningar av KG-1-celler inom forskning
KG-1 erbjuder flera lovande tillämpningar inom biomedicinsk forskning. Några av de viktiga forskningsområden där KG1-makrofagerna används är
- Cancerforskning: KG-1-celler härrör från en patient med akut myeloisk leukemi och anses därför vara ett värdefullt forskningsverktyg för att undersöka AML-biologi. Forskare använder dessa celler för att studera de cellulära och molekylära mekanismer som driver AML-utveckling, tillväxt och läkemedelsresistens. Detta innebär också att identifiera och upptäcka nya biomarkörer, genetiska mutationer och signalvägar som är associerade med AML. I en studie som genomfördes 2019 undersöktes till exempel att det långa icke-kodande RNA:t linc00239 underlättar doxorubicinresistens och malignt beteende i akuta myeloiska leukemiceller, KG-1. Ytterligare studier visade att lncRNA aktiverar PI3K/Akt/mTOR-signalering för att utöva dessa effekter i AML-celler [2].
- Toxikologi: KG1-cellinjen används ofta inom toxikologisk forskning. Forskare testar potentiella läkemedels toxicitet och effekt, inklusive kemoterapeutiska läkemedel och riktade terapier på KG1-celler med myeloisk leukemi, för att identifiera lovande läkemedelskandidater för framtida prekliniska och kliniska utvärderingar. Forskning som genomfördes under 2018 analyserade toxiciteten hos doxorubicininnehållande nano-niosomer på KG1 AML-cellinjen. Studien visade att nano-niosomer är en lämplig bärare för läkemedelstillförsel eftersom det förbättrar behandlingens effektivitet [3]. I en annan undersökning utforskade forskare de terapeutiska effekterna av nässelte som framställts av Urtica dioica-växtblad. Studien visade att detta vattenhaltiga bladextrakt av växten utövar antitumöreffekter i akuta myeloiska leukemiceller, KG-1 och U937 [4].
5. Publikationer om KG-1-celler
I detta avsnitt av artikeln listas några intressanta forskningspublikationer om KG-1-celler.
Quercetin gör KG-1-celler från human myeloisk leukemi känsliga mot TRAIL-inducerad apoptos
Detta dokument publicerades i Journal of Cellular Physiology (2019). Studien föreslog att quercetinföreningen sensibiliserar KG1 AML-cellinjen mot TNF-relaterad apoptosinducerande ligand (TRAIL) och kan öka effekten av TRAIL-inducerad cytotoxicitet i celler.
KLF8 ökar tillväxten av akut myeloisk leukemicell och glykolys via AKT/mTOR-vägen
I denna artikel i Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) föreslås att nedreglering av krüppelliknande transkriptionsfaktor 8 undertrycker AML-cellproliferation och glykolys, vilket uppmuntrar apoptos via reglering av AKT/mTOR-signalvägen.
Effekter av sorafenib och arseniktrioxid på U937- och KG-1-cellinjer: Apoptos eller autofagi?
Denna studie i Cell Journal (Yakhteh) (2020) undersökte de potentiella effekterna av arseniktrioxid och sorafenib på U937- och KG-1-celler.
I denna studie, som publicerades i Medical Oncology (2020), utvärderades OXPHOS och glykolys som terapeutiska mål i AML-cellinjen KG-1.
Denna publikation om läkemedelsdesign, utveckling och terapi, 2020 föreslog att curcumin- och talidomidföreningar synergistiskt utövar apoptotiska effekter i KG-1-celler genom att minska STAT3- och Bcl-xL-uttrycket.
6. Resurser för KG-1 cellinje: Protokoll, videor och mycket mer
Nedan följer några online-resurser som finns tillgängliga om KG-1-celler.
- Subkultur av suspenderade celler: Den här videon beskriver protokollet för subkulturering av suspensionscellkulturer som KG-1.
Följande länk innehåller KG-1-cellkulturprotokollet:
- KG-1 cellinje: Den här webbplatsen är full av grundläggande cellodlingsinformation om KG-1-cellinjen. Den innehåller information om cellinjemedia och protokoll för subkulturering och hantering av kryokonserverade och proliferativa kulturer.
Referenser
- Pelliccia, F., V. Ubertini och N. Bosco, The importance of molecular cytogenetic analysis prior to using cell lines in research: Fallet med leukemicellinjen KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al., Långticke-kodande RNA linc00239 främjar maligna beteenden och kemoresistens mot doxorubicin delvis via aktivering av PI3K/Akt/mTOR-vägen i akuta myeloida leukemiceller. Onkologiska rapporter, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Framställning och studie av nano-niosomer innehållande doxorubicin och utvärdering av dess toxicitet på akut myeloblastisk leukemicellinje KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al, Nässelte hämmar tillväxten av akuta myeloida leukemiceller in vitro genom att främja apoptos. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.