Ramos-celler - forskning om B-cellslymfom: Betydelsen av Ramos-celler
Ramos-celler är en B-lymfocytcellinje som används flitigt inom biomedicinsk forskning. De används framför allt inom immunologi och cancerstudier. Forskare använder dessa celler för att utvärdera cytotoxiska läkemedel och studera B-cellers ytantigener, mutationer och apoptotiska mekanismer.
Ursprung och allmänna egenskaper hos Ramos-celler s
Att förstå en cellinjes ursprung och väsentliga egenskaper spelar en avgörande roll för att avgöra dess lämplighet för din forskning. Därför är det tillrådligt att noggrant utvärdera denna information innan du påbörjar något arbete med den. I detta avsnitt behandlas följande vanliga frågor: Vad är Ramos cancercellinje? Vad är Ramos cellinje CD19? Vad är Ramos cellinje CD20? Vilket är ursprunget för Ramos-cellerna? Vilka är markörerna på Ramos-cellinjen? Vad är Ramos-cellstorleken? Vad är morfologin för Ramos cellinje?
- Ramos cellinje etablerades 1972. Dessa celler härrörde från asciticvätskan hos en 3-årig kaukasisk pojke med Burkitt-lymfom av amerikansk typ [1].
- De uttrycker viktiga B-cellsmarkörer, inklusive immunoglobulin M (IgM), CD19, CD20 och CD22.
- Ramos-celler är Epstein Bar-virusnegativa celler. De kan dock permanent övergå till att bli Epstein-Barr-viruspositiva celler.
- Dessa B-lymfoblastceller har en morfologi med rund form.
Ramos blå celler jämfört med Ramos B-celler
Ramos blå celler och Ramos B-celler är båda mänskliga Burkitt-lymfomceller. Båda är negativa för Epstein Bar-virus. Skillnaden mellan dessa celler är att Ramos blue cells uttrycker en NF-κB/AP-1-inducerbar reportergen som kallas SEAP (secreted embryonic alkaline phosphate), medan vita Ramos-celler inte gör det.
Odling av Ramos-celler
Detta avsnitt av artikeln är avsett att hjälpa dig att lära dig nödvändig cellodlingsinformation om Ramos-cellerna. Här kommer du att få veta: Vad är cellinjens fördubblingstid? Vad är det rekommenderade mediet? Hur odlar man Ramos-celler?
Nyckelpunkter för odling av Ramos-celler
|
Fördubblingstid: |
Ramos-cellernas fördubblingstid är ungefär 20,4 ± 1,5 timmar. Det kan dock avvika beroende på de tillhandahållna cellkulturförhållandena. |
|
Vidhäftande eller i suspension: |
Ramos-cellerna växer i suspension. |
|
Celldensitet: |
Den optimala celldensiteten för Ramos-cellinjen är 3 x105 celler/ml . För subkulturering samlas de suspenderade cellerna upp genom centrifugering. Cellerna tillsätts med färskt media och resuspenderas försiktigt. Därefter hälls cellerna över i den nya kolven med en densitet på 3-9 x105 celler/ml . |
|
Tillväxtmedium: |
RIMI 1640 kompletterat med 10% fetalt bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin och 2,0 g/L NaHCO3 används för att odla Ramos-celler. media bör bytas ut 2 gånger per vecka. |
|
Tillväxtförhållanden: |
Den humana Burkitt-lymfomcellinjen (Ramos) förvaras i en fuktad inkubator med 5% CO2 och 37°C temperatur. |
|
Förvaring: |
Frysta Ramos-celler förvaras vid en temperatur under -150 grader Celsius eller i ångfasen av flytande kväve för att skydda cellernas livskraft under längre tid. |
|
Frysningsprocess och medium: |
CM-1 eller CM-ACF frysmedium rekommenderas för Ramos-celler. En långsam frysningsprocess används som tillåter en gradvis sänkning av temperaturen med 1 grad Celsius per minut. Denna långsamma frysning skyddar cellerna från chock och förbättrar deras livskraft. |
|
Upptiningsprocess: |
För upptining förvaras frysta celleri ett förvärmt vattenbad vid 37°C i 40 till 60 sekunder tills en liten isklump har bildats. Därefter tillsätts färskt medium och cellerna centrifugeras för att avlägsna frysmedieelement. Pelleten resuspenderas igen och cellerna fördelas i en ny kolv som innehåller odlingsmedium. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
Biosäkerhetsnivå 1-laboratoriet är nödvändigt för att upprätthålla Epstein-Barr-virusnegativa Ramos-cellkulturer. Biosäkerhetsnivån flyttas dock till 2 när Ramos-celler permanent omvandlas till Epstein-Barr-viruspositiva. |
Ramos: Fördelar och begränsningar
Precis som andra cellinjer har Ramos-cellerna också tydliga fördelar och begränsningar. I det här avsnittet beskrivs några viktiga sådana som kan ha stor betydelse för hur de används i forskning.
Fördelar med Ramos
- Burkitt lymfom cellmodell: Ramos-cellerna utvecklades från en patient med Burkitts lymfom, vilket gör dem till en relevant cellmodell för studier av lymfoida maligniteter
- Enkel odling: Ramos-celler är lätta att odla och underhålla i laboratoriet. De har okomplicerade cellodlingskrav och villkor
Begränsningar
- In vitro-modell: Ramos-cellerna kanske inte helt representerar den genetiska komplexiteten i patienttumörer, vilket begränsar deras tillämplighet. Dessutom är det inte säkert att resultaten från experiment med Ramos-cellinjen helt återspeglar in vivo-förhållanden, vilket kan leda till utmaningar vid översättningen
tillämpningar av Ramos-celler inom forskning
Ramos erbjuder lovande tillämpningar inom det biomedicinska området. Några av de viktigaste forskningsanvändningarna av Ramos-cellerna är
- Lymfombiologi: Ramos-celler används i stor utsträckning för att studera lymfomens biologi. De används för att utforska genetiska och molekylära faktorer som ligger till grund för lymfoida maligniteter. Dessutom får forskare insikter i sjukdomsinitiering, progression och heterogenitet genom att använda dessa Burkitt-lymfomceller. Genetiska mutationer och signalvägar undersöks också, vilket potentiellt kan leda till utveckling av mer precisa diagnostiska och terapeutiska metoder. En studie som genomfördes 2019 visade att GCN5 (General control non-depressible 5) Histone acetyltransferase inhibition minskar tumörigeniciteten hos humana Burkitt lymfomceller (Ramos) genom att störa BCR-signalering. GCN5 föreslås därför som ett tänkbart mål för utveckling av läkemedelsbehandling av lymfom [2].
- Screening och testning av läkemedel: Ramos cellinje används i stor utsträckning för screening och testning av läkemedel. Forskare utvärderar effekten av potentiella terapeutiska föreningar när det gäller att hämma cellproliferation och celltillväxt och inducera celldöd i lymfomceller. Detta bidrar till att identifiera lovande läkemedelskandidater och underlättar därmed utvecklingen av riktade behandlingar för lymfompatienter. Sådan forskning visade att Annona frukthud, massa och frön metanoliskt extrakt utövade måttliga medan kloroformextrakt uppvisade robusta effekter på proliferationen av Ramos-celler. Studien föreslog därför att Annonafrukter kan visa sig vara effektiva vid förebyggande och behandling av lymfom [3].
Ramos-celler för din forskning
Publikationer med Ramos-celler
I detta avsnitt av artikeln listas några intressanta forskningspublikationer där Ramos cellinje ingår:
Kontinuerlig signalering av CD 79b och CD 19 krävs för att B-celler från Burkitt-lymfom ska fungera
Denna forskning publicerades i The EMBO journal 2018. Studien visade att Ramos B-celler kräver uttryck av Ramos-cellernas CD19- och CD79b-markörer (BCR-signaleringskomponent Igβ) för att de ska kunna utvecklas och växa konkurrenskraftigt.
Denna studie publicerad i Neoplasia (2021) använde Ramos-celler och föreslog att mixed lineage kinase domain (MLKL) är epigenetiskt reglerad i Burkitts lymfomceller (Ramos). Det är således en lovande prognostisk markör för behandlingsframgången för nekroptosrelaterade terapier.
Fosforylering av PBK/TOPK Tyr74 av JAK2 främjar tumörtillväxt i Burkitt-lymfom
Denna forskningsartikel i Cancer Letters (2022) tyder på att JAK2/TOPK/histone H3-signalaxeln spelar en avgörande roll för proliferationen av B-lymfomcellinjer in vitro.
Verotoxin-1-inducerad ER-stress utlöser apoptotiska eller överlevnadsvägar i Burkitt-lymfomceller
Denna artikel publicerades 2020 i Toxins. Studien föreslog att behandling av verotoxin-1 inducerar endoplasmatisk retikulum (ER) -stress i Ramos B-celler. Detta leder till initiering av apoptotisk signalering eller överlevnadssignalering i lymfomcellinjer.
Silymarin hämmar genuttryck av Toll-like receptor 8 och apoptos i Ramos cancercellinje
I denna studie i Avicenna Journal of Phytomedicine (2020) rapporterades att en naturlig förening, silymarin, undertrycker TLR8-uttryck (Toll-like receptor 8) och apoptos i Ramos-cellinjen.
Resurser för Ramos cellinje: Protokoll, videor och mycket mer
Nedan följer några online-resurser om Ramos-celler:
- Transfektion av Ramos-celler: Detta dokument hjälper dig att lära dig protokollet för transfektion av Ramos-cellinjen.
Följande länk innehåller Ramos cellodlingsprotokoll:
- Ramos-celler: Denna webbplats innehåller grundläggande information om Ramos-cellinjen. Den innehåller också ett protokoll för subkultur av Ramos-celler och hantering av prolifererande och kryopreserverade kulturer. Dessutom finns information om Ramos-cellmedier, fördubblingstid och celldensitet.
Nyckelinsikter om Ramos-celler: Ofta ställda frågor
Referenser
- Kerntke, C.G., Analys av membran-IgE:s organisation och signaleringskapacitet under dess interaktion med CD19 och CD23 i B-lymfocyter. 2021, Georg-August-Universität Göttingen.
- Farria, A.T., et al, GCN5 HAT-inhibering minskar överlevnaden hos humana Burkitt-lymfomceller genom minskning av MYC-målgenuttryck och hindrande av BCR-signalvägar. Oncotarget, 2019. 10(56): p. 5847.
- Al-Shaya, H.M., et al, Fytokemisk profil och antioxidationsaktivitet hos annona-frukt och dess effekt på lymfomcellproliferation. Food Science & Nutrition, 2020. 8(1): p. 58-68.