P19-celler - Embryonal carcinomforskning som använder P19-celler
P19 är en murin embryonal carcinomcellinje. Den används ofta inom biomedicinsk forskning, främst för att studera utvecklingsbiologi, stamcellsbiologi, celldifferentiering och läkemedelsscreening. Eftersom P19-celler har differentieringsförmåga kan de vara användbara för att undersöka komplexa biologiska processer som vävnadsbildning och tidig embryonal utveckling. I den här artikeln kommer vi att diskutera grunderna för musderiverade P19-celler.
P19-cellernas allmänna egenskaper och ursprung
Det är viktigt att känna till en cellinjes allmänna egenskaper och ursprung innan du börjar arbeta med den. Detta avsnitt kommer att omfatta följande: Vad är P19-cellinjen? Vad är storleken på P19-cellen? Vad är ursprunget till P19-celler?
- P19 är en typ av pluripotenta embryonala karcinomceller som ursprungligen erhölls från teratokarcinom som utvecklats i en C3H/He-mus. Cellinjen etablerades första gången 1982 av McBurney och Rogers.
- P19-celler kan växa kontinuerligt i ett serumkompletterat odlingsmedium. De kan differentieras till andra celltyper när de utsätts för icke-toxiska läkemedel som retinoinsyra och dimetylsulfoxid (DMSO) [1].
- Dessa muskarcinomceller har en epitelliknande morfologi.
- P19-cellinjen har en euploid manlig karyotyp (n=40; XY).
Information om odling av P19-celler
P19-cellinjen odlas i stor utsträckning i forskningslaboratorier på grund av dess unika egenskaper. Dess odling är enkel och hanterbar. Detta avsnitt innehåller all viktig information som du behöver för att underhålla och odla P19-cellkulturen. Vi kommer att veta: Vad är fördubblingstiden för P19-celler? Hur odlar man P19-cellinjen? Är P19 en vidhäftande cellinje?
Viktiga punkter för odling av P19-celler
|
Fördubblingstid: |
Den fördubblingstid som rapporterats för P19-cellinjen är cirka 2 till 3 dagar. |
|
Adherent eller i suspension: |
P19 embryonal karcinomcellinje är adherent. |
|
Förhållande mellan subkulturer: |
P19-celler ska subkultiveras var 48:e timme och ett delningsförhållande på 1:10 ska upprätthållas för dessa celler. Adherenta celler tvättas med 1 X fosfatbuffertlösning och inkuberas med Accutase tills cellerna dissocieras. Cellerna tillsätts med odlingsmedium och skördas genom centrifugering. De uppsamlade cellerna resuspenderas försiktigt och fördelas i nya kolvar. |
|
Tillväxtmedium: |
DMEM/Ham's F12-media innehållande 5% fetalt bovint serum, 3,1 g/L glukos, 1,6 mM L-glutamin, 1,0 mM natriumpyruvat, 15 mM HEPES och 1,2 g/L NaHCO3 används för odling av P19-celler. |
|
Tillväxtförhållanden: |
En befuktad inkubator inställd på 37°C med 5% CO2 är nödvändig för odling av P19 embryonic carcinoma cellinje. |
|
Förvaring: |
Frysta P19-cellflaskor bör förvaras vid en temperatur under -150°C i en frys eller i ångfasen av flytande kväve för att bibehålla cellernas livskraft på längre sikt. |
|
Frysningsprocess och medium: |
CM-1- eller CM-ACF-medium kan användas för att frysa P19-celler med hjälp av en långsam frysmetod som skyddar cellerna från chock och bevarar deras livskraft. |
|
Upptiningsprocess: |
Frysta P19-celler kan tinas upp i ett 37°C vattenbad genom att snabbt skaka om en ampull i 40 till 60 sekunder. Cellerna tillsätts med färskt media och centrifugeras för att avlägsna frysmediaelement. Cellpallen resuspenderas igen och cellerna hälls i den nya kolven för tillväxt. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
Laboratorieinställningar på biosäkerhetsnivå 1 krävs för P19-cellinjen. |
P19 cellinje: Fördelar och nackdelar
I detta avsnitt diskuteras fördelar och nackdelar med P19-cellinjen.
Fördelar och nackdelar
- Differentieringspotential: P19-celler kan differentieras till olika celltyper, inklusive kardiomyocyter, neuroner och mikrogliala celler. De kräver icke-toxiska läkemedel för differentiering, såsom retinoinsyra och dimetylsulfoxid (DMSO). Retinoinsyra inducerar utvecklingen av neuroner, mikroglia och astroglia, medan DMSO initierar utvecklingen av slagande kardiomyocyter och glatta muskelceller. P19-celler är därför användbara för att studera celldifferentiering och utvecklingsprocesser
- Modellsystem: Den pluripotenta embryonala karcinomcellinjen P19 är en värdefull modell för att studera tidig embryonal utveckling. Forskare använder P19-celler för att belysa cellsignaleringsvägar och de cellulära och molekylära mekanismer som är involverade i dessa processer
Nackdelar med P19
- Murint ursprung: P19 är en murin embryonal karcinomcellinje. Följaktligen kan resultaten från studier som använder dessa celler kanske inte helt överföras till mänsklig biologi och processer
Forskningstillämpningar av P19-celler
P19-celler har flera forskningstillämpningar tack vare sin differentieringsförmåga och relevans för utvecklingsbiologi och stamcellsforskning. Några av de viktiga forskningsapplikationerna för P19 embryonala karcinomceller inkluderar:
- Studier av celldifferentiering: Som vi vet kan P19-celler differentieras till neuroner, mikroglial, glatta muskelceller och kardiomyocyter; används därför ofta för att studera celldifferentieringsprocesser. Dessutom hjälper det forskningen att undersöka nerv- och hjärtutveckling och underliggande mekanismer. En studie som genomfördes 2018 visade att reaktiva syreföreningar (ROS) styr differentieringen av P19-celler till specifika celltyper och förhindrar induktion av andra [3]. I en annan studie undersöktes den retinoinsyramedierade neurala differentieringsprocessen och man fann att PI3K/Akt/GSK3β-signalvägen var involverad [4].
- Utvecklingsbiologi: P19-celler är en ovärderlig modell för att studera tidig embryonal utveckling. De hjälper forskarna att förstå komplexa biologiska processer, såsom vävnadsbildning under embryoutvecklingen. Forskningen använde P19-celler och studerade bidragande molekylära faktorer för bildandet av ventrikulär septumdefekt (VSD). Resultaten visade att ett långt icke-kodande RNA SNHG6 bidrar till VSD genom negativ reglering av miRNA-101 och aktivering av Wnt/β-catenin-vägen [5].
- Testning av läkemedel: P19-cellinjen för embryonal karcinom hos mus används också för att screena potentiella läkemedelskandidater. I en studie användes differentierade P19-cellneuroner och undersöktes de neuroprotektiva acetylkolinesterashämmande effekterna av syntetisk L-Dopa och vattenhaltigt extrakt av Mucuna pruriens-frö. Resultaten visade att växtextraktet uppvisade lovande resultat jämfört med L-Dopa [6].
Köp din P19-cellinje idag
P19-celler: Forskningspublikationer
Detta artikelavsnitt kommer att behandla några intressanta forskningspublikationer som behandlar P19-celler.
Denna artikel publicerades i Oncology Reports 2017. I studien föreslogs att könshormoner i hypofysen driver teratokarcinomcellinjernas vidhäftning, proliferation och migration, inklusive P19-celler.
Det långa icke-kodande RNA:t uc. 4 påverkar celldifferentiering genom TGF-beta-signalvägen
I denna publikation i tidskriften Experimental & Molecular Medicine (2018) användes P19-celler och funktionen hos det långa icke-kodande RNA:t uc.4 studerades. Resultaten visade att uc.4 påverkar celldifferentieringen genom att modulera TGF-betasignalvägen.
Denna forskningsartikel publicerades 2018 i Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. Studien visade att naturligt hjärnvävnadsextrakt och 3D-cellkultur kan påskynda P19 embryonala karcinomcellers differentiering till neurala celler.
Denna studie publicerades i Journal of Ethnopharmacology 2020. Studien föreslog att Cichorium int ybus L. bladextrakt kan inducera differentiering i P19 embryonala karcinomceller till insulinproducerande pankreatiska β-celler.
Denna forskning publicerades i Molecules (2022). Denna studie undersökte de neuroskyddande och acetylkolinesterasinhiberande effekterna av Mucuna pruriens fröextrakt på P19-cellneuroner.
Resurser för P19 cellinje: Protokoll, videor och mer
Följande är några resurser på P19-celler.
- Protokoll för neuronal differentiering av P19-celler: Den här artikeln innehåller P19-cellers neurala differentieringsprotokoll och annan användbar information om P19-celldifferentiering.
- Transfektion av P19-celler: Den här länken hjälper dig att lära dig P19-celltransfektionsprotokollet.
Följande länk innehåller p19-cellkulturprotokollet.
- P19-celler: Denna webbplats innehåller all användbar information om P19-cellinjen, inklusive dess odlingsförhållande, P19-cellmedier, celldelning och mycket mer.
Utforska P19-cellinjen: Ofta ställda frågor
Referenser
- McBurney, M.W., P19 embryonala carcinomceller. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): p. 135-40.
- Bressler, J., et al, P19 Embryonic Carcinoma Cell Line: A Model To Study Gene-Environment Interactions. Cell Culture Techniques, 2011: s. 223-240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey och G. Rödel, Mitochondrial ROS direct the differentiation of murine pluripotent P19 cells. Stamcellsforskning, 2018. 30: p. 180-191.
- Fu, F., et al, All-trans-retinoid acid inducerar differentieringen av P19-celler till neuroner som är involverade i PI3K/Akt/GSK3β-signalvägen. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): p. 4386-4396.
- Jiang, Y., et al., Långt icke-kodande RNA SNHG6 bidrar till bildandet av ventrikulär septumdefekt via negativ reglering av miR-101 och aktivering av Wnt/β-catenin-signalvägen. Die Pharmazie - En internationell tidskrift för farmaceutisk vetenskap, 2019. 74(1): p. 23-28.
- Kamkaen, N., et al., Mucuna pruriens frö vattenhaltigt extrakt förbättrade neuroskyddande och acetylkolinesterashämmande effekter jämfört med syntetisk L-dopa. Molekyler, 2022. 27(10): p. 3131.