NCI-H1299-celler: Forskning och kliniska implikationer av NCI-H1299-lungcancerceller
NCI-H1299 är en immortaliserad human icke-småcellig lungcancercellinje som används i stor utsträckning inom immunonkologi, cancer och läkemedelsupptäcktsforskning. Dessutom använde forskare dessa celler för att undersöka läkemedelskänslighet, underliggande signalvägar och molekylära mekanismer relaterade till lungcancer. Dessutom används dessa celler för att studera virusinfektioner såsom SARS-CoV-2.
Allmänna egenskaper och ursprung för NCI-H1299-celler
Det första du bör veta om en cellinje är dess ursprung och allmänna egenskaper, eftersom de hjälper dig att utforma dess användning i din forskning. Detta avsnitt av artikeln hjälper dig att lära dig viktig information om NCI-H1299:s ursprung och egenskaper. Till exempel, vad är NCI-H1299 lungcancerceller? Vilken typ av cell är NCI-H1299? Vad är storleken på NCI-H1299-celler? Vad är skillnaden mellan A549 och NCI-H1299?
- Cellinjen NCI-H1299 härstammar från en lymfkörtelmetastas i lungan hos en 43-årig kaukasisk manlig patient med cancer.
- Dessa celler har homozygot partiell deletion av p53-genen, vilket innebär att de inte uttrycker p53-proteinet. Avsaknaden av p53-proteinuttryck hos NCI-H1299 bidrar till den proliferativa tendensen hos H1299-lungcancerceller.
- Förutom p53 rapporteras dessa odödliga celler ha NCI-H1299 KRAS-mutation, som är ansvarig för deras tillväxt, proliferation, migration och invasionsegenskaper.
- NCI-H1299:s karyotyp är nära diploid.
- NCI-H1299-cellerna har en epitelcellsliknande morfologi.
- Dessa celler är tillplattade och har en tjocklek på mindre än 5 µm.
NCI-H1299 och A549
NCI-H1299 och A549 är cellinjer för icke-småcellig lungcancer. NCI-H1299-cellerna är mer aggressiva och känsliga jämfört med A549. Båda har relativt likartade mutationer, t.ex. KRAS. Men till skillnad från NCI-H1299-cellerna uttrycker A549-cellerna P53-genen.
Information om odling
Det är inte lätt att underhålla en cellinjekultur om man inte känner till all viktig information om den, t.ex: Vad är NCI-H1299:s fördubblingstid? Vad är sådddensiteten för NCI-H1299? Vad är NCI-H1299 cellmedia? Hur odlar man NCI-H1299-cellinjer? Detta avsnitt hjälper dig att få svar på alla dessa frågor om odling av NCI-H1299-celler.
Viktiga punkter för odling av NCI-H1299-celler
|
Fördubblingstid: |
Fördubblingstiden för NCI-H1299 varierar mellan 22-30 timmar. |
|
Vidhäftande eller i suspension: |
NCI-H1299 är en adherent cellinje. |
|
Förhållande mellan subkultivering: |
NCI-H1299-celler subkultiveras i ett rekommenderat förhållande på 1:3 till 1:6. För sådd tvättas adherenta celler med 1x PBS och inkuberas med Accutase passaging solution i 8 till 10 minuter vid rumstemperatur. Lossnande celler tillsätts med färskt odlingsmedium och centrifugeras. Cellpelleten resuspenderas sedan och cellerna hälls över i nya kolvar som innehåller odlingsmedium. |
|
Tillväxtmedium: |
RPM1 1640 är ett idealiskt NCI-H1299-cellmedium. Det kompletteras med 10% fetalt bovint serum, 4500 mg/L glukos, 2,0 mM L-glutamin, 1 mM natriumpyruvat, 1500 mg/L NaHCO3 och 10 mM HEPES. Media bör förnyas varannan till var tredje gång i veckan. |
|
Tillväxtförhållanden: |
Cellkulturer av NCI-H1299 lungcancer hålls i en luftfuktad inkubator vid 37°C med 5% CO2-tillförsel. |
|
Förvaring: |
NCI-H1299-cellinjen kan långtidsförvaras i ångfasen av flytande kväve eller i frysar med extremt låg temperatur vid temperaturer under -150°C. |
|
Frysningsprocess och medium: |
CM-1 eller CM-ACF är frysmedier för NCI-H1299-celler. Cellerna fryses med hjälp av en långsam frysningsprocess som endast tillåter en temperatursänkning på 1 grad per minut för att skydda cellernas livsduglighet. |
|
Upptiningsprocess: |
Frysta NCI-H1299-celler omrörs snabbt i ett förvärmt vattenbad vid 37 grader Celsius i 40 till 60 sekunder tills en liten isbit finns kvar. Upptinade celler tillsätts med färska medier och kan odlas direkt i nya kolvar eller centrifugeras. I det förstnämnda fallet bör mediet bytas ut efter 24 timmars inkubation. Centrifugering hjälper till att avlägsna frysande medieelement. Därefter resuspenderas skördade celler i färskt medium och fördelas i den nya kolven för odling. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 krävs för att hantera NCI-H1299-cellkultur. |
Köp NCI-H1299 Cell Line: Högkvalitativa forskningsverktyg för att undersöka lungcancerbiologi
Fördelar och nackdelar med NCI-H1299-celler
Liksom andra humana cancercellinjer har NCI-H1299 också vissa särskiljande egenskaper som är förknippade med specifika för- och nackdelar. Här har vi sammanfattat några viktiga sådana.
Fördelar och nackdelar
De viktigaste fördelarna med cellinjen NCI-H1299 för icke-småcellig lungcancer är följande
-
In vitro-modellför lungcancer
NCI-H1299-cellinjerna har utvecklats från lymfkörtelmetastaser av lungcancer och har därför relativt likartade egenskaper. Därför kan dessa celler fungera som en in vitro-modell för att undersöka lungcancerbiologi, cell- och molekylära mekanismer samt screena och testa potentiella läkemedel.
-
Lätt att odla
NCI-H1299-celler är lätta att odla och underhålla i ett forskningslaboratorium. Det finns inga krångliga krav och procedurer för cellodling.
-
NCI-H1299 P53 och NCI-H1299 KRAS-mutation
NCI-H1299-celler saknar genuttryck för p53, vilket gör att cellerna kan föröka sig kraftigt. Dessutom har de KRAS-mutation som bidrar till celltillväxt, proliferation, invasion och migration. Mot bakgrund av detta använder forskare H1299-celler för att undersöka molekylära mekanismer som är relevanta för KRAS- och P53-mutationer.
Nackdelar
Nackdelarna med NCI-H1299-celler är:
-
Vävnadsspecificitet
NCI-H1299 härstammar från lungvävnad. Därför är dess tillämplighet mestadels begränsad till lungcarcinomforskning. Den kanske inte fullt ut representerar andra cancertypers heterogenitet och allmänna egenskaper.
Forskningsapplikationer för NCI-H1299-celler
Cellinjen NCI-H1299 används i stor utsträckning inom lungcancerforskningen. Några lovande tillämpningar av denna cellinje nämns här.
- Cancerbiologi: NCI-H1299-celler fungerar som ett utmärkt forskningsverktyg för att undersöka cancerutveckling, progression och relaterade cell- och molekylära mekanismer. Dessa celler har vissa mutationer, vilket gör det möjligt för forskare att utforska relaterade cancercellsbeteenden, signalvägar och genuttrycksprofiler. Flera studier har använt cellinjen NCI-H1299 för icke-småcellig lungcancer för att studera lungcancerbiologi. I en studie som genomfördes 2018 undersöktes till exempel den signalväg som är involverad i apoptos i lungcancerceller med hjälp av NCI-H1299-celler. Forskarna fann att PI3K/AKT-signalvägen bidrar till cellproliferation och att hämning av den kan orsaka cancercelldöd [1]. På samma sätt undersökte en annan forskning de mekanismer som är involverade i NCI-H1299 epitelial-till-mesenkymal övergång (EMT). I denna studie föreslogs att ett extracellulärt protein SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) bidrar till NCI-H1299 EMT och migration, och därmed främjar tumörutveckling i celler - SPARC-proteinet fungerar som en förmedlare av TGF-β1-signalering [2].
- Läkemedelsupptäckt och screening: NCI-H1299, en cellinje för lungcancer hos människa, används i stor utsträckning för att bedöma toxicitet och effekt hos potentiella läkemedel. Dessutom används den av forskare för att undersöka verkningsmekanismen hos läkemedel mot tumörsjukdomar. I studier har man också använt dessa celler för att identifiera möjliga läkemedelsmål och resistensmekanismer. Xiao-Yun Shen och hans kollegor undersökte t.ex. den naturliga föreningen bruceine D (BD) och dess potential mot cancer. Resultaten visade att BD avsevärt hindrar proliferation, invasion och migration av NCI-H1299-celler. Det kan därför betraktas som en potentiell adjuvant terapi för behandling av icke-småcellig lungcancer [3]. På liknande sätt utvärderades i en studie de cytotoxiska effekterna av xanthohumol ensamt och i kombination med cisplatin som kemoterapeutiskt läkemedel på NCI-H1299 lungcancerceller [4].
Forskningspublikationer med NCI-H1299-celler
Några viktiga och mest citerade forskningspublikationer om NCI-H1299-cellinjen för lungcancer finns här.
Induktion av apoptos i indol-3-karbinolbehandlade lungcancer H1299-celler via ROS-nivåhöjning
Denna artikel är publicerad i tidskriften Human and Experimental Toxicology (2021). Studien föreslog att indol-3-karbinol inducerar apoptos i H1299 via förhöjda nivåer av reaktiva syrearter (ROS).
Denna forskning publicerades 2018 i tidskriften Cellular Physiology and Biochemistry. Forskningsresultaten visade att kombinationen av koffeinsyra och paklitaxel utövar en synergistisk anti-cancereffekt i cellinjen för icke-småcellig lungcancer, NCI-H1299.
Denna forskningsartikel publicerades i Molecular Medicine Reports (2018). Studien utvärderade antitumöreffekten av tubeimoside-1, en triterpenoid saponin, och underliggande mekanismer i cellinjen NCI-H1299.
Pristimerin inducerar apoptos och hämmar proliferation och migration i H1299 lungcancerceller
I denna artikel publicerad i Journal of Cancer (2020) föreslås att Pristimerin, en naturlig förening, undertrycker proliferationen och migrationen av NCI-H1299-celler.
Mekanism för VIPR1-genreglering av humana lungadenokarcinom H1299-celler
I denna studie i Medical Oncology (2019) undersöktes de potentiella effekterna av överuttryck av VIPR1-genen på adenokarcinomcellinjen NCI-H1299.
Resurser för NCI-H1299 cellinje: Protokoll, videor och mer
Här är några online-resurser som innehåller NCI-H1299-cellerna.
- NCI-H1299 transfektion: Den här videon förklarar protokollet för transient transfektionsprotokoll för NCI-H1299-cellinjer.
- Subkultur av en adherent cellinje: Den här videon hjälper dig att lära dig ett allmänt subkulturförfarande för en adherent cellinje.
Följande länk innehåller information om cellodling för NCI-H1299-celler.
- NCI-H1299 cellinje: Den här länken kan hjälpa dig att lära dig mer om NCI-H1299-cellpassager och transfektionsprotokoll.
Vanliga frågor om cellinjen NCI-H1299
Referenser
- Gu, J., et al., Studie av EGCG-inducerad apoptos i lungcancerceller genom att hämma PI3K / Akt-signalvägen. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al, SPARC fungerar som en förmedlare av TGF-β1 för att främja epitelial till mesenkymal övergång i A549- och H1299-lungcancerceller. Biofactors, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al, A study on the mechanism of bruceine D in the treatment of non-small cell lung cancer H1299 cells. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al, Cytotoxiska effekter av xanthohumol och dess kombination med cisplatin på metastaserande lungcancerceller H1299 från människa. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.