LNCaP-cellinjen: En nyckel till genombrott inom prostatacancer

LnCaP-cellinjen är en hörnsten inom cancerforskningen, i synnerhet när det gäller prostatacancer. Dess utbredda tillämpning inom området beror på dess användbarhet för att förstå de biologiska grunderna för prostatacancer och för att bedöma effekten av potentiella terapeutiska ingrepp. Denna artikel syftar till att ge en grundläggande förståelse för cellinjen LNCaP (lymfkörtelcancer i prostata) och förse forskare med den väsentliga information som krävs för att påbörja arbetet med denna cellinje.

LNCaP-cellernas egenskaper och ursprung

LNCaP-cellinjen, som är erkänd för sin relevans inom prostatacancerforskningen, uppvisar unika egenskaper och ursprung som är avgörande för forskare att förstå:

Ursprung: LNCaP-cellerna isolerades först 1977 från den metastatiska lymfkörteln hos en 50-årig kaukasisk man med prostatacancer, specifikt från den vänstra supraklavikulära regionen.
Androgenkänslighet: Dessa celler kännetecknas av sin känslighet för androgener, en egenskap som har underlättat utvecklingen av två betydande sublinjer från de ursprungliga LNCaP-cellerna: LNCaP-G4, känd för sin höga androgenkänslighet, och LNCaP-E9, som utmärker sig för sin låga androgenkänslighet. Dessa sublinjer utgör ett mångsidigt verktyg för att undersöka nyanserna i prostatacancer.
Morfologi: LNCaP-cellerna har en epitelliknande form och kan växa antingen som aggregat eller som enskilda celler, vilket gör dem till en mångsidig modell för att studera cell-cellinteraktioner och cancercellers morfologi.
Storlek: Den genomsnittliga diametern för LNcaP-prostatacancerceller är cirka 18 µm, en detalj som underlättar den mikroskopiska undersökningen och karakteriseringen av dessa celler.
Kromosomuppsättning: Cellinjen är aneuploid, med ett varierande kromosomantal mellan 76 och 91, vilket återspeglar den genetiska instabilitet som ofta observeras i cancerceller.
Tumörframkallande potential: När LNCaP-celler introduceras i hanliga athymiska nakenmöss uppvisar de en 58%-ig frekvens av subkutana tumörer, vilket understryker deras användbarhet i in vivo-modeller av prostatacancer.

Den detaljerade förståelsen av LNCaP-cellernas ursprung, egenskaper och användbarhet inom forskningen ger en solid grund för forskare som påbörjar studier av prostatacancer, vilket underlättar informerad experimentell design och tolkning av resultat.

Prostataceller i SEM.

Odling av LNCaP-celler: Viktiga riktlinjer

För att kunna bedriva forskning med LNCaP, en framstående cellinje för prostatacancer, krävs en grundlig förståelse av odlingsprinciperna. Följande punkter sammanfattar de kritiska aspekter som måste beaktas för en effektiv odling av LNCaP-celler:

Tid för populationsfördubbling: LNCaP-celler uppvisar en genomsnittlig fördubblingstid på 48 till 60 timmar, vilket indikerar den period som krävs för att cellpopulationen ska fördubblas under optimala förhållanden.
Tillväxtkaraktäristik: Dessa celler är adherenta och tenderar att växa i monolager samtidigt som de bildar distinkta cellkluster, en egenskap som är viktig för övervakning av cellhälsa och konfluens.
Utsåddstäthet: Det rekommenderas att LNCaP-celler seedas med en densitet på 1-2 x 10^4 celler/cm^2. Protokollet innebär att cellerna tvättas med PBS, avskiljs med hjälp av Accutase och därefter centrifugeras. Cellerna resuspenderas sedan och odlas i färskt tillväxtmedium i nya kolvar.
Optimalt tillväxtmedium: Det medium som föredras för LNCaP-odling är EMEM, berikat med 2,5 mM L-glutamin och 10% fetalt bovint serum (FBS). För att bibehålla optimala tillväxtförhållanden rekommenderas att mediet uppdateras var tredje dag.
Miljö förodling: LNCaP-celler trivs i en fuktad inkubator inställd på 37°C med en atmosfär på 5% CO2, förhållanden som efterliknar miljön in vivo.
Cellförvaring: För långtidsförvaring bör LNCaP-celler förvaras i ångfasen av flytande kväve, vilket säkerställer deras livskraft för framtida experiment.
Tekniker för frysning och upptining: Med hjälp av frysmedium CM-1 eller CM-ACF bör LNCaP-celler frysas gradvis för att minimera termisk chock. Efter upptining, som bäst görs i ett 37°C vattenbad tills endast en liten isklump återstår, ska cellerna omedelbart resuspenderas i tillväxtmedium, centrifugeras för att avlägsna frysmediet och sedan överföras till odlingsflaskor.
Biosäkerhetsöverväganden: Odling av LNCaP-celler kräver att protokoll på biosäkerhetsnivå 1 följs, vilket garanterar säkra och effektiva hanteringsmetoder.

Dessa riktlinjer utgör grunden för att etablera och underhålla LNCaP-cellkulturer, vilket underlättar robusta och reproducerbara resultat i forskning om prostatacancer.

LNCaP-celler vid låg och hög konfluency.

För- och nackdelar med att använda LNCaP-cellinjen

LNCaP-cellinjen, som är en hörnsten i forskningen om prostatacancer, har en unik uppsättning egenskaper som ger både fördelar och utmaningar i tillämpningen. I detta avsnitt beskrivs de viktigaste fördelarna och potentiella nackdelarna med LNCaP-celler.

Fördelarna med LNCaP

Enkelodling: LNCaP-celler är särskilt användarvänliga när det gäller odling och underhåll i laboratoriemiljö. Denna tillgänglighet har gjort dem till ett förstahandsval för olika tillämpningar, inklusive läkemedelsscreening och farmakologisk testning.
Androgenkänslighet: Ett kännetecken för LNCaP-celler är att de är beroende av androgener, vilket kännetecknas av att de uttrycker androgenreceptorer (AR). Denna egenskap gör dem till en ovärderlig in vitro-modell för att utforska dynamiken i androgenberoende prostatacancer, vilket ger insikter i sjukdomens utveckling och potentiella terapeutiska mål.

Nackdelar med prostatacancer

Tillväxthastighet: En av begränsningarna med LNCaP-celler är deras relativt långsamma proliferationshastighet. Denna egenskap kan utgöra en utmaning vid experimentell design som kräver snabb celltillväxt eller hög genomströmning inom en begränsad tidsram.
Aggregering av celler: LNCaP-celler har en benägenhet att bilda aggregat eller kluster, vilket kan medföra variabilitet och komplicera tolkningen av data i vissa cellbaserade analyser, särskilt sådana som bygger på enhetlig cellfördelning eller analys av enskilda celler.

Att förstå dessa egenskaper hos LNCaP-cellinjen är avgörande för att forskare ska kunna utnyttja dess fördelar och samtidigt mildra effekterna av dess begränsningar, och därmed optimera cellinjens potential för att främja forskningen om prostatacancer.

Forskningsapplikationer för androgenkänsliga LNCaP-celler

LNCaP-celler, som härrör från mänsklig prostatacancer, fungerar som ett kritiskt verktyg inom olika forskningsområden. Deras användbarhet beror på deras androgenberoende natur och förmågan att modellera specifika aspekter av prostatacancerns biologi. Viktiga tillämpningar inkluderar:

Forskning om prostatacancer

Studier av androgenreceptorer

LNCaP-celler, liksom många prostatatumörceller, uppvisar känslighet för androgener, som är kritiska drivkrafter för tillväxt av prostatacancer. Denna känslighet utnyttjas terapeutiskt via androgendeprivationsstrategier, såsom androgenablation eller användning av antiandrogener som flutamid. Effekten av dessa behandlingar övervakas ofta genom att specifika antigener och cellproliferation undertrycks. Uppkomsten av resistent prostatacancer är dock en betydande utmaning, ofta efter utsättning av antiandrogen, vilket kan leda till metastaserande sjukdom.

Mutationer spelar en central roll i LNCaP-cellernas anpassnings- och resistensmekanismer. Punktmutationer, framför allt inom androgenreceptorgenen, har identifierats och studerats med hjälp av tekniker som polymeraskedjereaktion (PCR) och transkriptomiska analyser. Dessa mutationer kan påverka cellernas svar på androgendeprivation och antiandrogenbehandlingar, vilket bidrar till komplexiteten i behandlingen av avancerad prostatacancer.

Upptäckt av läkemedel

Screening av terapier

Forskningen med LNCaP-celler har utvidgats till att omfatta mer än traditionella hormonbehandlingar och utforska nya behandlingsmetoder. Den intracellulära läkemedelstillförseln som syftar till att påverka specifika vägar inom dessa celler, cytotoxiciteten hos föreningar som ripl och effekterna av medel som amygdalin och clorgyline har varit föremål för intresse. Dessa studier syftar till att hitta nya metoder för att stoppa metastaseringsprocessen, kontrollera cellcykelprogressionen och framkalla cellcykelstopp i prostatacancerceller, vilket ger hopp om effektivare behandlingar mot avancerade och resistenta former av sjukdomen.

Kliniska implikationer

LNCaP-cellernas metastatiska potential, i synnerhet deras förmåga att efterlikna den metastatiska processen till platser som den supraklavikulära lymfkörteln, gör dem ovärderliga för att studera prostatacancerns spridning. Att förstå det genomiska och transkriptomiska landskapet i dessa celler, inklusive den roll som humant genomiskt DNA spelar i deras beteende, är avgörande för att utveckla strategier för att förebygga eller behandla metastaserande prostatacancer.

430,00 €*

Innehåll: 1.5 milliliter

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300265

Förbättra din forskning med vårLnCaP-cellinje och dess derivatLnCaP-klonen FGC

Resurser och forskningsinsikter om LNCaP-celler

Att få tillgång till högkalibriga LNCaP-cellinjer och deras detaljerade genetiska och fenotypiska data är avgörande för forskare. Många bioregister och vetenskapliga institutioner erbjuder dessa viktiga resurser, vilket gör det möjligt för forskare att genomföra grundliga och betydande studier inom prostatacancer och relaterade områden.

Anmärkningsvärda forskningspublikationer som involverar LNCaP-celler

LNCaP-cellinjen har varit central i många betydelsefulla studier inom prostatacancerforskningen. Nedan följer några anmärkningsvärda publikationer som har använt LNCaP-celler som en viktig forskningsmodell:

CRISPR/Cas9-inriktning av androgenreceptorn undertrycker tillväxten av LNCaP humana prostatacancerceller: Denna studie, som publicerades i Molecular Medicine Reports 2018, belyser potentialen hos CRISPR/Cas9 som ett terapeutiskt verktyg för att hämma tillväxten av LNCaP-celler genom att rikta in sig på androgenreceptorn.
Fytokemisk analys av stjälkar från Daphne pontica L. med deras proapoptotiska egenskaper mot DU-145- och LNCaP-prostatacancerceller: Denna publikation från DARU Journal of Pharmaceutical Sciences visar på Daphne pontica L.s cancerhämmande egenskaper mot LNCaP- och DU-145-celler.
Synergistiska antitumöreffekter av Liraglutide, en glukagonliknande peptid-1-receptoragonist, tillsammans med Docetaxel på LNCaP-prostatacancercellinjen: I denna forskning, som presenterades i European Journal of Pharmacology 2020, undersöks den potenta antitumörsynergin mellan Liraglutide och Docetaxel på LNCaP-celler.
Bestämning av de potentiella anticancereffekterna av Coriandrum sativum i PC-3- och LNCaP-prostatacancercellinjer: Enligt denna publikation från 2018 i Journal of Cellular Biochemistry visar extrakt av Coriandrum sativum lovande anticancereffekter på LNCaP-celler genom att modulera viktiga cellcykelgener.
Knockdown av STEAP1 hämmar celltillväxten och inducerar apoptos i LNCaP-prostatacancerceller som motverkar effekten av androgener: I denna artikel i Molecular Oncology Journal från 2018 diskuteras hur man genom att tysta den överuttryckta STEAP1-genen i LNCaP-celler kan hindra tillväxten av prostatacancerceller och utlösa apoptos.

LNCaP-celler: Protokoll, handledning och mer

LNCaP, en allmänt använd cellinje för prostatacancer, stöds av ett överflöd av resurser, inklusive detaljerade odlings- och transfektionsprotokoll:

Transfektion av LNCaP-cellinjen: Detta dokument erbjuder en omfattande guide om passering och transfektionsprotokoll för LNCaP-celler

Vanliga frågor om LNCaP-celler

Referenser

Castanares, M.A., et al, Karakterisering av en ny metastaserande prostatacancercellinje av LNCaP-ursprung. The Prostate, 2016. 76(2): p. 215-225.
Iguchi, K., et al., Isolering och karakterisering av LNCaP-sublinjer som skiljer sig åt i hormonkänslighet. Journal of andrology, 2007. 28(5): p. 670-678.
Wei, C., et al., CRISPR/Cas9-inriktning av androgenreceptorn undertrycker tillväxten av LNCaP mänskliga prostatacancerceller. Molecular medicine reports, 2018. 17(2): p. 2901-2906.
Gomes, I.M., et al, Knockdown av STEAP1 hämmar celltillväxt och inducerar apoptos i LNCaP-prostatacancerceller som motverkar effekten av androgener. Medicinsk onkologi, 2018. 35: p. 1-10.
Tousi, M.S., et al, Utvärdering av apoptotiska effekter av mPEG-b-PLGA-belagda järnoxidnanopartiklar som en eupatorinbärare på DU-145 och LNCaP mänskliga prostatacancercellinjer. Journal of Pharmaceutical Analysis, 2021. 11(1): p. 108-121.