INS-1 Cellinje

INS-1 är en väl karakteriserad insulinomcellinje från råtta som ofta används inom diabetesforskning. INS-1-celler utsöndrar insulin vid glukosstimulering och används därför för att studera glukosmetabolism, betacellsfysiologi och reglering av insulinutsöndring. Vidare används dessa celler också för screening, testning och utveckling av potentiella läkemedel mot diabetes mellitus.

Den här artikeln ger dig all nödvändig information om INS-1-betaceller som du behöver känna till innan du använder dem i din forskning. Du kommer huvudsakligen att lära dig följande:

Allmänna egenskaper och ursprung för INS-1-celler
INS-1 cellinje: Information om odling
Fördelar och nackdelar med INS-1-cellinjen
Forskningsapplikationer av INS-1-insulinomceller från råtta
Forskningspublikationer som innehåller INS-1 betaceller
Resurser för INS-1 cellinje: Protokoll, videor och mer

1. Allmänna egenskaper och ursprung för INS-1-celler

Att känna till en cellinjes allmänna egenskaper och ursprung kan i hög grad hjälpa dig att effektivt använda den i din forskning. Detta artikelavsnitt kommer att informera dig om INS-1-ursprung och allmänna egenskaper. Du kommer att veta: Vad är INS-1 råttinsulinomcellinjen? Vilka är de allmänna egenskaperna hos INS-1? Vad är INS-1 832/3 cellinje? Vad är INS-1E?

INS-1-cellerna isolerades ursprungligen från en 666 dagar gammal råtta med röntgeninducerat transplanterbart insulinom.
INS-1-celler är bi-hormonella. De uttrycker samtidigt insulin- och proglukagonproteiner. Dessa celler betraktas som omogna eftersom de uppvisar låga uttrycksnivåer av transkriptionsfaktorn Nkx6.1 och saknar alfacellsmarkörer [1].
Det finns två subkloner av INS-1-celler, nämligen INS-1E och INS-1 832/3.
INS-1E skiljer sig från modercellinjen INS-1 när det gäller sekretoriska reaktioner på glukos och insulininnehåll.
INS-1 832/3 eller INS-1 832/13 är också en subklon av INS-1-cellinjen. Den är en ovärderlig modell för att studera funktionen hos betacellerna i bukspottkörtelns öar och regleringen av insulinsekretionen. Den skiljer sig också från föräldracellerna INS-1 när det gäller glukosstimulerad insulinsekretion (GSIS).

3D-modellering av insulinmedierat glukosupptag.

2. INS-1 cellinje: Information om odling

För att kunna hantera och underhålla en cellinje på ett effektivt sätt måste du känna till följande odlingsinformation om den. Detta avsnitt av artikeln kommer att täcka alla viktiga punkter för odling av INS-1-celler. du kommer att lära dig: Hur odlar man INS-1 beta-celler? Vad är INS-1 cellodlingsprotokoll? Vad är fördubblingstiden för INS-1-celler? Vad är INS-1-cellmediet för råttinsulinomceller?

Viktiga punkter för odling av INS-1-celler

Fördubblingstid:	Populationsfördubblingstiden för INS-1-celler är cirka 44 timmar.
Adherent eller i suspension:	INS-1-celler växer både i suspension och adherent form.
Förhållande mellan subkultivering:	INS-1-celler subkultiveras i ett delningsförhållande på 1:3. I korthet samlas suspenderade celler in. Adherenta celler sköljs med PBS och inkuberas med Accutase-lösningen. Efter avskiljning tillsätts cellerna med färskt media. Därefter centrifugeras och samlas både suspenderade och vidhäftande celler upp. Cellerna resuspenderas försiktigt och fördelas i de nya kolvarna för tillväxt.
Tillväxtmedium:	RPM1 1640 används för odling av insulinomcellinjen INS-1rat. Mediet kompletteras med 10% värmeinaktiverat fetalt bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 och 1 mM natriumpyruvat.
Tillväxtförhållanden:	INS-1-cellerna förvaras i en luftfuktad inkubator vid 37°C och med kontinuerlig tillförsel av 5% CO2.
Förvaring:	INS-1 betaceller kan långtidsförvaras i ångfasen av flytande kväve eller vid en temperatur under -150°C i en elektrisk frys.
Frysningsprocess och medium:	CM-1- eller CM-ACF-medier används för att frysa INS-1-celler genom en långsam frysningsprocess. Den tillåter endast en temperatursänkning på 1°C per minut för att skydda cellernas livskraft.
Upptiningsprocess:	Frysta INS-1-celler tinas i ett vattenbad som är förinställt på 37 grader Celsius i 40 till 60 sekunder. Efter upptining tillsätts cellerna med färsk media och hälls direkt i en ny kolv för tillväxt. Efter 24 timmar byts mediet ut för att eliminera komponenter i frysmediet.
Biosäkerhetsnivå:	Biosäkerhetsnivå 1-laboratorium krävs för att odla INS-1-insulinomceller från råtta.

INS-1-celler som växer i öar vid 10x och 20x förstoring.

3. fördelar och nackdelar med cellinjen INS-1

Liksom andra cellinjer har INS-1 också vissa distinkta egenskaper som är förknippade med vissa för- och nackdelar. Här har vi nämnt några viktiga sådana.

Fördelar med INS-1

De viktigaste fördelarna med INS-1-cellinjen är

Väl karakteriserad
INS-1 är en väletablerad och välkarakteriserad cellinje. Den har använts i ett stort antal forskningsstudier. Den bibehåller sina fenotypiska egenskaper och insulinsekretionsförmåga under en längre period, vilket ger tillförlitliga och konsekventa experimentella resultat.
Modell för betaceller
INS-1-celler används för att studera betacellernas funktion i bukspottkörtelns öar, eftersom de utsöndrar insulin och reagerar på fluktuationer i glukosnivåerna.

nackdelar med INS-1-celler

Nackdelarna med INS-1-celler är:

Icke-mänskligt ursprung
INS-1-betacellerna har ett icke-mänskligt ursprung. De härstammar från råttinsulinom. Detta kan orsaka artspecifika skillnader och begränsa den direkta översättningen av experimentella resultat till mänsklig fysiologi.

4. Forskningstillämpningar av INS-1-insulinomaceller från råtta

INS-1-betacellerna används i stor utsträckning inom diabetesforskningen. Några lovande tillämpningar av denna cellinje nämns här.

Studier av insulinsekretion: INS-1-celler har insulinutsöndrande förmåga och används därför i stor utsträckning för att studera de underliggande cellulära mekanismerna för insulinutsöndring. Forskarna undersöker viktiga faktorer som är involverade i insulinfrisättningen, inklusive glukosmetabolism, signalvägar, hormoner och farmakologiska medel. En studie visade att en K + ATP-jonkanalberoende signalväg reglerar insulinsekretionen i INS-1-betaceller [2]. Dessutom har studier visat att GLP-1R och AKT/PDX1-vägar också är involverade i insulinsekretionen i INS-1-insulinomceller från råtta [3].
Studier av betacellens funktion: INS-1-celler har betacellsliknande egenskaper från pankreatiska öar, t.ex. känslighet för glukosmetabolism och insulinsekretion. De används därför för att studera betacellernas fysiologiska processer och funktioner. I en studie som genomfördes 2022 användes INS-1-celler och en modell för betacellsdysfunktion utvecklades genom _H2O2. De studerade cellviabilitet, insulinsekretion och markörer relaterade till oxidativ stress i dessa celler som svar på behandling med naturliga föreningar [4].
Upptäckt och utveckling av läkemedel: Råttinsulinomcellerna INS-1 används ofta för att screena och testa antidiabetiska föreningar eller läkemedel. De kan användas för att studera de potentiella effekterna av terapeutiska medel på insulinsekretion och andra relevanta parametrar. En studie visade att loganin, en komponent i en kinesisk örtformel, skyddade INS-1-cellernas insulinutsöndrande funktion och utövade potentiella antidiabetiska effekter. Komponenten förmedlade dessa gynnsamma effekter genom att hämma den nukleära translokationen av FOXO1-genen via PI3K/AKT-vägen [5].

550,00 €*

Innehåll: 1.5 milliliter

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300471

5. Forskningspublikationer som innehåller INS-1 betaceller

Här är några viktiga forskningspublikationer som rör INS-1-cellinjen från råttinsulinom.

Alfa-mangostin förbättrar insulinsekretionen och skyddar INS-1-celler från streptozotocininducerad skada

Denna studie publicerades i Internation Journal of Molecular Sciences 2018. Studien föreslog att en gul kristallin naturlig förening, Alpha-mangostin, främjar insulinsekretion i INS-1-betaceller och skyddar dem mot skador som induceras av betacellstoxin streptozotocin.

Epikatekins potentiering av glukosstimulerad insulinsekretion i INS-1-celler är inte beroende av dess antioxidantaktivitet

Denna forskning publicerades i Acta Pharmacologica Sinica 2018. Studiens resultat visade att epicatechinföreningen främjar glukosstimulerad insulinutsöndring i mättade fettsyraförsämrade INS-1-betaceller via CaMKII-vägaktivering.

En nyupptäckt fenyletanoidglykosid från Stevia rebaudiana Bertoni påverkar insulinsekretionen i INS-1 β-öceller från råtta

Denna artikel i Molecules (2019) föreslog att en ny naturlig förening Phenylethanoid Glycoside påverkar insulinsekretionen i INS-1-insulinomceller från råtta och därmed har antidiabetisk potential.

Loureirin B främjar insulinsekretion genom GLP-1R och AKT/PDX1-vägar

Denna forskning publicerades i European Journal of Pharmacology (2022). Studien föreslog att Loureirin B, en naturlig produkt, förbättrar insulinsekretionen i INS-1-pankreatiska ö-betaceller via modulering av AKT / PDX1 och GLP-1R-vägar.

In vitro anticanceraktiviteter av Withania coagulans mot HeLa, MCF-7, RD, RG2 och INS-1 cancerceller och fytokemisk analys

I denna artikel från Integrative Medicine Research (2018) utvärderades anticancerpotentialen hos Withania coagulans-extrakt med hjälp av INS-1-cancerceller.

6. Resurser för INS-1 cellinje: Protokoll, videor och mer

Här är några online-resurser som innehåller INS-1-cellerna:

Subkultivering av suspenderade celler: Den här videon är en omfattande guide för subkulturceller som växer i suspensionskulturer.
Subkultivering av vidhäftande celler: Den här videon hjälper dig att lära dig det allmänna protokollet för passering av adherenta celler.

Följande länk innehåller protokollet för INS-1-cellodling:

INS-1 cellinje: Denna webbplats innehåller all information om INS-1-cellkultur. Den innehåller information om INS-1-cellkultur och frysmedier, protokoll för subkultur och hantering av kryopreserverade och proliferativa INS-1-kulturer.

Referenser

Acosta-Montalvo, A., et al, Proglucagon-Derived Peptides Expression and Secretion in Rat Insulinoma INS-1 Cells. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
Park, J.E. and J.S. Han, A Portulaca oleracea L. extract promotes insulin secretion via a K+ ATP channel dependent pathway in INS-1 pancreatic β-cells. Nutrition Research and Practice, 2018. 12(3): p. 183.
Fang, H., et al, Loureirin B främjar insulinsekretion genom GLP-1R och AKT/PDX1-vägar. European Journal of Pharmacology, 2022. 936: p. 175377.
Duan, J., et al., Swietenine och swietenolide från Swietenia macrophylla king förbättrar insulinsekretionen och dämpar apoptos i H2O2-inducerade INS-1-celler. Miljötoxikologi, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
Mo, F.-F., et al., Anti-diabetisk effekt av loganin genom att hämma FOXO1 nukleär translokation via PI3K / Akt-signalväg i INS-1-cell. Iransk Journal of Basic Medical Sciences, 2019. 22(3): p. 262.