Hep2-celler och deras roll i forskningen om struphuvudcancer
Hep2-celler är en central in vitro-modell som används i stor utsträckning inom olika biomedicinska forskningsområden, såsom reumatologi, cancerforskning och immunologi. Dessa mänskliga celler, som härstammar från struphuvudcancer, har varit avgörande för att klarlägga ursprungsvävnaden och de specifika egenskaperna hos tumörer i struphuvudet. Deras betydelse är välkänd inom translationell cancerforskning, där de i hög grad har bidragit till vår förståelse av struphuvudets natur och cancerens ursprung, vilket märks tydligt i publikationer om struphuvudcancerforskning [1].
- Odlingsmedium
- EMEM eller Eagle's minimal essential medium används för att odla Hep 2-celler. Detta medium kompletteras med 10 % FBS, 1,0 g/l glukos, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamin, 1 % NEAA och 1 mM natriumpyruvat för optimal celltillväxt. Mediet bör bytas ut 2 till 3 gånger i veckan.
- Fördubblingstid
- Den rapporterade fördubblingstiden för Hep 2-celler är cirka 40 timmar.
- Tillväxt
- Hep 2-celler är vidhäftande och växer till monolager.
- Biosäkerhetsnivå
- BSL-1
- Finns hos
- Cytion — Beställ Hep2
Hep 2-cellernas ursprung och allmänna egenskaper
En cellinjes ursprung och allmänna egenskaper avgör dess användbarhet inom forskning. Detta avsnitt hjälper dig att lära dig mer om ursprunget och några framträdande egenskaper hos Hep 2-celler. Du kommer till exempel att få reda på: Vad är HEp-2-cellinjen? Vad är källan till Hep 2-celler? Och hur ser morfologin hos Hep 2 ut?
- Hep 2, en odödlig human epitelcellinje, beskrevs först av H.W. Toolan som larynxkarcinomceller 1954. På senare tid har det dock rapporterats att Hep 2-cellinjen består av adenokarcinomceller från livmoderhalsen och har sitt ursprung i en kontaminering av Hela-cellinjen [2].
- Hep 2-celler innehåller Hela-markörkromosomer och är positiva för keratin och DNA-sekvenser från humant papillomvirus, vilket har bekräftats genom immunperoxidasfärgning respektive PCR.
- Hep 2, som härstammar från Hela-cellinjen, har en epitelial morfologi.
- Hep 2-cellinjen uppvisar både strukturella och numeriska kromosomavvikelser med en nästan triploid karyotyp [3].
Hep-2-cellinjen: Information om odling
Innan man arbetar med en cellinje måste man känna till följande viktiga punkter för odlingen. Denna information kan vara användbar för att effektivt odla och underhålla cellinjen. Du bör veta: Vad är fördubblingstiden för HEp-2-celler? Är Hep 2-celler vidhäftande? Vad är utsädesdensiteten för Hep2-celler?
Populationsfördubblingstid:
Den rapporterade fördubblingstiden för Hep 2-celler är cirka 40 timmar.
Adhärenta eller i suspension:
Hep 2-celler är vidhäftande och växer till monolager.
Utsädestäthet:
En utsädesdensitet på 1 x 104 celler/cm2 är idealisk för Hep 2-cellodling. För utsäde sköljs vidhäftande Hep 2-celler med 1 x PBS-lösning, följt av inkubation med Accutase-dissociationslösning. Efter 8–10 minuters inkubation vid rumstemperatur resuspenderas cellerna i odlingsmedium och centrifugeras. De uppsamlade cellerna dispenseras sedan i färskt odlingsmedium och hälls i nya kolvar för odling.
Odlingsmedium:
EMEM eller Eagles minimala essentiella medium används för odling av Hep 2-celler. Detta medium kompletteras med 10 % FBS, 1,0 g/l glukos, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamin, 1 % NEAA och 1 mM natriumpyruvat för optimal celltillväxt. Mediet bör bytas ut 2 till 3 gånger i veckan.
Odlingsförhållanden:
Liksom andra däggdjurscellinjer odlas även Hep 2 i en fuktad inkubator inställd på 37 °C och med en kontinuerlig tillförsel av 5 % CO2.
Förvaring:
Hep 2-celler kan förvaras i elektriska frysar med extremt låg temperatur (under -150 °C) eller i flytande kväve i gasfas för långvarig förvaring.
Frysningsprocess och medium:
De frysmedier som rekommenderas för Hep 2-celler är CM-1 eller CM-ACF. Cellerna bör frysas med en långsam frysprocess som möjliggör en gradvis temperatursänkning på 1 °C och skyddar cellernas livskraft.
Upptining:
Flaskan med frysta celler tinas snabbt genom omrörning i ett vattenbad vid 37 °C tills endast en liten isklump återstår. Cellerna tillsätts sedan till färskt medium och centrifugeras för att avlägsna frysmediets beståndsdelar. Därefter resuspenderas cellpelleten i medium och cellerna fördelas i odlingsflaskor. Cellerna behöver vila i nästan 24 timmar för att fästa.
Biosäkerhetsnivå
Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 rekommenderas för hantering och underhåll av Hep 2-cellkulturer.
Fördelar och begränsningar hos Hep 2-celler
Nästan alla cellinjer uppvisar en unik kombination av fördelar och begränsningar som bidrar till deras användning inom forskningsområdet. I detta avsnitt beskrivs några av de viktigaste för- och nackdelarna med Hep 2-cellinjen.
Fördelar
De främsta fördelarna med cellinjen Hep 2 är:
- Mänskligt ursprung: Hep 2 härstammar från mänskliga epitelceller, vilket gör den till en värdefull in vitro-modell för att studera mänskliga sjukdomar och virusinfektioner.
- ANA-detektion: Hep 2-cellinjen har en naturlig proteinuppsättning som presenterar ett stort antal antigener, vilket gör den till ett utmärkt substrat för detektion av antinukleära antikroppar (ANA). Denna egenskap möjliggör specifik och mycket känslig screening av ANA i serum, vilket gör den till ett viktigt diagnostiskt verktyg för identifiering av bindvävssjukdomar.
Begränsningar
- Kromosomavvikelser: Hep 2-celler uppvisar flera numeriska och strukturella kromosomavvikelser. Dessa avvikelser kan påverka cellernas beteende och kan begränsa deras användbarhet i vissa laboratorieexperiment.
- Tumörbildning: Hep 2, en tumörhärledd human epitelcellinje, kan uppvisa genetiska avvikelser som normalt inte förekommer i epitelceller. Följaktligen kan användningen av Hep 2-celler vara begränsad i specifika studier som fokuserar på normal cellfysiologi.
Utökade tillämpningar av Hep 2-cellinjen inom biomedicinsk forskning
Hep 2-cellinjen utmärker sig som en exemplarisk modell för en mängd tillämpningar inom biomedicinsk forskning. Dessa celler är kända för sin mångsidighet och spelar en avgörande roll i in vitro-experiment, allt från receptoranalys till studier av komplexa sjukdomar.
Utforskning av tumörbildande mekanismer och terapeutiska mål med Hep 2-celler
Hep 2-celler är tumörbildande och spelar därför en avgörande roll för att utforska cancerbiologins komplexitet. De ger insikter i cancersignaleringsvägar och mekanistiska studier och är en hörnsten i screening och utvärdering av läkemedel mot cancer. I en upplysande studie användes till exempel Hep 2 för att kartlägga miRNA-33as inverkan på cancercellernas proliferation. Resultaten belyste de antiproliferativa effekterna av miRNA-33a genom dess interaktion med PIM1, ett känt onkogen, vilket tyder på ett nytt terapeutiskt mål [4]. I ett annat fall användes Hep 2 för att bedöma den terapeutiska potentialen hos Marsdenia tenacissima-zinkoxidnanopartiklar, vilket belyste deras antiproliferativa och apoptotiska effekt [5].
Framsteg inom virologisk forskning med insikter från Hep 2-celler
Hep 2-cellernas mottaglighet för olika humana virus gör dem till en ovärderlig resurs inom virologisk forskning. De har använts effektivt vid uttryck av SARS-CoV-2-virusgener för att kartlägga det komplexa samspelet mellan viruset och värdcellens mekanismer [6]. Denna tillämpning är särskilt viktig i dagens läge, där förståelse och bekämpning av virusinfektioner som COVID-19 är en global prioritet.
Att dechiffrera cellulära funktioner: genmanipulation i Hep 2-celler
Hep 2-cellinjens anpassningsförmåga till genetisk manipulation understryker dess användbarhet i mekanistiska studier. Forskare utnyttjar denna egenskap för att modulera genuttryck och belysa specifika geners roller i cellulära funktioner. En anmärkningsvärd studie involverade överuttryck av det RNA-bindande proteinet RBM6 i Hep 2-celler, vilket underlättade undersökningen av dess tumörsuppressorpotential och gav värdefulla insikter i de molekylära grunderna för cancer [7].
Förbättrad sjukdomsdiagnostik genom tillämpningar av Hep 2-cellinjen
Utöver dessa forskningsområden är Hep 2-celler uppskattade för sina diagnostiska egenskaper, särskilt vid detektion av ANA, som är avgörande för diagnosen av autoimmuna sjukdomar såsom systemisk lupus erythematosus. Den precision med vilken Hep 2-celler kan presentera ANA stöder diagnosen och utvecklingen av riktade behandlingar, vilket förbättrar vår förståelse av autoimmuna sjukdomar och förbättrar patientvården.
Genom dessa olika tillämpningar har Hep 2-celler bidragit avsevärt till framsteg inom translationell cancerforskning, studier av virusinfektioner och utforskningen av cellulära mekanismer. Deras bidrag till genereringen av kliniskt relevanta data är ovärderligt, vilket bekräftar deras oumbärliga roll både i laboratoriet och på kliniken. I takt med att forskningen fortsätter att utvecklas kommer Hep 2-cellinjen säkert att förbli i framkant och bidra till upptäckten av nya behandlingar samt utvidga vår kunskap om människors hälsa och sjukdomar.
Säkra din HEp-2-cellinje redan idag
Hep 2-celler: Forskningspublikationer
Nedan följer några intressanta och mest citerade forskningspublikationer om Hep 2-celler.
- Syntes av zinkoxidnanopartiklar från Marsdenia tenacissima hämmar celltillväxten och inducerar apoptos i struphuvudcancerceller (Hep-2)
Denna artikel, publicerad i Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2019), undersökte den cancerbekämpande potentialen hos biosyntetiserade zinkoxidnanopartiklar från Marsdenia tenacissima i Hep 2-cellinjen. - Bioformulerade PLGA-nanopartiklar laddade med hesperidin motverkar den mitokondriellt medierade intrinsiska apoptotiska vägen i cancerceller
Denna artikel publicerades i Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials 2021. Denna studie undersökte de cancerbekämpande egenskaperna hos bioformulerade hesperidinladdade poly(mjölksyra-ko-glykolsyra) (PLGA)-nanopartiklar i Hep 2-celler. - Antiviral aktivitet hos etanolextrakt av Lophatherum gracile mot infektion
med respiratoriskt syncytialvirus Denna publikation i Journal of Ethnopharmacology 2019 använde Hep 2-celler för att studera infektion med respiratoriskt syncytialvirus och screena antivirala läkemedel mot det. Studien rapporterade om den lovande antivirala potentialen hos etanolextrakt av en medicinalväxt, nämligen Lophatherum gracile, mot infektion med respiratoriskt syncytialvirus. - Utvärdering av vattenextrakt från fyra aromatiska växter avseende deras aktivitet mot Candida albicans-adhesion till humana HEp-2-epitelceller
Denna forskning är publicerad i Gene Reports (2020). Denna studie undersökte den hämmande potentialen hos vattenextrakt från fyra aromatiska växter mot vidhäftning av Candida albicans till humana Hep 2-epitelceller. - Wnt1-inducerbart signalprotein 1 reglerar glykolys och kemoresistens hos skivepitelcancer i struphuvudet via YAP1/TEAD1/GLUT1-signalvägen
. Denna studie publicerades i Journal of Cellular Physiology 2019. Studien rapporterar att Wnt1-inducerbart signalprotein 1 (WISP1) interagerar med YAP1/TEAD1/GLUT1-signalvägen och reglerar glukosmetabolismen och kemoresistensen i Hep 2-cellinjen.
Resurser för cellinjen Hep2: protokoll, videor och mer
Hep 2 är en välkänd cellinje. Det finns flera tillgängliga resurser som handlar om cellinjen Hep 2.
- Subkultivering av Hep 2-cellinjen: Denna video är en steg-för-steg-guide till subkultivering av Hep 2-celler.
- ANA-screening av Hep 2-celler: Denna video förklarar screening av antinukleära antikroppar (ANA) med hjälp av cellinjen Hep 2.
- Odling av Hep 2: Denna länk innehåller grundläggande information om cellodling av Hep 2-celler. Den omfattar celldelning, frysning och upptining av celler.
Vanliga frågor om HEp-2-celler i biomedicinsk forskning
Referenser
- Fusi, M. och S. Dotti, Anpassning av HEp-2-cellinjen till helt djurfria odlingssystem och realtidsanalys av celltillväxt. Biotechniques, 2021. 70(6): s. 319–326.
- Gorphe, P., En omfattande översikt av Hep-2-cellinjen i translationell forskning om struphuvudcancer. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): s. 644–649.
- Wang, M., et al., Cancerassocierade fibroblaster i en mänsklig HEp-2-etablerad xenotransplanterad struphuvudtumör härstammar inte från cancerceller genom epitel-mesenkymövergång, utan är fenotypiskt aktiverade men karyotypiskt normala. PLoS One, 2015. 10(2): s. e0117405.
- Karatas, O.F., Antiproliferativ potential hos miR-33a i Hep-2-celler från struphuvudcancer genom inriktning på PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): s. 2455–2461.
- Wang, Y., et al., Syntes av zinkoxid-nanopartiklar från Marsdenia tenacissima hämmar cellproliferationen och inducerar apoptos i struphuvudcancerceller (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: s. 111624.
- Zhang, J., et al., En systemisk och molekylär studie av subcellulär lokalisering av SARS-CoV-2-proteiner. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): s. 269.
- Wang, Q., et al., RNA-bindande proteinet RBM6 som ett tumörsuppressorgen hämmar tillväxten och utvecklingen av struphuvudcancer. Gene, 2019. 697: s. 26-34.
