Hep2-celler och deras roll i larynxcancerforskningen

Hep 2-celler är en central in vitro-modell som används flitigt inom biomedicinsk forskning, t.ex. reumatologi, cancerforskning och immunologi. Dessa humana celler härstammar från larynxcancer och har varit viktiga för att klargöra ursprungsvävnaden och de specifika egenskaperna hos larynxneoplasmer. Deras betydelse är välkänd inom translationell cancerforskning, där de i hög grad har bidragit till vår förståelse av cancerns laryngeala natur och ursprung, vilket har lett till en betydande närvaro i forskningspublikationer om laryngeal cancer [1].

Hep 2-cellernas ursprung och allmänna egenskaper

En cellinjes ursprung och allmänna egenskaper avgör dess tillämplighet inom forskningen. I det här avsnittet får du veta mer om Hep 2-cellernas ursprung och vissa framträdande egenskaper. Du kommer till exempel att få reda på följande: Vad är HEp-2-cellinjen? Vad är källan till Hep 2-celler? Och vad är morfologin hos Hep 2?

  • Hep 2, en odödlig human epitelcellinje, beskrevs först av H.W. Toolan som laryngeal carcinomceller 1954. På senare tid har det dock rapporterats att Hep 2-cellinjen består av adenokarcinomceller från livmoderhalsen och härrör från kontaminering av Hela-cellinjen [2].
  • Hep 2-celler innehåller Hela-markörkromosomer och är positiva för DNA-sekvenser av keratin och humant papillomvirus, vilket bekräftas med immunoperoxidasfärgning respektive PCR.
  • Hela-cellinjederivatet Hep 2 har en epitelliknande morfologi.
  • Hep 2-cellinjen uppvisar både strukturella och numeriska kromosomskador med en nära triploid karyotyp [3].

Delning av HeLa livmoderhalscancerceller under mikroskop.

Hep 2 cellinje: Information om odling

Innan du arbetar med en cellinje måste du känna till följande viktiga punkter för odlingen av den. Denna information kan vara användbar för att effektivt odla och underhålla cellinjen. Det bör du veta: Vad är fördubblingstiden för HEp-2-celler? Är Hep-2-celler vidhäftande? Vilken är sådddensiteten för Hep2-celler?

Populationens fördubblingstid:

Den rapporterade fördubblingstiden för Hep 2-celler är cirka 40 timmar.

Adherenta eller i suspension:

Hep 2-celler är adherenta och växer till monolager.

Utsådd densitet:

En sådddensitet på 1 x104 celler/cm2 är idealisk för Hep 2-cellkultur. För sådd sköljs adherenta Hep 2-celler med 1 x PBS-lösning, följt av inkubation med Accutase dissociation solution. Efter 8-10 minuters inkubation i rumstemperatur resuspenderas cellerna i media och centrifugeras. De uppsamlade cellerna fördelas sedan i färskt medium och hälls i nya kolvar för odling.

Tillväxtmedium:

EMEM eller Eagle's minimal essential medium används för att odla Hep 2-celler. Detta medium kompletteras med 10% FBS, 1,0 g/L glukos, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-glutamin, 1% NEAA och 1 mM natriumpyruvat för idealisk celltillväxt. Medierna bör förnyas 2 till 3 gånger i veckan.

Tillväxtförhållanden:

Liksom andra cellinjer från däggdjur odlas även Hep 2 i en befuktad inkubator vid 37°C och med kontinuerlig tillförsel av 5% CO2.

Förvaring:

Hep 2-celler kan förvaras i elektriska frysar med extremt låg temperatur (under -150 °C) eller i flytande kväve i ångfas för långtidsförvaring.

Frysningsprocess och medium:

De frysmedier som rekommenderas för Hep 2-celler är CM-1 eller CM-ACF. Cellerna ska frysas med hjälp av en långsam frysningsprocess som tillåter en gradvis temperatursänkning på 1 °C och skyddar cellernas livskraft.

Upptiningsprocess:

Den frysta cellflaskan tinas snabbt genom omrörning i vattenbad vid37°Ctills en liten isklump återstår. Cellerna tillsätts sedan till färskt media och centrifugeras för att avlägsna komponenterna i det frysta mediet. Därefter resuspenderas cellpelleten i media och cellerna fördelas i odlingsflaskor. Cellerna måste vila i nästan 24 timmar för att fästa.

Biosäkerhetsnivå

Biosäkerhetsnivå 1-laboratorium rekommenderas för hantering och underhåll av Hep 2-cellkulturer.

Hep 2-celler före och efter uppnådd konfluens.

Fördelar och begränsningar med Hep 2-celler

Nästan alla cellinjer uppvisar en unik kombination av fördelar och begränsningar som bidrar till att de används inom forskningsområdet. I detta avsnitt beskrivs några av de viktigaste för- och nackdelarna med Hep 2-cellinjen.

Fördelar och nackdelar

De viktigaste fördelarna med Hep 2-cellinjen är följande:

  • Mänskligt ursprung: Hep 2 härrör från mänskliga epitelceller, vilket gör den till en värdefull in vitro-modell för att studera mänskliga sjukdomar och virusinfektioner
  • ANA-detektion: Hep 2-cellinjen har en nativ proteinuppsättning som innehåller många antigener, vilket gör den till ett utmärkt substrat för detektion av antinukleära antikroppar (ANA). Denna egenskap möjliggör specifik och mycket känslig screening av ANA i serum, vilket gör det till ett viktigt diagnostiskt verktyg för att identifiera bindvävssjukdomar

Begränsningar

  • Kromosomala avvikelser: Hep 2-celler uppvisar flera numeriska och strukturella kromosomavvikelser. Dessa avvikelser kan påverka cellernas beteende och kan begränsa deras användbarhet i vissa laboratorieexperiment
  • Tumörframkallande egenskaper: Hep 2, en tumörhärledd human epitelcellinje, kan ha genetiska abnormiteter som normalt saknas i epitelceller. Följaktligen kan användningen av Hep 2-celler begränsas i specifika studier som fokuserar på normal cellulär fysiologi.

Utökade tillämpningar av Hep 2-cellinjen inom biomedicinsk forskning

Hep 2-cellinjen framstår som en exemplarisk modell för en mängd olika tillämpningar inom biomedicinsk forskning. Dessa celler är kända för sin mångsidighet och spelar en viktig roll i in vitro-experiment, allt från receptoranalys till studier av komplexa sjukdomar.

Utforska tumörframkallande mekanismer och terapeutiska mål med Hep 2-celler

Hep 2-celler, som är tumörframkallande, är centrala för att fördjupa sig i cancerbiologins finesser. De ger insikter i cancersignalvägar, mekanistiska studier och är en grundpelare i screening och utvärdering av cancerläkemedel. I en insiktsfull studie användes till exempel Hep 2 för att kartlägga miRNA-33a:s inverkan på cancercellers spridning. Resultaten belyste de antiproliferativa effekterna av miRNA-33a genom dess interaktion med PIM1, en känd onkogen, vilket tyder på ett nytt terapeutiskt mål [4]. I ett annat fall användes Hep 2 för att bedöma den terapeutiska potentialen hos nanopartiklar av zinkoxid från Marsdenia tenacissima, vilket belyste deras antiproliferativa och apoptotiska effekt [5].

Framsteg inom virologisk forskning med insikter om Hep 2-celler

Hep 2-cellernas känslighet för olika humana virus gör dem till en ovärderlig resurs inom virologisk forskning. De har använts effektivt för att uttrycka virusgener från SARS-CoV-2 för att avslöja det komplexa samspelet mellan viruset och värdcellens mekanismer [6]. Denna tillämpning är särskilt viktig i dagens läge, där det är en global prioritering att förstå och bekämpa virusinfektioner som covid-19.

Att tyda cellulära funktioner: Genmanipulering i Hep 2-celler

Hep 2-cellinjens anpassningsförmåga till genetisk manipulation understryker dess användbarhet i mekanistiska studier. Forskarna utnyttjar denna egenskap för att modulera genuttrycket och klargöra specifika geners roll i cellfunktionerna. En anmärkningsvärd studie involverade överuttryck av det RNA-bindande proteinet RBM6 i Hep 2-celler, vilket underlättade undersökningen av dess tumörsuppressorpotential och gav värdefulla insikter i de molekylära grunderna för cancer [7].

Förbättrad sjukdomsdiagnostik genom tillämpningar av Hep 2-cellinjen

Utöver dessa forskningsområden hyllas Hep 2-celler för sina diagnostiska egenskaper, särskilt när det gäller detektion av ANA, som är avgörande för diagnos av autoimmuna sjukdomar som systemisk lupus erythematosus. Den precision med vilken Hep 2-celler kan presentera ANA stöder diagnos och utveckling av riktade behandlingar, vilket ökar vår förståelse för autoimmuna patologier och förbättrar patientvården.

Genom dessa olika tillämpningar har Hep 2-celler bidragit väsentligt till framsteg inom translationell cancerforskning, studier av virusinfektioner och utforskning av cellulära mekanismer. Deras bidrag till genereringen av kliniskt relevanta data är ovärderligt, vilket bekräftar deras oumbärliga roll i både laboratoriet och kliniken. I takt med att forskningen fortsätter att utvecklas kommer Hep 2-cellinjen säkert att ligga i framkant, bidra till upptäckten av nya behandlingar och öka vår kunskap om människors hälsa och sjukdomar.

Säkra din HEp-2-cellinje idag

Hep 2-celler: Forskningspublikationer

Nedan följer några intressanta och mest citerade forskningspublikationer om Hep 2-celler.

Resurser för Hep2 cellinje: Protokoll, videor och mycket mer

Hep 2 är en välkänd cellinje. Det finns flera tillgängliga resurser med Hep 2-cellinjen.

Vanliga frågor om HEp-2-celler i biomedicinsk forskning

Referenser

  1. Fusi, M. och S. Dotti, Anpassning av HEp-2-cellinjen till helt djurfria odlingssystem och realtidsanalys av celltillväxt. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
  2. Gorphe, P., A comprehensive review of Hep-2 cell line in translational research for laryngeal cancer. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
  3. Wang, M., et al., Cancerassocierade fibroblaster i en human HEp-2 etablerad laryngeal xenograferad tumör härrör inte från cancerceller genom epitelial-mesenkymal övergång, fenotypiskt aktiverade men karyotypiskt normala. PLoS One, 2015. 10(2): s. e0117405.
  4. Karatas, O.F., Antiproliferativ potential hos miR-33a i struphuvudcancer Hep-2-celler genom att rikta in sig på PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
  5. Wang, Y., et al., Syntes av zinkoxidnanopartiklar från Marsdenia tenacissima hämmar cellproliferationen och inducerar apoptos i laryngeal cancerceller (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
  6. Zhang, J., et al., En systemisk och molekylär studie av subcellulär lokalisering av SARS-CoV-2-proteiner. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
  7. Wang, Q., et al., RNA-bindande protein RBM6 som en tumörundertryckande gen undertrycker tillväxt och progression i laryngocarcinom. Gene, 2019. 697: p. 26-34.

Vi har upptäckt att du befinner dig i ett annat land eller använder ett annat webbläsarspråk än det som för närvarande är valt. Vill du acceptera de föreslagna inställningarna?

Nära