Gå till startsidan

Hep2-celler och deras roll i forskningen om struphuvudcancer

Hep2-celler är en central in vitro-modell som används i stor utsträckning inom olika biomedicinska forskningsområden, såsom reumatologi, cancerforskning och immunologi. Dessa mänskliga celler, som härstammar från struphuvudcancer, har varit avgörande för att klarlägga ursprungsvävnaden och de specifika egenskaperna hos tumörer i struphuvudet. Deras betydelse är välkänd inom translationell cancerforskning, där de i hög grad har bidragit till vår förståelse av struphuvudets natur och cancerens ursprung, vilket märks tydligt i publikationer om struphuvudcancerforskning [1].

📋 Hep2-cellinjen — Kortfattad information
Odlingsmedium
EMEM eller Eagle's minimal essential medium används för att odla Hep 2-celler. Detta medium kompletteras med 10 % FBS, 1,0 g/l glukos, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamin, 1 % NEAA och 1 mM natriumpyruvat för optimal celltillväxt. Mediet bör bytas ut 2 till 3 gånger i veckan.
Fördubblingstid
Den rapporterade fördubblingstiden för Hep 2-celler är cirka 40 timmar.
Tillväxt
Hep 2-celler är vidhäftande och växer till monolager.
Biosäkerhetsnivå
BSL-1

Hep 2-cellernas ursprung och allmänna egenskaper

En cellinjes ursprung och allmänna egenskaper avgör dess användbarhet inom forskning. Detta avsnitt hjälper dig att lära dig mer om ursprunget och några framträdande egenskaper hos Hep 2-celler. Du kommer till exempel att få reda på: Vad är HEp-2-cellinjen? Vad är källan till Hep 2-celler? Och hur ser morfologin hos Hep 2 ut?

  • Hep 2, en odödlig human epitelcellinje, beskrevs först av H.W. Toolan som larynxkarcinomceller 1954. På senare tid har det dock rapporterats att Hep 2-cellinjen består av adenokarcinomceller från livmoderhalsen och har sitt ursprung i en kontaminering av Hela-cellinjen [2].
  • Hep 2-celler innehåller Hela-markörkromosomer och är positiva för keratin och DNA-sekvenser från humant papillomvirus, vilket har bekräftats genom immunperoxidasfärgning respektive PCR.
  • Hep 2, som härstammar från Hela-cellinjen, har en epitelial morfologi.
  • Hep 2-cellinjen uppvisar både strukturella och numeriska kromosomavvikelser med en nästan triploid karyotyp [3].

HeLa-celler från livmoderhalscancer under mikroskop.

Hep-2-cellinjen: Information om odling

Innan man arbetar med en cellinje måste man känna till följande viktiga punkter för odlingen. Denna information kan vara användbar för att effektivt odla och underhålla cellinjen. Du bör veta: Vad är fördubblingstiden för HEp-2-celler? Är Hep 2-celler vidhäftande? Vad är utsädesdensiteten för Hep2-celler?

 

Populationsfördubblingstid:

Den rapporterade fördubblingstiden för Hep 2-celler är cirka 40 timmar.

Adhärenta eller i suspension:

Hep 2-celler är vidhäftande och växer till monolager.

Utsädestäthet:

En utsädesdensitet på 1 x 104 celler/cm2 är idealisk för Hep 2-cellodling. För utsäde sköljs vidhäftande Hep 2-celler med 1 x PBS-lösning, följt av inkubation med Accutase-dissociationslösning. Efter 8–10 minuters inkubation vid rumstemperatur resuspenderas cellerna i odlingsmedium och centrifugeras. De uppsamlade cellerna dispenseras sedan i färskt odlingsmedium och hälls i nya kolvar för odling.

Odlingsmedium:

EMEM eller Eagles minimala essentiella medium används för odling av Hep 2-celler. Detta medium kompletteras med 10 % FBS, 1,0 g/l glukos, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamin, 1 % NEAA och 1 mM natriumpyruvat för optimal celltillväxt. Mediet bör bytas ut 2 till 3 gånger i veckan.

Odlingsförhållanden:

Liksom andra däggdjurscellinjer odlas även Hep 2 i en fuktad inkubator inställd på 37 °C och med en kontinuerlig tillförsel av 5 % CO2.

Förvaring:

Hep 2-celler kan förvaras i elektriska frysar med extremt låg temperatur (under -150 °C) eller i flytande kväve i gasfas för långvarig förvaring.

Frysningsprocess och medium:

De frysmedier som rekommenderas för Hep 2-celler är CM-1 eller CM-ACF. Cellerna bör frysas med en långsam frysprocess som möjliggör en gradvis temperatursänkning på 1 °C och skyddar cellernas livskraft.

Upptining:

Flaskan med frysta celler tinas snabbt genom omrörning i ett vattenbad vid 37 °C tills endast en liten isklump återstår. Cellerna tillsätts sedan till färskt medium och centrifugeras för att avlägsna frysmediets beståndsdelar. Därefter resuspenderas cellpelleten i medium och cellerna fördelas i odlingsflaskor. Cellerna behöver vila i nästan 24 timmar för att fästa.

Biosäkerhetsnivå

Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 rekommenderas för hantering och underhåll av Hep 2-cellkulturer.

Hep2 cells

Hep 2-celler före och efter att de nått full konfluens.

Fördelar och begränsningar hos Hep 2-celler

Nästan alla cellinjer uppvisar en unik kombination av fördelar och begränsningar som bidrar till deras användning inom forskningsområdet. I detta avsnitt beskrivs några av de viktigaste för- och nackdelarna med Hep 2-cellinjen.

Fördelar

De främsta fördelarna med cellinjen Hep 2 är:

  • Mänskligt ursprung: Hep 2 härstammar från mänskliga epitelceller, vilket gör den till en värdefull in vitro-modell för att studera mänskliga sjukdomar och virusinfektioner.
  • ANA-detektion: Hep 2-cellinjen har en naturlig proteinuppsättning som presenterar ett stort antal antigener, vilket gör den till ett utmärkt substrat för detektion av antinukleära antikroppar (ANA). Denna egenskap möjliggör specifik och mycket känslig screening av ANA i serum, vilket gör den till ett viktigt diagnostiskt verktyg för identifiering av bindvävssjukdomar.

Begränsningar

  • Kromosomavvikelser: Hep 2-celler uppvisar flera numeriska och strukturella kromosomavvikelser. Dessa avvikelser kan påverka cellernas beteende och kan begränsa deras användbarhet i vissa laboratorieexperiment.
  • Tumörbildning: Hep 2, en tumörhärledd human epitelcellinje, kan uppvisa genetiska avvikelser som normalt inte förekommer i epitelceller. Följaktligen kan användningen av Hep 2-celler vara begränsad i specifika studier som fokuserar på normal cellfysiologi.

Utökade tillämpningar av Hep 2-cellinjen inom biomedicinsk forskning

Hep 2-cellinjen utmärker sig som en exemplarisk modell för en mängd tillämpningar inom biomedicinsk forskning. Dessa celler är kända för sin mångsidighet och spelar en avgörande roll i in vitro-experiment, allt från receptoranalys till studier av komplexa sjukdomar.

Utforskning av tumörbildande mekanismer och terapeutiska mål med Hep 2-celler

Hep 2-celler är tumörbildande och spelar därför en avgörande roll för att utforska cancerbiologins komplexitet. De ger insikter i cancersignaleringsvägar och mekanistiska studier och är en hörnsten i screening och utvärdering av läkemedel mot cancer. I en upplysande studie användes till exempel Hep 2 för att kartlägga miRNA-33as inverkan på cancercellernas proliferation. Resultaten belyste de antiproliferativa effekterna av miRNA-33a genom dess interaktion med PIM1, ett känt onkogen, vilket tyder på ett nytt terapeutiskt mål [4]. I ett annat fall användes Hep 2 för att bedöma den terapeutiska potentialen hos Marsdenia tenacissima-zinkoxidnanopartiklar, vilket belyste deras antiproliferativa och apoptotiska effekt [5].

Framsteg inom virologisk forskning med insikter från Hep 2-celler

Hep 2-cellernas mottaglighet för olika humana virus gör dem till en ovärderlig resurs inom virologisk forskning. De har använts effektivt vid uttryck av SARS-CoV-2-virusgener för att kartlägga det komplexa samspelet mellan viruset och värdcellens mekanismer [6]. Denna tillämpning är särskilt viktig i dagens läge, där förståelse och bekämpning av virusinfektioner som COVID-19 är en global prioritet.

Att dechiffrera cellulära funktioner: genmanipulation i Hep 2-celler

Hep 2-cellinjens anpassningsförmåga till genetisk manipulation understryker dess användbarhet i mekanistiska studier. Forskare utnyttjar denna egenskap för att modulera genuttryck och belysa specifika geners roller i cellulära funktioner. En anmärkningsvärd studie involverade överuttryck av det RNA-bindande proteinet RBM6 i Hep 2-celler, vilket underlättade undersökningen av dess tumörsuppressorpotential och gav värdefulla insikter i de molekylära grunderna för cancer [7].

Förbättrad sjukdomsdiagnostik genom tillämpningar av Hep 2-cellinjen

Utöver dessa forskningsområden är Hep 2-celler uppskattade för sina diagnostiska egenskaper, särskilt vid detektion av ANA, som är avgörande för diagnosen av autoimmuna sjukdomar såsom systemisk lupus erythematosus. Den precision med vilken Hep 2-celler kan presentera ANA stöder diagnosen och utvecklingen av riktade behandlingar, vilket förbättrar vår förståelse av autoimmuna sjukdomar och förbättrar patientvården.

Genom dessa olika tillämpningar har Hep 2-celler bidragit avsevärt till framsteg inom translationell cancerforskning, studier av virusinfektioner och utforskningen av cellulära mekanismer. Deras bidrag till genereringen av kliniskt relevanta data är ovärderligt, vilket bekräftar deras oumbärliga roll både i laboratoriet och på kliniken. I takt med att forskningen fortsätter att utvecklas kommer Hep 2-cellinjen säkert att förbli i framkant och bidra till upptäckten av nya behandlingar samt utvidga vår kunskap om människors hälsa och sjukdomar.

Säkra din HEp-2-cellinje redan idag

Hep 2-celler: Forskningspublikationer

Nedan följer några intressanta och mest citerade forskningspublikationer om Hep 2-celler.

Resurser för cellinjen Hep2: protokoll, videor och mer

Hep 2 är en välkänd cellinje. Det finns flera tillgängliga resurser som handlar om cellinjen Hep 2.

  • Subkultivering av Hep 2-cellinjen: Denna video är en steg-för-steg-guide till subkultivering av Hep 2-celler.
  • ANA-screening av Hep 2-celler: Denna video förklarar screening av antinukleära antikroppar (ANA) med hjälp av cellinjen Hep 2.
  • Odling av Hep 2: Denna länk innehåller grundläggande information om cellodling av Hep 2-celler. Den omfattar celldelning, frysning och upptining av celler.

Vanliga frågor om HEp-2-celler i biomedicinsk forskning

HEp-2-celler är en odödlig cellinje som ursprungligen troddes komma från larynxcarcinom men som senare identifierades som adenocarcinomceller från livmoderhalsen, kontaminerade med HeLa-celler. Deras mänskliga epiteliala ursprung gör dem till ett viktigt verktyg för att studera olika sjukdomar, särskilt inom cancerforskning, immunologi och virologi, vilket ger insikter i sjukdomsmekanismer och potentiella behandlingar
Färgningsmönster i HEp-2-celler under testning med antinukleära antikroppar (ANA) är avgörande för diagnos av autoimmuna sjukdomar. Dessa mönster hjälper till att identifiera specifika autoantikroppar, vilket underlättar diagnos av tillstånd som systemisk lupus erythematosus, och är en hörnsten i klinisk immunologi för sin roll i förståelsen av autoimmuna patologier
HEp-2-celler används ofta för ANA-detektion tack vare sin förmåga att presentera ett brett spektrum av antigener, vilket möjliggör känslig och specifik screening av ANA i serumprover. Detta gör dem ovärderliga vid diagnos av autoimmuna sjukdomar, vilket understryker deras centrala roll i utvecklingen av diagnostiska metoder inom immunologi
ANA-titrar i HEp-2-celler anger den högsta serumspädning vid vilken autoantikroppar fortfarande är detekterbara, vilket är ett viktigt mått för att bedöma autoimmuna sjukdomars svårighetsgrad och progression. Höga titrar tyder ofta på en mer aktiv sjukdom, vilket vägleder kliniker i behandlingsbeslut och sjukdomsövervakning
HEp-2-cellerna, som härstammar från larynxcarcinom, är viktiga för att utforska larynxcancerns ursprung och egenskaper. Användningen av dem i translationell cancerforskning har lett till betydande framsteg i förståelsen av larynxcancer, bidragit till utvecklingen av riktade behandlingar och berikat litteraturen om larynxcancer
HEp-2-cellerna troddes ursprungligen komma från larynxcarcinom, men identifierades senare som adenocarcinomceller från livmoderhalsen, ett avslöjande som belyste komplexiteten i cellinjernas ursprung, men som inte förringade deras värde inom forskningen på grund av deras unika egenskaper och tillämpningar för att studera epitelcellers beteenden och patologier
Trots sitt gemensamma ursprung från humana livmoderhalscancerceller har HeLa och HEp-2 celler olika egenskaper.HeLa:ssnabba proliferation gör den lämplig för ett brett spektrum av studier, medan HEp-2:s unika egenskaper, särskilt inom epitelcellsforskning, ger specifika fördelar vid studier av epitelcellers patologier och mekanismer
Framgångsrik odling av HEp-2-celler kräver specifika förhållanden, t.ex. användning av EMEM kompletterat med FBS och upprätthållande av en kontrollerad miljö vid 37°C med 5% CO2. Kunskap om deras odlingskrav, inklusive sådddensitet och mediesammansättning, är avgörande för att de ska kunna användas effektivt i forskning
HEp-2-celler har många fördelar, bland annat deras relevans vid studier av mänskliga sjukdomar och deras användbarhet vid ANA-detektion.Deras kromosomavvikelser och tumörframkallande natur kan dock begränsa deras användbarhet inom vissa forskningsområden, vilket kräver noggrant övervägande av deras användning
HEp-2-celler har breddat forskningshorisonterna inom olika biomedicinska områden, från läkemedelsscreening till studier av sjukdomsmekanismer. Deras mångsidighet och bidrag till att förstå och behandla sjukdomar understryker deras ovärderliga roll i både grundforskning och translationell forskning, vilket lovar fortsatt relevans i framtida vetenskapliga strävanden

Referenser

  1. Fusi, M. och S. Dotti, Anpassning av HEp-2-cellinjen till helt djurfria odlingssystem och realtidsanalys av celltillväxt. Biotechniques, 2021. 70(6): s. 319–326.
  2. Gorphe, P., En omfattande översikt av Hep-2-cellinjen i translationell forskning om struphuvudcancer. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): s. 644–649.
  3. Wang, M., et al., Cancerassocierade fibroblaster i en mänsklig HEp-2-etablerad xenotransplanterad struphuvudtumör härstammar inte från cancerceller genom epitel-mesenkymövergång, utan är fenotypiskt aktiverade men karyotypiskt normala. PLoS One, 2015. 10(2): s. e0117405.
  4. Karatas, O.F., Antiproliferativ potential hos miR-33a i Hep-2-celler från struphuvudcancer genom inriktning på PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): s. 2455–2461.
  5. Wang, Y., et al., Syntes av zinkoxid-nanopartiklar från Marsdenia tenacissima hämmar cellproliferationen och inducerar apoptos i struphuvudcancerceller (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: s. 111624.
  6. Zhang, J., et al., En systemisk och molekylär studie av subcellulär lokalisering av SARS-CoV-2-proteiner. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): s. 269.
  7. Wang, Q., et al., RNA-bindande proteinet RBM6 som ett tumörsuppressorgen hämmar tillväxten och utvecklingen av struphuvudcancer. Gene, 2019. 697: s. 26-34.

Vi har upptäckt att du befinner dig i ett annat land eller använder ett annat webbläsarspråk än det som för närvarande är valt. Vill du acceptera de föreslagna inställningarna?

Nära